CODE REV ENREV PRODNAME LANG replace spaces with underline

Transcription

Page 1
D06025_04_Insert_CK (IFCC)_MU
EN
CK (IFCC)
2 x 65 ml (Konelab™)
2 x 25 ml (Konelab™, Indiko™)
THIS PACKAGE INSERT IS APPLICABLE FOR USE
OUTSIDE THE US.
INTENDED USE
For in vitro diagnostic use in the quantitative determination of creatine kinase (ATP: Creatine NPhosphotransferase (CK), EC 2.7.3.2) activity in human serum or plasma on Konelab and Indiko
analyzers.
Any reference to the Konelab systems also refers to the T Series.
SUMMARY (1,2)
Creatine kinase activity is greatest in striated muscle, brain, and heart tissue. Other tissues, such
as the kidneys, the diaphragm, and the prostate, contain significantly less activity.
CK activity is elevated in many diseases, including those involving skeletal muscle, the heart, the
central nervous system, and the thyroid. After acute muscle damage the total CK activity in the
blood begins to rise, reaching pathological levels after a mean duration of 4 - 5 hours in 50% of
patients. The values elevate regularly from the 8th - 24th hour after onset of infarction and return
to the reference range with great interindividual fluctuations.
PRINCIPLE OF THE PROCEDURE
The CK assay is two part liquid assay that utilizes three enzymes to determine acitivity of CK.
Creatine kinase catalyses the reaction between creatine phosphate and ADP (adenosine-5’diphosphate) with formation of creatine and ATP (adenosine-5’-triphosphate). The latter compound
phosphorylates glucose to G-6-P (glucose-6-phosphate) in the presence of HK (hexokinase). G-6-P
is oxidised to 6-PG (gluconate-6-phosphate) and in the same time an equimolar amount of NADP
(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate) is reduced to NADPH in a reaction catalysed by G6P-DH (glucose-6-phosphate dehydrogenase). The increase in absorbance at 340 nm, resulting
from the formation of NADPH, is proportional to the activity of creatine kinase in the sample (3).
CK
Creatine phosphate + ADP → Creatine + ATP
HK
ATP + Glucose → ADP + G-6-P
Sample
4 hours at 20…25 °C,
1 month at 4…8 °C, or
1 month at -20 °C; protected from light.
CK-BB not stable.
TEST PROCEDURE
Refer to the Application Notes for an automated procedure on your analyzer. Any application
which has not been validated by Thermo Fisher Scientific Oy cannot be performance guaranteed
and therefore must be evaluated by the user.
Indiko instrument settings
Enter the application parameters via barcode found in the Indiko application sheet or via
electronical file as appropriate.
Materials provided
Reagents as described above.
Materials required but not provided
Calibrator and controls as indicated below.
Calibration
The response (dA/min) is converted to result units by a calculation factor.
Or use eCal (981830) as a calibrator according to the instructions given in the package insert of
eCal (981830).
Quality Control
Use quality control (QC) samples at least once a day and after each calibration and every time a
new bottle of reagent is used. It is recommended to use at least two levels (low and high) of
controls or sample pools. Always follow the local, state and federal regulations in performing QC.
Available controls:
CK-MB Control, code 981908
CK-MB Control High, code 981255
Nortrol, code 981043
Abtrol, code 981044
The control (QC) intervals and limits must be adapted to the individual laboratory requirements.
The results of the quality control samples should fall within the limits pre-set by the laboratory.
CALCULATION OF RESULTS
The results are calculated automatically by the analyzer as follows:
G-6-P-DH
G-6-P + NADP → 6-PG + NADPH + H+
+
Activity in U/l = Factor x dA/min
REAGENT INFORMATION
Kit code 981828 contains
2 vials of 52 ml Reagent A
2 vials of 13 ml Reagent B
Kit code 981829 contains
2 vials of 20 ml Reagent A
2 vials of 5 ml Reagent B
Concentrations
Reagent A
Buffer (Imidazole), pH 6.5
D-glucose
N-acetyl-L-cysteine (NAC)
Magnesium acetate
EDTA-Na2
Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADP)
Hexokinase (HK)
NaN3
Reagent B
Buffer (Imidazole)
Adenosine-5’-diphosphate (ADP)
Adenosine-5’-monophosphate (AMP)
Di(adenosine-5’)penta-phosphate (AP5A)
Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Creatine phosphate
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1 %
TV x 1000
Theoretical factor = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Total reaction volume in ml
Sample volume in ml
Extinction coefficient of NADPH at 340 nm
Cuvette pathlength = 1
Conversion factor µkat/l = (U/l)/60
If eCal (981830) is used as a calibrator, the results are calculated automatically by the analyzer
using a calibration curve.
Calibration Curve (example)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Precautions
Reagent B is hazardous.
See separate sheet inside the kit for Hazardous- and Precautions-phrases: H315, P280,
P302+P352, P305+P351+P338.
The reagents contain sodium azide as preservative.
Exercise the normal precautions required for handling all laboratory reagents.
The product has to be disposed of as laboratory chemical in accordance with local regulations.
Preparation
Reagent A and B are ready for use.
Note: Check that there are no bubbles in the bottleneck or on the surface of the reagent when
you insert the reagent vials or vessels in the analyzer.
Storage and Stability
Reagents in unopened vials are stable at 2…8 °C until the expiration date printed on the label.
Refer to the Application Notes of your analyzer for the on board stability of reagents.
If the reagents show turbidity, do not use them.
SPECIMEN COLLECTION
Note: When processing samples in sample collection tubes, follow the instructions of the tube
manufacturer carefully to avoid erroneous results. Pay special attention to the preanalytical
variables such as mixing, standing time before centrifugation and centrifuge settings.
Sample Type
Unhemolyzed serum or heparin plasma can be used.
Note: Hemolysis can lead to deviating results. Avoid exposure of samples to strong light.
Precautions
Human samples should be handled and disposed of as if they were potentially infectious.
The calibration curve is lot dependent.
LIMITATIONS OF THE PROCEDURE
For diagnostic purposes, the results should always be assessed in conjunction with the patient’s
medical history, clinical examination and other findings.
Interference
A study was performed using the CLSI document EP7-A2 as a guideline.
Criterion: Difference within ± 10% of initial values.
Konelab
Interfering Substance
Conjugated bilirubin
Unconjugated bilirubin
Hemoglobin in hemolysate
Lipemia: Intralipid
(trademark of Fresenius
Kabi AB)
Interferent Concentration
Target CK
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Difference
from Target
(%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
Template: D01162_5 © 2015 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries. This information is not intended to encourage use of these products in any manner that might
infringe the intellectual property rights of others.
981828
981829
Storage (4)
The sample can be stored as shown below.
Indiko
Interfering Substance
4)
Conjugated bilirubin
Unconjugated bilirubin
Hemoglobin in hemolysate
Lipemia: Intralipid
(trademark of Fresenius
Kabi AB)
Interferent Concentration
Target CK
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Difference
from Target
(%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Avoid using hemolyzed specimens.
There is a poor correlation between turbidity and triglycerides concentration.
In very rare cases gammopathy, in particular type IgM (Waldenström’s macroglobulinemia), may
cause unreliable results (6). Not tested at Thermo Fisher Scientific Oy.
For other interfering substances, please refer to the reference (5).
EXPECTED VALUES (3)
Male
< 171 U/l (< 2.85 µkat/l) at 37 °C
Female < 145 U/l (< 2.41 µkat/l) at 37 °C
The quoted values should serve as a guide only. It is recommended that each laboratory verify
this range or derives a reference interval for the population that it serves.
Conversion factor
µkat/l = (U/l)/60
MEASURING RANGE
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Extended measuring range after secondary dilution: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
The results obtained in individual laboratories may differ from the given performance data.
Limit of Detection
A study was performed using document EP17-A as a guideline.
Konelab LoB: 0.6 U/l (0.01 µkat/l)
The Limit of Blank (LoB) represents the highest measurement result that is likely to be observed
for an analyte-free sample (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
The Limit of Detection (LoD) represents the lowest amount of analyte in sample that can be
detected (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
The Limit of Quantitation (LoQ) represents the lowest actual concentration in a sample that can be
quantitatively determined (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
The Limit of Blank (LoB) represents the highest measurement result that is likely to be observed
for an analyte-free sample (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
The Limit of Detection (LoD) represents the lowest amount of analyte in sample that can be
detected (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
The Limit of Quantitation (LoQ) represents the lowest actual concentration in a sample that can be
quantitatively determined (n = 42).
Imprecision
The imprecision of the CK assay is ≤ 5.0% Total CV.
Konelab
CK
Repeatability
(Within run)
Within device (Total)
Mean 92 U/l
SD
CV%
1.7
1.8
Mean 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Mean 616 U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
The precision study was performed using CLSI Document EP5-A2 as a guideline at one site with
three Konelab 60 analyzers, one operator, 2 reagent lots, one calibrator lot and 6 calibrations for 21
days, with the number of measurements being n = 84. Results from each analyzer were combined.
Indiko
CK
Repeatability
(Within run)
Within device (Total)
Mean 95 U/l
SD
CV%
1.2
1.2
Mean 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Mean 637 U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
The precision study was performed using CLSI Document EP5-A2 as a guideline at one site with
three Indiko analyzers, one operator, 2 reagent lots, one calibrator lot and 7 calibrations for 21 days,
with the number of measurements being n = 84. Results from each analyzer were combined.
Method Comparison
Konelab
A comparison study was performed on Konelab Prime 60 using CLSI Document EP9-A2 as a
guideline and the previous 981372 CK(IFCC) method (x) as the reference.
Linear regression (Deming) (result unit U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
The sample concentrations were between 17 and 2253 U/l.
Indiko
1) A comparison study was performed on Indiko using CLSI Document EP9-A2 as a guideline
and the previous 981372 CK(IFCC) method on Konelab Prime 60 (x) as the reference.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) A comparison study was performed on Indiko using CLSI Document EP9-A2 as a guideline
and the same CK(IFCC) method on Konelab Prime 60 (x) as the reference.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
BIBLIOGRAPHY
1)
Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th edition,
W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 357 - 358.
2)
Thomas, L. (ed.), Clinical Laboratory Diagnostics; Use and Assessment of Clinical
Laboratory Results, 1st edition, TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main,
Germany, 1998, p. 73.
3)
IFCC 2002/3: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic
Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 2. Reference Procedure for the
Measurement of Catalytic Concentrations of Creatine Kinase, Clin.Chem.Lab.Med. 2002,
40(6): 635 - 642.
5)
6)
WHO/DIL/LAB/99.1 Rev.2, 2002: Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory
Investigations & Stability of blood, plasma and serum samples. Geneva, 15 January 2002,
p. 28.
Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press,
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
Bakker A.J. et. al. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms,
detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007; 45(9), 1240 -1243.
MANUFACTURER
Thermo Fisher Scientific Oy
Analyzers & Automation
Clinical Diagnostics
Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa
Tel. +358 10 329 200
www.thermoscientific.com
Date of revision (yyyy-mm-dd)
2015-05-08
Changes from previous version
The line beside the text indicates changes.
Page 2
CS
Zvláštní upozornění
S lidskými vzorky je nutné manipulovat a likvidovat je, jako by byly potenciálně infekční.
CK (IFCC)
981828
981829
Uskladnění (4)
Vzorky lze uchovávat podle dále uvedených pokynů.
4 hodiny při 20…25 °C,
1 měsíc při 4…8 °C nebo
1 měsíc při-20 °C. Vzorek je nutno chránit před
světlem.
CK-BB nestabilizovaná.
Vzorek
TATO PŘÍBALOVÁ INFORMACE JE URČENA PRO
POUŽITÍ MIMO ÚZEMÍ USA.
POUŽITÍ
Pro diagnostické použití in vitro při kvantitativním stanovení aktivity kreatinkinázy (ATP: kreatin-Nfosfotransferáza (CK), EC 2.7.3.2) v lidském séru nebo plazmě na analyzátorech Konelab a
Indiko.
Každá zmínka o systémech Konelab se rovněž týká série T.
SHRNUTÍ (1,2)
Aktivita kreatinkinázy je nejvyšší v příčně pruhovaných svalech, mozku a srdeční tkáni. V dalších
tkáních, jako jsou ledviny, bránice a prostata, je jejich aktivita podstatně nižší.
Aktivita CK je zvýšená při mnoha onemocněních, včetně onemocnění kosterních svalů, srdce,
centrální nervové soustavy a štítné žlázy. Po vzniku akutního poškození svalu se celková aktivita
CK v krvi začne zvyšovat, a u 50 % pacientů dosahuje patologických hladin průměrně po uplynutí
4–5 hodin. Hodnoty se pravidelně zvyšují počínaje 8.–24. hodinou po začátku infarktu a vracejí se
do referenčního rozmezí s velkými individuálními odchylkami.
PRINCIP POSTUPU
Stanovení CK je dvoudílné tekuté stanovení, které pro stanovení aktivity CK využívá tří enzymů.
Kreatinkináza katalyzuje reakci mezi kreatinfosfátem a ADP (adenosin-5’-difosfát), při níž se vytváří
kreatin a ATP (adenosin-5’-trifosfát). Druhá z těchto sloučenin fosforyluje glukózu na G-6-P
(glukózo-6-fosfát) za přítomnosti HK (hexokinázy). G-6-P je oxidována na 6-PG (glukonát-6-fosfát)
a zároveň je ekvimolární množství NADP (nikotinamid adenin dinukleotid fosfát) redukováno na
NADPH v reakci katalyzované G-6P-DH (glukózo-6-fosfát dehydrogenáza). Zvýšení absorbance při
340 nm, které je důsledkem vytvoření NADPH, proporcionálně odpovídá aktivitě kreatinkinázy ve
vzorku (3).
POSTUP STANOVENÍ
Údaje o automatizovaném postupu práce na analyzátoru naleznete v aplikačních poznámkách.
Nelze zaručit účinnost žádné aplikace, která nebyla validována společností Thermo Fisher
Scientific Oy. Taková aplikace musí být proto hodnocena uživatelem.
Nastavení analyzátorů Indiko
Zadejte aplikační parametry pomocí čárového kódu, který naleznete ve specifikacích analyzátoru
Indiko, nebo pomocí elektronického souboru.
Dodávané materiály
Reagencie uvedeny výše.
Potřebné materiály, které nejsou součástí dodávky
Kalibrátor a kontrolní vzorky uvedené dále.
Kalibrace
Reakce (dA/min) je přepočtena pomocí faktoru přepočtu na výsledné jednotky.
Nebo použijte jako kalibrátor eCal (981830), a to v souladu s návodem uvedeným na příbalovém
letáku eCal (981830).
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
Řízení kvality
Vzorky pro řízení kvality (QC) používejte alespoň jednou denně, po každé kalibraci a vždy, když
použijete novou lahvičku činidla. Doporučuje se používat kontrolní materiály nebo směsné vzorky
nejméně pro dvě hladiny (nízká a vysoká). Při řízení kvality vždy dodržujte platné místní předpisy.
Dodávané kontrolní vzorky:
CK-MB Control, kód 981908
CK-MB Control High, kód 981255
Nortrol, kód 981043
Abtrol, kód 981044
Intervaly a limitní hodnoty kontrolních vzorků musejí být upraveny podle požadavků jednotlivých
laboratoří. Výsledky vzorků pro řízení kvality by měly vyhovovat mezním hodnotám
přednastaveným laboratoří.
INFORMACE O ČINIDLECH
VÝPOČET VÝSLEDKŮ
Výsledky jsou automaticky vypočteny analyzátorem, a to dále uvedeným způsobem:
CK
Kreatinfosfát + ADP → Kreatin + ATP
HK
ATP + Glukóza → ADP + G-6-P
Obsah sady označené kódem
981828
2 lahvičky s 52 ml činidla A
2 lahvičky s 13 ml činidla B
Obsah sady označené kódem
981829
2 lahvičky s 20 ml činidla A
2 lahvičky s 5 ml činidla B
Koncentrace
Činidlo A
Pufr (imidazol), pH 6.5
D-glukóza
N-acetyl-L-cystein (NAC)
Octan hořečnatý
EDTA-Na2
Nikotinamid adenin dinukleotid fosfát (NADP)
Hexokináza (HK)
NaN3
Činidlo B
Pufr (imidazol)
Adenosin-5’-difosfát (ADP)
Adenosin-5’-monofosfát (AMP)
Di(adenosin-5’)penta-fosfát (AP5A)
Glukózo-6-fosfát dehydrogenáza (G-6-P-DH)
EDTA-Na2
Kreatinfosfát
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1 %
Aktivita v U/l = Faktor x dA/min
TV x 1000
Teoretický faktor = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Celkový reakční objem v ml
Objem vzorku v ml
Extinkční koeficient NADPH při 340 nm
Optická tloušťka kyvety = 1
Faktor přepočtu µkat/l = (U/l)/60
Je-li použit jako kalibrátor eCal (981830), jsou výsledky vypočteny automaticky analyzátorem
pomocí kalibrační křivky.
Kalibrační křivka (příklad)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Zvláštní upozornění
Činidlo B je nebezpečné.
Viz zvláštní list uvnitř balení obsahující bezpečnostní opatření: H315, P280, P302+P352,
P305+P351+P338.
Činidla obsahují jako konzervační látku azid sodný.
Používejte běžná bezpečnostní opatření vyžadovaná pro manipulaci se všemi laboratorními činidly.
Výrobek musí být zlikvidován jako laboratorní chemikálie v souladu s místními předpisy.
Příprava
Činidla A a B jsou připravena k použití.
Poznámka: Překontrolujte, zda při vkládání lahviček nebo nádob s činidly do analyzátoru nejsou
v hrdle lahvičky nebo na povrchu činidla bubliny.
Uchovávání a stabilita
Činidla v neotevřených lahvičkách jsou stabilní při teplotě 2…8 °C do data ukončení použitelnosti
vytištěného na štítku.
Údaje o stabilitě činidel v analyzátoru („on-board“) naleznete v aplikačních poznámkách svého
analyzátoru Konelab.
Jeví-li činidla známky turbidity, nepoužívejte je.
ODBĚR VZORKŮ
Poznámka: Při zpracování vzorků v odběrových zkumavkách důsledně dodržujte pokyny
výrobce zkumavek, aby se zabránilo chybným výsledkům. Zvláštní pozornost věnujte
preanalytickým faktorům, jako je promíchání, doba stání před odstředěním a nastavení
odstředění.
Typ vzorků
Lze použít nehemolyzované sérum nebo heparinizovanou plazmu.
Poznámka: Hemolýza může vést k odchylce výsledků. Zabraňte expozici vzorků silnému světlu.
Kalibrační křivka je závislá na konkrétní šarži.
OMEZENÍ POSTUPU
Pro diagnostické účely by výsledky měly být vždy hodnoceny v souvislosti s anamnézou pacienta,
klinickými vyšetřeními a dalšími poznatky.
Rušení
Byla provedena studie podle pokynů uvedených v dokumentu CLSI EP7-A2.
Kritérium: Rozdíl v rozmezí ± 10 % počátečních hodnot.
Konelab
Látka rušící stanovení
Konjugovaný bilirubin
Nekonjugovaný bilirubin
Hemoglobin v hemolyzátu
Lipémie: Intralipid
(ochranná známka
společnosti Fresenius Kabi
AB)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
Cílová
konc. CK
(U/l)
188
498
180
495
184
505
Rozdíl vůči
cílové
konc. (%)
- 5.3
- 5.8
−1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
Koncentrace rušící látky
Page 3
Indiko
Látka rušící stanovení
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
Cílová
konc. CK
(U/l)
179
477
175
469
187
502
Rozdíl vůči
cílové
konc. (%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Koncentrace rušící látky
Konjugovaný bilirubin
Nekonjugovaný bilirubin
Hemoglobin v hemolyzátu
Lipémie: Intralipid
(ochranná známka
společnosti Fresenius Kabi
AB)
Nepoužívejte hemolyzované vzorky.
Mezi turbiditou a koncentrací triglyceridů existuje nízká korelace.
Ve velmi vzácných případech může gamopatie, zvláště typu IgM (Waldenströmova
makroglobulinémie), způsobit nespolehlivé výsledky (6). Společnost Thermo Fisher Scientific Oy
takové testy neprovedla.
Údaje o dalších látkách rušících stanovení naleznete v odkazu č. 5.
PŘEDPOKLÁDANÉ HODNOTY (3)
Muži
< 171 U/l (< 2.85 µkat/l) při 37 °C
Ženy
< 145 U/l (< 2.41 µkat/l) při 37 °C
Uvedené hodnoty by měly sloužit pouze jako vodítko. Doporučuje se, aby každá laboratoř toto
rozpětí ověřila nebo odvodila referenční interval pro populaci, jíž poskytuje služby.
Faktor přepočtu
µkat/l = (U/l)/60
Změny oproti předchozí verzi
Svislá čára podél textu označuje změny.
PRACOVNÍ CHARAKTERISTIKY
Výsledky získané v jednotlivých laboratořích se mohou od uvedených údajů lišit.
Mez detekce
Byla provedena studie podle pokynů uvedených v dokumentu EP17-A.
Mez slepého vzorku (LoB) představuje nejvyšší naměřený výsledek, který bude pravděpodobně
zjištěn pro vzorek bez analytu (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Mez detekce (LoD) představuje nejnižší množství analytu ve vzorku, které lze detekovat (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Mez stanovitelnosti (LoQ) představuje nejnižší skutečnou koncentraci ve vzorku, kterou lze
kvantitativně stanovit (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Mez slepého vzorku (LoB) představuje nejvyšší naměřený výsledek, který bude pravděpodobně
zjištěn pro vzorek bez analytu (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Mez detekce (LoD) představuje nejnižší množství analytu ve vzorku, které lze detekovat (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Mez stanovitelnosti (LoQ) představuje nejnižší skutečnou koncentraci ve vzorku, kterou lze
kvantitativně stanovit (n = 42).
Nepřesnost
Nepřesnost stanovení CK je ≤ 5.0% celkového CV.
Opakovatelnost
(v rámci série)
V rámci analyzátoru
(celkem)
Střední hodnota
92 U/l
SD
% CV
1.7
1.8
Střední hodnota
226 U/l
SD
% CV
2.0
0.9
Střední hodnota
616 U/l
SD
% CV
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
Byla provedena studie přesnosti podle pokynů v dokumentu CLSI EP5-A2 na jednom pracovišti
a třech analyzátorech Konelab 60, s jedním laborantem, dvěma šaržemi reagencií, jednou šarží
kalibrátorů a 6 kalibracemi trvající 21 dní, v níž byl počet měření n = 84. Výsledky z každého
analyzátoru byly zkombinovány.
Indiko
CK
Opakovatelnost
(v rámci série)
V rámci analyzátoru
(celkem)
Střední hodnota
95 U/l
SD
% CV
1.2
1.2
Střední hodnota
226 U/l
SD
% CV
2.0
0.9
Střední hodnota
637 U/l
SD
% CV
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
Byla provedena studie přesnosti podle pokynů v dokumentu CLSI EP5-A2 na jednom pracovišti a
třech analyzátorech Indiko, s jedním laborantem, dvěma šaržemi činidel, jednou šarží kalibrátorů a
7 kalibracemi trvající 21 dní, v níž byl počet měření n = 84. Výsledky z každého analyzátoru byly
zkombinovány.
Srovnání metod
Konelab
Byla provedena srovnávací studie na analyzátoru Konelab Prime 60 podle pokynů dokumentu
CLSI EP9-A2. Jako referenční metoda byla použita předchozí metoda 981372 CK(IFCC).
Lineární regrese (dle Deminga) (jednotky výsledků U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Koncentrace vzorků se pohybovaly v rozmezí 17 až 2253 U/l.
Indiko
1) Byla provedena srovnávací studie na analyzátoru Indiko podle pokynů dokumentu CLSI
EP9-A2. Jako referenční metoda byla použita předchozí metoda 981372 CK(IFCC) na
analyzátoru Konelab Prime 60 (x).
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Byla provedena srovnávací studie na analyzátoru Indiko podle pokynů dokumentu CLSI
EP9-A2. Jako referenční metoda byla použita stejná metoda CK(IFCC) na analyzátoru Konelab
Prime 60 (x).
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
VÝROBCE
Tel.: +358 10 329 200
Datum revize (rrrr-mm-dd)
2015-05-08
ROZSAH MĚŘENÍ
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Rozšířený rozsah měření po sekundárním ředění: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
Konelab
CK
SEZNAM LITERATURY
1)
Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5.vydání,
W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, str. 357 - 358.
2)
Thomas, L. Thomas, L. (ed.), Clinical Laboratory Diagnostics; Use and Assessment of
Clinical Laboratory Results, 1. vydání, TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt n.
Mohanem, Německo, 1998, p. 73. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
Page 4
Page 5
DE
CK (IFCC)
DIE VORLIEGENDE FACHINFORMATION IST FÜR DEN
GEBRAUCH AUSSERHALB DER USA VORGESEHEN.
ANWENDUNGSBEREICH
Zur In-vitro--Diagnose für den quantitativen Nachweis von Kreatinkinase (ATP: Kreatin-NPhosphotransferase (CK), EC 2.7.3.2) in Humanserum oder -plasma mit Konelab- oder IndikoAnalysegeräten.
Jeder Verweis auf Konelab-Systeme betrifft auch die T-Serie.
ZUSAMMENFASSUNG (1.2)
Die Kreatinkinaseaktivität ist in der quergestreiften Muskulatur, im Gehirn und im Herzgewebe
höher. In anderen Geweben, wie beispielsweise Nieren, Zwerchfell und Prostata, liegt eine
signifikant verminderte Aktivität vor.
Die CK-Aktivität ist bei vielen Erkrankungen erhöht, einschließlich solcher, welche die
Skelettmuskulatur, das Herz, das zentrale Nervensystem und die Schilddrüse betreffen. Nach
einem akuten Muskelschaden steigt die totale CK-Aktivität im Blut an und erreicht nach einem
durchschnittlichen Zeitraum von 4–5 Stunden bei 50 % der Patienten eine pathologische
Konzentration. Die Werte erhöhen sich in der Regel zwischen der 8. und 24. Stunde nach
Infarktbeginn und kehren mit großen individuellen Schwankungen in den Referenzbereich zurück.
TESTPRINZIP
Dieses CK-MB-Assay ist ein Flüssig-Assay aus zwei Teilen, das drei Enzyme zur Bestimmung der
CK-Aktivität verwendet.
Die Kreatinkinase katalysiert die Reaktion zwischen Kreatinphosphat und ADP (Adenosin-5’diphosphat), bei der Kreatin und ATP (Adenosin-5’-triphosphat) gebildet wird. Die letztgenannte
Verbindung phosphoryliert Glucose in Gegenwart von HK (Hexokinase) zu G-6-P (Glucose-6Phosphat). G-6-P wird zu 6-PG (Gluconat-6-Phosphat) oxidiert und gleichzeitig wird eine
äquimolare Menge NADP (Nicotinamid-adenin-dinucleotid-phosphat) zu NADPH in einer Reaktion
reduziert, die durch G-6P-DH (Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase) katalysiert wird. Die aus der
Bildung von NADPH resultierende Zunahme der Extinktion bei 340 nm ist proportional zur
Kreatinkinaseaktivität in der Probe (3).
CK
Kreatinphosphat + ADP → Kreatin + ATP
HK
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
Probe
4 Stunden bei 20...25 °C,
1 Monat bei 4...8 °C oder
1 Monat bei -20 °C; vor Licht geschützt.
CK-BB instabil.
TESTVERFAHREN
Angaben zur Automatisierung mit dem Analysengerät den Applikationshinweisen entnehmen.
Bei Verwendung von Applikationen, die nicht durch Thermo Fisher Scientific Oy validiert wurden,
kann keine Garantie für die angegebenen Leistungsdaten übernommen werden. Für die
Validierung derartiger Applikationen ist der Anwender daher selbst verantwortlich.
Indiko-Geräteeinstellungen
Die Applikationsparameter mit Hilfe des Barcodes auf dem Indiko-Applikationsblatt oder aus einer
elektronischen Datei einlesen.
Packungsinhalt
Reagenzien wie oben beschrieben.
Erforderliche, jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien
Kalibrator und Kontrollen wie nachstehend angegeben.
Kalibrierungs
Das Messergebnis (dA/min) wird durch einen Umrechnungsfaktor in Ergebniseinheiten
umgerechnet.
Oder eCal (981830) als Kalibrator gemäß den Anweisungen in der Packungsbeilage von eCal
(981830) verwenden.
Qualitätskontrolle
Mindestens einmal täglich sowie nach jeder Kalibrierung und bei jeder Verwendung eines neuen
Reagenzfläschchens eine Qualitätskontrolle (QK) durchführen. Es wird empfohlen, mindestens
zwei Konzentrationen (niedrig und hoch) von Kontrollen oder Probenmischungen zu verwenden.
Bei der Qualitätskontrolle sind stets alle örtlichen, bundesstaatlichen und landesweiten
Vorschriften zu berücksichtigen.
Erhältliche Kontrollen:
CK-MB Control, Bestellnr. 981908
CK-MB Control High, Bestellnr. 981255
Nortrol, Bestellnr. 981043
Abtrol, Bestellnr. 981044
Die Intervalle und Grenzwerte der Kontrolle (QC) müssen an die Anforderungen der einzelnen
Laboratorien angepasst werden. Die Ergebnisse der Qualitätskontrollen müssen innerhalb der
vom Labor vorgegebenen Grenzwerte liegen.
BERECHNUNG DER ERGEBNISSE
Die Ergebnisse werden vom Analysegerät automatisch wie folgt berechnet:
REAGENZDATEN
Aktivität in U/l = Faktor x dA/min
Kit Bestellnr. 981828 enthält
2 Fläschchen mit 52 ml Reagenz A
2 Fläschchen mit 13 ml Reagenz B
Kit Bestellnr. 981829 Bestellnr
2 Fläschchen mit 20 ml Reagenz A
2 Fläschchen mit 5 ml Reagenz B
Konzentrationen
Reagenz A
Buffer (Imidazol), pH 6,5
D-Glucose
N-Acetyl-L-Cystein (NAC)
Magnesiumacetat
EDTA-Na2
Nicotinamid-adenin-dinucleotid-phosphat (NADP)
Hexokinase (HK)
NaN3
Reagenz B
Puffer (Imidazol)
Adenosin-5’-diphosphat (ADP)
Adenosin-5’-monophosphat (AMP)
Di(adenosin-5’)-pentaphosphat (AP5A)
Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Kreatinphosphat
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2,7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1 %
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
TV x 1000
Theoretischer Faktor = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6,22
P
Gesamtes Reaktionsvolumen in ml
Probenvolumen in ml
= Extinktionskoeffizient von NADPH bei 340
nm
Schichtdicke der Küvette = 1
Umrechnungsfaktor µkat/l = (U/l)/60
Wenn eCal (981830) als Kalibrator verwendet wird, werden die Ergebnisse vom Analysegerät
automatisch mit einer Bezugskurve berechnet.
Bezugskurve (Beispiel)
Vorsichtsmaßnahmen
Reagenz B ist gefährlich.
Informationen zu den Gefahren und Vorsichtsmaßnahmen finden Sie im Kit auf einem gesonderten
Blatt: H315, P280, P302+P352, P305+P351+P338.
Die Reagenzien enthalten Natriumazid als Konservierungsmittel.
Es sind die üblichen Vorsichtsmaßnahmen für den Umgang mit Laborreagenzien zu befolgen.
Das Produkt muss gemäß den lokalen Regulierungsvorschriften als Laborchemikalie entsorgt
werden.
Vorbereitungen
Reagenz A und B sind gebrauchsfertig.
Hinweis: Kontrollieren Sie, dass sich im Flaschenhals oder an der Reagenzoberfläche keine
Luftblasen befinden, wenn Sie die Reagenzfläschchen bzw. -gefäße einsetzen.
Lagerung und Stabilität
In ungeöffneten Fläschchen sind die Reagenzien bei 2...8 °C bis zum Ablauf des Verfallsdatums
auf dem Etikett haltbar.
Informationen zur Haltbarkeit der Reagenzien nach Einlegen in das Analysegerät finden Sie in
den entsprechenden Applikationshinweisen.
Verwenden Sie die Reagenzien nicht, wenn sie eine Trübung aufweisen.
PROBENGEWINNUNG
Hinweis: Befolgen Sie bei der Verarbeitung von Proben in Probenröhrchen genau die
Anweisungen des Röhrchenherstellers, um fehlerhafte Ergebnisse zu vermeiden. Achten Sie
besonders auf die präanalytischen Variablen wie das Mischen, die Standzeit vor der
Zentrifugation und die Zentrifugeneinstellungen.
Probenart
Es kann nicht hämolysiertes Serum oder Heparinplasma verwendet werden.
Hinweis: Hämolyse kann zu abweichenden Ergebnissen führen. Die Proben dürfen keiner
starken Lichteinwirkung ausgesetzt werden.
Vorsichtsmaßnahmen
Proben humanen Ursprungs sind als potenziell infektiös zu betrachten und dementsprechend zu
behandeln und zu entsorgen.
Die Bezugskurve ist chargenabhängig.
GRENZEN DES VERFAHRENS
Zu diagnostischen Zwecken sollten die Ergebnisse immer in Verbindung mit der Anamnese, den
klinischen Untersuchungen und anderen Befunden des Patienten bewertet werden.
Interferenz
Es wurde eine Studie durchgeführt, bei der das CLSI-Dokument EP7-A2 als Richtlinie diente.
Kriterium: Differenz innerhalb von ±10 % der Ausgangswerte.
Konelab
Störsubstanz
Konjugiertes Bilirubin
Nicht-konjugiertes Bilirubin
Hämoglobin im Hämolysat
Lipämie: Intralipid
(Warenzeichen der
Fresenius Kabi AB)
Konzentration der
Störsubstanz
Zielwert für
CK (U/l)
592 µmol/l (34,6 mg/dl)
601 µmol/l (35,2 mg/dl)
621 µmol/l (36,3 mg/dl)
677 µmol/l (39,6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Abweichung
vom
Zielwert (%)
-5.3
-5.8
-1.7
-2.9
+8.5
+4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+2.8
+7.1
981828
981829
Lagerung (4)
Die Proben können wie nachfolgend dargestellt gelagert werden.
Indiko
Störsubstanz
Konjugiertes Bilirubin
Nicht-konjugiertes Bilirubin
Hämoglobin im Hämolysat
Lipämie: Intralipid
(Warenzeichen der
Fresenius Kabi AB)
Konzentration der
Störsubstanz
Zielwert für
CK (U/l)
592 µmol/l (34,6 mg/dl)
601 µmol/l (35,2 mg/dl)
621 µmol/l (36,3 mg/dl)
676 µmol/l (39,5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Abweichung
vom
Zielwert (%)
-0,8
-2,4
+0,2
-0,1
+8.6
+3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+1.0
-0.8
Kein hämolysiertes Untersuchungsmaterial verwenden.
Es besteht eine schwache Korrelation zwischen der Trübung und der Konzentration der
Triglyceride.
In sehr seltenen Fällen kann es infolge einer Gammopathie, insbesondere vom IgM-Typ
(Waldenströmsche Makroglobulinämie), zu unzuverlässigen Ergebnissen kommen (6).
Von Thermo Fisher Scientific Oy nicht bestätigte Daten.
Siehe Literaturhinweis (5) für weitere Substanzen, die Störfaktoren darstellen können.
ERWARTUNGSWERTE (3)
Männlich < 171 U/l (< 2.85 µkat/l) bei 37 °C
Weiblich < 145 U/l (< 2.41 µkat/l) bei 37 °C
Die angegebenen Werte gelten nur als Richtlinie. Es wird empfohlen, dass jedes Labor diesen
Bereich überprüft oder ein Referenzintervall für die betroffene Population ableitet.
Umrechnungsfaktor
µkat/l = (U/l)/60
Änderungen gegenüber der vorherigen Fassung
Die Linie neben dem Text weist auf Änderungen hin.
LEISTUNGSDATEN
Die Ergebnisse einzelner Laboratorien können von den angegebenen Leistungsdaten
abweichen.
Nachweisgrenze
Es wurde eine Studie durchgeführt, bei der das Dokument EP17-A als Richtlinie diente.
Die Blankgrenze (LoB, Limit of Blank) stellt das höchste Messergebnis dar, das für eine Probe
ohne Analyt erhalten wird (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Die Nachweisgrenze (LoD, Limit of Detection) stellt die geringste Menge an Analyten in einer
Probe dar, die noch nachgewiesen werden können (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Die Bestimmungsgrenze (LoQ, Limit of Quantitation) stellt die niedrigste Konzentration in einer
Probe dar, die noch quantitativ bestimmt werden kann (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Die Blankgrenze (LoB, Limit of Blank) stellt das höchste Messergebnis dar, das für eine Probe
ohne Analyt erhalten wird (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Die Nachweisgrenze (LoD, Limit of Detection) stellt die geringste Menge an Analyten in einer
Probe dar, die noch nachgewiesen werden kann (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Die Bestimmungsgrenze (LoQ, Limit of Quantitation) stellt die niedrigste Konzentration in einer
Probe dar, die noch quantitativ bestimmt werden kann (n = 42).
Präzision
Die Impräzision des ALT-Tests ist ≤ 5.0 % des Gesamt-VK.
Wiederholgenauigkeit
(in der Serie)
Intra-Gerät (Gesamt)
Mittelwert 92 U/l
SD
CV%
1.7
1.8
Mittelwert 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Mittelwert 616 U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
Unter Verwendung des CLSI-Dokuments EP5-A2 als Richtlinie wurde an einem Standort, mit drei
Konelab 60-Analysengeräten, einem Bediener, 2 Reagenzienchargen, einer Kalibriercharge und 6
Kalibrierungen 21 Tage lang eine Präzisionsstudie durchgeführt, wobei die Anzahl der Messungen (n)
84 betrug. Die Ergebnisse von jedem Analysegerät wurden kombiniert.
Indiko
CK
Wiederholgenauigkeit
(in der Serie)
Intra-Gerät (Gesamt)
HERSTELLER
Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa, Finnland
Tel.: +358 10 329 200
Datum der Überarbeitung (JJJJ-MM-TT)
2015-05-08
MESSBEREICH
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Erwarteter Messbereich nach Sekundärverdünnung: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
Konelab
CK
LITERATURVERWEISE
1)
Burtis, CA und Ashwood, ER (Hrsg.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,
5. Auflage, WB Saunders Company, Philadelphia, 2001, S. 357–358.
2)
Thomas, L. (Hrsg.) Clinical Laboratory Diagnostics: Use and Assessment of Clinical
Laboratory results, 1. Auflage, TH-Books Verlagsgesellschaft, Frankfurt/Main,
Deutschland, 1998, S. 73.
3)
Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Teil. 2. Reference Procedure for the
Measurement of Catalytic Concentrations of Aspartate Aminotransferase,
Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(6): 635–642.
4)
WHO/DIL/LAB/99.1 Ausg. 2, 2002: Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory
Investigations & Stability of blood, plasma and serum samples. Genf, 15. Januar 2002,
S. 28.
5)
Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fünfte Auflage, AACC Press,
Washington, D.C., 3-234–3-239, 2000.
6)
Bakker A.J. et al. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms,
detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007; 45(9), 1240 –1243.
Mittelwert 95 U/l
SD
CV%
1.2
1.2
Mittelwert 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Mittelwert 637 U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
Unter Verwendung des CLSI-Dokuments EP5-A2 als wurde an einem Standort auf drei IndikoAnalysegeräten, mit einem Bediener, 2 Reagenzienchargen, einer Kalibriercharge und 7
Kalibrierungen 21 Tage lang eine Präzisionsstudie durchgeführt, wobei die Anzahl der Messungen (n)
84 betrug. Die Ergebnisse von jedem Analysegerät wurden kombiniert.
Vergleich der Methoden
Konelab
Auf einem Konelab Prime 60-Analysegerät wurde unter Verwendung des CLSI-Dokuments
EP9-A2 als Richtlinie mit der vorherigen 981372 CK(IFCC)-Methode (x) als Referenz eine
Vergleichsuntersuchung durchgeführt.
Lineare Regression (Deming) (Ergebnisse in U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Die in den Proben enthaltenen Konzentrationen lagen zwischen 17 und 2253 U/l.
Indiko
1) Es wurde eine Vergleichsuntersuchung auf einem Indiko-Analysegerät unter Verwendung des
CLSI-Dokuments EP9-A2 als Richtlinie mit der vorherigen 981372 CK(IFCC)-Methode (x) auf
einem Konelab Prime 60-Analysegerät als Referenz durchgeführt.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Es wurde eine Vergleichsuntersuchung auf einem Indiko-Analysegerät unter Verwendung des
CLSI-Dokuments EP9-A2 als Richtlinie und mit der gleichen CK-MBCK(IFCC)-Methode auf
einem Konelab Prime 60-Analysegerät als Referenz durchgeführt.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
Page 6
EL
CK (IFCC)
981828
981829
Προφυλάξεις
Τα ανθρώπινα δείγματα θα πρέπει να χρησιμοποιούνται και να απορρίπτονται ως δυνητικώς
μολυσματικά.
Φύλαξη (4)
Το δείγμα μπορεί να φυλαχθεί όπως περιγράφεται παρακάτω.
Δείγμα
4 ώρες στους 20...25 °C,
1 μήνα στους 4...8 °C ή
1 μήνα στους -20 °C, προστατευμένο από το φως.
Το ισοένζυμο CK-BB δεν είναι σταθερό.
ΤΟ ΠΑΡΟΝ ΕΝΘΕΤΟ ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑΣ ΙΣΧΥΕΙ ΓΙΑ ΧΡΗΣΗ
ΕΚΤΟΣ ΤΩΝ Η.Π.Α.
ΠΡΟΒΛΕΠΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ
Για in vitro διαγνωστική χρήση στον ποσοτικό προσδιορισμό της ενεργότητας της κινάσης της
κρεατίνης (ATP: N-φωσφοτρανσφεράση της κρεατίνης (CK), EC 2.7.3.2) σε ανθρώπινο ορό ή
πλάσμα με αναλυτές Konelab και Indiko.
Οποιαδήποτε αναφορά στα συστήματα Konelab ισχύει και για τη Σειρά T.
ΠΕΡΙΛΗΨΗ (1, 2)
Η ενεργότητα της κινάσης της κρεατίνης είναι υψηλότερη στο γραμμωτό μυϊκό, τον εγκεφαλικό και
τον καρδιακό ιστό. Σε άλλους ιστούς όπως οι νεφροί, το διάφραγμα και ο προστάτης, απαντάται
σημαντικά χαμηλότερη ενεργότητα.
Η ενεργότητα της CK είναι αυξημένη σε πολλές παθήσεις, συμπεριλαμβανομένων εκείνων που
αφορούν το σκελετικό μυ, την καρδιά, το κεντρικό νευρικό σύστημα και το θυρεοειδή. Έπειτα από
οξεία μυϊκή βλάβη, η ενεργότητα της ολικής CK στο αίμα αρχίζει να αυξάνεται, αγγίζοντας
παθολογικά επίπεδα μετά από μια μέση διάρκεια 4 - 5 ωρών, στο 50% των ασθενών. Οι τιμές
αυξάνονται με ομαλό ρυθμό την 8η - 24η ώρα μετά την εμφάνιση εμφράγματος και επανέρχονται
στο εύρος αναφοράς με μεγάλες διακυμάνσεις από άτομο σε άτομο.
ΑΡΧΗ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑΣ
Ο προσδιορισμός CK είναι μια ανάλυση υγρών δειγμάτων σε δύο μέρη, που χρησιμοποιεί τρία
ένζυμα για τον προσδιορισμό της ενεργότητας της CK.
Η κινάση της κρεατίνης καταλύει την αντίδραση ανάμεσα στη φωσφορική κρεατίνη και την ADP
(5'-διφωσφορική αδενοσίνη) για το σχηματισμό κρεατίνης και ATP (5'-τριφωσφορική αδενοσίνη).
Η τελευταία ένωση φωσφορυλιώνει τη γλυκόζη σε G-6-P (6-φωσφορική γλυκόζη) παρουσία του
ενζύμου HK (εξοκινάση). Η G-6-P οξειδώνεται σε 6-PG (6-φωσφορικό γλυκονικό οξύ) και,
ταυτόχρονα, μια ισομοριακή ποσότητα NADP (φωσφορικό νικοτιναμιδο-αδενινο-δινουκλεοτίδιο)
ανάγεται σε NADPH σε μια αντίδραση που καταλύεται από το ένζυμο G-6P-DH (αφυδρογονάση
της 6-φωσφορικής γλυκόζης). Η αύξηση της απορρόφησης στα 340 nm, ως αποτέλεσμα του
σχηματισμού NADPH, είναι ανάλογη προς την ενεργότητα της κινάσης της κρεατίνης στο
δείγμα (3).
ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΕΞΕΤΑΣΗΣ
Για αυτοματοποιημένες διαδικασίες στον αναλυτή σας, ανατρέξτε στις Σημειώσεις εφαρμογής.
Η απόδοση οποιασδήποτε εφαρμογής που δεν έχει επικυρωθεί από τη Thermo Fisher Scientific
Oy δεν μπορεί να είναι εγγυημένη και επομένως πρέπει να αξιολογείται από το χρήστη.
Ρυθμίσεις οργάνου Indiko
Εισαγάγετε τις παραμέτρους εφαρμογής μέσω του γραμμωτού κώδικα που θα βρείτε στο φύλλο
εφαρμογής Indiko, ή μέσω ηλεκτρονικού αρχείου, όπως κρίνεται κατάλληλο.
Παρεχόμενα υλικά
Αντιδραστήρια, όπως αυτά περιγράφονται παραπάνω.
Υλικά που απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται
Βαθμονομητής και υλικά ελέγχου, όπως περιγράφεται παρακάτω.
Βαθμονόμηση
Η απόκριση (dA/min) μετατρέπεται σε μονάδες αποτελέσματος με ένα συντελεστή υπολογισμού.
Εναλλακτικά, χρησιμοποιήστε ως βαθμονομητή μια μονάδα eCal (981830), ακολουθώντας τις
οδηγίες που αναγράφονται στο ένθετο συσκευασίας της μονάδας eCal (981830).
HK
ATP + Γλυκόζη → ADP + G-6-P
Ποιοτικός έλεγχος
Χρησιμοποιείτε δείγματα ποιοτικού ελέγχου τουλάχιστον μία φορά την ημέρα και μετά από κάθε
βαθμονόμηση, καθώς και κάθε φορά που χρησιμοποιείτε νέα φιάλη αντιδραστηρίου. Συνιστάται
να χρησιμοποιείτε υλικά ελέγχου ή συνδυασμό δειγμάτων τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλής
και υψηλής συγκέντρωσης). Κατά τη διεξαγωγή ποιοτικού ελέγχου, τηρείτε πάντοτε τους
τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς.
Διαθέσιμα υλικά ελέγχου:
CK-MB Control, κωδικός 981908
CK-MB Control High, κωδικός 981255
Nortrol, κωδικός 981043
Abtrol, κωδικός 981044
Τα διαστήματα και τα όρια των ελέγχων (QC) πρέπει να προσαρμόζονται στις απαιτήσεις του
εκάστοτε εργαστηρίου. Τα αποτελέσματα των δειγμάτων ποιοτικού ελέγχου θα πρέπει να
εμπίπτουν στα όρια που έχει προκαθορίσει το εργαστήριο.
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
ΥΠΟΛΟΓΙΣΜΟΣ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ
Τα αποτελέσματα υπολογίζονται αυτομάτως από τον αναλυτή ως εξής:
ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ
Eνεργότητα σε U/l = Συντελεστής x dA/min
CK
Φωσφορική κρεατίνη + ADP → Κρεατίνη + ATP
Το κιτ με κωδικό 981828 περιέχει
2 φιαλίδια Αντιδραστηρίου A των
52 ml
2 φιαλίδια Αντιδραστηρίου B των
13 ml
Το κιτ με κωδικό 981829 περιέχει
2 φιαλίδια Αντιδραστηρίου A των
20 ml
2 φιαλίδια Αντιδραστηρίου B των
5 ml
Συγκεντρώσεις
Αντιδραστήριο Α
Ρυθμιστικό διάλυμα (Ιμιδαζόλη), pH 6.5
D-γλυκόζη
N-ακετυλ-L-κυστεΐνη (NAC)
Οξικό μαγνήσιο
EDTA-Na2
Φωσφορικό νικοτιναμιδο-αδενινο-δινουκλεοτίδιο (NADP)
Εξοκινάση (HK)
NaN3
Αντιδραστήριο Β
Ρυθμιστικό διάλυμα (Ιμιδαζόλη)
5'-διφωσφορική αδενοσίνη (ADP)
5'-μονοφωσφορική αδενοσίνη (AMP)
Πενταφωσφορική δι(αδενοσίνη-5') (AP5A)
Αφυδρογονάση της 6-φωσφορικής γλυκόζης (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Φωσφορική κρεατίνη
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1 %
TV x 1000
Θεωρητικός συντελεστής = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Ολικός όγκος αντίδρασης σε ml
Όγκος δείγματος σε ml
Συντελεστής εξασθένησης NADPH στα 340 nm
Μήκος διαδρομής κυψελίδας = 1
Συντελεστής μετατροπής µkat/l = (U/l)/60
Αν χρησιμοποιείται ως βαθμονομητής μια μονάδα eCal (981830), τα αποτελέσματα
υπολογίζονται αυτόματα από τον αναλυτή με χρήση καμπύλης βαθμονόμησης.
Καμπύλη βαθμονόμησης (παράδειγμα)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Προφυλάξεις
Το αντιδραστήριο Β είναι επικίνδυνο.
Δείτε το ξεχωριστό φυλλάδιο για τις φράσεις κινδύνου και προφυλάξεων που εσωκλείεται στο κιτ:
H315, P280, P302+P352, P305+P351+P338.
Τα αντιδραστήρια περιέχουν αζίδιο του νατρίου ως συντηρητικό.
Λαμβάνετε τις συνήθεις προφυλάξεις που απαιτούνται για το χειρισμό όλων των εργαστηριακών
αντιδραστηρίων.
Το προϊόν πρέπει να απορρίπτεται ως εργαστηριακή χημική ουσία σύμφωνα με τους τοπικούς
κανονισμούς.
Προετοιμασία
Τα Αντιδραστήρια Α και Β είναι έτοιμα για χρήση.
Σημείωση: Ελέγξτε ότι δεν υπάρχουν φυσαλίδες στο λαιμό του φιαλιδίου ή στην επιφάνεια του
αντιδραστηρίου όταν εισάγετε τα φιαλίδια ή τα δοχεία αντιδραστηρίων στον αναλυτή.
Φύλαξη και σταθερότητα
Τα αντιδραστήρια σε φιαλίδια που δεν έχουν ανοιχτεί είναι σταθερά στους 2...8°C μέχρι την
ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα.
Για πληροφορίες σχετικά με τη σταθερότητα των αντιδραστηρίων όταν αυτά είναι τοποθετημένα
στο μηχάνημα, ανατρέξτε στις Σημειώσεις εφαρμογής του αναλυτή.
Εάν τα αντιδραστήρια παρουσιάζουν θολερότητα, μην τα χρησιμοποιήσετε.
ΣΥΛΛΟΓΗ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ
Σημείωση: Κατά την επεξεργασία δειγμάτων σε σωληνάρια δειγματοληψίας, ακολουθήστε
προσεκτικά τις οδηγίες του κατασκευαστή των σωληναρίων, για να αποφύγετε τη λήψη
εσφαλμένων αποτελεσμάτων. Να είστε ιδιαίτερα προσεκτικοί με τις προαναλυτικές μεταβλητές,
όπως είναι η ανάμιξη, ο χρόνος ηρεμίας πριν από τη φυγοκέντρηση και οι ρυθμίσεις της
φυγοκέντρου.
Τύπος δείγματος
Μπορεί να χρησιμοποιηθεί μη αιμολυμένος ορός ή ηπαρινισμένο πλάσμα.
Σημείωση: Η αιμόλυση μπορεί να οδηγήσει σε αποκλίνοντα αποτελέσματα. Αποφεύγετε την
έκθεση των δειγμάτων σε δυνατό φως.
Η καμπύλη βαθμονόμησης εξαρτάται από την παρτίδα.
ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑΣ
Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα θα πρέπει να εκτιμώνται πάντοτε σε συνδυασμό
με το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς, τα ευρήματα κλινικής εξέτασης και άλλα ευρήματα.
Παρεμβολές
Διεξήχθη μελέτη με οδηγό το έγγραφο ΕΡ7-Α2 του CLSI.
Κριτήριο: Διαφορά εντός ± 10% των αρχικών τιμών.
Konelab
Ουσία παρεμβολής
Συζευγμένη χολερυθρίνη
Μη συζευγμένη
χολερυθρίνη
Αιμοσφαιρίνη σε αιμόλυμα
Λιπαιμία: Intralipid
(εμπορικό σήμα της
Fresenius Kabi AB)
Συγκέντρωση ουσίας
παρεμβολής
Στόχος CK
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Διαφορά
από στόχο
(%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
Page 7
Indiko
Ουσία παρεμβολής
Συζευγμένη χολερυθρίνη
Μη συζευγμένη
χολερυθρίνη
Αιμοσφαιρίνη σε αιμόλυμα
Λιπαιμία: Intralipid
(εμπορικό σήμα της
Fresenius Kabi AB)
Συγκέντρωση ουσίας
παρεμβολής
Στόχος CK
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Διαφορά
από στόχο
(%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Αποφεύγετε τη χρήση αιμολυμένων δειγμάτων.
Υπάρχει μικρή συσχέτιση ανάμεσα στη θολερότητα και τη συγκέντρωση τριγλυκεριδίων.
Σε πολύ σπάνιες περιπτώσεις γαμμαπάθειας, και συγκεκριμένα τύπου IgM (μακροσφαιριναιμία
Waldenström), μπορεί να προκληθούν αναξιόπιστα αποτελέσματα (6). Δεν έχει δοκιμαστεί στη
Thermo Fisher Scientific Oy.
Για άλλες ουσίες παρεμβολής, ανατρέξτε στην παραπομπή (5).
ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
ΑΝΑΜΕΝΟΜΕΝΕΣ ΤΙΜΕΣ (3)
Άνδρες < 171 U/l (< 2.85 µkat/l) στους 37 °C
Γυναίκες < 145 U/l (< 2.41 µkat/l) στους 37 °C
Οι προαναφερθείσες τιμές θα πρέπει να λαμβάνονται υπόψη μόνον ενδεικτικά. Συνιστάται κάθε
εργαστήριο να επαληθεύει αυτό το εύρος τιμών ή να ορίζει ένα διάστημα αναφοράς για τον
πληθυσμό με τον οποίο ασχολείται.
ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΉΣ
Τηλ. +358 10 329 200
Συντελεστής μετατροπής
µkat/l = (U/l)/60
Ημερομηνία αναθεώρησης (εεεε-μμ-ηη)
2015-05-08
ΕΥΡΟΣ ΜΕΤΡΗΣΗΣ
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Εκτεταμένο εύρος μέτρησης μετά από δευτερογενή αραίωση: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
Αλλαγές από την προηγούμενη έκδοση
Η γραμμή δίπλα στο κείμενο υποδεικνύει αλλαγές.
ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟΔΟΣΗΣ
Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται σε μεμονωμένα εργαστήρια ενδέχεται να διαφέρουν από τα
παρεχόμενα δεδομένα απόδοσης.
Όριο ανίχνευσης
Διεξήχθη μελέτη με οδηγό το έγγραφο ΕΡ17-Α.
Το όριο τυφλού (LoB) αντιστοιχεί στο υψηλότερο αποτέλεσμα μέτρησης που είναι πιθανό να
παρατηρηθεί για δείγμα χωρίς προσδιοριζόμενη ουσία (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Το όριο ανίχνευσης (LoD) αντιστοιχεί στη χαμηλότερη ποσότητα προσδιοριζόμενης ουσίας στο
δείγμα, η οποία μπορεί να ανιχνευτεί (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Το όριο ποσοτικοποίησης (LoQ) αντιστοιχεί στη χαμηλότερη πραγματική συγκέντρωση στο
δείγμα, η οποία μπορεί να ποσοτικοποιηθεί (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Το όριο τυφλού (LoB) αντιστοιχεί στο υψηλότερο αποτέλεσμα μέτρησης που είναι πιθανό να
παρατηρηθεί για δείγμα χωρίς προσδιοριζόμενη ουσία (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Το όριο ανίχνευσης (LoD) αντιστοιχεί στη χαμηλότερη ποσότητα προσδιοριζόμενης ουσίας στο
δείγμα, η οποία μπορεί να ανιχνευτεί (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Το όριο ποσοτικοποίησης (LoQ) αντιστοιχεί στη χαμηλότερη πραγματική συγκέντρωση στο
δείγμα, η οποία μπορεί να ποσοτικοποιηθεί (n = 42).
Ανακρίβεια
Η ανακρίβεια του προσδιορισμού CK είναι ≤ 5.0% του συνολικού CV.
Konelab
CK
Επαναληψιμότητα
(Σε μία ανάλυση)
Επί της συσκευής
(Σύνολο)
Μέση τιμή 92 U/l
SD
1.7
CV%
1.8
Μέση τιμή
226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Μέση τιμή
616 U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
2.8
3.1
22.3
1.4
3.6
Διεξήχθη μελέτη ακριβείας με οδηγό το έγγραφο EP5-A2 του CLSI, σε ένα κέντρο με τρεις αναλυτές
Konelab 60, ένα χειριστή, δύο παρτίδες αντιδραστηρίων, μία παρτίδα βαθμονομητή και έξι
βαθμονομήσεις σε 21 ημέρες, με αριθμό μετρήσεων n = 84. Τα αποτελέσματα από κάθε αναλυτή
συνδυάστηκαν.
Indiko
CK
Επαναληψιμότητα
(Σε μία ανάλυση)
Επί της συσκευής
(Σύνολο)
Μέση τιμή 95 U/l
SD
1.2
CV%
1.2
Μέση τιμή
226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Μέση τιμή
637 U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
1.7
2.8
11.7
1.2
1.8
Διεξήχθη μελέτη ακριβείας με οδηγό το έγγραφο EP5-A2 του CLSI, σε ένα κέντρο με τρεις αναλυτές
Indiko, ένα χειριστή, δύο παρτίδες αντιδραστηρίων, μία παρτίδα βαθμονομητή και επτά
βαθμονομήσεις σε 21 ημέρες, με αριθμό μετρήσεων n = 84. Τα αποτελέσματα από κάθε αναλυτή
συνδυάστηκαν.
Σύγκριση μεθόδων
Konelab
Διεξήχθη συγκριτική μελέτη στον αναλυτή Konelab Prime 60 με οδηγό το έγγραφο EP9-A2 του
CLSI και με την προηγούμενη μέθοδο 981372 CK (IFCC) (x) ως μέθοδο αναφοράς.
Γραμμική παλινδρόμηση (Deming) (μονάδα αποτελεσμάτων U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Οι συγκεντρώσεις του δείγματος ήταν μεταξύ 17 και 2253 U/l.
Indiko
1) Διεξήχθη συγκριτική μελέτη στον αναλυτή Indiko με οδηγό το έγγραφο EP9-A2 του CLSI και με
την προηγούμενη μέθοδο 981372 CK (IFCC) στον αναλυτή Konelab Prime 60 (x) ως μέθοδο
αναφοράς.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Διεξήχθη συγκριτική μελέτη στον αναλυτή Indiko με οδηγό το έγγραφο EP9-A2 του CLSI και με
την ίδια μέθοδο CK (IFCC) στον αναλυτή Konelab Prime 60 (x) ως μέθοδο αναφοράς.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
Page 8
Page 9
ES
CK (IFCC)
ESTE PROSPECTO ES PARA USO FUERA DE EE. UU.
INDICACIONES
Para uso diagnóstico in vitro en la determinación cuantitativa de la actividad de la creatina-cinasa
(ATP: creatina N-fosfotransferasa (CK), EC 2.7.3.2) en suero o plasma humano en analizadores
Konelab e Indiko.
Las referencias a los sistemas Konelab son extensibles a la serie T.
RESUMEN (1,2)
La actividad de la creatina-cinasa es mayor en los músculos estriados, el cerebro y el tejido
cardíaco. Otros tejidos, como los riñones, el diafragma y la próstata, presentan una actividad
notablemente inferior.
La actividad de la CK es elevada en muchas enfermedades, incluidas las que afectan al músculo
esquelético, el corazón, el sistema nervioso central y la tiroides. La actividad total de la CK en
sangre comienza a elevarse tras una lesión muscular aguda y alcanza niveles patológicos en el
50 % de pacientes tras una duración media de 4-5 horas. Los valores aumentan regularmente a
partir de 8 a 24 horas tras el comienzo del infarto y recuperan el rango de referencia con grandes
fluctuaciones según el individuo.
PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO
El ensayo CK es un ensayo líquido en dos partes que utiliza tres enzimas para determinar la
actividad de la CK.
La creatina-cinasa cataliza la reacción entre la fosfocreatina y la ADP (adenosina-5'-difosfato) y
forma creatina y ATP (adenosina-5'-trifosfato). Este último compuesto fosforila la glucosa a G-6-P
(glucosa-6-fosfato) en presencia de HK (hexocinasa). La G-6-P se oxida a 6-PG (gluconato-6fosfato) y, al mismo tiempo, una cantidad equimolar de NADP (nicotinamida adenina dinucleótido
fosfato) se reduce a NADPH en una reacción catalizada por G-6P-DH (glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa). El incremento de absorbencia a 340 nm causado por la formación de NADPH es
proporcional a la actividad de la creatina-cinasa en la muestra (3).
CK
Fosfocreatina + ADP → Creatina + ATP
HK
ATP + glucosa → ADP + G-6-P
4 horas a 20…25 °C,
1 mes a 4…8 °C o
1 mes a -20 °C; protegida de la luz.
CK-BB no estable.
PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
Consulte las notas de aplicación para obtener información sobre el uso de un procedimiento
automatizado con el analizador. No puede garantizarse la fiabilidad de ninguna aplicación no
aprobada por Thermo Fisher Scientific Oy, por lo que deberá evaluarla el usuario.
Ajustes del analizador Indiko
Para introducir los parámetros de aplicación, utilice el código de barras que aparece en la hoja de
aplicación de Indiko o el archivo electrónico, según corresponda.
Material suministrado
Los reactivos antes descritos.
Material requerido pero no suministrado
El calibrador y los controles indicados más abajo.
Calibración
La respuesta (dA/min) se convierte en unidades de resultado con un factor de cálculo.
También se puede usar eCal (981830) como calibrador según las instrucciones del prospecto del
paquete.
Control de la calidad
Utilice muestras de control de la calidad al menos una vez al día, después de cada calibración y
cada vez que use un nuevo frasco de reactivo. Se recomienda utilizar al menos dos niveles (alto
y bajo) de controles o mezclas de muestras. Siga siempre las normas locales, estatales y
federales al realizar los controles de calidad.
Controles disponibles:
CK-MB Control, código 981908
CK-MB Control High, código 981255
Nortrol, código 981043
Abtrol, código 981044
Los intervalos y límites de los controles deben adaptarse a los requisitos de cada laboratorio. Los
resultados de las muestras de control de la calidad deben estar dentro de los límites establecidos
por el laboratorio.
CALCULO DE RESULTADOS
El analizador calcula los resultados automáticamente de la manera siguiente:
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
Actividad en l/U = Factor x dA/min
INFORMACIÓN DE REACTIVOS
El kit código 981828 contiene
2 viales con 52 ml de reactivo A
2 viales con 13 ml de reactivo B
Muestra
El kit código 981829 contiene
2 viales con 20 ml de reactivo A
2 viales con 5 ml de reactivo B
Concentraciones
Reactivo A
Tampón (imidazol), pH 6.5
D-glucosa
N-acetil-L-cisteína (NAC)
Acetato de magnesio
EDTA-Na2
Nicotinamida adenina dinucleótido fosfato (NADP)
Hexocinasa (HK)
NaN3
Reactivo B
Tampón (imidazol)
Adenosina-5'-difosfato (ADP)
Adenosina-5'-monofosfato (AMP)
Di(adenosina-5')pentafosfato
(AP5A)
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Fosfocreatina
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/I
< 0.1 %
TV x 1000
Factor teórico = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Volumen total de reacción en ml
Volumen de muestra en ml
Coeficiente de extinción de NADPH a
340 nm
Longitud de recorrido de cubeta = 1
Factor de conversión µkat/l = (U/l)/60
Si se utiliza eCal (981830) como calibrador, el analizador calcula automáticamente los resultados
con una curva de calibración.
Curva de calibración (ejemplo)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Precauciones
El reactivo B es peligroso.
Consulte la hoja separada dentro del kit para ver las indicaciones de peligrosidad y las
precauciones: H315, P280, P302+P352, P305+P351+P338.
Los reactivos contienen azida sódica como conservante.
Deben adoptarse las precauciones normales requeridas en el manejo de reactivos en laboratorio.
El producto debe desecharse como producto químico de laboratorio según la normativa local.
Preparación
Los reactivos A y B están listos para su uso.
Nota: compruebe que no haya burbujas en el cuello de la botella ni en la superficie del reactivo
cuando introduzca viales o recipientes de reactivos en el analizador.
Conservación y estabilidad
Los reactivos en viales sin abrir son estables a 2...8 °C hasta la fecha de caducidad impresa en la
etiqueta.
Consulte las notas de aplicación del analizador para determinar la estabilidad de los reactivos
una vez abiertos y puestos en el analizador.
Si los reactivos presentan turbidez, no los utilice.
RECOGIDA DE MUESTRAS
Nota: cuando se procesen muestras en tubos de recogida de muestras, siga atentamente las
instrucciones del fabricante del tubo para evitar resultados incorrectos. Preste especial atención
a las variables preanalíticas, como la mezcla, el tiempo de verticalidad antes de la centrifugación
y los ajustes de la centrífuga.
Tipo de muestra
Puede utilizarse suero no hemolizado o plasma con heparina.
Nota: la hemólisis puede dar lugar a resultados desviados. No exponga las muestras a una
iluminación intensa.
Precauciones
Las muestras humanas se deben manipular y desechar como si se tratase de material
potencialmente infeccioso.
La curva de calibración depende del lote.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Para fines diagnósticos, los resultados deben evaluarse siempre conjuntamente con la
anamnesis del paciente, las exploraciones físicas y otros datos.
Interferencia
Se ha realizado un estudio según las directrices del documento EP7-A2 de CLSI.
Criterios: diferencia de ± 10 % respecto a los valores iniciales.
Konelab
Sustancia interferente
Bilirrubina conjugada
Bilirrubina no conjugada
Hemoglobina en
hemolizado
Lipidemia: Intralipid
(marca comercial de
Fresenius Kabi AB)
Concentración
interferente
CK objetivo
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Diferencia
respecto
del objetivo
(%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
981828
981829
Conservación (4)
Las muestras pueden conservarse como se indica abajo.
Indiko
Sustancia interferente
Bilirrubina no conjugada
Hemoglobina en
hemolizado
Lipidemia: Intralipid
(marca comercial de
Fresenius Kabi AB)
Concentración
interferente
CK objetivo
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Diferencia
respecto
del objetivo
(%)
- 0.8
- 2.4
+ 0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
No utilice muestras hemolizadas.
Existe una escasa correlación entre la turbidez y la concentración de triglicéridos.
Rara vez la gammopatía, en particular el tipo IgM (macroglobulinemia de Waldeström), puede
generar resultados no fiables (6). No probado en Thermo Fisher Scientific Oy.
Si desea obtener información sobre la interferencia de otras sustancias, consulte la referencia (5).
VALORES PREVISTOS (3)
Hombre < 171 U/l (< 2.85 µkat/l) a 37 °C
Mujer
< 145 U/l (< 2.41 µkat/l) a 37 °C
Los valores mencionados sirven sólo de referencia. Se recomienda que cada laboratorio verifique
este rango u obtenga un intervalo de referencia para la población a la que atiende.
Factor de conversión
µkat/l = (U/l)/60
INTERVALO DE MEDICION
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Intervalo de medición aumentado después de la segunda dilución: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150
µkat/l).
CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO
Los resultados obtenidos en cada laboratorio pueden diferir de los datos de resultados
presentados.
Límites de detección
Se realizó un estudio según las directrices del documento EP17-A.
Konelab LdB: 0.6 U/l (0.01 µkat/l)
El límite del blanco (LdB) representa el resultado de medición más alto que es probable que se
observe con una muestra sin analito (n = 60).
LdD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
El límite de detección (LdD) representa la cantidad más baja de analito que puede detectarse en
una muestra (n = 60).
LdC: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
El límite de cuantificación (LdC) representa la concentración real más baja que puede
determinarse cuantitativamente en una muestra (n = 41).
Indiko
LdB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
El límite del blanco (LdB) representa el resultado de medición más alto que es probable que se
observe con una muestra sin analito (n = 60).
LdD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
El límite de detección (LdD) representa la cantidad más baja de analito que puede detectarse en
una muestra (n = 60).
LdC: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
El límite de cuantificación (LdC) representa la concentración real más baja que puede
determinarse cuantitativamente en una muestra (n = 42).
Precisión
La imprecisión del ensayo de CK es ≤ 5.0 % del coeficiente de variación (CV) total.
Konelab
CK
Repetibilidad
(intraserie)
Intradispositivo (total)
Media 92 U/l
DE
CV%
1.7
1.8
Media 226 U/l
DE
CV%
2.0
0.9
Media 616 U/l
DE
CV%
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
En el estudio de precisión realizado en un centro según las directrices del documento EP5-A2 de
CLSI se usaron tres analizadores Konelab 60, un operador, 2 lotes de reactivos, un lote de
calibradores y 6 calibraciones durante 21 días, siendo el número de medidas n = 84. Los resultados
de cada analizador se combinaron.
Indiko
CK
Repetibilidad
(intraserie)
Intradispositivo (total)
Media 95 U/l
DE
CV%
1.2
1.2
Media 226 U/l
DE
CV%
2.0
0.9
Media 637 U/l
DE
CV%
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
En el estudio de precisión realizado en un centro según las directrices del documento EP5-A2 de
CLSI se usaron tres analizadores Indiko, un operador, 2 lotes de reactivos, un lote de calibradores y 7
calibraciones durante 21 días, siendo el número de medidas n = 84. Los resultados de cada
analizador se combinaron.
Comparación de métodos
Konelab
Se realizó un estudio comparativo con Konelab Prime 60 según las directrices del documento
EP9-A2 de CLSI y con el método 981372 CK(IFCC) (x) anterior como referencia.
Regresión lineal (Deming) (unidad de resultado U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Las concentraciones de las muestras oscilaron entre 17 y 2253 U/l.
Indiko
1) Se realizó un estudio comparativo con Indiko según las directrices del documento EP9-A2 de
CLSI y con el método 981372 CK(IFCC) utilizado anteriormente con Konelab Prime 60 (x) como
referencia.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Se realizó un estudio comparativo con Indiko según las directrices del documento EP9-A2 de
CLSI y con el mismo método CK(IFCC) utilizado en Konelab Prime 60 (x) como referencia.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
BIBLIOGRAFÍA
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
FABRICANTE
Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa (Finlandia)
Tel. +358 10 329 200
Fecha de revisión (aaaa-mm-dd)
2015-05-08
Cambios desde la versión anterior
Una línea junto al texto indica modificaciones.
Page 10
Page 11
ET
CK (IFCC)
2 × 65 ml (Konelab™)
2 × 25 ml (Konelab™, Indiko™)
PAKENDI INFOLEHT ON KOOSTATUD KASUTAMISEKS
VÄLJASPOOL USA-D.
Proov
4 tundi temperatuuril 20…25 °C,
1 kuu temperatuuril 4…8 °C või
1 kuu temperatuuril -20 °C kaitstuna valguse eest.
CK-BB ei ole stabiilne.
MÕÕTEPROTSEDUUR
Teave analüsaatori automaatse mõõteprotseduuri kasutamise kohta on esitatud tehnilistes
märkustes. Thermo Fisher Scientific Oy poolt kinnitamata rakendusviiside sooritusnäitajaid tagada
ei saa, seetõttu peab neid hindama lõppkasutaja.
SIHTOTSTARVE
Kreatiini kinaasi (ATP: kreatiini N-fosfotransferaas (CK), EC 2.7.3.2) aktiivsuse in vitro
kvantitatiivseks määramiseks inimese seerumis või plasmas Konelabi ja Indiko analüsaatoritel.
Konelabi süsteemide viited kehtivad ühtlasi T-seeria kohta.
Indiko seadme sätted
Sisestage rakenduse parameetrid Indiko rakenduse lehel oleva vöötkoodi või elektroonilise faili
kaudu.
KOKKUVÕTE (1, 2)
Kreatiini kinaasi aktiivsus on kõige kõrgem vöötlihastes, ajus ja südamekoes. Muudes kudedes,
nagu neerudes, diafragmas ja eesnäärmes, on aktiivsus palju madalam.
CK aktiivsus on kõrgem paljude haiguste, sh skeletilihaste, südame, kesknärvisüsteemi ja
kilpnäärmega seotud haiguste puhul. Pärast ägedat lihasekahjustust hakkab CK koguaktiivsus
veres tõusma, jõudes 50% patsientidest haigusliku tasemeni keskmiselt 4–5 tunni jooksul.
Väärtused tõusevad korrapäraselt alates 8.–24. tunni möödumisest infarkteerumise algusest ja
naasevad normaalvahemikku suurte individuaalsete erinevustega.
Kaasasolevad materjalid
Eespool kirjeldatud reaktiivid.
PROTSEDUURI PÕHIMÕTE
Ck analüüs on kaheosaline vededlikanalüüs, mis kasutab CK aktiivsuse määramiseks kolme
ensüümi.
Kreatiini kinaas katalüüsib reaktsiooni kreatiinfosfaadi ja ADP (adenosiin-5’-difosfaat) vahel,
reaktsioonis tekivad kreatiin ja ATP (adenosiin-5’-trifosfaat). Viimane fosforüülib glükoosi HK
(heksokinaas) juuresolekul glükoos-6-fosfaadiks (G-6-P). G-6-P oksüdeerub 6-PG-ks (glükonaat-6fosfaat), samal ajal redutseerub ekvimolaarne NADP (nikotiinamiidadeniindinukleotiidfosfaat) kogus
G-6P-DH (glükoos-6-fosfaadi dehüdrogenaas) katalüüsitavas reaktsioonis NADPH-ks. NADPH
tekkest tingitud neelduvuse tõus lainepikkusel 340 nm on võrdeline kreatiini kinaasi aktiivsusega
proovis (3).
Vajaminevad materjalid, mida kaasas pole
Allpool kirjeldatud kalibraator ja kontrollmaterjalid.
Kalibreerimine
Vastus (dA/min) teisendatakse ühikuliseks tulemuseks vastava arvutusteguri abil.
Teine võimalus on kasutada eCal (981830) kalibraatorit, järgides eCal (981830) pakendi infolehes
toodud juhiseid.
HK
ATP + Glükoos → ADP + G-6-P
Kvaliteedikontroll
Kvaliteedikontrolli materjale kasutatakse vähemalt kord päevas, pärast igat kalibreerimist ja iga
kord, kui kasutatakse uut reaktiivipudelit. Kasutage vähemalt kahe tasemega kontrollmaterjale
(madal ja kõrge) või proovisegusid. Kvaliteedikontrolli (QC) läbiviimisel järgige alati kohalikke,
riiklikke ja föderaalseid regulatsioone.
Saadaval on järgmised kontrollmaterjalid:
CK-MB Control, kood 981908
CK-MB Control High, kood 981255
Nortrol, kood 981043
Abtrol, kood 981044
Kontrollmaterjalide (KK) vahemikud ja piirid tuleb kohaldada konkreetse labori vajadustele.
Kontrollmaterjalide vahemikud ja piirid tuleb kohaldada individuaalsete laborite vajadustele.
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
TULEMUSTE ARVUTAMINE
Tulemused arvutab analüsaator automaatselt järgmisel viisil
REAKTIIVI INFO
Aktiivsus U/l = tegur × dA/min
CK
Kreatiinfosfaat + ADP → Kreatiin + ATP
Komplekt koodiga 981828 sisaldab
2 viaali 52 ml reaktiivi A
2 viaali 13 ml reaktiivi B
Komplekt koodiga 981829 sisaldab
2 viaali 20 ml reaktiivi A
2 viaali 5 ml reaktiivi B
TV
SV
6.22
P
Kontsentratsioonid
Reaktiiv A
Puhver (imidasool), pH 6.5
D-glükoos
N-atsetüül-L-tsüsteiin (NAC)
Magneesiumatsetaat
EDTA-Na2
Nikotiinamiidadeniindinukleotiidfosfaat (NADP)
Heksokinaas (HK)
NaN3
Reaktiiv B
Puhver (Imidasool)
Adenosiin-5’-difosfaat (ADP)
Adenosiin-5’-monofosfaat (AMP)
Di(adenosiin-5’)pentafosfaat (AP5A)
Glükoos-6-fosfaadi dehüdrogenaas (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Kreatiinfosfaat
NaN3
TV × 1000
Teoreetiline tegur = 
6.22 × SV × P
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1%
Reaktsiooni kogumaht (ml)
Proovi maht (ml)
NADPH ekstinktsioonikoefitsient lainepikkusel 340 nm
Küveti optiline teepikkus = 1
Teisendustegur µkat/l = (U/l)/60
eCal (981830) kasutamisel kalibraatorina arvutab analüsaator tulemused kalibreerimiskõvera järgi
automaatselt
Kalibreerimiskõver (näide)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14 000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1%
Ettevaatusabinõud
Reaktiiv B on ohtlik.
Vaadake ohu- ja ettevaatuslausete komplektis olevat eraldi lehte: H315, P280, P302+P352,
P305+P351+P338.
Reaktiivid sisaldavad säilitusainena naatriumasiidi.
Kõigi laborireaktiivide käsitsemisel tuleb rakendada tavapäraseid ettevaatusabinõusid.
Toode tuleb kõrvaldada laborikemikaalina kooskõlas kohalike eeskirjadega.
Ettevalmistus
Reaktiivid A ja B on kasutusvalmis.
Märkus: enne reaktiiviviaalide või -nõude viimist analüsaatorisse tuleb kontrollida, et pudelikaelas
ega reaktiivi pinnal ei ole mulle.
Säilitamine ja stabiilsus
Avamata viaalides püsivad reaktiivid temperatuuril 2…8 °C stabiilsena sildile trükitud
aegumistähtajani.
Teave reaktiivide seadmesisese stabiilsuse kohta on esitatud analüsaatori tehnilistes märkustes.
Kui reaktiivides esineb hägusust, ärge kasutage neid.
PROOVIDE VÕTMINE
Märkus: väärade tulemuste vältimiseks tuleb proovide töötlemisel proovivõtukatsutites
tähelepanelikult järgida katsuti valmistaja juhiseid. Pöörake kindlasti tähelepanu analüüsile
eelnevatele teguritele nagu näiteks segamine, säilitamisaeg enne tsentrifuugimist ja tsentrifuugi
sätted.
Proovi tüüp
Kasutada võib hemolüüsumata seerumi- või hepariiniga plasmaproove.
Märkus: hemolüüs võib viia tulemuste kõrvalekalleteni. Proove tuleb hoida tugeva valguse eest.
Ettevaatusabinõud
Inimpäritolu proove tuleb käsitsemisel ja kõrvaldamisel lugeda võimalikeks nakkusallikateks.
Kalibreerimiskõver on eri partiide puhul erinev.
PROTSEDUURI PIIRANGUD
Diagnostilistel eesmärkidel tuleb analüüsi tulemusi kasutada alati kombinatsioonis haigusloo,
kliinilise läbivaatuse ja teiste leidudega.
Segavad mõjud
Uuring viidi läbi CLSI dokumendi EP7-A2 suuniseid järgides.
Kriteerium: erinevus algväärtusest ±10%.
Konelab
Segav aine
Konjugeeritud bilirubiin
Konjugeerimata bilirubiin
Hemoglobiin
hemolüsaadis
Lipeemia: Intralipid
(Fresenius Kabi AB
kaubamärk)
Segav kontsentratsioon
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
CK
sihtväärtus
(U/l)
188
498
180
495
184
505
Erinevus
sihtväärtusest
(%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
981828
981829
Säilitamine (4)
Proove võib säilitada alljärgnevalt kirjeldatud viisil.
Indiko
Segav aine
Segav kontsentratsioon
Konjugeeritud bilirubiin
Konjugeerimata bilirubiin
Hemoglobiin
hemolüsaadis
Lipeemia: Intralipid
(Fresenius Kabi AB
kaubamärk)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
CK
sihtväärtus
(U/l)
179
477
175
469
187
502
Erinevus
sihtväärtusest
(%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Hoiduge kasutamast hemolüüsitud proove.
Korrelatsioon hägususe ja triglütseriidide sisalduse vahel on väike.
Väga harvadel juhtudel võib gammopaatia, ennekõike IgM-tüüpi (Waldenströmi
makroglobulineemia), põhjustada ebatõeseid tulemusi (6). Ei ole testitud Thermo Fisher Scientific
Oy-s.
Muid segavaid aineid on käsitletud viites 5.
EELDATAVAD VÄÄRTUSED (3)
Mees
< 171 U/l (< 2.85 µkat/l) temp. 37 °C
Naine
< 145 U/l (< 2.41 µkat/l) temp. 37 °C
Need väärtused on mõeldud suunitluslikena. Kõigil laboritel on soovitatav seda vahemikku
kontrollida või tuletada ise etalonvahemik teenindatava populatsiooni seas.
Teisendamistegur
µkat/l = (U/l)/60
SOORITUSNÄITAJAD
Individuaalsetes laborites saadavad tulemused võivad erineda esitatud sooritusnäitajatest.
Avastamise piirmäär
Uuring viidi läbi CLSI dokumendi EP17-A suuniseid järgides.
Puhas piirmäär (LoB) on suurim tõenäoline mõõtmistulemus analüüdivabast proovist (n=60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Avastamise piirmäär (LoD) on väikseim avastatav analüüdikogus proovis (n=60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Koguse piirmäär (LoQ) on madalaim tegelik kontsentratsioon proovis, mida on võimalik
kvantitatiivselt määrata (n=41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Puhas piirmäär (LoB) on suurim tõenäoline mõõtmistulemus analüüdivabast proovist (n=60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Avastamise piirmäär (LoD) on väikseim avastatav analüüdikogus proovis (n=60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Koguse piirmäär (LoQ) on madalaim tegelik kontsentratsioon proovis, mida on võimalik
kvantitatiivselt määrata (n=42).
Ebatäpsus
CK analüüsi ebatäpsus on ≤ 5.0% üld-CV-st.
Korratavus
(mõõtmisseeria
sisene)
Seadmesisene
(summaarne)
Keskmine 92 U/l
SD
1.7
CV%
1.8
Keskmine 226
U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Keskmine 616
U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
2.8
3.1
22.3
1.4
3.6
Vastavalt CLSI dokumendi EP5-A2 suunistele viidi ühes laboris kolme Konelab 60 analüsaatori peal
ühe operaatori poolt 2 reaktiivipartiid, ühte kalibraatoripartiid ja 6 kalibreerimist kasutades 21 päeva
jooksul läbi täpsusuuring, mõõtmiste arv uuringus oli n = 84. Kõigi analüsaatorite tulemused ühendati.
Indiko
CK
Korratavus
(mõõtmisseeria
sisene)
Seadmesisene
(summaarne)
Keskmine 95 U/l
SD
1.2
CV%
1.2
Keskmine 226
U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Keskmine 637
U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
1.7
2.8
11.7
1.2
TOOTJA
Tel. +358 10 329 200
Teksti läbivaatamise kuupäev (aaaa-kk-pp)
2015-05-08
MÕÕTEPIIRKOND
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Laiendatud mõõtepiirkond pärast teisest lahjendust: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
Konelab
CK
KIRJANDUS
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
1.8
Vastavalt CLSI dokumendi EP5-A2 suunistele viidi ühes laboris kolme Indiko analüsaatori peal ühe
operaatori poolt 2 reaktiivipartiid, ühte kalibraatoripartiid ja 7 kalibratsiooni kasutades 21 päeva jooksul
läbi täpsusuuring, mõõtmiste arv uuringus oli n = 84. Kõigi analüsaatorite tulemused ühendati.
Meetodite võrdlus
Konelab
Vastavalt CLSI dokumendi EP9-A2 suunistele viidi Konelab Prime 60 analüsaatoril läbi
võrdlusuuring, kasutades võrdlusalusena varasemat 981372 CK (IFCC) meetodit (x).
Lineaarne regressioon (Deming) (tulemus ühikutes U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Proovide kontsentratsioonid jäid vahemikku 17 kuni 2253 U/l.
Indiko
1) Vastavalt CLSI dokumendi EP9-A2 suunistele viidi Indiko analüsaatoril läbi võrdlusuuring,
kasutades võrdlusalusena varasemat 981372 CK (IFCC) meetodit Konelab Prime 60
analüsaatoril (x).
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Vastavalt CLSI dokumendi EP9-A2 suunistele viidi Indiko analüsaatoril läbi võrdlusuuring,
kasutades võrdlusalusena sama CK (IFCC) meetodit Konelab Prime 60 (x) analüsaatoril (x).
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
Muudatused võrreldes eelmise versiooniga
Teksti kõrval olev joon tähistab muudatusi.
Page 12
Page 13
FR
CK (IFCC)
CETTE NOTICE EST VALABLE POUR UNE UTILISATION
EN DEHORS DES ÉTATS-UNIS.
UTILISATION PREVUE
Pour usage diagnostique in vitro basé sur la détermination quantitative de l’activité de la créatine
kinase (ATP : créatine N-phosphotransférase (CK), EC 2.7.3.2) dans le sérum ou le plasma
humain sur les analyseurs Konelab et Indiko.
Toute référence aux systèmes Konelab fait également référence à la série T.
RESUME (1, 2)
L'activité de la créatine kinase est maximale au niveau des muscles striés, du cerveau et du tissu
cardiaque. Les autres tissus comme les reins, le diaphragme et la prostate contiennent une
activité significativement inférieure.
L'activité de la CK est élevée dans de nombreuses maladies, notamment celles impliquant les
muscles squelettiques, le cœur, le système nerveux central et la thyroïde. Après un dommage
musculaire aigu, l'activité totale de la CK dans le sang commence à augmenter pour atteindre des
niveaux pathologiques après un délai moyen de 4 à 5 heures chez 50 % des patients. Les
valeurs augmentent régulièrement entre la 8ème et la 24ème heure après le début d'un infarctus,
pour revenir ensuite à l'intervalle de référence, avec des variations importantes entre les individus.
PRINCIPE DE LA PROCEDURE
Le dosage CK est un dosage liquide en deux parties utilisant trois enzymes pour déterminer
l’activité de la CK.
La créatine kinase catalyse la réaction entre la créatine phosphate et l'ADP (adénosine-5'diphosphate) avec une formation de créatine et d'ATP (adénosine-5'-triphosphate). Ce dernier
composé phosphoryle le glucose en G-6-P (glucose-6-phosphate) en présence d'hexokinase (HK).
Le G-6-P est oxydé en 6-PG (gluconate-6-phosphate) et, en même temps, une quantité
équimolaire de NADP (nicotinamide adénine dinucléotide phosphate) est réduite en NADPH au
cours d'une réaction catalysée par la G-6P-DH (glucose-6-phosphate déshydrogénase).
L'augmentation de l'absorbance à 340 nm résultant de la formation de NADPH est proportionnelle
à l'activité de la créatine kinase dans l'échantillon (3).
Echantillon
4 heures à 20…25 °C,
1 mois à 4…8 °C ou
1 mois à -20 °C, protégé de la lumière.
CK-BB non stable.
PROCÉDURE DE TEST
Pour une description de la procédure automatisée sur votre modèle d'analyseur, se référer à la
fiche d'application de l'appareil. Toute application n’ayant pas été validée par Thermo Fisher
Scientific Oy ne peut pas être garantie en ce qui concerne ses performances et doit par
conséquent être évaluée par l’utilisateur.
Paramètres de l'instrument Indiko
Entrer les paramètres d'application via le code-barres qui se situe dans la fiche d'application
Indiko ou via le fichier électronique, selon le cas.
Matériel fourni
Réactifs décrits ci-dessus.
Matériel requis mais non fourni
Étalon et contrôles indiqués ci-dessous.
Étalonnage
La réponse (dA/min) est convertie en unités de résultat à l’aide d'un facteur de calcul.
Ou utiliser l'étalon eCal (981830) conformément aux instructions figurant dans la notice de eCal
(981830).
CK
Créatine phosphate + ADP → Créatine + ATP
Contrôle qualité
Utiliser les échantillons de contrôle qualité (QC) au moins fois par jour, après chaque étalonnage
et à chaque fois qu'un nouveau flacon de réactif est entamé. Il est conseillé d’utiliser au moins
deux niveaux (bas et élevé) de contrôles ou de pools d’échantillons. Toujours se conformer aux
réglementations locales, fédérales et nationales applicables en matière de contrôle qualité.
Contrôles disponibles :
CK-MB Control, N° de réf. 981908
CK-MB Control High, N° de réf. 981255
Nortrol, N° de réf. 981043
Abtrol, N° de réf. 981044
Les intervalles et les limites de contrôle (QC) doivent être adaptés aux besoins de chaque
laboratoire. Les résultats des échantillons de contrôle qualité doivent se situer dans la plage de
tolérance prédéfinie par le laboratoire.
HK
CALCUL DES RESULTATS
Les résultats sont calculés automatiquement par l'analyseur de la manière suivante :
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
Activité en U/l = Facteur x dA/min
TV x 1000
Facteur théorique = 
6.22 x SV x P
INFORMATIONS SUR LES RÉACTIFS
Contenu de la trousse 981828
2 flacons de 52 ml de réactif A
2 flacons de 13 ml de réactif B
Contenu de la trousse 981829
2 flacons de 20 ml de réactif A
2 flacons de 5 ml de réactif B
Concentrations
Réactif A
Tampon (Imidazole), pH 6.5
D-glucose
N-acétyl-L-cystéine (NAC)
Acétate de magnésium
EDTA-Na2
Nicotinamide adénine dinucléotide phosphate (NADP)
Hexokinase (HK)
NaN3
Réactif B
Tampon (imidazole)
Adénosine-5’-diphosphate (ADP)
Adénosine-5’-monophosphate (AMP)
Di(adénosine-5’)penta-phosphate (AP5A)
Glucose-6-phosphate déshydrogénase (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Créatine phosphate
NaN3
TV
SV
6.22
P
Volume total de la réaction en ml
Volume d'échantillon en ml
Coefficient d'extinction du NADPH à 340 nm
Longueur du trajet de la cuvette = 1
Facteur de conversion µkat/l = (U/l)/60
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5 000 U/l
< 0.1 %
Si l'on utilise l'étalon eCal (981830), les résultats sont calculés automatiquement par l'analyseur
à l'aide d'une courbe d'étalonnage.
Courbe d’étalonnage (exemple)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14 000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Précautions
Le réactif B est dangereux.
Voir aussi la liste séparée des mentions de danger et de précautions à l’intérieur du kit : H315,
P280, P302 + P352, P305 + P351 + P338.
Les réactifs contiennent de l’azoture de sodium comme conservateur.
La courbe d'étalonnage dépend du lot.
Prendre les précautions habituelles requises lors de la manipulation de tout réactif de laboratoire.
Ce produit doit être éliminé comme un produit chimique de laboratoire conformément aux
réglementations locales.
LIMITES DE LA PROCEDURE
Pour l’établissement d'un diagnostic, les résultats doivent toujours être évalués en association
avec les antécédents médicaux du patient, les examens cliniques et les autres observations.
Préparation
Les réactifs A et B sont prêts à l'emploi.
Remarque : s’assurer de l’absence de bulles au niveau du goulot du flacon ou à la surface du
réactif lors de la mise en place des flacons ou des récipients de réactifs dans l’analyseur.
Interférence
Une étude a eu lieu conformément aux directives du document CLSI EP7-A2.
Critère : différence se situant dans les limites de ±10 % des valeurs initiales.
Conservation et stabilité
Les réactifs contenus dans les flacons scellés sont stables à 2…8 °C jusqu’à la date de
péremption figurant sur l’étiquette.
Se référer à la fiche d'application de l'analyseur en ce qui concerne la stabilité des réactifs dans
l'appareil.
Si les réactifs montrent une turbidité, ne pas les utiliser.
PRELEVEMENT DES ECHANTILLONS
Remarque : si les échantillons sont traités dans des tubes de prélèvement d’échantillons, suivre
attentivement les instructions du fabricant des tubes afin d’éviter des résultats erronés. Prêter une
attention particulière aux variables préanalytiques comme le mélange, le temps de repos avant
centrifugation et les réglages de la centrifugeuse.
Type d'échantillon
On peut utiliser des échantillons de sérum ou de plasma hépariné non hémolysés.
Remarque : une hémolyse peut entraîner une déviation des résultats. Éviter l'exposition des
échantillons à la lumière vive.
Précautions
Les échantillons d'origine humaine doivent être manipulés et éliminés comme du matériel
potentiellement infectieux.
Konelab
Susbtance interférente
Bilirubine conjuguée
Bilirubine non conjuguée
Hémoglobine dans
l'hémolysat
Lipémie : Intralipid
(marque de Fresenius
Kabi AB)
Concentration de
substance interférente
CK cible
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Différence
depuis la
cible (%)
-5.3
-5.8
-1.7
-2.9
+8.5
+4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+2.8
+7.1
981828
981829
Stockage (4)
Les échantillons peuvent être conservés comme indiqué ci-dessous.
Indiko
Susbtance interférente
Bilirubine conjuguée
Bilirubine non conjuguée
Hémoglobine dans
l'hémolysat
Lipémie : Intralipid
(marque de Fresenius
Kabi AB)
Concentration de
substance interférente
CK cible
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Différence
depuis la
cible (%)
-0.8
-2.4
+0.2
-0.1
+8.6
+3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+1.0
-0.8
Éviter d'utiliser des échantillons hémolysés.
Il existe une faible corrélation entre turbidité et concentration en triglycérides.
De très rares cas de gammapathie, notamment de type IgM (macroglobulinémie de
Waldenström), peuvent être à l’origine de résultats non fiables (6). Non testé par Thermo Fisher
Scientific Oy.
Pour les autres substances interférentes, se reporter à la référence 5.
VALEURS ATTENDUES (3)
Homme < 171 U/l (< 2.85 µkat/l) à 37 °C
Femme < 145 U/l (< 2.41 µkat/l) à 37 °C
Les valeurs citées sont données à titre indicatif uniquement. Il est recommandé que chaque
laboratoire vérifie cet intervalle ou établisse son propre intervalle pour la population qu'il dessert.
Facteur de conversion
µkat/l = (U/l)/60
INTERVALLE DE MESURES
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Intervalle de mesures étendu après dilution secondaire: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCE
Les résultats obtenus dans chaque laboratoire peuvent différer des données de performance
indiquées.
Limite de détection
Une étude a eu lieu conformément aux directives du document EP17-A.
La limite de blanc (LoB) représente le résultat de mesure le plus élevé qui est susceptible d’être
observé pour un échantillon sans analyte (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
La limite de détection (LoD) représente la plus faible quantité d’analyte qu’il est possible de
détecter dans un échantillon (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
La limite de quantification (LoQ) représente la plus faible concentration réelle qu’il est possible de
quantifier dans un échantillon (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
La limite de blanc (LoB) représente le résultat de mesure le plus élevé qui est susceptible d’être
observé pour un échantillon sans analyte (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
La limite de détection (LoD) représente la plus faible quantité d’analyte qu’il est possible de
détecter dans un échantillon (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
La limite de quantification (LoQ) représente la plus faible concentration réelle qu’il est possible de
quantifier dans un échantillon (n = 42).
Imprécision
L’imprécision du dosage CK est ≤ 5.0 % du CV total.
Konelab
CK
Répétabilité
(intra-série)
Intra-analyseur
(totale)
Moyenne 92 U/l
SD
% CV
1.7
1.8
Moyenne 226 U/l
SD
% CV
2.0
0.9
Moyenne 616 U/l
SD
% CV
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
L’étude de précision a été réalisée conformément aux directives du document CLSI EP5-A2, sur un
seul site et sur trois analyseurs Konelab 60, avec un opérateur, 2 lots de réactifs, un lot d’étalons et
6 étalonnages pendant 21 jours, le nombre de mesures étant de n = 84. Les résultats de chaque
analyseur ont été combinés.
Indiko
CK
Répétabilité
(intra-série)
Intra-analyseur
(totale)
Moyenne 95 U/l
SD
% CV
1.2
1.2
Moyenne 226 U/l
SD
% CV
2.0
0.9
Moyenne 637 U/l
SD
% CV
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
L’étude de précision a été réalisée conformément aux directives du document CLSI EP5-A2, sur un
seul site et sur trois analyseurs Indiko, avec un opérateur, 2 lots de réactifs, un lot d’étalons et
7 étalonnages pendant 21 jours, le nombre de mesures étant de n = 84. Les résultats de chaque
analyseur ont été combinés.
Comparaison des méthodes
Konelab
Une étude de comparaison a été réalisée sur un analyseur Konelab Prime 60 conformément aux
directives du document CLSI EP9-A2 en utilisant comme référence la méthode 981372 CK(IFCC)
précédente.
Régression linéaire (Deming) (unité du résultat : U/l) :
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Les concentrations des échantillons se situaient entre 17 et 2253 U/l.
Indiko
1) Une étude de comparaison a été réalisée sur un analyseur Indiko conformément aux directives
du document CLSI EP9-A2 et en utilisant comme référence la méthode 981372 CK(IFCC)
précédente sur le Konelab Prime 60 (x).
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Une étude de comparaison a été réalisée sur un analyseur Indiko conformément aux directives
du document CLSI EP9-A2 en utilisant comme référence la même méthode CK(IFCC) que sur le
Konelab Prime 60 (x).
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
BIBLIOGRAPHIE
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
FABRICANT
Tél. +358 10 329 200
Date de révision (aaaa-mm-jj)
2015-05-08
Modifications par rapport à la version précédente
Le trait en regard du texte indique les modifications.
Page 14
Page 15
HU
CK (IFCC)
EZ A TÁJÉKOZTATÓ AZ EGYESÜLT ÁLLAMOKON KÍVÜLI
HASZNÁLATRA VONATKOZIK.
RENDELTETÉS
In vitro diagnosztikai felhasználásra az emberi szérum, illetve plazma kreatin kináz (ATP: Kreatin
N-foszfotranszferáz (CK), EC 2.7.3.2) aktivitásának kvantitatív meghatározásában Konelab és
Indiko analizátorokban.
A Konelab rendszerekre tett minden hivatkozás a T sorozatra is vonatkozik.
ÖSSZEGZÉS (1, 2)
A kreatin kináz aktivitás a harántcsíkolt izom-, az agy-, valamint a szívizomszövetben
a legmagasabb. Más szervek szövetei, mint például a vesék, a rekeszizom, vagy a prosztata
szignifikánsan kevesebb aktivitással rendelkeznek.
A CK aktivitás sok betegségben emelkedett, beleértve a vázizmok, a szív, a központi
idegrendszer és a pajzsmirigy betegségeit. Akut izomkárosodás után a vér CK aktivitása
emelkedni kezd, a betegek 50%-ában átlagosan 4-5 óra alatt éri el a kóros szintet. Infarktus
kialakulása után az értékek rendszeresen 8-24 órával emelkednek, visszatérésük
a referenciatartományba egyénenként nagy eltéréseket mutat.
AZ ELJÁRÁS ALAPELVE
A CK assay egy kétrészes folyadék-assay, amely három enzimet használ a CK-aktivitás
meghatározására.
A kreatin kináz a kreatin-foszfát és az ADP (adenozin-5’-difoszfát) közti reakciót katalizálja, mely
során kreatin és ATP (adenozin-5’-trifoszfát) keletkezik. Az utóbbi vegyület foszforilálja a glukózt
G-6-P-tá (glukóz-6-foszfát) HK (hexokináz) jelenlétében. A G-6-P 6-PG-tá (6-foszfoglukonát)
oxidálódik, miközben ekvimoláris mennyiségű NADP (nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát)
NADPH-vá redukálódik a G-6P-DH (glukóz-6-foszfát dehidrogenáz) által katalizált reakcióban.
A 340 nm-en mért abszorbancia NADPH-képződés következtében létrejött növekedése arányos
a minta kreatin kináz aktivitásával (3).
Minta
4 óráig 20…25 °C-on,
1 hónapig 4…8 °C-on, illetve
1 hónapig -20 °C-on, fénytől védett helyen
CK-BB nem stabil.
A VIZSGÁLATI ELJÁRÁS
Az automatizált eljárás kivitelezéséhez olvassa el az analizátorához tartozó Alkalmazási
tudnivalókat. Nem garantálható semmilyen olyan alkalmazás eredménye, amelyet a Thermo
Fisher Scientific Oy nem hagyott jóvá, ezért ezeket a felhasználónak kell értékelnie.
Indiko készülék beállításai
Adja meg az alkalmazási paramétereket az Indiko alkalmazási lapon lévő vonalkód, illetve
elektronikus fájl alapján.
Szolgáltatott anyagok
A fent leírt reagensek.
Szükséges, de nem szolgáltatott anyagok
Az alább leírt kalibrátorok és kontrollok.
Kalibrálás
A válasz (dA/min) egy számítási tényező segítségével eredményegységekre átszámítva
jelenik meg.
Ettől eltérően használhatja az eCal (981830) vegyületet kalibrálásra az eCal (981830)
csomagjában található tájékoztató szerint.
HK
ATP + glukóz → ADP + G-6-P
Minőség-ellenőrzés
Használjon minőségellenőrző (QC) mintákat naponta legalább egyszer, minden kalibrálás után,
illetve minden új üveg reagens felnyitásakor. Legalább két különböző szintű (alacsony és magas)
kontroll vagy mintapool alkalmazása javasolt. Mindig tartsa be a minőség-ellenőrzésre vonatkozó
helyi, állami és szövetségi szabályozásokat.
Rendelkezésre álló kontrollminták:
Abtrol, kód: 981044
Az ellenőrzési intervallumokat (QC) és határértékeket az aktuális laboratóriumi követelményekhez
kell igazítani. A minőségellenőrző minták eredményeinek a laboratórium által előre beállított
határértékek közé kell esniük.
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
AZ EREDMÉNYEK KISZÁMÍTÁSA
Az eredményeket az analizátor automatikusan kiszámítja a következők szerint:
A REAGENSEK ADATAI
Aktivitás U/l = faktor x dA/min
CK
Kreatin-foszfát + ADP → Kreatin + ATP
A 981828 kódszámú készlet
a következőket tartalmazza
2 darab 52 ml A reagenst tartalmazó
üvegcse
2 darab 13 ml B reagenst tartalmazó
üvegcse
A 981829 kódszámú készlet
a következőket tartalmazza
2 darab 20 ml A reagenst tartalmazó
üvegcse
2 darab 5 ml B reagenst tartalmazó
üvegcse
Koncentrációk
A reagens
Puffer (imidazol), pH 6.5
D-glukóz
N-acetil-L-cisztein (NAC)
Magnézium-acetát
EDTA-Na2
Nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát (NADP)
Hexokináz (HK)
NaN3
B reagens
Puffer (imidazol)
Adenozin-5’-difoszfát (ADP)
Adenozin-5’-monofoszfát (AMP)
Di-(adenozin-5’)-pentafoszfát
(AP5A)
Glukóz-6-foszfát dehidrogenáz (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Kreatin-foszfát
NaN3
TV x 1000
Elméleti faktor = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Teljes reagáló térfogat ml-ben
Minta térfogata ml-ben
A NADPH extinkciós együtthatója 340 nm-en
Küvetta úthossza = 1
Átváltási faktor µkat/l = (U/l)/60
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1%
eCal (981830) alkalmazásával történő kalibráláskor az eredményeket a analizátor egy kalibrációs
görbe segítségével automatikusan kiszámítja.
Kalibrációs görbe (példa)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1%
Óvintézkedések
A B reagens veszélyes.
Tekintse meg a készlet belsejében található különálló lapot a veszélyes anyagokra- és
óvintézkedésekre vonatkozó mondatokért: H315, P280, P302+P352, P305+P351+P338.
A reagens tartósítószerként nátrium-azidot tartalmaz.
A kalibrációs görbe cikkszámtól függ.
Tartsa be a laboratóriumi reagensek kezelésére vonatkozó szokásos előírásokat.
A terméket mint laboratóriumi vegyszert a helyi szabályozásoknak megfelelően kell kidobni.
Elkészítés
Az A és B reagens használatra kész.
Megjegyzés: Ellenőrizze, hogy a reagensfiolák vagy -edények analizátorba helyezésénél nincs-e
buborék az üveg nyakánál vagy a reagens felszínén.
Tárolás és stabilitás
A felbontatlan üvegcsében tárolt reagensek 2...8 °C között a címkén feltüntetett lejárati időpontig
stabilak.
A reagensek elemzőkészüléken belüli stabilitásához olvassa el az analizátorhoz tartozó
Alkalmazási tudnivalókat.
Amennyiben a reagens zavaros, ne használja.
MINTAVÉTEL
Megjegyzés: A minták mintavételi csövekben történő feldolgozásakor kövesse pontosan
a kémcső gyártójának utasításait a hibás eredmények elkerülése érdekében. Szenteljen külön
figyelmet az elemzés előtti változóknak, mint amilyen a keverés, a centrifugálás előtti állási idő,
valamint a centrifugabeállítások.
A minta típusa
Használjon hemolizálatlan szérumot vagy heparinos plazmát.
Megjegyzés: A hemolízis hibás eredményekhez vezethet. Tartsa távol a mintákat erős fénytől.
Óvintézkedések
Az emberi mintákat úgy kell kezelni és kidobni, mintha fertőzőek lennének.
AZ ELJÁRÁS KORLÁTAI
A diagnózisalkotáskor az eredményeket mindig a beteg kórelőzményével, az klinikai
vizsgálatokkal és a többi lelettel együtt kell értelmezni.
Interferencia
Vizsgálatot végeztek a CLSI EP7-A2 dokumentumának előírásai alapján.
Feltétel: Az eltérés a kezdeti értékek ± 10%-án belül van.
Konelab
Interferáló anyag
Konjugált bilirubin
Nem konjugált bilirubin
Hemoglobin a
hemolizátumban
Lipémia: Intralipid
(a Fresenius Kabi AB
védjegye)
Interferáló anyag
koncentrációja
Cél CK
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Eltérés a
célértéktől
(%)
-5.3
-5.8
-1.7
-2.9
+8.5
+4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+2.8
+7.1
981828
981829
Tárolás (4)
A minta az alább látható ideig tárolható.
Indiko
Interferáló anyag
Konjugált bilirubin
Nem konjugált bilirubin
Hemoglobin a
hemolizátumban
(a Fresenius Kabi AB
védjegye)
Interferáló anyag
koncentrációja
Cél CK
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Eltérés a
célértéktől
(%)
-0.8
-2.4
+0.2
-0.1
+8.6
+3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+1.0
-0.8
Kerülje hemolizált minták használatát.
Gyenge összefüggés van a zavarosság és trigliceridkoncentráció között.
Igen ritka esetekben a gammopátiák, különösen az IgM típusúak (Waldenström
macroglobulinemia), megbízhatatlan eredményekhez vezethetnek (6). Nem történt vizsgálat
a Thermo Fisher Scientific Oy vállalatnál.
Egyéb interferenciát okozó anyagok tekintetében lásd az (5) referenciát.
BIBLIOGRÁFIA
1)
2)
Thomas, L. Thomas, L. (ed.), Clinical Laboratory Diagnostics; Use and Assessment of
Clinical Laboratory Results, 1st edition, TH-Books Verlagsgesellschaft mbH,
Frankfurt/Main, Germany, 1998, p. 73. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
VÁRHATÓ ÉRTÉKEK (3)
Férfi < 171 U/l (< 2.85 µkat/l) 37 °C hőmérsékleten
Nő < 145 U/l (< 2.41 µkat/l) 37 °C hőmérsékleten
A feltüntetett értékek kizárólag tájékoztató jellegűek. Minden laboratórium esetében ajánlott
a normál tartomány megerősítése, illetve a kiszolgált populációra jellemző referenciaintervallum
kialakítása.
GYÁRTÓ
Tel. +358 10 329 200
Átváltási tényező
µkat/l = (U/l)/60
Ellenőrzés időpontja (éééé-hh-nn)
2015-05-08
MÉRÉSI TARTOMÁNY
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Másodlagos hígítás utáni kiterjesztett mérési tartomány: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
Változtatások az előző változathoz képest
A szöveg melletti vonal a változásokat jelöli.
TELJESÍTMÉNYJELLEMZŐK
Az egyes laboratóriumokban nyert értékek különbözhetnek a megadott teljesítményadatoktól.
Detektálási határ
Vizsgálatot végeztek az EP17-A dokumentum előírásai alapján.
A vak határérték (Limit of Blank, LoB) azt a legnagyobb mérési eredményt képviseli, melynek
mérése a legvalószínűbb egy analitmentes mintában (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
A detektálási határérték (Limit of Detection, LoD) azt a mintában lévő legkisebb analitmennyiséget
jelenti, amely még detektálható (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
A kvantálási határérték (Limit Of Quantitation, LoQ) azt a legalacsonyabb aktuális
mintakoncentrációt jelenti, amely kvantitatívan meghatározható (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
A vak határérték (Limit of Blank, LoB) azt a legnagyobb mérési eredményt képviseli, melynek
mérése a legvalószínűbb egy analitmentes mintában (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
A detektálási határérték (Limit of Detection, LoD) azt a mintában lévő legkisebb analitmennyiséget
jelenti, amely még detektálható (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
A kvantálási határérték (Limit Of Quantitation, LoQ) azt a legalacsonyabb aktuális
mintakoncentrációt jelenti, amely kvantitatívan meghatározható (n = 42).
Pontatlanság
A CK assay pontatlansága ≤ 5.0% teljes CV.
Konelab
CK
Ismételhetőség
(Futtatás alatt)
Eszközön belül
(összes)
Középérték
92 U/l
SD
CV%
1.7
1.8
Középérték
226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Középérték
616 U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
A pontosságot a CLSI EP5-A2 dokumentumának előírásai alapján vizsgáltuk 21 napon keresztül egy
helyszínen három Konelab 60 analizátorral, egy kezelővel, két reagenstétellel, egy kalibrátortétellel és
hat kalibrálással, n = 84-es mérésszámmal. Az egyes analizátorokból származó eredményeket
egyesítettük.
Indiko
CK
Ismételhetőség
(Futtatás alatt)
Eszközön belül
(összes)
Középérték
95 U/l
SD
CV%
1.2
1.2
Középérték
226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Középérték
637 U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
A CLSI EP5-A2 dokumentumának előírásai alapján pontossági mérést végeztek 21 napon keresztül
egy helyszínen három Indiko analizátorral, egy felhasználóval, 2 reagenstétellel, egy kalibrátortétellel
és 7 kalibrációval, n = 84-es mérésszámmal. Az egyes analizátorokból származó eredményeket
egyesítettük.
Módszer-összehasonlítás
Konelab
A CLSI EP9-A2 dokumentumának figyelembe vételével összehasonlító vizsgálat készült Konelab
Prime 60 analizátoron, a korábbi 981372 CK-MB módszer (x) referenciaként való
felhasználásával.
Lineáris regresszió (Deming) (eredmény U/l egységben):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
A mintakoncentrációk 17 és 2253 U/l között voltak.
Indiko
1) Összehasonlító vizsgálat készült Indiko analizátoron a CLSI EP9-A2 dokumentumának
figyelembe vételével és a korábbi, Konelab Prime 60 (x) analizátoron végzett 981372 CK(IFCC)
módszer referenciaként való felhasználásával.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Összehasonlító vizsgálat készült Indiko analizátoron a CLSI EP9-A2 dokumentumának
figyelembe vételével és ugyanannak a Konelab Prime 60 (x) analizátoron végzett CK(IFCC)
módszernek a referenciaként való felhasználásával.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
Page 16
Page 17
ID
CK (IFCC)
Penyimpanan (4)
Sampel bisa disimpan seperti ditunjukkan di bawah ini.
Sampel
4 hari pada suhu 20…25 °C
1 bulan pada suhu 4…8 °C atau
1 bulan pada suhu -20 °C; terlindung dari cahaya.
CK-BB tidak stabil.
SISIPAN PAKET INI DIIZINKAN UNTUK DIGUNAKAN
DI LUAR AMERIKA SERIKAT.
TUJUAN PENGGUNAAN
Untuk penggunaan diagnostik in vitro dalam penetapan kuantitatif kreatin kinase (ATP: Aktivitas
Kreatin N-Fosfotransferase (CK), EC 2.7.3.2) dalam serum atau plasma manusia pada
penganalisis Konelab dan Indiko.
Semua acuan ke sistem Konelab juga mengacu ke Seri T.
RINGKASAN (1,2)
Aktivitas kreatin kinase paling besar di dalam otot lurik, otak, dan jaringan jantung. Jaringan
lainnya, seperti ginjal, diafragma, dan prostat, memiliki aktivitas yang jauh lebih sedikit.
Aktivitas CK meningkat dalam banyak penyakit, termasuk penyakit yang menyangkut otot rangka,
jantung, sistem saraf pusat, dan tiroid. Setelah penyakit otot akut, total aktivitas CK dalam darah
mulai naik, mencapai level patologis setelah rata-rata durasi 4 - 5 jam pada 50% pasien. Nilainya
meningkat secara teratur mulai jam ke-8 - ke-24 setelah mulainya infark dan kembali ke kisaran
referensi dengan fluktuasi yang besar antar-individu.
PRINSIP PROSEDUR
Asai CK merupakan asai cairan dua-bagian yang memanfaatkan tiga enzim untuk menentukan
aktivitas CK.
Kreatin kinase mengkatalisis reaksi antara kreatin fosfat dan ADP (adenosin-5'-difosfat) dengan
pembentukan kreatin dan ATP (adenosin-5'-trifosfat). Senyawa yang belakangan ini
memfosforilasi glukosa menjadi G-6-P (glukosa-6-fosfat) dengan adanya HK (heksokinase). G-6P dioksidasi menjadi 6-PG (glukonat-6-fosfat) dan secara bersamaan sejumlah ekuimolar NADP
(nikotinamida adenin dinukleotida fosfat) direduksi menjadi NADPH dalam reaksi yang dikatalisis
oleh G-6P-DH (glukosa-6-fosfat dehidrogenase). Kenaikan absorbansi pada 340 nm, akibat
pembentukan NADPH, adalah proporsional dengan aktivitas kreatin kinase dalam sampel (3).
CK
Kreatin fosfat + ADP → Kreatin + ATP
HK
ATP + Glukosa → ADP + G-6-P
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
INFORMASI REAGEN
Kode kit 981828 mengandung
2 vial yang masing-masing berisi 52
ml Reagen A
ml Reagen B
Kode kit 981829 mengandung
ml Reagen A
ml Reagen B
Konsentrasi
Reagen A
Buffer (Imidazole), pH 6,5
D-glukosa
N-asetil-L-sistein (NAC)
Magnesium asetat
EDTA-Na2
Nikotinamida adenin dinukleotida fosfat (NADP)
Heksokinase (HK)
NaN3
Reagen B
Buffer (Imidazole)
Adenosin-5’-difosfat (ADP)
Adenosin-5’-monofosfat (AMP)
Di(adenosin-5’)penta-fosfat (AP5A)
Glukosa-6-fosfat dehidrogenase (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Kreatin fosfat
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2,7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1 %
PROSEDUR PENGUJIAN
Lihat Catatan Aplikasi untuk mengetahui prosedur otomatis pada penganalisis Anda.
Pengaplikasian yang belum divalidasi Thermo Fisher Scientific Oy tidak menjamin kinerjanya dan
harus dievaluasi oleh pengguna.
Pengaturan instrumen Indiko
Masukkan parameter pengaplikasian via barcode yang terdapat pada lembar aplikasi Indiko atau
melalui file elektronik yang sesuai.
Bahan yang disediakan
Reagen seperti dipaparkan di atas.
Bahan yang diperlukan tetapi tidak disediakan
Kalibrator dan kontrol seperti disebutkan di bawah.
Kalibrasi
Respons (dA/mnt) dikonversi ke satuan hasil oleh faktor penghitungan.
Atau gunakan eCal (981830) sebagai kalibrator menurut petunjuk yang tercantum pada sisipan
kemasan eCal (981830).
Kontrol Kualitas
Gunakan sampel kontrol kualitas (QC) setidaknya sehari sekali dan setelah setiap kalibrasi serta
setiap kali botol reagen baru digunakan. Sebaiknya gunakan setidaknya dua level kontrol (rendah
dan tinggi) atau pool sampel. Selalu patuhi peraturan lokal, provinsi, dan pemerintah pusat dalam
melakukan QC.
Kontrol yang tersedia:
Kontrol CK-MB, kode 981908
Kontrol Tinggi CK-MB, kode 981255
Nortrol, kode 981043
Abtrol, kode 981044
Interval dan batas kontrol (QC) harus disesuaikan dengan persyaratan masing-masing
laboratorium. Hasil sampel kendali mutu harus masuk dalam batas yang telah ditetapkan oleh
laboratorium.
PENGHITUNGAN HASIL
Hasilnya dihitung secara otomatis oleh penganalisis sebagai berikut:
Aktivitas dalam U/l = Faktor x dA/mnt
TV x 1000
Faktor teoretis = 
6,22 x SV x P
TV
SV
6,22
P
Volume reaksi total dalam ml
Volume sampel dalam ml
Koefisien ekstingsi NADPH pada 340 nm
Panjang lintas cahaya dalam kuvet = 1
Faktor konversi µkat/l = (U/l)/60
Jika eCal (981830) digunakan sebagai kalibrator, hasilnya dihitung secara otomatis oleh
penganalisis menggunakan kurva kalibrasi.
Kurva Kalibrasi (contoh)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Tindakan Pencegahan
Reagen B berbahaya.
Lihat lembar terpisah di dalam kit untuk penjelasan tentang Berbahaya dan Pencegahan: H315,
P280, P302+P352, P305+P351+P338.
Reagen ini mengandung natrium azida sebagai pengawet.
Lakukan tindakan pencegahan normal yang diperlukan untuk menangani semua reagen
laboratorium.
Produk harus dibuang sebagai bahan kimia laboratorium sesuai dengan peraturan setempat.
Persiapan
Reagen A dan B siap untuk digunakan.
Catatan: Pastikan tidak ada gelembung di leher botol atau pada permukaan reagen saat Anda
memasukkan vial atau bejana reagen di penganalisis.
Penyimpanan dan Stabilitas
Reagen dalam ampul yang tidak terbuka stabil pada suhu 2…8 °C sampai tanggal kedaluwarsa
yang tercetak pada label.
Lihat Catatan Aplikasi penganalisis Anda untuk mengetahui stabilitas reagen dalam kondisi baik.
Jika reagen menunjukkan turbiditas (kekeruhan), jangan gunakan.
PENGUMPULAN SPESIMEN
Catatan: Saat memproses sampel di tabung pengumpulan sampel, patuhi petunjuk produsen
tabung secara cermat untuk menghindari hasil yang keliru. Berikan perhatian khusus terhadap
variabel praanalisis seperti waktu pencampuran dan pendiaman sebelum pengaturan sentrifugasi
dan sentrifus.
Jenis Sampel
Serum tidak dihemolisis atau plasma heparin bisa digunakan.
Catatan: Hemolisis dapat menyebabkan hasil yang menyimpang. Hindari keterpaparan sampel
terhadap cahaya kuat.
Kurva kalibrasi bergantung pada lot.
BATASAN PROSEDUR
Untuk keperluan diagnostik, hasilnya harus selalu dinilai beserta riwayat medis pasien,
pemeriksaan klinis, dan temuan lain.
Interferensi
Penelitian dilakukan menggunakan dokumen CLSI EP7-A2 sebagai panduan.
Kriteria: Perbedaan dalam ± 10% nilai awal.
Konelab
Zat Pengganggu
Bilirubin terkonjugasi
Bilirubin tak terkonjugasi
Hemoglobin dalam
hemolisat
Lipemia: Intralipid (merek
dagang dari Fresenius
Kabi AB)
Konsentrasi Gangguan
592 µmol/l (34,6 mg/dl)
601 µmol/l (35,2 mg/dl)
621 µmol/l (36,3 mg/dl)
677 µmol/l (39,6 mg/dl)
2,1 g/l
2,4 g/l
Target CK
(U/l)
188
498
180
495
184
505
Selisih dari
Target (%)
- 5,3
- 5,8
- 1,7
- 2,9
+ 8,5
+ 4,6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2,8
+ 7,1
981828
981829
Tindakan Pencegahan
Sampel manusia harus ditangani dan dibuang seakan-akan berpotensi menular.
Indiko
Zat Pengganggu
Konsentrasi Gangguan
Bilirubin terkonjugasi
Bilirubin tak terkonjugasi
Hemoglobin dalam
hemolisat
Lipemia: Intralipid (merek
dagang dari Fresenius
Kabi AB)
592 µmol/l (34,6 mg/dl)
601 µmol/l (35,2 mg/dl)
621 µmol/l (36,3 mg/dl)
676 µmol/l (39,5 mg/dl)
2,5 g/l
2,4 g/l
Target CK
(U/l)
179
477
175
469
187
502
Selisih dari
Target (%)
- 0,8
- 2,4
+0,2
- 0,1
+ 8,6
+ 3,4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1,0
- 0,8
Hindari menggunakan spesimen terhemolisis.
Korelasi antara turbiditas dan konsentrasi trigliserida buruk.
Dalam kasus gamopati yang sangat jarang, terutama jenis IgM (makroglobulinemia
Waldenström) tertentu, bisa menyebabkan hasil yang tidak andal (6). Tidak diuji pada Thermo
Fisher Scientific Oy.
Untuk zat penginterferensi lainnya, harap baca referensi (5).
PERKIRAAN NILAI (3)
Laki-laki
< 171 U/l (< 2,85 µkat/l) pada suhu 37 °C
Perempuan
< 145 U/l (< 2,41 µkat/l) pada suhu 37 °C
Nilai yang dikutip harus difungsikan sebagai panduan saja. Masing-masing laboratorium
sebaiknya memverifikasi kisaran ini atau memperoleh interval referensi untuk populasi yang
dilayani.
Faktor konversi
µkat/l = (U/l)/60
KISARAN PENGUKURAN
10 – 1000 U/l (0,17 – 17 µkat/l).
Kisaran pengukuran yang diperpanjang setelah pengenceran sekunder: 10 – 9000 U/l (0,17 –
150 µkat/l).
KARAKTERISTIK KINERJA
Hasil yang diperoleh dari masing-masing laboratorium mungkin berbeda dengan data kinerja
yang diberikan.
Batas Deteksi
Penelitian dilakukan menggunakan dokumen EP17-A sebagai panduan.
Konelab LoB: 0,6 U/l (0,01 µkat/l)
Limit of Blank (LoB) merupakan hasil pengukuran paling tinggi yang mungkin teramati untuk
sampel bebas-analit (n = 60).
LoD: 1,5 U/l (0,03 µkat/l)
Limit of Detection (LoD) merupakan jumlah analit paling rendah dalam sampel yang dapat
dideteksi (n = 60).
LoQ: 3,2 U/l (0,05 µkat/l)
Limit of Quantitation (LoQ) merupakan konsentrasi aktual paling rendah di sampel yang dapat
ditentukan secara kuantitatif (n = 41).
Indiko
LoB: 0,2 U/l (0,003 µkat/l)
Limit of Blank (LoB) merupakan hasil pengukuran paling tinggi yang mungkin teramati untuk
sampel bebas-analit (n = 60).
LoD: 2,2 U/l (0,04 µkat/l)
Limit of Detection (LoD) merupakan jumlah analit paling rendah dalam sampel yang dapat
dideteksi (n = 60).
LoQ: 3,8 U/l (0,06 µkat/l)
Limit of Quantitation (LoQ) merupakan konsentrasi aktual paling rendah di sampel yang dapat
ditentukan secara kuantitatif (n = 42).
Impresisi
Ketidaktepatan pemeriksaan kadar CK adalah ≤ 5,0% Total CV.
Konelab
CK
Keterulangan
(Dalam siklus)
Dalam perangkat
(Total)
Rata-rata 92 U/l
SD
CV%
1,7
1,8
Rata-rata 226 U/l
SD
CV%
2,0
0,9
Rata-rata 616 U/l
SD
CV%
7,1
1,2
2,5
3,1
22,3
2,8
1,4
3,6
Penelitian presisi dilakukan menggunakan Dokumen CLSI EP5-A2 sebagai panduan di satu
lokasi dengan tiga penganalisis Konelab 60, satu operator, 2 lot reagen, satu lot kalibrator, dan 6
kalibrasi selama 21 hari, dengan jumlah pengukuran n = 84. Hasil dari masing-masing
penganalisis digabungkan.
Indiko
CK
Keterulangan
(Dalam siklus)
Dalam perangkat
(Total)
Rata-rata 95 U/l
SD
CV%
1,2
1,2
Rata-rata 226 U/l
SD
CV%
2,0
0,9
Rata-rata 637 U/l
SD
CV%
4,1
0,6
1,7
2,8
11,7
1,7
1,2
1,8
Penelitian presisi dilakukan menggunakan Dokumen CLSI EP5-A2 sebagai panduan di satu
lokasi dengan tiga penganalisis Indiko, satu operator, 2 lot reagen, satu lot kalibrator, dan 7
kalibrasi selama 21 hari, dengan jumlah pengukuran n = 84. Hasil dari masing-masing
penganalisis digabungkan.
Perbandingan Metode
Konelab
Penelitian perbandingan dilakukan atas Konelab Prime 60 menggunakan Dokumen CLSI EP9A2 sebagai panduan dan metode 981372 CK(IFCC) sebelumnya (x) sebagai referensi.
Regresi linear (Deming) (satuan hasil U/I):
y = 1,07 x + 6,3
r = 0,999
n = 95
Konsentrasi sampelnya antara 17 dan 2253 U/l.
Indiko
1.) Penelitian perbandingan dilakukan atas Indiko menggunakan Dokumen CLSI EP9-A2 sebagai
panduan dan metode 981372 CK(IFCC) atas Konelab Prime 60 (x) sebagai referensi.
y = 1,10 x + 4,7
r = 0,999
n = 95
2.) Penelitian perbandingan dilakukan atas Indiko menggunakan Dokumen CLSI EP9-A2 sebagai
panduan dan metode CK(IFCC) yang sama atas Konelab Prime 60 (x) sebagai referensi.
y = 1,03 x + 1,4
r = 1,00
n = 98
BIBLIOGRAFI
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
PRODUSEN
Telp. +358 10 329 200
Tanggal revisi (yyyy-mm-dd)
2015-05-08
Perubahan dari versi sebelumnya
Garis di sebelah teks menunjukkan perubahan.
Page 18
Page 19
IT
CK (IFCC)
Conservazione (4)
I campioni possono essere conservati come specificato di seguito.
Campione
IL PRESENTE FOGLIETTO ILLUSTRATIVO È
APPLICABILE AL DI FUORI DEGLI STATI UNITI.
USO PREVISTO
Per uso diagnostico in vitro nella determinazione quantitativa della creatinchinasi (ATP: creatina
N-fosfotransferasi (CK), EC 2.7.3.2) nel siero o nel plasma umano su analizzatori Konelab
e Indiko.
Eventuali riferimenti ai sistemi Konelab fanno riferimento anche alla serie T.
SOMMARIO (1,2)
L'attività della creatinchinasi è più elevata nella muscolatura striata, in quella cardiaca e nel
cervello. In altri tessuti come i reni, il diaframma e la prostata, l'attività di questa sostanza
è significativamente inferiore.
Livelli elevati di CK si riscontrano in caso di patologie dei muscoli scheletrici, del cuore, del
sistema nervoso centrale e della tiroide. Conseguentemente a danno muscolare acuto, l'attività
della CK totale nel sangue inizia a salire, fino a raggiungere livelli patologici in media dopo 4-5 ore,
nel 50% dei pazienti. I livelli si innalzano regolarmente entro 8-24 ore dall'insorgenza dell'infarto
miocardio e ritornano all'intervallo di riferimento con elevate fluttuazioni interindividuali.
PRINCIPIO DELLA PROCEDURA
Per la CK si effettua un dosaggio liquido in due parti che utilizza tre enzimi per determinarne l'attività.
La creatinchinasi catalizza la reazione tra creatinfosfato e ADP (adenosin-5'-difosfato) con
formazione di creatina e ATP (adenosin-5'-trifosfato). In presenza di esochinasi (HK), il glucosio
viene fosforilato dall'ATP prodotto nella reazione primaria formando G-6-P (glucosio-6-fosfato).
Il G-6-P viene infine ossidato in 6-PG (gluconato-6-fosfato) e contemporaneamente una quantità
equimolare di NADP (nicotinamide adenin dinucleotide fosfato) viene ridotta a NADPH in una
reazione catalizzata da G-6P-DH (glucosio-6-fosfato deidrogenasi). L'aumento dell'assorbanza
a 340 nm, dovuta alla formazione di NADPH, è proporzionale all'attività della creatinchinasi nel
campione esaminato (3).
CK
Creatinfosfato + ADP → Creatina + ATP
HK
ATP + Glucosio → ADP + G-6-P
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
INFORMAZIONI SUI REAGENTI
Il kit con codice 981828 contiene
2 fiale da 52 ml di Reagente A
2 fiale da 13 ml di Reagente B
Il kit con codice 981829 contiene
2 fiale da 20 ml di Reagente A
2 fiale da 5 ml di Reagente B
Concentrazioni
Reagente A
Tampone (imidazolo), pH 6.5
D-glucosio
N-acetil-L-cisteina (NAC)
Magnesio acetato
EDTA-Na2
Nicotinamide adenin dinucleotide fosfato (NADP)
Esochinasi (HK)
NaN3
Reagente B
Tampone (imidazolo)
Di(adenosin-5')penta-fosfato
(AP5A)
Glucosio-6-fosfato deidrogenasi (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Creatinfosfato
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
<0.1%
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
<0.1%
4 ore a 20…25°C,
1 mese a 4…8°C o
1 mese a -20°C al riparo dalla luce
CK-BB non stabile
PROCEDURA ANALITICA
Per le procedure automatiche sull'analizzatore in uso, consultare le note applicative. Tutte le
applicazioni non esplicitamente approvate da Thermo Fisher Scientific Oy non possono essere
garantite in termini di prestazioni e dovranno pertanto essere valutate dall'utente.
Impostazioni dello strumento Indiko
Inserire i parametri dell'applicazione utilizzando il codice a barre presente nella scheda
dell'applicazione Indiko o tramite il file elettronico, in base alle esigenze.
Materiali inclusi nel kit
I reagenti descritti in precedenza.
Materiali necessari ma non inclusi nel kit
Calibratore e controlli indicati di seguito.
Calibrazione
La risposta (dA/min) è convertita nelle unità di misura del risultato per mezzo di un fattore di
calcolo.
In alternativa utilizzare eCal (981830) come calibratore in base alle istruzioni riportate nel foglietto
illustrativo accluso alla confezione di eCal (981830).
Controllo qualità
Utilizzare campioni di controllo qualità (CQ) almeno una volta al giorno, dopo ogni calibrazione
e ogni volta che si utilizza un nuovo flacone di reagente. È consigliabile utilizzare almeno due
livelli (basso e alto) di controlli o pool di campioni. Osservare sempre le normative locali, nazionali
e federali applicabili quando si esegue il controllo qualità (CQ).
Controlli disponibili:
CK-MB Control, codice 981908
CK-MB Control High, codice 981255
Nortrol, codice 981043
Abtrol, codice 981044
Gli intervalli e i limiti del controllo (QC) devono essere adattati ai requisiti dei singoli laboratori.
I risultati dei campioni di controllo qualità devono rientrare nei limiti di variabilità stabiliti dal
laboratorio.
CALCOLO DEI RISULTATI
I risultati vengono calcolati automaticamente dall'analizzatore come segue:
Attività in U/l = Fattore x dA/min
TV x 1000
Fattore teorico = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Volume di reazione totale in ml
Volume del campione in ml
Coefficiente di estinzione del NADPH a 340 nm
Tracciato della cuvetta = 1
Fattore di conversione µkat/l = (U/l)/60
Se come calibratore viene utilizzato eCal (981830), i risultati vengono calcolati automaticamente
dall'analizzatore in base a una curva di calibrazione.
Curva di calibrazione (esempio)
Precauzioni
Il reagente B è pericoloso.
Vedere il foglio separato fornito nel kit per le frasi H (indicazioni di pericolo) e le frasi P (precauzioni):
H315, P280, P302+P352, P305+P351+P338.
I reagenti contengono azoturo di sodio come conservante.
Rispettare le normali precauzioni previste per l'utilizzo di tutti i reagenti di laboratorio.
Il prodotto deve essere smaltito come sostanza chimica da laboratorio conformemente alle
disposizioni locali.
Preparazione
I reagenti A e B sono pronti all'uso.
Nota: verificare che non siano presenti bolle nel collo del flacone o sulla superficie del reagente
quando si inseriscono fiale o recipienti di reagente nell'analizzatore.
Conservazione e stabilità
I reagenti in fiale intatte sono stabili fino alla data di scadenza indicata sull'etichetta, se conservati
a una temperatura di 2…8°C.
Per la stabilità dei reagenti nello strumento, fare riferimento alle Note applicative dell'analizzatore
in uso.
Se i reagenti presentano torbidità non utilizzarli.
La curva di calibrazione dipende dal lotto.
LIMITI DELLA PROCEDURA
Per scopi diagnostici, i risultati devono sempre essere valutati congiuntamente a un'anamnesi
medica del paziente, agli esami clinici e ad altri reperti.
Interferenze
È stato eseguito uno studio utilizzando il documento EP7-A2 del CLSI come linea guida.
Criterio: differenza entro ± 10% dei valori iniziali.
Konelab
Sostanza interferente
RACCOLTA DEL CAMPIONE
Nota: per l'analisi dei campioni in provette, seguire attentamente le istruzioni fornite dal produttore
delle provette al fine di evitare risultati errati. Prestare particolare attenzione alle variabili
preanalitiche quali la miscelazione, il tempo di attesa prima della centrifugazione e le impostazioni
di centrifugazione.
Bilirubina coniugata
Tipo di campione
È possibile utilizzare siero non emolizzato o plasma eparinizzato.
Nota: l'emolisi può produrre risultati fuorvianti. Evitare di esporre i campioni alla luce diretta.
Emoglobina nell'emolisato
Bilirubina non coniugata
Lipemia: Intralipid (marchio
commerciale di Fresenius
Kabi AB)
Concentrazione
interferente
CK target
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Deviazione
dal valore di
riferimento
(%)
- 5.3
- 5.8
-1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
981828
981829
Precauzioni
Tutti i campioni umani devono essere maneggiati e smaltiti come campioni potenzialmente infetti.
Indiko
Sostanza interferente
Bilirubina coniugata
Bilirubina non coniugata
Emoglobina nell'emolisato
Lipemia: Intralipid (marchio
commerciale di Fresenius
Kabi AB)
Concentrazione
interferente
CK target
(U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Deviazione
dal valore di
riferimento
(%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Evitare l'uso di campioni emolizzati.
Vi è una scarsa correlazione fra torbidità e concentrazione dei trigliceridi.
In rarissimi casi la presenza di gammopatia, in particolare il tipo IgM (macroglobulinemia di
Waldenström), può determinare risultati inaffidabili (6). Non testato da Thermo Fisher
Scientific Oy.
Per le altre sostanze interferenti, vedere la bibliografia (5).
VALORI PREVISTI (3)
Maschi
< 171 U/l (< 2.85 µkat/l) a 37°C
Femmine < 145 U/l (< 2.41 µkat/l) a 37°C
I valori citati dovranno servire esclusivamente come riferimento. Si raccomanda a ogni laboratorio
di verificare l'applicabilità di questo intervallo alla propria popolazione di pazienti e, se necessario,
di determinare intervalli di riferimento propri.
INTERVALLO DI MISURAZIONE
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Intervallo di misurazione ampliato dopo la seconda diluizione: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
CARATTERISTICHE PRESTAZIONALI
I risultati ottenuti nei singoli laboratori possono differire dai dati sulle prestazioni riportati.
Limiti di rilevamento
È stato eseguito uno studio utilizzando il documento EP17-A come linea guida.
Il LoB (Limit Of Blank) rappresenta il risultato della misurazione massima che è probabile
osservare per un campione privo di analita (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Il LoD (Limit of Detection) rappresenta la concentrazione minima rilevabile di analita in un
campione (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Il LoQ (Limit of Quantitation) rappresenta la concentrazione minima effettiva in un campione che
è possibile determinare quantitativamente (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Il LoB (Limit Of Blank) rappresenta il risultato della misurazione massima che è probabile
osservare per un campione privo di analita (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Il LoD (Limit of Detection) rappresenta la concentrazione minima rilevabile di analita in un
campione (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Il LoQ (Limit of Quantitation) rappresenta la concentrazione minima effettiva in un campione che
è possibile determinare quantitativamente (n = 42).
Imprecisione
L'imprecisione del dosaggio della CK è ≤ 5.0% del CV totale.
Ripetibilità
(Entro la serie)
Entro il dispositivo
(totale)
Media 92 U/l
SD
CV%
1.7
1.8
Media 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Media 616 U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
Lo studio di precisione è stato eseguito utilizzando il documento EP5-A2 del CLSI come linea guida,
in una sede con tre analizzatori Konelab 60, un operatore e due lotti di reagente, un lotto di calibratore
e sei calibrazioni per un periodo di 21 giorni, per un numero di misurazioni pari a n = 84. I risultati dei
singoli analizzatori sono stati combinati.
Indiko
CK
Ripetibilità
(Entro la serie)
Entro il dispositivo
(totale)
PRODUTTORE
Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa, Finlandia
Tel. +358 10 329 200
Data della revisione (aaaa-mm-gg)
2015-05-08
Fattore di conversione
µkat/l = (U/l)/60
Konelab
CK
BIBLIOGRAFIA
1)
2)
Thomas, L (ed.), Clinical Laboratory Diagnostics; Use and Assessment of Clinical
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
Media 95 U/l
SD
CV%
1.2
1.2
Media 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Media 637 U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
Lo studio di precisione è stato eseguito utilizzando il documento EP5-A2 del CLSI come linea guida, in
una sede con tre analizzatori Indiko, un operatore e due lotti di reagente, un lotto di calibratore e sette
calibrazioni per un periodo di 21 giorni, per un numero di misurazioni pari a n = 84. I risultati di ciascun
analizzatore sono stati combinati.
Metodo di confronto
Konelab
È stato eseguito uno studio comparato sull'analizzatore Konelab Prime 60, utilizzando il
documento EP9-A2 come linea guida e il precedente metodo 981372 CK (IFCC) (x) come
riferimento.
Regressione lineare (di Deming) (risultato espresso in U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Le concentrazioni dei campioni erano comprese tra 17 e 2253 U/l.
Indiko
1) È stato eseguito uno studio comparato sull'analizzatore Indiko, utilizzando il documento
EP9-A2 del CLSI come linea guida e il precedente metodo 981372 CK (IFCC) sull'analizzatore
Konelab Prime 60 (x) come riferimento.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) È stato eseguito uno studio comparato sull'analizzatore Indiko, utilizzando il documento
EP9-A2 del CLSI come linea guida e lo stesso metodo CK (IFCC) sull'analizzatore Konelab
Prime 60 (x) come riferimento.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
Modifiche rispetto alla versione precedente
La linea accanto al testo indica le modifiche apportate.
Page 20
Page 21
LT
981828
981829
2 x 65 ml (Konelab™ )
ŠIS PAKUOTĖS LAPELIS SKIRTAS NAUDOTOJAMS NE
JAV TERITORIJOJE.
NUMATYTOJI PASKIRTIS
Skirtas in vitro diagnostikai, kiekybiškai nustatant kreatino kinazės (ATP: kreatino
N-fosfotransferazės (CK), EC 2.7.3.2) aktyvumą žmogaus serume arba plazmoje, naudojant
„Konelab“ ir „Indiko“ analizatorius.
Nurodant bet kokias „Konelab“ sistemas taip pat nurodomi T serijos gaminiai.
SANTRAUKA (1, 2)
Kreatino kinazės aktyvumas yra didžiausias skersaruožiuose raumenyse, smegenyse ir širdies
audinyje. Kituose audiniuose, pavyzdžiui, inkstuose, diafragmoje ir prostatoje, šis aktyvumas yra
žymiai mažesnis.
CK aktyvumas padidėja sergant daugeliu ligų, įskaitant tas, kurios susijusios su skeleto
raumenimis, širdimi, centrine nervų sistema ir skydliauke. Po stipraus raumenų pažeidimo
bendras CK aktyvumas kraujyje pradeda didėti, vidutiniškai po 4–5 valandų 50 % ligonių jis
pasiekia patologinį lygį. Vertės kyla reguliariai nuo 8–24 - os valandos po infarkto priepuolio ir
grįžta į atskaitos diapazoną su dideliais individualiais svyravimais.
PROCEDŪROS PRINCIPAS
CK tyrimas yra dviejų dalių skysčių tyrimas, per kurį CK aktyvumui nustatyti naudojami trys
fermentai.
Kreatino kinazė katalizuoja kreatino fosfato ir ADP (adenozin-5’-difosfato) reakciją, sudarydama
kreatiną ir ATP (adenozin-5’-trifosfatą). Pastarasis junginys fosforilina gliukozę į G-6-P (gliukozės-6fosfatą) esant HK (heksokinazės). G-6-P oksiduojama į 6-PG (gliukonato-6-fosfatą), ir tuo pat metu
toks pat NADP (nikotinamidadenindinukleotido fosfato) kiekis redukuojamas į NADPH reakcijoje,
kurią katalizuoja G-6P-DH (gliukozės-6-fosfato dehidrogenazė). Dėl susidariusio NADPH padidėjusi
absorbcijos geba 340 nm bangų ruože yra proporcinga kreatino kinazės aktyvumui mėginyje (3).
CK
Kreatino fosfatas + ADP → Kreatinas + ATP
HK
ATP + Gliukozė → ADP + G-6-P
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
Mėginys
Rinkinį, kurio kodas 981829, sudaro
2 buteliukai po 20 ml A reagento
2 buteliukai po 5 ml B reagento
TYRIMO PROCEDŪRA
Skaitykite analizatoriaus naudojimo nuorodas apie įrenginiu vykdomą automatinę procedūrą.
Naudojant gaminį bendrovės „Thermo Fisher Scientific Oy“ nepatvirtintai paskirčiai, nurodytų
techninių savybių užtikrinti neįmanoma ir tokį naudojimą turi įvertinti naudotojas.
„Indiko“ prietaiso parametrai
Naudojimo parametrus įveskite nuskaitydami brūkšninį kodą, esantį „Indiko“ naudojimo duomenų
lape, arba iš elektroninio failo (kaip tinkama).
Teikiamos medžiagos
Anksčiau aprašyti reagentai.
Būtinos, bet neteikiamos medžiagos
Toliau nurodytas kalibratorius ir kontrolės medžiagos.
Kalibratorius
Atsako rodiklis (dA/min) konvertuojamas į rezultato pateikimo vienetus pritaikius perskaičiavimo
koeficientą.
Arba naudokite „eCal“ (981830) kaip kalibratorių pagal „eCal“ (981830) pakuotės lapelyje
pateiktas instrukcijas.
Kokybės kontrolė
Kokybės kontrolės (angl. QC) mėginius tirkite ne mažiau nei vieną kartą per dieną ir po kiekvieno
kalibravimo, taip pat kaskart naudodami naują reagento butelį. Rekomenduojama naudoti ne
mažiau nei dviejų lygių (didelės ir mažos koncentracijos) kontrolės medžiagas arba jungtinius
mėginius. Atlikdami kokybės kontrolę, visuomet vadovaukitės vietos, valstijos ir federaliniais
reglamentais.
Kontrolės medžiagos, kurias galima įsigyti:
„CK-MB Control“, kodas 981908
„CK-MB Control High“, kodas 981255
„Nortrol“, kodas 981043
„Abtrol“, kodas 981044
Kontrolės (QC) intervalus ir apribojimus kiekviena laboratorija turi pritaikyti pagal savo
reikalavimus. Kokybės kontrolės mėginių rezultatai turi patekti į laboratorijos iš anksto nustatytų
verčių intervalą.
Aktyvumas, išreikštas U/I = koeficientas x dA/min
TV x 1000
Teorinis koeficientas = 
6.22 x SV x P
Koncentracija
A reagentas
Buferis (imidazolas), pH 6.5
D-gliukozė
N-acetil-L-cisteinas (NAC)
Magnio acetatas
EDTA-Na2
Nikotinamidadenindinukleotido fosfatas (NADP)
Heksokinazė (HK)
NaN3
Reagentas B
Buferis (imidazolas)
Adenozin-5’-difosfatas (ADP)
Adenozin-5’-monofosfatas (AMP)
Di(adenozin-5’)penta-fosfatas
(AP5A)
Gliukozės-6-fosfato dehidrogenazė (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Kreatino fosfatas
NaN3
4 valandas 20…25 °C temp.,
1 mėnesį 4…8 °C temp. arba
1 mėnesį -20 °C temp.; apsaugoti nuo šviesos.
CK-BB nėra stabilus.
REZULTATŲ SKAIČIAVIMAS
Analizatorius automatiškai apskaičiuoja rezultatus taip:
INFORMACIJA APIE REAGENTUS
Rinkinį, kurio kodas 981828, sudaro
2 buteliukai po 52 ml A reagento
2 buteliukai po 13 ml B reagento
Laikymas (4)
Mėginį galima laikyti toliau nurodytomis sąlygomis.
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1 %
TV
SV
6.22
P
Bendrasis reakcijos tūris ml
Mėginio tūris ml
NADPH ekstinkcijos koeficientas 340 nm bangų ruože
Kiuvetės trajektorijos ilgis = 1
Konversijos koeficientas µkat/l = (U/l)/60
Jeigu naudojamas kalibratorius „eCal“ (981830), analizatorius apskaičiuoja rezultatus
automatiškai pagal kalibravimo kreivę.
Kalibravimo kreivė (pavyzdys)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Atsargumo priemonės
B reagentas yra pavojingas.
Žr. atskirą lapą rinkinyje apie pavojaus ir atsargumo priemonių frazes: H315, P280, P302+P352,
P305+P351+P338.
Reagentų sudėtyje yra konservanto natrio azido.
Laikykitės standartinių atsargumo priemonių, būtinų dirbant su visais laboratorijos reagentais.
Gaminį reikia išmesti kaip laboratorinį cheminį preparatą pagal vietinius reglamentus.
Paruošimas
Reagentas A ir B jau paruošti naudojimui
Pastaba. Prieš dėdami reagentų buteliukus ar indus į analizatorių, patikrinkite, ar buteliuko
kaklelyje arba reagento paviršiuje nėra burbuliukų.
Su kiekviena partija teikiama jai tinkanti kalibravimo kreivė.
Laikymas ir stabilumas
Neatidarytuose buteliukuose 2…8 °C temperatūroje laikomi reagentai išlieka stabilūs iki
tinkamumo datos, nurodytos etiketėje.
Apie prietaise esančių reagentų stabilumą žr. analizatoriaus naudojimo nuorodose.
Jei reagentai atrodo susidrumstę, jų nenaudokite.
Neigiama sąveika
Tyrimas atliktas vadovaujantis CLSI dokumento EP7-A2 gairėmis.
Kriterijus: skirtumas nuo pradinių verčių ± 10 % diapazone.
ĖMINIO PAĖMIMAS
Pastaba. Apdorodami mėginius mėginių ėmimo mėgintuvėliuose, atidžiai vadovaukitės
mėgintuvėlio gamintojo instrukcijomis, kad išvengtumėte klaidingų rezultatų. Būkite itin dėmesingi
prieš analizę veikiantiems kintamiesiems, kaip antai maišymas, nusistovėjimo trukmė prieš
centrifugavimą ir centrifugos parametrų sąranka.
Mėginio tipas
Galima naudoti nehemolizuotą serumą arba heparino plazmą
Pastaba. Dėl hemolizės galite gauti rezultatus su dideliu nuokrypiu. Saugokite mėginius nuo
stiprios šviesos.
Atsargumo priemonės
Su žmonių mėginiais reikia dirbti ir juos šalinti taip, lyg jie būtų potencialiai užkrečiami.
PROCEDŪROS APRIBOJIMAI
Diagnostikos tikslais rezultatus visada reikia vertinti atsižvelgiant į paciento anamnezę, klinikinius
tyrimus ir kitas išvadas.
„Konelab“
Sąveikaujanti medžiaga
Konjuguotas bilirubinas
Nekonjuguotas bilirubinas
Hemoglobinas hemolizate
Lipemija: „Intralipid“
(„Fresenius Kabi AB“ prekės
ženklas)
Sąveiką sukelianti
koncentracija
Tikslinis CK
kiekis (U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Skirtumas
nuo tikslinio
kiekio (%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
CK (IFCC)
„Indiko“
Sąveikaujanti medžiaga
Konjuguotas bilirubinas
Nekonjuguotas bilirubinas
Hemoglobinas hemolizate
Lipemija: „Intralipid“
(„Fresenius Kabi AB“ prekės
ženklas)
Sąveiką sukelianti
koncentracija
Tikslinis CK
kiekis (U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Skirtumas
nuo tikslinio
kiekio (%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Nenaudokite hemolizuotų ėminių.
Drumstumo ir trigliceridų koncentracijos koreliacija labai nedidelė.
Labai retais atvejais dėl gamopatijos, ypač IgM tipo (Waldenström makroglobulinemijos), galima
gauti nepatikimus rezultatus (6). „Thermo Fisher Scientific Oy“ netirta.
Daugiau apie galinčias sąveikauti medžiagas žr. nuorodoje (5).
NUMATOMOS VERTĖS (3)
Vyrai
< 171 U/l (< 2.85 µkat/l) 37 °C temperatūroje
Moterys < 145 U/l (< 2.41 µkat/l) 37 °C temperatūroje
Nurodytos vertės gali būti traktuojamos tik kaip pavyzdys. Rekomenduojama, kad kiekviena
laboratorija patikrintų šį diapazoną arba išvestų atskaitos intervalą populiacijai, kurią ji aptarnauja.
Konvertavimo koeficientas
µkat/l = (U/l)/60
MATAVIMO DIAPAZONAS
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Išplėstinis matavimo reikšmių diapazonas po antrojo praskiedimo: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150
µkat/l).
VEIKIMO CHARAKTERISTIKOS
Atskirose laboratorijose gauti rezultatai gali skirtis nuo pateiktų veikimo duomenų.
Aptikimo riba
Tyrimas atliktas vadovaujantis CLSI dokumento EP17-A gairėmis.
„Konelab“LoB: 0.6 U/l (0.01 µkat/l)
Tuščioji riba (angl. „Limit of Blank“, LoB) reiškia didžiausią matavimo rezultatą, kurį galima
nustatyti mėginyje, kuriame nėra analitės (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Aptikimo riba (angl. „Limit of Detection“, LoD) reiškia mažiausią analitės kiekį, kurį galima aptikti
mėginyje (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Kiekio nustatymo riba (angl. „Limit of Quantitation“, LoQ) yra mažiausia faktinė medžiagos
koncentracija mėginyje, kurios kiekį galima nustatyti (n = 41).
„Indiko“ LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Tuščioji riba (angl. „Limit of Blank“, LoB) reiškia didžiausią matavimo rezultatą, kurį galima
nustatyti mėginyje, kuriame nėra analitės (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Aptikimo riba (angl. „Limit of Detection“, LoD) reiškia mažiausią analitės kiekį, kurį galima aptikti
mėginyje (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Kiekio nustatymo riba (angl. „Limit of Quantitation“, LoQ) yra mažiausia faktinė medžiagos
koncentracija mėginyje, kurios kiekį galima nustatyti (n = 42).
Netikslumas
CK tyrimo rezultatų nuokrypis yra ≤ 5.0 % bendrojo CV.
„Konelab“
CK
Pakartojamumas
(vieno ciklo metu)
Atliekant tyrimą vienu
analizatoriumi
(bendrasis)
Vidurkis – 92 U/l
SD
1.7
CV%
1.8
Vidurkis – 226
U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Vidurkis – 616
U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
2.8
3.1
22.3
1.4
3.6
Tikslumo tyrimas buvo atliktas vadovaujantis CLSI EP5-A2 dokumento gairėmis vienoje laboratorijoje
naudojant tris „Konelab 60“ analizatorius, dirbant vienam operatoriui ir naudojant 2 partijų reagentus,
vienos partijos kalibratorių bei atlikus 6 kalibravimus per 21 dieną; matavimų skaičius n = 84.
Kiekvienu analizatoriumi gauti rezultatai buvo sujungti.
„Indiko“
CK
Pakartojamumas
(vieno ciklo metu)
Atliekant tyrimą vienu
analizatoriumi
(bendrasis)
Vidurkis – 95 U/l
SD
1.2
CV%
1.2
Vidurkis – 226
U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Vidurkis – 637
U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
1.7
2.8
11.7
1.2
1.8
Tikslumo tyrimas buvo atliktas vadovaujantis CLSI EP5-A2 dokumento gairėmis vienoje laboratorijoje,
naudojant tris „Indiko“ analizatorius, dirbant vienam operatoriui ir naudojant 2 partijų reagentus, vienos
partijos kalibratorių bei atlikus 7 kalibravimus per 21 dieną; matavimų skaičius buvo n = 84. Kiekvienu
analizatoriumi gauti rezultatai buvo sujungti.
Metodų palyginimas
„Konelab“
Palyginamasis tyrimas buvo atliktas pagal CLSI EP9-A2 dokumento gaires su „Konelab Prime
60“, kaip etaloną naudojant ankstesnįjį 981372 CK (IFCC) metodą (x).
Tiesinė regresija (pagal Demingą) (rezultatų matavimo vienetas – U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Analitės koncentracija mėginiuose buvo nuo 17 iki 2253 U/l.
„Indiko“
1) Palyginamasis tyrimas buvo atliktas pagal CLSI EP9-A2 dokumento gaires su „Indiko“,
kaip etaloną naudojant ankstesnįjį 981372 CK (IFCC) metodą su „Konelab Prime 60“ (x).
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Palyginamasis tyrimas buvo atliktas pagal CLSI EP9-A2 dokumento gaires su „Indiko“,
kaip etaloną naudojant tą patį CK (IFCC) metodą su „Konelab Prime 60“ (x).
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
LITERATŪRA
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
GAMINTOJAS
Tel. +358 10 329 200
Redakcijos data (MMMM-mm-dd)
2015-05-08
Pakeitimai nuo ankstesnės versijos
Linija šalia teksto reiškia, kad tekstas pakeistas.
Page 22
Page 23
LV
981828
981829
ŠIS IEPAKOJUMA IELIKTNIS IR LIETOJAMS ĀRPUS ASV.
LIETOŠANA
In vitro kvantitatīvai kreatinīna kināzes (ATP: kreatīna N-fosfortransferāzes (CK), EC 2.7.3.2)
aktivitātes noteikšanai cilvēka serumā vai asinīs, izmantojot Konelab un Indiko analizatorus.
Jebkura atsauce uz Konelab sistēmām ir attiecināma arī uz T sēriju.
KOPSAVILKUMS (1,2)
Vislielākā kreatīna kināzes ektivitāte ir šķērssvītrotajos muskuļos, smadzenēs un sirds audos.
Citos audos, piemēram nierēs, diafragmā un prostatā, ir ievērojami mazāka aktivitāte.
CK aktivitāte ir palielināta daudzu slimību gadījumos, tostarp to, kas saistītas ar skeleta
muskuļiem, sirdi, centrālo nervu sistēmu un vairogdziedzeri. Pēc akūta muskuļu bojājuma kopējā
CK aktivitāte asinīs sāk palielināties, 50 % pacientu sasniedzot patoloģiskus līmeņus aptuveni pēc
4–5 stundām. Šīs vērtības regulāri palielinās no 8. līdz 24. stundai pēc infarkta simptomu
parādīšanās un atgriežas atsauces diapazonā, kas ievērojami atšķiras atkarībā no individuālām
svārstībām.
PROCEDŪRAS PRINCIPS
CK pārbaude ir divdaļīga šķidrā pārbaude, kas izmanto trīs enzīmus CK aktivitātes noteikšanai.
Kreatīna kināze katalizē reakciju starp kreatīna fosfātu un ADP (adenozīna-5-difosfātu), kā rezultātā
veidojas kreatīns un ATP (adenozīna-5-trifosfāts). ATP fosforilizē glikozi par G-6-P (glikozes-6fosfātu) HK (heksokināzes) klātbūtnē. G-6-P oksidējas par 6-PG (glikonāta-6-fosfātu), un tajā pašā
laikā tāds pats molu skaits NADP (nikotīnamīda adenīna dinukleotīda fosfāts) tiek reducēts par
NADPH tādā reakcijā, kuru katalizē G-6-P-DH (glikozes-6-fosfāta dehidrogenāze). Absorbcijas
palielinājums pie 340 nm, kas rodas no NADPH izveidošanās, ir proporcionāls kreatīna
fosfokināzes aktivitātei paraugā (3).
CK
Kreatīna fosfāts + ADP → Kreatīns + ATP
HK
ATP + Glikoze → ADP + G-6-P
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
Komplekta ar kodu 981829 saturs
2 pudelītes 20 ml reaģenta A
2 pudelītes 5 ml reaģenta B
Koncentrācijas
Reaģents A
Buferšķīdums (Imidazole), pH 6.5
D-glikoze
N-acetil-L-cisteīns (NAC)
Magnija acetāts
EDTA-Na2
Nikotīnamīda adenīna dinukleotīda fosfāts (NADP)
Heksokināze (HK)
NaN3
Reaģents B
Buferšķīdums (Imidazols)
Adenozīn-5’-difosfāts (ADP)
Adenozīn-5’-monofosfāts (AMP)
Di(adenozīn-5)pentafosfāts (AP5A)
Glikozes-6-fosfāta dehidrogenāze (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Kreatīna fosfāts
NaN3
4 stundas 20…25 °C temperatūrā,
1 mēnesis 4…8 °C temperatūrā vai
1 mēnesis -20 °C temperatūrā; paraugs jāuzglabā tumsā.
CK-BB nav stabils.
Paraugs
PĀRBAUDES PROCEDŪRA
Lai iegūtu informāciju par analizatora automātisko procedūru, skatiet lietošanas norādījumus.
Jebkāda veida lietošana, ko nav apstiprinājis uzņēmums “Thermo Fisher Scientific Oy”, nevar
garantēt atbilstošus rezultātus, tādēļ lietotājam ir pašam jānovērtē tādas lietošanas
nepieciešamība.
Indiko instrumentu iestatījumi
Lietošanas parametrus ievadiet, izmantojot Indiko lietošanas norādījumos pieejamo svītrkodu vai
elektronisko failu.
Piegādātie materiāli
Iepriekš aprakstītie reaģenti.
Nepieciešamie, bet nepiegādātie reaģenti
Tālāk norādītais kalibrators un kontroles.
Kalibrācija
Reakcija (dA/min.) tiek pārveidota rezultāta vienībās, izmantojot aprēķinu koeficientu.
Var arī izmantot eCal (981830) kā kalibrētāju saskaņā ar instrukcijām eCal (981830) iepakojuma
ieliktnī.
Kvalitātes kontrole
Izmantojiet kvalitātes kontroles paraugus vismaz reizi dienā, pēc katras kalibrācijas un ikreiz, kad
tiek izmantota jauna reaģenta pudelīte. Ieteicams izmantot vismaz divus kontroles vai paraugu
kopu līmeņus (zemāko un augstāko). Veicot kvalitātes kontroli, vienmēr ievērojiet vietējos, valsts
un pašvaldības noteikumus.
Pieejamās kontroles
CK-MB Control, kods 981908
CK-MB Control High, kods 981255
Nortrol, kods 981043
Abtrol, kods 981044
Kontroles intervāli un ierobežojumi ir jāpielāgo individuālajām laboratorijas prasībām. Kvalitātes
kontroles paraugu rezultātiem ir jāatbilst laboratorijas iepriekš noteiktajiem ierobežojumiem.
REZULTĀTU APRĒĶINĀŠANA
Analizators automātiski aprēķina rezultātus šādi:
INFORMĀCIJA PAR REAĢENTU
Komplekta ar kodu 981828 saturs
2 pudelītes 52 ml reaģenta A
2 pudelītes 13 ml reaģenta B
Uzglabāšana (4)
Paraugus var glabāt, kā norādīts tālāk.
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1 %
Aktivitāte U/I = faktors x dA/min
TV x 1000
Teorētiskais faktors = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Kopējais reakcijas apjoms ml
Parauga apjoms ml
NADPH zuduma koeficients pie 340 nm
Kivetes ceļa garums = 1
Konversijas koeficients µkat/l = (U/l)/60
Ja kā kalibrators tiek izmantots eCal (981830), analizators rezultātus aprēķina automātiski,
izmantojot kalibrēšanas līkni.
Kalibrēšanas līkne (piemērs)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Piesardzības pasākumi
Reaģents B ir bīstams.
Informāciju par apdraudējumiem un piesardzības pasākumiem skatiet atsevišķajā komplektā
iekļautajā ieliktnī: H315, P280, P302+P352, P305+P351+P338.
Reaģents satur nātrija azīdu kā konservantu.
Nodrošiniet parastos piesardzības pasākumus, kas jāievēro attiecībā uz rīkošanos ar visiem
laboratorijas reaģentiem.
Izstrādājums ir jāizmet kā laboratorijām paredzēta ķīmiskā viela saskaņā ar vietējiem noteikumiem.
Sagatavošana
Reaģenti A un B ir gatavi lietošanai.
Piezīme. Ievietojot reaģenta pudelītes vai traukus analizatorā, pārbaudiet, vai pudelītes kaklā un
uz reaģenta virsmas nav burbuļu.
Uzglabāšana un stabilitāte
Reaģenti neatvērtās pudelītēs ir stabili 2…8 °C temperatūrā līdz uzglabāšanas laika, kas
uzdrukāts uz etiķetes, beigām.
Ievietoto reaģentu stabilitāti skatīt analizatora lietošanas norādījumos.
Neizmantojiet, ja reaģents ir duļķains.
Kalibrēšanas līkne ir atkarīga no partijas.
PROCEDŪRAS IEROBEŽOJUMI
Diagnostiskos nolūkos rezultāti vienmēr jāizvērtē saistībā ar pacienta slimības vēsturi, klīniskajiem
izmeklējumiem un citiem iegūtajiem datiem.
Mijiedarbība
Izpēte veikta, par pamatnorādi izmantojot CLSI dokumentu EP7-A2.
Kritērijs: atšķirība ± 10 % robežās no sākotnējām vērtībām.
Konelab
Interferējošā viela
PARAUGU IEGŪŠANA
Piezīme. Apstrādājot paraugus savākšanas stobriņos, precīzi ievērojiet stobriņu ražotāja
norādījumus, lai rezultāti nebūtu kļūdaini. Pievērsiet īpašu uzmanību pirmsanalīzes vērtībām,
piemēram, sajaukšanai, noturēšanas laikam pirms centrifugēšanas un centrifugēšanas
iestatījumiem.
Saistīts bilirubīns
Paraugu veids
Var izmantot nehemolizētu serumuvai heparīna plazmu.
Piezīme. Hemolīze var sniegt kļūdainus rezultātus. Nepakļaujiet paraugus pārmērīgai gaismas
ietekmei.
Lipēmija: Intralipid
(uzņēmuma Fresenius
Kabi AB preču zīme)
Piesardzības pasākumi
Ar paraugiem, kas iegūti no cilvēkiem ir jārīkojas un tie jālikvidē tā, it kā tie būtu iespējami infekciozi.
Nesaistīts bilirubīns
Hemoglobīns hemolizātā
Interferences
koncentrācija
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
Mērķa CK
(U/l)
188
498
180
495
184
505
Atšķirība no
mērķa (%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
CK (IFCC)
Indiko
Interferējošā viela
Saistīts bilirubīns
Nesaistīts bilirubīns
Hemoglobīns hemolizātā
Lipēmija: Intralipid
(uzņēmuma Fresenius
Kabi AB preču zīme)
Interferences
koncentrācija
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
Mērķa CK
(U/l)
179
477
175
469
187
502
Atšķirība no
mērķa (%)
- 0.8
- 2.4
+ 0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Neizmantojiet hemolizētus paraugus.
Pastāv vāja korelācija starp duļķainumu un triglicerīdu koncentrāciju.
Ļoti retos gadījumos gammopātija, īpaši IgM tips (Valdenstrēma makroglobulinēmija), var sniegt
neuzticamus rezultātus (6). Nav pārbaudīts Thermo Fisher Scientific Oy.
Lai iegūtu informāciju par citām interferējošām vielām, skatiet uzziņas materiālu (5).
PAREDZAMĀS VĒRTĪBAS (3)
Vīriešiem < 171 U/l (< 2.85 µkat/l) 37 °C temperatūrā
Sievietēm < 145 U/l (< 2.41 µkat/l) 37 °C temperatūrā
Norādītās vērtības ir jāuztver tikai kā uzziņas vērtības. Ieteicams katrai laboratorijai verificēt šo
diapazonu vai izstrādāt references intervālu saviem pacientiem.
BIBLIOGRĀFIJA
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
Konversijas koeficients
µkat/l = (U/l)/60
RAŽOTĀJS
Tālr. +358 10 329 200
MĒRĪŠANAS DIAPAZONS
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Extended measuring range after secondary dilution: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
Pārskatīšanas datums (gggg-mm-dd)
2015-05-08
VEIKTSPĒJAS RAKSTUROJUMS
Rezultāti, kas iegūti atšķirīgās laboratorijās, var atšķirties no dotajiem veikuma datiem.
Izmaiņas no iepriekšējās versijas
Līnija blakus tekstam norāda uz izmaiņām.
Noteikšanas robežvērtības
Izpēte veikta, par pamatnorādi izmantojot dokumentu EP17-A.
Tukšā parauga robežvērtība (LoB) attēlo augstāko mērījumu rezultātu, ko var novērot paraugam
bez analizējamām vielām (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Atklāšanas robežvērtība (LoD) attēlo mazāko analizējamās vielas daudzumu paraugā, ko var
konstatēt (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Kvantitātes robežvērtība (LoQ) attēlo mazāko faktisko koncentrāciju paraugā, ko var noteikt
kvantitatīvi (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Tukšā parauga robežvērtība (LoB) attēlo augstāko mērījumu rezultātu, ko var novērot paraugam
bez analizējamām vielām (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Atklāšanas robežvērtība (LoD) attēlo mazāko analizējamās vielas daudzumu paraugā, ko var
konstatēt (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Kvantitātes robežvērtība (LoQ) attēlo mazāko faktisko koncentrāciju paraugā, ko var noteikt
kvantitatīvi (n = 42).
Neprecizitāte
CK pārbaudes neprecizitāte ≤ 5.0% kopējā CV.
Konelab
CK
Atkārtojamība
(darbības laikā)
Ierīcē (kopējā)
Vidēji 92 U/l
SD
CV%
1.7
1.8
Vidēji 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Vidēji 616 U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
Precizitātes izpēte tika veikta vienā izpētes veikšanas vietā 21 dienu, izmantojot trīs Konelab 60
analizatorus, vienu operatoru, divas reaģentu partijas un vienu kalibratora partiju, veicot sešas
kalibrēšanas, saskaņā ar CLSI dokumentā EP5-A2 sniegtajām vadlīnijām. Mērījumu skaits: n = 84.
Tika apvienoti rezultāti no visiem analizatoriem.
Indiko
CK
Atkārtojamība
(darbības laikā)
Ierīcē (kopējā)
Vidēji 95 U/l
SD
CV%
1.2
1.2
Vidēji 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Vidēji 637 U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
Precizitātes izpēte tika veikta vienā izpētes veikšanas vietā 21 dienu, izmantojot trīs Indiko
analizatorus, vienu operatoru, divas reaģentu partijas un vienu kalibratora partiju, veicot septiņas
kalibrēšanas, saskaņā ar CLSI dokumentā EP5-A2 sniegtajām vadlīnijām. Mērījumu skaits: n = 84.
Tika apvienoti rezultāti no visiem analizatoriem.
Metožu salīdzināšana
Konelab
Salīdzināšanas izpēte tika veikta analizatoram Konelab Prime 60, saskaņā ar CLSI dokumentā
EP9-A2 sniegtajām vadlīnijām, kā atsauci izmantojot iepriekšējo 981372 CK(IFCC) metodi (x).
Lineārā regresija (pēc Deminga) (rezultātu mērvienība U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Paraugu koncentrācija bija no 17 līdz 2253 U/l.
Indiko
1) Salīdzināšanas izpēte tika veikta analizatoram Indiko saskaņā ar CLSI dokumentā EP9-A2
sniegtajām vadlīnijām, kā atsauci izmantojot iepriekšējo analizatoram Konelab Prime 60 (x)
izmantoto 981372 CK(IFCC) metodi (x).
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Salīdzināšanas izpēte tika veikta analizatoram Indiko saskaņā ar CLSI dokumentā EP9-A2
sniegtajām vadlīnijām un kā atsauci izmantojot analizatoram Konelab Prime 60 (x) izmantoto
CK(IFCC) metodi.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
Page 24
PL
CK (IFCC)
981828
981829
NINIEJSZA ULOTKA INFORMACYJNA DOŁĄCZANA DO
OPAKOWANIA PRZEZNACZONA JEST DO STOSOWANIA
POZA GRANICAMI USA.
PRZEZNACZENIE
Do ilościowego oznaczania w diagnostyce in vitro aktywności kinazy kreatynowej
(N-fosfotransferaza ATP: kreatyna (CK), EC 2.7.3.2) w surowicy lub osoczu ludzkim
w analizatorach Konelab i Indiko.
Wszelkie odniesienia do systemów Konelab dotyczą również serii T.
PODSUMOWANIE (1,2)
Aktywność kinazy kreatynowej jest największa w mięśniach poprzecznie prążkowanych, mózgu
i sercu. W innych tkankach, takich jak nerki, przepona i prostata, aktywność kinazy kreatynowej
jest znacznie niższa.
Aktywność CK jest podwyższona w wielu stanach chorobowych, w tym w chorobach dotyczących
mięśni szkieletowych, serca, ośrodkowego układu nerwowego i tarczycy. Po wystąpieniu ostrego
uszkodzenia mięśni całkowita aktywność CK we krwi zaczyna rosnąć, osiągając nieprawidłowe
poziomy po średnio 4–5 godzinach u 50% pacjentów. Wartości rosną systematycznie od 8. do
24. godziny po zawale i powracają do zakresu wartości prawidłowych z dużą zmiennością
osobniczą.
ZASADA DZIAŁANIA TESTU
Oznaczenie CK jest dwuczęściowym testem w postaci płynnej, w którym do określenia aktywności
kinazy kreatynowej wykorzystywane są trzy enzymy.
Kinaza kreatynowa katalizuje reakcję pomiędzy fosforanem kreatyny i ADP (adenozyno-5’difosforanem), w wyniku której powstaje kreatyna i ATP (adenozyno-5’-trójfosforan). Ten ostatni
związek jest wykorzystywany podczas fosforylacji glukozy do glukozo-6-fosforanu (G-6-P)
w obecności heksokinazy (HK). G-6-P zostaje utleniony do 6-fosfoglukonianu (6-PG) i w tym
samym czasie równomolowa ilość NADP (fosforanu dinukleotydu nikotynamidoadeninowego)
zostaje redukowana do NADPH w reakcji katalizowanej przez dehydrogenazę glukozo-6fosforanową (G-6P-DH). Wzrost absorbancji przy długości fali 340 nm, wynikający z powstania
NADPH, jest proporcjonalny do aktywności kinazy kreatynowej w próbce (3).
CK
Kinaza kreatynowa + ADP → kreatyna + ATP
HK
ATP + glukoza → ADP + G-6-P
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
INFORMACJE O ODCZYNNIKACH
Zawartość zestawu nr kat. 981828
2 fiolki po 52 ml odczynnika A
2 fiolki po 13 ml odczynnika B
Zawartość zestawu nr kat. 981829
2 fiolki po 20 ml odczynnika A
2 fiolki po 5 ml odczynnika B
Stężenia
Odczynnik A
Bufor (imidazol), pH 6.5
D-glukoza
N-acetylo-L-cysteina (NAC)
Octan magnezu
EDTA-Na2
Fosforan dinukleotydu nikotynamidoadeninowego (NADP)
Heksokinaza (HK)
NaN3
Odczynnik B
Bufor (imidazol)
Adenozyno-5’-difosforan (ADP)
Adenozyno-5’-monofosforan (AMP)
Di(adenozyno-5’)pentafosforan (AP5A)
Dehydrogenaza glukozo-6-fosforanowa (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Fosforan kreatyny
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥5000 U/l
< 0.1 %
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Środki ostrożności
Odczynnik B jest niebezpieczny.
Należy zapoznać się z informacjami dotyczącymi niebezpieczeństwa i środków ostrożności
znajdującymi się w odrębnym arkuszu: H315, P280, P302+P352, P305+P351+P338.
Odczynniki zawierają środek konserwujący – azydek sodu.
POBIERANIE PRÓBEK
Uwaga: Podczas przygotowywania próbek w probówkach do pobierania próbek należy uważnie
przestrzegać instrukcji producenta probówki, aby uniknąć błędnych wyników. Szczególną uwagę
należy zwrócić na zmienne występujące przed analizą, takie jak mieszanie, czas przechowywania
przed wirowaniem oraz ustawienia wirowania.
Typ próbki
Można używać niezhemolizowanej surowicy lub osocza z heparyną.
Uwaga: Hemoliza może doprowadzić do nieprawidłowych wyników. Należy unikać ekspozycji
próbek na silne światło.
Środki ostrożności
Próbki pochodzenia ludzkiego powinny być traktowane i utylizowane jako potencjalnie zakaźne.
Przechowywanie (4)
Próbkę można przechowywać zgodnie z poniższymi instrukcjami.
Próbka
4 godziny w temperaturze 20…25 °C,
1 miesiąc w temperaturze 4…8 °C lub
1 miesiąc w temperaturze -20 °C; próbki należy
chronić przed światłem.
Izoenzym CK-BB niestabilny.
PROCEDURA ANALITYCZNA
Procedurę zautomatyzowaną w danym analizatorze przedstawiono w uwagach dotyczących
obsługi. Wszelkie zastosowania, które nie posiadają aprobaty firmy Thermo Fisher Scientific Oy,
nie są objęte gwarancją poprawności funkcjonowania.
Ustawienia przyrządu Indiko
Wprowadzić parametry aplikacyjne przy użyciu kodu kreskowego znajdującego się na arkuszu
aplikacyjnym Indiko lub za pomocą pliku elektronicznego.
Materiały dostarczone
Odczynniki zgodnie z opisem powyżej.
Materiały niezbędne, lecz niedostarczone
Kalibrator i odczynniki kontrolne podane niżej.
Kalibracja
Odpowiedź (dA/min) jest konwertowana na jednostki wynikowe przy użyciu współczynnika
przeliczeniowego.
Można również użyć preparatu eCal (981830) jako kalibratora, zgodnie z instrukcjami podanymi
na ulotce opakowania preparatu eCal (981830).
KONTROLA JAKOŚCI
Próbki kontroli jakości (QC) należy badać co najmniej raz dziennie oraz po każdej kalibracji i po
rozpoczęciu nowej butelki odczynnika. Zaleca się użycie próbek zbiorczych lub odczynników
kontrolnych o co najmniej dwóch poziomach (niskim i wysokim). Kontrolę jakości należy zawsze
wykonywać zgodnie z przepisami lokalnymi, krajowymi i federalnymi.
Dostępne preparaty kontrolne:
CK-MB Control, nr kat. 981908
CK-MB Control High, nr kat. 981255
Nortrol, nr kat. 981043
Abtrol, nr kat. 981044
Przedziały czasowe i limity kontroli jakości (QC) należy dostosować do wymogów
poszczególnych pracowni analitycznych. Wyniki próbek kontroli jakości powinny się zawierać w
granicach ustalonych w danej pracowni analitycznej.
OBLICZANIE WYNIKÓW
Wyniki są obliczane automatycznie w analizatorze przy użyciu następującej metody:
Aktywność w U/l = współczynnik x dA/min
TV x 1000
Współczynnik teoretyczny = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Całkowita objętość reagentów w ml
Objętość próbki w ml
Współczynnik ekstynkcji NADPH przy
długości fali 340 nm
Droga przez kuwetę = 1
Współczynnik przeliczeniowy µkat/l = (U/l)/60
Jeżeli jako kalibrator używany jest preparat eCal (981830), to wyniki obliczane są automatycznie
przez analizator Konelab, w oparciu o krzywą kalibracyjną.
Krzywa kalibracyjna (przykład)
Należy przestrzegać standardowych środków ostrożności obowiązujących podczas pracy ze
wszystkimi odczynnikami laboratoryjnymi.
Produkt należy traktować jako laboratoryjny odczynnik chemiczny i usuwać zgodnie z lokalnie
obowiązującymi przepisami.
CK (IFCC)
A/min.
U/l
Przygotowanie
Odczynnik A i B są gotowe do użycia.
Uwaga: Umieszczając fiolki lub naczynia z odczynnikami w analizatorze, należy upewnić się,
że w szyjce naczynia ani na powierzchni odczynnika nie ma pęcherzyków powietrza.
Przechowywanie i stabilność
Odczynniki w nieotwartych fiolkach, przechowywane w temperaturze 2…8°C zachowują
stabilność do terminu ważności wydrukowanego na etykiecie.
Dane dotyczące stabilności odczynników znajdujących się w analizatorze przedstawiono
w uwagach dotyczących obsługi analizatora.
Jeśli odczynniki są mętne, nie należy ich używać.
Przebieg krzywej kalibracyjnej zależy od partii odczynników.
OGRANICZENIA PROCEDURY
Do celów diagnostycznych wyniki należy zawsze oceniać łącznie z historią zdrowotną pacjenta,
badaniami klinicznymi i innymi wynikami.
Page 25
Zakłócenia
Przeprowadzono badanie, używając dokumentu CLSI EP7-A2 w charakterze wytycznych.
Kryterium: Różnica w zakresie ±10% wartości początkowych.
Konelab
Substancja zakłócająca
Bilirubina związana
Bilirubina niezwiązana
Hemoglobina w
hemolizacie
Lipemia: Intralipid (znak
handlowy firmy Fresenius
Kabi AB)
Indiko
Substancja zakłócająca
Bilirubina związana
Bilirubina niezwiązana
Hemoglobina w
hemolizacie
Lipemia: Intralipid (znak
handlowy firmy Fresenius
Kabi AB)
Stężenie substancji
zakłócającej
Wartość
docelowa
CK (U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Różnica
wzgl.
wartości
docelowej
(%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
Stężenie substancji
zakłócającej
Wartość
docelowa
CK (U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Różnica
wzgl.
wartości
docelowej
(%)
- 0.8
- 2.4
+ 0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Unikać używania próbek zhemolizowanych.
Istnieje słaba korelacja pomiędzy stopniem zmętnienia a stężeniem triglicerydów.
W bardzo rzadkich przypadkach gammapatii, w szczególności typu IgM, (makroglobulinemia
Waldenströma), wyniki mogą być nierzetelne (6). Nie testowano w Thermo Fisher Scientific Oy.
Informacje dotyczące innych substancji zakłócających przedstawiono w pozycji (5) piśmiennictwa.
WARTOŚCI OCZEKIWANE (3)
Mężczyźni <171 U/l (<2.85 µkat/l) przy 37 °C
Kobiety <145 U/l (<2.41 µkat/l) przy 37 °C
Podane wartości należy traktować jedynie jako orientacyjne. Zaleca się, by w każdej pracowni
analitycznej zweryfikować podane zakresy lub ustalić własny przedział referencyjny dla badanej
populacji.
Współczynnik przeliczeniowy
µkat/l = (U/l)/60
ZAKRES POMIAROWY
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Rozszerzony zakres pomiarowy po wtórnym rozcieńczeniu: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
CHARAKTERYSTYKA DZIAŁANIA
Wyniki uzyskane w poszczególnych pracowniach analitycznych mogą się różnić od podanych
parametrów wydajnościowych.
Granica wykrywalności
Przeprowadzono badanie, używając dokumentu EP17-A w charakterze wytycznych.
Limit próby pustej (LoB) oznacza najwyższy wynik pomiaru, jaki może być zmierzony dla próbki
niezawierającej analitu (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Granica wykrywalności (LoD) oznacza najniższą ilość analitu w próbce, którą można wykryć
(n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Granica oznaczalności (LoQ) to najniższe rzeczywiste stężenie w próbce, które można określić
ilościowo (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Limit próby pustej (LoB) oznacza najwyższy wynik pomiaru, jaki może być zmierzony dla próbki
niezawierającej analitu (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Granica wykrywalności (LoD) oznacza najniższą ilość analitu w próbce, którą można wykryć
(n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Granica oznaczalności (LoQ) to najniższe rzeczywiste stężenie w próbce, które można określić
ilościowo (n = 42).
Niedokładność
Niedokładność testu do oznaczania CK wynosi ≤5.0% całkowitego CV.
Konelab
CK
Powtarzalność
(W jednej serii)
W jednym
urządzeniu
(sumarycznie)
Średnia 92 U/l
SD
CV%
1.7
1.8
Średnia 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Średnia 616 U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
Badanie precyzji przeprowadzone zostało w jednej placówce przez jednego operatora, z
wykorzystaniem dokumentu CLSI EP5-A2 w charakterze wytycznych, z użyciem trzech analizatorów
Konelab 60, 2 partii odczynników, jednej partii kalibratora i 6 kalibracji, w okresie 21 dni, w ciągu
których wykonano 84 pomiary (n = 84). Wyniki z każdego analizatora zostały skompilowane.
Indiko
CK
Powtarzalność
(W jednej serii)
W jednym
urządzeniu
(sumarycznie)
Średnia 95 U/l
SD
CV%
1.2
1.2
Średnia 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Średnia 637 U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
Badanie precyzji przeprowadzone zostało w jednej placówce przez jednego operatora, z
wykorzystaniem dokumentu CLSI EP5-A2 w charakterze wytycznych, użyciem trzech analizatorów
Indiko i 2 partii odczynników, jednej partii kalibratora i 7 kalibracji, w okresie 21 dni, w ciągu których
wykonano 84 pomiary (n = 84). Wyniki z każdego analizatora zostały skompilowane.
Porównanie metod
Konelab
Przeprowadzono badanie porównawcze przy użyciu analizatora Konelab Prime 60, z
wykorzystaniem dokumentu CLSI EP9-A2 w charakterze wytycznych i poprzedniej metody
oznaczania CK 981372 (IFCC) jako odniesienia.
Regresja liniowa (Deming) (jednostka wyników: U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Wartości stężeń w próbkach wynosiły od 17 U/l do 2253 U/l.
Indiko
1) Przeprowadzono badanie porównawcze przy użyciu analizatora Indiko, z wykorzystaniem
dokumentu CLSI EP9-A2 w charakterze wytycznych i poprzedniej metody oznaczania CK
981372 (IFCC) na analizatorze Konelab Prime 60 (x) jako odniesienia.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Przeprowadzono badanie porównawcze przy użyciu analizatora Indiko, z wykorzystaniem
dokumentu CLSI EP9-A2 w charakterze wytycznych i tej samej metody oznaczania CK (IFCC)
na analizatorze Konelab Prime 60 (x) jako odniesienia.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
PIŚMIENNICTWO
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
PRODUCENT
Tel. +358 10 329 200
Data zatwierdzenia (rrrr-mm-dd)
2015-05-08
Zmiany w stosunku do poprzedniej wersji
Linia obok tekstu oznacza zmiany.
Page 26
Page 27
PT
CK (IFCC)
ESTE FOLHETO INFORMATIVO É APLICÁVEL PARA
UTILIZAÇÃO FORA DOS EUA.
USO PRETENDIDO
Para uso em diagnóstico in vitro na determinação quantitativa da atividade da creatina quinase
[ATP: Creatina N-Fosfotransferase (CK), EC 2.7.3.2] no soro ou plasma humanos em
analisadores Konelab e Indiko.
Qualquer referência aos sistemas Konelab também se refere à série T.
RESUMO (1, 2)
A atividade da creatina quinase é mais elevada nos músculos estriados, no cérebro e no tecido
cardíaco. Outros tecidos, tais como os rins, o diafragma e a próstata, contêm um nível de
atividade significativamente mais reduzido.
A atividade da CK é elevada em diversas doenças, incluindo as que envolvem o músculo
esquelético, o coração, o sistema nervoso central e a tiroide. Após a ocorrência de danos
musculares graves, a atividade total de CK no sangue começa a aumentar, alcançando níveis
patológicos após uma duração média de 4 a 5 horas em 50% dos pacientes. Os valores
aumentam regularmente entre a 8.ª e a 24.ª hora após o início do enfarte e regressam ao
intervalo de referência com grandes flutuações interindividuais.
PRINCIPIO DO PROCEDIMENTO
Este ensaio da CK é um ensaio líquido de duas partes que utiliza três enzimas para determinar
a atividade da CK.
A creatina quinase catalisa a reação entre a creatina fosfato e a ADP (adenosina-5'-difosfato) com
a formação de creatina e de ATP (adenosina-5'-trifosfato). Este último composto fosforila glucose
para G-6-P (glucose-6-fosfato) na presença da HK (hexocinase). A G-6-P é oxidada em 6-PG
(gluconato-6-fosfato) enquanto simultaneamente uma quantidade equimolar de NADP
(nicotinamida adenina dinucleotideo fosfato) é reduzida a NADPH numa reação catalisada pela
G-6P-DH (glucose-6-fosfato desidrogenase). O aumento na absorvência a 340 nm, resultante da
formação de NADPH, é proporcional à atividade da creatina quinase na amostra (3).
CK
Creatina fosfato + ADP → Creatina + ATP
HK
Amostra
4 horas a 20…25°C,
1 mês a 4…8°C ou
1 mês a -20°C; protegida da luz.
CK-BB instável.
PROCEDIMENTO DE TESTE
Consulte as Notas de aplicação para obter mais informações sobre o procedimento automático
do analisador. Qualquer aplicação não validada pela Thermo Fisher Scientific Oy não pode ter
o desempenho garantido e, por conseguinte, tem de ser avaliada pelo utilizador.
Programação do aparelho Indiko
Insira os parâmetros da aplicação através do código de barras existente na folha da aplicação do
Indiko ou através de ficheiro eletrónico, conforme apropriado.
Materiais fornecidos
Reagentes, conforme descrito acima.
MATERIAIS NECESSÁRIOS, MAS NÃO FORNECIDOS
Calibrador e controlos conforme indicado abaixo.
Calibragem
A resposta (dA/min) é convertida para unidades de resultado através de um fator de cálculo.
Ou utilize o eCal (981830) como calibrador de acordo com as instruções fornecidas no folheto
da embalagem do eCal (981830).
Controlo de qualidade
Utilize amostras de controlo de qualidade (CQ) pelo menos uma vez por dia, depois de cada
calibragem e sempre que utilizar um frasco de reagente novo. Recomenda-se a utilização de,
pelo menos, dois níveis (baixo e alto) de controlos ou aglomerados (pools) de amostras. Proceda
sempre de acordo com as normas locais, distritais e nacionais quando efetuar o controlo de
qualidade.
Controlos disponíveis:
CK-MB Control, código 981908
CK-MB Control High, código 981255
Nortrol, código 981043
Abtrol, código 981044
Os intervalos e limites do controlo (CQ) devem ser adaptados aos requisitos individuais de cada
laboratório. Os resultados da amostra de controlo de qualidade devem situar-se dentro dos
limites predefinidos pelo laboratório.
CÁLCULO DE RESULTADOS
Os resultados são automaticamente calculados pelo analisador da seguinte forma:
G-6-P-DH
G-6-P + NADP → 6-PG + NADPH + H+
+
Atividade em U/l = Fator x dA/min
INFORMAÇÃO SOBRE OS REAGENTES
O kit com o código 981828 contém
2 frascos de 52 ml de Reagente A
2 frascos de 13 ml de Reagente B
O kit com o código 981829 contém
2 frascos de 20 ml de Reagente A
2 frascos de 5 ml de Reagente B
Concentrações
Reagente A
Tampão (Imidazola), pH 6.5
D-glucose
N-acetil-L-cisteína (NAC)
Acetato de magnésio
EDTA-Na2
Nicotinamida adenina dinucleótido fosfato (NADP)
Hexocinase (HK)
NaN3
Reagente B
Tampão (Imidazola)
Di(adenosina-5')penta-fosfato (AP5A)
Glucose-6-fosfato desidrogenase (G-6-P-DH)
EDTA-Na2
Creatina fosfato
NaN3
TV x 1000
Fator teórico = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1%
Volume total da reação em ml
Volume da amostra em ml
Coeficiente de extinção do NADPH a 340
nm
Comprimento do percurso da cuvete = 1
Fator de conversão µkat/l = (U/l)/60
Se utilizar o eCal (981830) como calibrador, os resultados são calculados automaticamente pelo
analisador através de uma curva de calibragem.
Curva de calibragem (exemplo)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1%
Precauções
O reagente B é perigoso.
Consulte os avisos relacionados com o perigo e as precauções na folha fornecida em separado no
kit: H315, P280, P302+P352, P305+P351+P338.
Os reagentes contêm azida de sódio como conservante.
Adote as precauções habitualmente requeridas para o manuseamento de reagentes de laboratório.
O produto tem ser eliminado como se fosse um químico de laboratório, de acordo com as normas
locais.
A curva de calibragem depende do lote.
Preparação
Os reagentes A e B estão prontos a usar.
Nota: certifique-se de que não há nenhuma bolha no gargalo do frasco nem na superfície do
reagente quando inserir os frascos ou as ampolas do reagente no analisador.
LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO
Para fins de diagnóstico, os resultados devem ser sempre avaliados em conjunto com o historial
clínico, os exames clínicos e outros dados do paciente.
CONSERVAÇÃO E ESTABILIDADE
Os reagentes que se encontram em frascos fechados permanecem estáveis até à data indicada
no rótulo, desde que mantidos a 2...8°C.
Consulte as Notas de aplicação do analisador para obter mais informações sobre a estabilidade
dos reagentes quando inseridos no analisador.
Se os reagentes apresentam turvação, não os utilize.
Interferência
Foi realizado um estudo no qual se utilizou o documento EP7-A2 do CLSI como referência.
Critério: diferença dentro de ± 10% dos valores iniciais.
Konelab
Substância interferente
COLHEITA DA AMOSTRA
Nota: ao processar as amostras nos tubos de colheita de amostra, siga cuidadosamente as
instruções do fabricante dos tubos, de forma a evitar resultados erróneos. Preste especial
atenção às variáveis pré-analíticas, tais como a mistura, o tempo de repouso antes da
centrifugação e as velocidades de centrifugação.
Tipo de amostra
Pode utilizar soro não hemolisado ou plasma com heparina.
Nota: a hemólise pode causar resultados erróneos. Evite a exposição das amostras a luzes
intensas.
Precauções
As amostras humanas devem ser manuseadas e eliminadas como se fossem potencialmente
infecciosas.
Bilirrubina não conjugada
Hemoglobina no
hemolisado
Lipemia: Intralipid (marca
comercial da Fresenius
Kabi AB)
Concentração
interferente
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
CK alvo
(U/l)
188
498
180
495
184
505
Diferença
do alvo (%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
981828
981829
Armazenamento (4)
As amostras podem ser conservadas como indicado a seguir.
Indiko
Substância interferente
Bilirrubina não conjugada
Hemoglobina no
hemolisado
Lipemia: Intralipid (marca
comercial da Fresenius
Kabi AB)
Concentração
interferente
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
CK alvo
(U/l)
179
477
175
469
187
502
Diferença
do alvo (%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Evite a utilização de amostras hemolisadas.
Há uma correlação fraca entre a turvação e a concentração de triglicéridos.
Em casos muito raros, a gamopatia, em particular o tipo IgM (macroglobulinemia de
Waldenström), pode causar resultados inexatos (6). Não testado na Thermo Fisher Scientific Oy.
Para outras substâncias interferentes, consulte a referência (5).
VALORES ESPERADOS (3)
Homem < 171 U/l (< 2.85 µkat/l) a 37°C
Mulher
< 145 U/l (< 2.41 µkat/l) a 37°C
Os valores indicados devem servir apenas como uma referência. Recomendamos que cada
laboratório verifique este intervalo, ou obtenha um intervalo de referência para a população que
serve.
Fator de conversão
µkat/l = (U/l)/60
INTERVALO DE MEDIÇÃO
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Intervalo de medição alargado depois da diluição secundária: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO
Os resultados obtidos em laboratórios individuais podem diferir dos dados de desempenho
fornecidos.
Limite de deteção
Foi realizado um estudo de acordo com o documento EP17-A.
O Limite do Branco (LoB) representa o resultado de medição mais elevado provável de ser
observado numa amostra sem analito (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
O Limite de Deteção (LoD) representa a quantidade mais baixa de analito numa amostra que
pode ser detetada (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
O Limite de Quantificação (LoQ) representa a concentração mais baixa concreta numa amostra
que pode ser determinada quantitativamente (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
O Limite do Branco (LoB) representa o resultado de medição mais elevado provável de ser
observado numa amostra sem analito (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
O Limite de Deteção (LoD) representa a quantidade mais baixa de analito numa amostra que
pode ser detetada (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
O Limite de Quantificação (LoQ) representa a concentração mais baixa concreta numa amostra
que pode ser determinada quantitativamente (n = 42).
Imprecisão
A imprecisão do ensaio de CK é ≤ 5.0% do total do CV.
Konelab
CK
Repetibilidade
(intraensaio)
Intra-aparelho (total)
Média 92 U/l
SD
% do
CV
1.7
1.8
Média 226 U/l
SD
% do
CV
2.0
0.9
Média 616 U/l
SD
% do
CV
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
Foi realizado um estudo de precisão no qual se utilizou o documento EP5-A2 do CLSI como
referência, num local com três analisadores Konelab 60, um operador, dois lotes de reagentes, um
lote de calibrador e seis calibragens durante 21 dias, sendo o número de medições de n= 84. Foram
combinados os resultados de cada analisador.
Indiko
CK
Repetibilidade
(intraensaio)
Intra-aparelho (total)
Média 95 U/l
SD
% do
CV
1.2
1.2
Média 226 U/l
SD
% do
CV
2.0
0.9
Média 637 U/l
SD
% do
CV
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
Foi realizado um estudo de precisão no qual se utilizou o documento EP5-A2 do CLSI como
referência, num local com três analisadores Indiko, um operador, dois lotes de reagentes, um lote de
calibrador e sete calibragens, durante 21 dias, sendo o número de medições de n = 84. Foram
combinados os resultados de cada analisador.
Comparação de métodos
Konelab
Foi realizado um estudo comparativo no analisador Konelab Prime 60, tendo-se utilizado o
documento EP9-A2 do CLSI e o anterior método 981372 CK(IFCC) (x) como referências.
Regressão linear (Deming) (unidade dos resultados U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
As concentrações das amostras situam-se entre 17 e 2253 U/l.
Indiko
1) Foi realizado um estudo comparativo no analisador Indiko, tendo-se utilizado o documento
EP9-A2 do CLSI e o anterior método 981372 CK(IFCC) no analisador Konelab Prime 60 (x)
como referências.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Foi realizado um estudo comparativo no analisador Indiko, tendo-se utilizado o documento
EP9-A2 do CLSI e o mesmo método CK(IFCC) no analisador Konelab Prime 60 (x) como
referências.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
REFERÊNCIAS
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
FABRICANTE
Tel. +358 10 329 200
Data de revisão (aaaa-mm-dd)
2015-05-08
Alterações em relação à versão anterior
A linha junto ao texto indica alterações.
Page 28
Page 29
RO
981828
981829
ACEST PROSPECT ESTE APLICABIL PENTRU
FOLOSIREA ÎN AFARA S.U.A.
UTILIZAREA RECOMANDATA
Pentru diagnostic in vitro utilizată în determinarea cantitativă a activităţii creatin-kinazei (ATP:
Creatin-N-fosfotransferaza (CK), EC 2.7.3.2) în ser uman sau plasmă pe analizoarele Konelab
şi Indiko.
Orice referinţă la sistemele Konelab se referă şi la seria T.
REZUMAT (1,2)
Activitatea creatin-kinazei e mai intensă în muşchiul striat, în creier şi în ţesutul cardiac. Alte
ţesuturi, cum ar fi rinichii, diafragmul şi prostata, au o activitate mult mai scăzută.
Activitatea CK e crescută în multe boli, inclusiv cele ale muşchilor scheletici, ale inimii, ale
sistemului nervos central şi ale tiroidei. După traumatisme musculare masive, activitatea totală
a CK în sânge începe să crească, atingând niveluri patologice după o durată medie de 4-5 ore la
50% dintre pacienţi. Valorile cresc regulat după 8-24 ore de la instalarea infarctului şi revin la
valorile de referinţă în intervale care variază mult de la un individ la altul.
PRINCIPIUL ANALIZEI
Analiza CK este o analiză lichidă în două părţi care utilizează trei enzime pentru a determina
activitatea CK.
Creatin-kinaza catalizează reacţia dintre creatin-fosfat şi ADP (adenozin-5’-difosfat) cu formare de
creatină şi ATP (adenozin-5’-trifosfat). Ultimul compus fosforilează glucoza la G-6-P (glucozo-6fosfat) în prezenţa HK (hexokinazei). G-6-P este oxidat la 6-PG (gluconat-6-fosfat) şi, totodată,
o cantitate echimolară de NADP (nicotinamid-adenin-dinucleotid fosfat) e redusă la NADPH printr-o
reacţie catalizată de G-6P-DH (glucozo-6-fosfat dehidrogenază). Creşterea absorbanţei la 340 nm,
care rezultă din formarea de NADPH, este proporţională cu activitatea creatin-kinazei din probă. (3).
CK
Creatin-fosfat + ADP → Creatină + ATP
HK
ATP + Glucoză → ADP + G-6-P
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
Probă
4 ore la 20...25 °C,
1 lună la 4...8 °C, sau
1 lună la -20 °C; ferită de lumină.
CK-BB nu este stabil.
PROCEDURA DE ANALIZARE
Consultaţi Notele de Aplicare pentru procedura automată pe analizorul dv. Toate aplicaţiile care
nu au fost validate de Thermo Fisher Scientific Oy nu garantează performanţa şi, prin urmare,
trebuie evaluate de către utilizator.
Setările instrumentului pentru Indiko
Introduceţi parametrii aplicaţiei prin intermediul codului de bare care se află în fişa aplicaţiei Indiko
sau printr-un fişier electronic, conform necesităţilor.
Materiale furnizate
Reactivii mai sus-menţionaţi.
Materiale necesare, dar care nu sunt furnizate
Calibratorii şi martorii indicaţi mai jos.
Calibrarea
Răspunsul (dA/min) este convertit în unităţile rezultatului, cu ajutorul unui factor de calcul.
Sau folosiţi eCal (981830) drept calibrator, conform instrucţiunilor din prospectul pentru eCal
(981830).
Controlul calităţii
Trebuie folosite probe pentru controlul calităţii cel puţin o dată pe zi, după fiecare calibrare şi de
fiecare dată când se foloseşte un flacon nou de reactiv. Se recomandă să utilizaţi cel puţin două
niveluri (scăzut şi ridicat) de martori sau baterii de probe. Respectaţi întotdeauna reglementările
locale, regionale şi naţionale la efectuarea controlului calităţii.
Martori disponibili:
CK-MB Control, cod 981908
CK-MB Control High, cod 981255
Nortrol, cod 981043
Abtrol, cod 981044
Intervalele (QC) şi limitele martorilor trebuie adaptate la necesităţile individuale ale laboratorului.
Rezultatele probelor pentru controlul calităţii trebuie să se încadreze în limitele stabilite de
laborator.
CALCULAREA REZULTATELOR
Rezultatele sunt calculate automat de către analizor, după cum urmează:
INFORMAŢII DESPRE REACTIVI
Trusa cod 981828 conţine
2 fiole de 52 ml reactiv A
2 fiole de 13 ml reactiv B
Păstrarea (4)
Probele pot fi păstrate aşa cum se arată mai jos.
Activitatea în U/l = Factor x dA/min
Trusa cod 981829 conţine
2 fiole de 20 ml reactiv A
2 fiole de 5 ml reactiv B
Concentraţii
Reactiv A
Soluție-tampon (Imidazol), pH 6.5
D-glucoză
N-acetil-L-cisteină (NAC)
Acetat de magneziu
EDTA-Na2
Nicotinamid-adenin-dinucleotid fosfat (NADP)
Hexokinază (HK)
NaN3
Reactiv B
Soluție-tampon (Imidazol)
Adenozin-5’-difosfat (ADP)
Adenozin-5’-monofosfat (AMP)
Di(adenozin-5’)penta-fosfat (AP5A)
Glucozo-6-fosfat dehidrogenaza (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Creatin-fosfat
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1%
TV x 1000
Factor teoretic = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Volumul total de reacţie în ml
Volumul probei în ml
Coeficientul de extincţie al NADPH la 340 nm
Lungimea drumului optic al cuvei = 1
Factor de conversie µkat/l = (U/l)/60
Dacă se foloseşte eCal (981830) drept calibrator, rezultatele sunt calculate automat de către
analizor folosind o curbă de calibrare.
Curbă de calibrare (exemplu)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1%
Precauţii
Reactivul B este periculos.
Consultaţi fişa separată din interiorul kitului pentru frazele privind Pericolul şi Precauţiile: H315,
P280, P302+P352, P305+P351+P338.
Reactivii conţin azidă de sodiu drept conservant.
Adoptaţi măsurile normale de precauţie necesare pentru mânuirea tuturor reactivilor de laborator.
Produsul trebuie aruncat ca produs chimic de laborator, în conformitate cu reglementările locale.
Pregătirea
Reactivii A şi B sunt gata de folosire.
Notă: Verificaţi să nu existe bule în gâtul flaconului sau la suprafaţa reactivului când introduceţi
fiolele sau recipientele cu reactiv în dispozitivul de analiză.
Păstrarea şi stabilitatea
Reactivii din fiolele nedeschise sunt stabili la 2…8 °C până la data de expirare tipărită pe etichetă.
Consultaţi Notele de Aplicare ale analizorului dv. pentru stabilitatea reactivilor păstraţi pe
instrument.
Nu folosiţi reactivii dacă aceştia prezintă turbiditate.
RECOLTAREA PROBELOR
Notă: Când prelucraţi probele în eprubete de recoltare, urmaţi cu grijă instrucţiunile producătorului
eprubetelor, pentru a evita rezultatele eronate. Acordaţi o atenţie deosebită variabilelor
preanalitice precum omogenizarea, intervalul de repaus înainte de centrifugare şi setările
centrifugei.
Tipul de probe
Pot fi folosite ser nehemolizat sau plasmă heparinizată.
Notă: Hemoliza poate conduce la rezultate deviate. Evitaţi expunerea probelor la lumină
puternică.
Precauţii
Probele umane trebuie mânuite şi aruncate ca şi cum ar fi potenţial infecţioase.
Curba de calibrare depinde de lot.
LIMITARILE PROCEDURII
În scopul stabilirii unui diagnostic, rezultatele trebuie evaluate întotdeauna luând în considerare
istoricul medical al pacientului, examenele clinice şi alte investigaţii.
Interferenţe
S-a efectuat un studiu folosind Documentul CLSI EP7-A2 ca ghid.
Criteriu: Diferenţă în limite de ± 10% din valorile iniţiale.
Konelab
Substanţă interferentă
Bilirubină conjugată
Bilirubină neconjugată
Hemoglobină în hemolizat
Lipemie: Intralipid (marcă
înregistrată a firmei
Fresenius Kabi AB)
Concentraţie interferentă
Nivel-ţintă
CK (U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Diferenţă
faţă de
nivelul-ţintă
(%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
CK (IFCC)
Indiko
Substanţă interferentă
Bilirubină conjugată
Bilirubină neconjugată
Hemoglobină în hemolizat
Lipemie: Intralipid (marcă
înregistrată a firmei
Fresenius Kabi AB)
Concentraţie interferentă
Nivel-ţintă
CK (U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Diferenţă
faţă de
nivelul-ţintă
(%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Evitaţi folosirea probelor hemolizate.
Există o corelaţie scăzută între turbiditate şi concentraţia trigliceridelor.
În cazuri foarte rare de gamopatii, mai ales cele de tip IgM (macroglobulinemia Waldenström),
rezultatele pot fi inexacte (6). Nu a fost testat la Thermo Fisher Scientific Oy.
Pentru alte substanţe care pot interfera, vă rugăm să consultaţi referinţa (5).
VALORI ESTIMATE (3)
Bărbaţi < 171 U/l (< 2.85 µkat/l) la 37 °C
Femei
< 145 U/l (< 2.41 µkat/l) la 37 °C
Valorile menţionate au doar caracter orientativ. Se recomandă ca fiecare laborator să verifice
acest interval sau să elaboreze un interval de referinţă pentru populaţia pe care o deserveşte.
Factor de conversie
µkat/l = (U/l)/60
INTERVAL DE MASURARE
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Interval extins de măsurare după diluţia secundară: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
CARACTERISTICILE PERFORMANTEI
Rezultatele obţinute în laboratoarele individuale pot fi diferite faţă de datele indicate referitoare la
performanţă.
Limitele de detecţie
S-a efectuat un studiu folosind documentul EP17-A ca ghid.
Limita blankului (LoB) reprezintă rezultatul cel mai mare al măsurătorii care este probabil să fie
observat pentru o probă fără analit (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Limita de detecţie (LoD) reprezintă cantitatea cea mai mică de analit dintr-o probă care poate fi
detectată (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Limita de cuantificare (LoQ) reprezintă concentraţia cea mai mică existentă într-o probă care
poate fi determinată cantitativ (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Limita blankului (LoB) reprezintă rezultatul cel mai mare al măsurătorii care este probabil să fie
observat pentru o probă fără analit (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Limita de detecţie (LoD) reprezintă cantitatea cea mai mică de analit dintr-o probă care poate fi
detectată (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Limita de cuantificare (LoQ) reprezintă concentraţia cea mai mică existentă într-o probă care
poate fi determinată cantitativ (n = 42).
Imprecizie
Imprecizia analizei pentru CK este ≤ 5.0 % din CV total.
Konelab
CK
Repetabilitate
(În cadrul aceleiaşi
analize)
Pe acelaşi dispozitiv
(Total)
Medie 92 U/l
SD
CV%
1.7
1.8
Medie 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Medie 616 U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
S-a efectuat un studiu asupra preciziei folosind Documentul CLSI EP5-A2 ca ghid, la o unitate
medicală, cu trei analizoare Konelab 60, un operator, două loturi de reactivi, un lot de calibratori şi
6 calibrări, timp de 21 de zile, cu numărul măsurătorilor n = 84. Au fost combinate rezultatele de la
fiecare analizor.
Indiko
CK
Repetabilitate
(În cadrul aceleiaşi
analize)
Pe acelaşi dispozitiv
(Total)
Medie 95 U/l
SD
CV%
1.2
1.2
Medie 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Medie 637 U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
S-a efectuat un studiu asupra preciziei folosind Documentul CLSI EP5-A2 ca ghid, la o unitate
medicală, cu trei analizoare Indiko, un operator, două loturi de reactivi, un lot de calibratori şi 7 calibrări,
timp de 21 de zile, cu numărul măsurătorilor n = 84. Au fost combinate rezultatele de la fiecare
analizor.
Comparaţia metodelor
Konelab
S-a efectuat un studiu comparativ asupra Konelab Prime 60 folosind Documentul CLSI EP9-A2
ca ghid şi metoda 981372 CK(IFCC) anterioară (x) ca referinţă.
Regresia liniară (Deming) (unitatea rezultatului U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Concentraţiile probelor au fost cuprinse între 17 şi 2253 U/l.
Indiko
1) S-a efectuat un studiu comparativ asupra Indiko folosind Documentul CLSI EP9-A2 ca ghid şi
metoda 981372 CK(IFCC) anterioară asupra Konelab Prime 60 (x) ca referinţă.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) S-a efectuat un studiu comparativ asupra Indiko folosind Documentul CLSI EP9-A2 ca ghid şi
aceeaşi metodă CK(IFCC) asupra Konelab Prime 60 (x) ca referinţă.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
BIBLIOGRAFIE
1)
Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry (Principii
fundamentale ale chimiei clinice), ediţia a 5-a, W B Saunders Company, Philadelphia,
2001, pp. 357 - 358.
2)
Laboratory Results (Diagnoza în laboratoarele clinice; Utilizarea şi evaluarea rezultatelor
clinice de laborator), prima ediţie, TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main,
Germania, 1998, p. 73.
3)
Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. (Proceduri primare de referinţă pentru
măsurarea concentraţiilor activităţii catalitice a enzimelor la 37 °C). 2. Reference
Procedure for the Measurement of Catalytic Concentrations of Creatine Kinase,
Clin.Chem.Lab.Med. ((Proceduri de referinţă pentru măsurarea concentraţiilor catalitice ale
creatin-kinazei). 2002, 40(6): 635 - 642.
4)
Investigations & Stability of blood, plasma and serum samples (Utilizarea anticoagulanţilor
în investigaţiile şi stabilitatea diagnosticului de laborator al probelor de sânge, plasmă şi
ser). Geneva, 15 January 2002, p. 28.
5)
Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition (Efectele
medicamentelor asupra testelor clinice de laborator, Ediţia a cincea), AACC Press,
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
detection and prevention (Interferenţa gamopatiei în analizele chimice clinice: mecanisme,
detecţie şi prevenţie). Clin Chem Lab Med 2007; 45(9), 1240 -1243.
PRODUCĂTOR
Tel. +358 10 329 200
Data reviziei (aaaa-ll-zz)
2015-05-08
Modificări faţă de versiunea precedentă
Linia de lângă text indică modificări.
Page 30
RU
CK (IFCC)
КК (IFCC)
981828
981829
ДАННЫЙ ЛИСТОК-ВКЛАДЫШ ПРЕДНАЗНАЧЕН ДЛЯ
ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЗА ПРЕДЕЛАМИ США.
НАЗНАЧЕНИЕ
Используется в диагностике in vitro для количественного определения активности
креатинкиназы (ATP: креатин N-фосфотрансфераза (КК), EC 2.7.3.2) в человеческой
сыворотке или плазме крови с помощью анализаторов Konelab и Indiko.
Любая информация, касающаяся систем Konelab, также относится к анализаторам
серии T.
КРАТКАЯ СПРАВКА (1,2)
Наибольшую активность креатинкиназа имеет в поперечных мышцах, мозге и
сердечной ткани. Другие ткани, такие как почки, диафрагма и простата, содержат
значительно меньше креатинкиназы.
Активность КК увеличивается при многих заболеваниях, включая повреждения
скелетных мышц, сердца, центральной нервной системы и щитовидной железы.
После острого повреждения мышц общая активность КК в крови начинает
увеличиваться и достигает патологических уровней в среднем через 4–5 часов у
50 % пациентов. Активность регулярно увеличивается с 8-го по 24-й час после
начала инфаркта и возвращается в нормальный диапазон в зависимости от
индивидуальных особенностей пациента.
ПРИНЦИП АНАЛИЗА
Данный тест представляет собой двухэтапный анализ жидкости с использованием
трех ферментов для определения активности КК.
Креатинкиназа катализирует реакцию между креатинфосфатом и АДФ (аденозин-5'дифосфат), в результате чего образуется креатин и АТФ (аденозин-5'-трифосфат).
Последнее соединение фосфорилирует глюкозу в G-6-P (глюкозо-6-фосфат) в
присутствии HK (гексокиназы). G-6-P окисляется до 6-PG (глюконат-6-фосфат).
Одновременно с этим эквимолярное количество НАДФ (никотинамид аденин
динуклеотид фосфат) восстанавливается до НАДФH в реакции, катализируемой
G-6P-DH (глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа). Увеличение поглощения при 340 nm в
результате образования НАДФH пропорционально активности креатинкиназы в
образце (3).
КК
Креатинфосфат + АДФ → Креатин + АТФ
HK
АТФ + Глюкоза → АДФ + G-6-P
G-6-P-DH
+
+
G-6-P + НАДФ → 6-PG + НАДФH + H
ИНФОРМАЦИЯ О РЕАГЕНТЕ
Комплект с кодом 981828
содержит
2 флакона с 52 ml реагента А
2 флакона с 13 ml реагента В
Комплект с кодом 981829
содержит
2 флакона с 20 ml реагента А
2 флакона с 5 ml реагента В
Концентрация
Реагент А
Буфер (Имидазол), pH 6.5
D-глюкоза
N-ацетил-L-цистеин (NAC)
Магния ацетат
EDTA-Na2
Никотинамид-аденин-динуклеотидфосфат (НАДФ)
Гексокиназа (HK)
NaN3
Реагент В
Буфер (Имидазол)
Аденозин-5’-дифосфат (АДФ)
Аденозин-5’-монофосфат (АМФ)
Ди(аденозин-5’)пента-фосфат (АФ5A)
Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Креатинфосфат
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2,7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1 %
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Меры предосторожности
Реагент В является опасным веществом.
Сведения о возможных рисках и мерах предосторожности содержатся на отдельном
вкладыше: H315, P280, P302+P352, P305+P351+P338.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта.
Необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности при работе со всеми
лабораторными реагентами.
Продукт необходимо утилизировать как лабораторный химический реактив в соответствии с
местными нормативными требованиями.
СБОР ОБРАЗЦОВ
Примечание: При обработке образцов в пробирках соблюдайте все инструкции
производителя пробирок чтобы избежать получения ошибочных результатов.
Особое внимание на преаналитическом этапе следует уделять таким факторам, как
смешивание, время от момента взятия образца до центрифугирования и настройки
центрифуги.
Тип образца
Можно использовать негемолизированную сыворотку или плазму крови с гепарином.
Примечание: Это может привести к отклонениям в результатах. Не подвергайте
образцы воздействию интенсивного света.
Меры предосторожности
При исследовании и утилизации все образцы должны рассматриваться как
потенциально инфицированные.
Хранение (4)
Образцы можно хранить, как указано ниже.
Образец
4 суток при температуре 20…25 °C, 1 месяц
при температуре 4…8 °C, или 1 месяц при
температуре -20 °C; защищенные от света.
КК-BB не стабильна.
ПРОЦЕДУРА ТЕСТИРОВАНИЯ
Подробная информация содержится в указаниях по выполнению автоматической
процедуры тестирования для используемой модели анализатора. Результаты
любого тестирования, не подтвержденного компанией Thermo Fisher Scientific Oy
пользователь оценивает самостоятельно.
Настройки аппарата Indiko
Введите соответствующие области применения параметры с помощью штрихкода
в краткой инструкции по применению или из электронного файла в зависимости от
ситуации.
Входящие в комплект материалы
Перечисленные выше реагенты.
Необходимые реагенты, не входящие в набор
Калибровочные и контрольные образцы, указанные ниже.
Калибровка
Показатель реакции (dA/min) преобразуется в итоговые единицы измерения с
помощью коэффициента пересчета.
Либо используйте в качестве калибратора eCal (981830) в соответствии с
инструкциями, приведенными на листке-вкладыше калибратора eCal (981830).
Контроль качества
Используйте образцы для контроля качества (КК) как минимум один раз в день,
а также после каждой калибровки и замены флакона с реагентом. Рекомендуется
использовать образцы или группы образцов для контроля как минимум двух уровней
(низкого и высокого). При проведении процедуры контроля качества соблюдайте все
местные, региональные и федеральные нормативные требования.
Имеющиеся в наличии контрольные материалы:
CK-MB Control (код 981908)
CK-MB Control High (код 981255)
Nortrol (код 981043)
Abtrol (код 981044)
Периодичность анализа контрольных образцов и предельные значения должны
соответствовать требованиям, установленным в конкретной лаборатории.
Результаты анализа образцов для контроля качества должны находиться в
пределах, заранее установленных лабораторией.
РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Анализатор автоматически рассчитывает результаты следующим образом:
Активность в U/l = коэффициент x dA/min
TV x 1000
Теоретический коэффициент = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Общий объем реакции в ml
Объем образца в ml
Коэффициент поглощения НАДФH
при 340 nm
Длина оптического пути кюветы = 1
Коэффициент преобразования µkat/l = (U/l)/60
Если в качестве калибратора используется eCal (981830), результаты
рассчитываются анализатором автоматически с использованием кривой калибровки.
Кривая калибровки (пример)
КК (IFCC)
Подготовка
Реагенты А и В готовы к использованию.
Примечание: Помещая флаконы или другие емкости с реагентами в анализатор,
убедитесь в том, что в горлышке флакона или на поверхности реагента нет
пузырьков воздуха.
Хранение и стабильность реагентов
Реагенты в невскрытых флаконах остаются стабильными при температуре 2…8 °C
до истечения указанного на этикетке срока годности.
Сведения о стабильности реагентов в анализаторе см. в указаниях по применению
конкретного анализатора.
Не используйте мутные реагенты.
Кривая калибровки зависит от лота реагента.
ОГРАНИЧЕНИЯ
При постановке диагноза результаты лабораторных исследований следует всегда
оценивать совместно с данными анамнеза, клинического обследования и другими
показателями.
Page 31
Искажение результатов анализа
Исследование проводилось в соответствии с рекомендациями EP7-A2 Института
клинических и лабораторных стандартов (CLSI).
Критерий: Разница в пределах ± 10 % от первоначальных значений.
Konelab
Интерферент
интерферента
Связанный
билирубин
Несвязанный
билирубин
Гемоглобин в
гемолизате
Липемия: Intralipid
(товарный знак
компании Fresenius
Kabi AB)
Indiko
Интерферент
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
Целевая
концентрация
КК (U/l)
188
498
180
495
184
505
Отклонение
от значения
(%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
интерферента
Связанный
билирубин
Несвязанный
билирубин
Гемоглобин в
гемолизате
Липемия: Intralipid
(товарный знак
компании Fresenius
Kabi AB)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
Целевая
концентрация
КК (U/l)
179
477
175
469
187
502
Отклонение
от значения
(%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Не используйте гемолизированные образцы.
Мутность образцов слабо коррелирует с уровнем концентрации триглицеридов.
В очень редких случаях наличие гаммапатии, в частности обусловленной
нарушением синтеза иммуноглобулинов класса IgM (макроглобулинемия
Вальденстрема), может привести к получению недостоверных результатов анализа
(6). Это не проверялось компанией Thermo Fisher Scientific Oy.
Информация о других интерферентах содержится в публикации (5).
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (3)
Мужчины
< 171 U/l (< 2.85 µkat/l) при 37 °C
Женщины
< 145 U/l (< 2.41 µkat/l) при 37 °C
Приведенные значения носят исключительно справочный характер. Каждой
лаборатории рекомендуется подтвердить этот диапазон значений или установить
собственный референтный диапазон.
Коэффициент преобразования
µkat/l = (U/l)/60
ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Расширенный диапазон измерений после вторичного разведения: 10 – 9000 U/l
(0.150 – 17 µkat/l).
РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Результаты, полученные в конкретных лабораториях, могут отличаться от
приведенных характеристик.
Предел обнаружения
Исследование проводилось в соответствии с рекомендациями EP17-A Института
клинических и лабораторных стандартов (CLSI).
Предел холостой пробы (LoB) представляет собой максимальный результат
измерения, который можно получить в образце без аналита (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Предел обнаружения (LoD) представляет собой наименьшее количество аналита в
образце, которое можно обнаружить (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Предел количественного определения (LoQ) представляет наименьшую
фактическую концентрацию в образце, которую можно определить количественно
(n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Предел холостой пробы (LoB) представляет собой максимальный результат
измерения, который можно получить в образце без аналита (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Предел обнаружения (LoD) представляет собой наименьшее количество аналита в
образце, которое можно обнаружить (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Предел количественного определения (LoQ) представляет наименьшую
фактическую концентрацию в образце, которую можно определить количественно
(n = 42).
Погрешность
Погрешность результатов анализа CK ≤ 5.0 % от общего коэффициента вариации
(CV).
Konelab
КК
Повторяемость
(в пределах
одного цикла
измерений)
В пределах
устройства (всего)
Среднее
значение 92 U/l
SD
1.7
CV%
1.8
Среднее
значение 226
U/l
SD
CV%
2.0
0.9
2.5
2.8
3.1
1.4
Среднее
значение 616
U/l
SD
CV%
7.1
1.2
22.3
3.6
Исследование точности измерений проводилось в соответствии с Руководством по
оценке прецизионности количественных методов измерения (EP5-A2) Института
клинических и лабораторных стандартов (CLSI) в одном исследовательском центре
с использованием трех анализаторов Konelab 60, одного оператора, двух партий
реагента, одной партии калибратора и шести процедур калибровки на протяжении
21 дня, за которые было выполнено восемьдесят четыре измерения (n = 84).
Результаты, полученные на всех анализаторах, объединялись.
Indiko
КК
Повторяемость
(в пределах
одного цикла
измерений)
В пределах
устройства (всего)
Среднее
SD
CV%
1.2
1.2
Среднее
SD
CV%
2.0
0.9
Среднее
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
Исследование точности измерений проводилось в соответствии с Руководством по
оценке прецизионности количественных методов измерения (EP5-A2) Института
клинических и лабораторных стандартов (CLSI) в одном исследовательском центре
с использованием трех анализаторов Indiko, одного оператора, двух партий
реагента, одной партии калибратора и семи процедур калибровки на протяжении
21 дня, за которые было выполнено восемьдесят четыре измерения (n = 84).
Результаты, полученные на всех анализаторах, объединялись.
Сравнение методов
Konelab
Сравнительное исследование было проведено в соответствии с Руководством по
сравнению методов исследования биологических образцов и расчету стандартных
ошибок (EP9-A2) Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) с
использованием анализатора Konelab Prime 60 и предыдущего теста 981372 CK
(IFCC) (х) в качестве эталонного метода.
Линейная регрессия (Deming) (единица измерения — U/l):
y = 1.07x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Концентрация аналита в образцах находилась в пределах от 17 до 2253 U/l.
Indiko
1) Сравнительное исследование было проведено в соответствии с Руководством по
использованием анализатора Indiko и предыдущего теста 981372 CK (IFCC) и
анализатора Konelab Prime 60 (x) в качестве эталонного метода.
y = 1.10x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Сравнительное исследование было проведено в соответствии с Руководством по
использованием анализатора Indiko и этого теста CK (IFCC) и анализатора Konelab
Prime 60 (x) в качестве эталонного метода.
y = 1.03x + 1.4
r = 1.00
n = 98
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1)
Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,
5th edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 357 - 358.
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
IFCC 2002/3: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of
Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 2. Reference
Procedure for the Measurement of Catalytic Concentrations of Creatine Kinase,
Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(6): 635 - 642.
4)
Investigations & Stability of blood, plasma and serum samples. Geneva, 15 January
2002, p. 28.
5)
Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC
Press, Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
Bakker A.J. e. al. Gammopathy interference in clinical chemistry assays:
mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007; 45(9),
1240 -1243.
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ
Тел.: +358 10 329 200
Дата редактирования (гггг-мм-дд)
2015-05-08
Изменения по сравнению с последней версией
Изменения указаны линией возле текста.
Page 32
Page 33
SK
981828
981829
Bezpečnostné opatrenia
S ľudskými vzorkami zaobchádzajte a likvidujte ich ako potenciálne infekčný materiál.
Uskladnenie (4)
Vzorky je možné uskladňovať podľa nižšie uvedeného návodu.
Vzorka
4 hodiny pri teplote 20…25°C,
1 mesiac pri teplote 4…8 °C alebo
1 mesiac pri teplote -20 °C; chránená pred svetlom.
CK-BB nestabilná.
TENTO PRÍBALOVÝ LETÁK JE URČENÝ PRE KRAJINY
MIMO USA.
POUŽITIE
Na diagnostické použitie in vitro pri kvantitatívnom stanovení aktivity kreatín kinázy (ATP: kreatín
N-fosfotransferáza (CK), EC 2.7.3.2) v ľudskom sére alebo plazme v analyzátoroch Konelab a
Indiko.
Akákoľvek zmienka o systémoch Konelab sa vzťahuje aj na sériu T.
SÚHRN (1, 2)
Aktivita kreatín kinázy je najväčšia v priečne pruhovanom svale, mozgu a srdcovom tkanive.
V iných tkanivách, ako sú obličky, bránica a prostata, je aktivita značne nižšia.
Aktivita CK sa zvyšuje pri mnohých ochoreniach, ku ktorým patria ochorenia kostrového svalstva,
srdca, centrálneho nervového systému a štítnej žľazy. U 50 % pacientov sa po akútnom
poškodení svalov začne zvyšovať aktivita CK v krvi a patologické hladiny dosahuje v priemere po
4-5 hodinách. Hodnoty sa pravidelne zvyšujú od ôsmej do dvadsiatej štvrtej hodiny po začiatku
poškodenia a znižujú sa na pôvodné hodnoty v referenčnom rozpätí s veľkými rozdielmi medzi
jednotlivcami.
PRINCÍP METÓDY
Test CK predstavuje tekutý test zložený z dvoch častí, ktorý využíva tri enzýmy na určenie aktivity
CK.
Kreatín kináza katalyzuje reakciu medzi kreatínfosfátom a ADP (adenozín-5'-difosfát), pri ktorej sa
tvorí kreatín a ATP (adenozín-5'-trifosfát). Nová zlúčenina za prítomnosti HK (hexokinázy)
fosforyluje glukózu na G-6-P (glukóza-6-fosfát). G-6-P sa oxiduje na 6-PG (glukonát-6-fosfát) a
súčasne sa ekvimolárne množstvo NADP (nikotínamid adenín dinukleotidfosfát) redukuje na
NADPH v reakcii katalyzovanej G-6P-DH (glukóza-6-fosfát dehydrogenáza). Zvýšenie absorbancie
pri 340 nm, ktoré je výsledkom vzniku NADPH, je priamo úmerné aktivite kreatín kinázy vo vzorke
(3).
CK
Kreatín fosfát + ADP → Kreatín + ATP
HK
ATP + Glukóza → ADP + G-6-P
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
Súprava s kódom 981829 obsahuje
2 fľaštičky s 20 ml činidla A
2 fľaštičky s 5 ml činidla B
Koncentrácie
Činidlo A
Pufer (Imidazol), pH 6.5
D-glukóza
N-acetyl-L-cysteín (NAC)
Octan horečnatý
EDTA-Na2
Nikotínamid adenín dinukleotidfosfát (NADP)
Hexokináza (HK)
NaN3
Činidlo B
Pufer (Imidazol)
Adenozín-5’-difosfát (ADP)
Adenozín-5’-monofosfát (AMP)
Di(adenozín-5’)penta-fosfát (AP5A)
Glukóza-6-fosfátdehydrogenáza (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Kreatín fosfát
NaN3
Nastavenie prístroja Indiko
Pomocou čiarového kódu na aplikačnom formulári Indiko alebo pomocou elektronického súboru
zadajte aplikačné parametre.
Poskytnuté materiály
Činidlá popísané vyššie.
Materiály potrebné, ale nedodané
Kalibrátor a kontroly uvedené nižšie.
Kalibrácia
Odozva (dA/min) sa konvertuje na výsledné jednotky pomocou koeficientu prepočtu.
Ako kalibrátor môžete použiť aj eCal (981830) podľa inštrukcií uvedených v príbalovom letáku
eCal (981830).
Kontrola kvality
Používajte vzorky na kontrolu kvality (QC) aspoň raz denne, po každej kalibrácii a vždy, keď
použijete novú fľaštičku s činidlom. Odporúčame použiť kontroly alebo skupiny vzoriek aspoň
dvoch úrovní (nízkej a vysokej). Pri kontrole kvality vždy dodržiavajte miestne, štátne a federálne
predpisy.
Dostupné kontroly:
Abtrol, kód 981044
Intervaly a hraničné hodnoty kontroly (QC) sa musia prispôsobiť individuálnym požiadavkám
laboratória. Výsledné hodnoty kontrolných vzoriek majú byť v rozmedzí hodnôt vopred
stanovených laboratóriom.
VÝPOČET VÝSLEDKOV
Výsledky automaticky vypočíta analyzátor takýmto spôsobom:
INFORMÁCIE O ČINIDLÁCH
Súprava s kódom 981828 obsahuje
2 fľaštičky s 52 ml činidla A
2 fľaštičky s 13 ml činidla B
TESTOVACÍ POSTUP
Postup automatizácie analyzátora nájdete v Používateľskej príručke. Účinnosť postupu, ktorý
nebol schválený spoločnosťou Thermo Fisher Scientific Oy, nemôže byť garantovaná, a preto
musí byť vyhodnotená používateľom.
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< 0.1 %
Aktivita v U/l = faktor x dA/min
TV x 1000
Teoretický faktor = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
Celkový reagujúci objem v ml
Objem vzorky v ml
Absorpčný koeficient NADPH pri 340 nm
Veľkosť kyvety = 1
Konverzný pomer µkat/l = (U/l)/60
Ak sa eCal (981830) používa ako kalibrátor, výsledky sa automaticky vypočítajú analyzátorom
pomocou kalibračnej krivky.
Kalibračná krivka (príklad)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Bezpečnostné opatrenia
Reagencia B je nebezpečná.
V samostatnom hárku vnútri súpravy nájdete výstražné a bezpečnostné upozornenia: H315, P280,
P302+P352, P305+P351+P338.
Reagencie obsahujú azid sodný ako konzervačnú látku.
Dodržujte štandardné bezpečnostné opatrenia, ktoré sú nevyhnutné pri manipulácii so všetkými
laboratórnymi reagenciami.
Produkt likvidujte ako laboratórnu chemickú látku v súlade s platnými predpismi.
Príprava
Činidlá A a B sú pripravené na použitie.
Poznámka: Pred vložením fľaštičiek alebo nádobiek s činidlom do analyzátora skontrolujte,
či sa v hrdle nádobky alebo na povrchu činidla nenachádzajú žiadne bubliny.
Uskladnenie a stabilita
Činidlá v neotvorených fľaštičkách sú stabilné pri teplote 2…8 °C až do exspiračnej doby
vytlačenej na štítku.
Informácie o stabilite činidiel v prístroji nájdete v Používateľskej príručke analyzátora.
Ak sú činidlá zakalené, nepoužívajte ich.
ODBER VZORIEK
Poznámka: Pri spracovaní vzoriek v skúmavkách na odber vzoriek dôkladne dodržiavajte
pokyny výrobcu skúmavky, aby ste sa vyhli chybným výsledkom. Zvláštnu pozornosť venujte
predanalytickým premenným, ako napr. čas miešania a státia pred odstreďovaním, ako aj
nastaveniam odstreďovania.
Typ vzorky
Môžete používať nehemolyzované sérum alebo heparinizovanú plazmu.
Poznámka: Hemolýza môže viesť k nesprávnym výsledkom. Vzorky nevystavujte silnému svetlu.
Kalibračná krivka závisí od šarže.
OBMEDZENIA METÓDY
Pre diagnostické účely majú byť výsledky vždy vyhodnocované spolu s anamnézou pacienta,
klinickým vyšetrením a ďalšími zisteniami.
Interferencie
Vykonala sa štúdia s použitím CLSI dokumentu EP7-A2 ako smernice.
Kritérium: Rozdiel do ± 10 % počiatočných hodnôt.
Konelab
Interferujúca substancia
Konjugovaný bilirubín
Nekonjugovaný bilirubín
Hemoglobín v hemolyzáte
(obchodná známka
spoločnosti Fresenius Kabi
AB)
Koncentrácia
interferujúcej substancie
Cieľová
hodnota
CK (U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
188
498
180
495
184
505
Rozdiel
oproti
cieľovej
hodnote (%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
CK (IFCC)
Indiko
Interferujúca substancia
Konjugovaný bilirubín
Nekonjugovaný bilirubín
Hemoglobín v hemolyzáte
(obchodná známka
spoločnosti Fresenius Kabi
AB)
Koncentrácia
interferujúcej substancie
Cieľová
hodnota
CK (U/l)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
179
477
175
469
187
502
Rozdiel
oproti
cieľovej
hodnote (%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Nepoužívajte hemolyzovanú vzorku.
Korelácia medzi zakalenosťou vzorky a koncentráciou triglyceridov je nízka.
Vo veľmi vzácnych prípadoch môže gamopatia, najmä typ IgM (Waldenströmova
makroglobulinémia), spôsobiť nespoľahlivosť výsledkov (6). Nebolo testované spoločnosťou
Thermo Fisher Scientific Oy.
Viac o ďalších interferujúcich substanciách, pozri odkaz (5).
OČAKÁVANÉ HODNOTY (3)
Muži < 171 U/l (< 2.85 µkat/l) pri teplote 37 °C
Ženy < 145 U/l (< 2.41 µkat/l) pri teplote 37 °C
Tieto hodnoty slúžia len ako pomôcka. Odporúčame, aby si každé laboratórium overilo tento
rozsah alebo prispôsobilo referenčný interval pre konkrétnu populáciu.
Zmeny od predchádzajúcej verzie
Čiara vedľa textu naznačuje zmeny.
MERACÍ ROZSAH
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Rozšírený merací rozsah po sekundárnom zriedení: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
PREVÁDZKOVÉ CHARAKTERISTIKY
Výsledky získané v jednotlivých laboratóriách sa môžu líšiť od daných prevádzkových dát.
Limit detekcie
Vykonala sa štúdia s použitím dokumentu EP17-A ako smernice.
Limit slepej vzorky (LoB) predstavuje najvyšší výsledok merania, ktorý je možné pozorovať pri
vzorke bez analytu (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Limit detekcie (LoD) predstavuje najnižšie množstvo analytu vo vzorke, ktoré je možné detegovať
(n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Limit stanoviteľnosti (LoQ) predstavuje najnižšiu skutočnú koncentráciu vo vzorke, ktorú je možné
stanoviť kvantitatívne (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Limit slepej vzorky (LoB) predstavuje najvyšší výsledok merania, ktorý je možné pozorovať pri
vzorke bez analytu (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Limit detekcie (LoD) predstavuje najnižšie množstvo analytu vo vzorke, ktoré je možné detegovať
(n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Limit stanoviteľnosti (LoQ) predstavuje najnižšiu skutočnú koncentráciu vo vzorke, ktorú je možné
stanoviť kvantitatívne (n = 42).
Nepresnosť
Nepresnosť analýzy CK je ≤ 5.0 % celkovej hodnoty CV.
Opakovateľnosť
(v rámci cyklu
analýz)
Pre dané zariadenie
(celkovo)
Priemer 92 U/l
SD
CV %
1.7
1.8
Priemer 226 U/l
SD
CV %
2.0
0.9
Priemer 616 U/l
SD
CV %
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
V súlade s dokumentom CLSI EP5-A2 použitým ako smernica sa konala štúdia presnosti na jednom
pracovisku s tromi analyzátormi Konelab 60, jedným operátorom, 2 šaržami činidiel, jednou šaržou
kalibrátorov a 6 kalibráciami po dobu 21 dní a s počtom meraní n = 84. Výsledky z každého
analyzátora boli skombinované.
Indiko
CK
Opakovateľnosť
(v rámci cyklu
analýz)
Pre dané zariadenie
(celkovo)
VÝROBCA
Tel. +358 10 329 200
Dátum revízie (rrrr-mm-dd)
2015-05-08
Konverzný faktor
µkat/l = (U/l)/60
Konelab
CK
BIBLIOGRAFIA
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
Priemer 95 U/l
SD
CV %
1.2
1.2
Priemer 226 U/l
SD
CV %
2.0
0.9
Priemer 637 U/l
SD
CV %
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
V súlade s dokumentom CLSI EP5-A2 použitým ako smernica sa konala štúdia presnosti na jednom
pracovisku s tromi analyzátormi Indiko, jedným operátorom, 2 šaržami činidiel, jednou šaržou
kalibrátorov a 7 kalibráciami po dobu 21 dní a s počtom meraní n = 84. Výsledky z každého
analyzátora boli skombinované.
Porovnanie metódy
Konelab
Vykonala sa porovnávacia štúdia na analyzátore Konelab Prime 60 s použitím CLSI dokumentu
EP9-A2 ako smernice a predchádzajúcej metódy 981372 CK (IFCC) ako referencie.
Lineárna regresia (Deming) (výsledok v jednotkách U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Koncentrácie vzoriek sa pohybovali v rozmedzí od 17 do 2253 U/l.
Indiko
1) Vykonala sa porovnávacia štúdia na analyzátore Indiko s použitím CLSI dokumentu EP9-A2
ako smernice a predchádzajúcej metódy 981372 CK (IFCC) na analyzátore Konelab Prime 60 (x)
ako referencie.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Vykonala sa porovnávacia štúdia na analyzátore Indiko s použitím dokumentu CLSI EP9-A2
ako smernice a tej istej metódy CK (IFCC) na analyzátore Konelab Prime 60 (x) ako referencie.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
Page 34
Page 35
SV
CK (IFCC)
DENNA BIPACKSEDEL GÄLLER KUNDER
UTANFÖR USA.
AVSEDD ANVÄNDNING
För in vitro-diagnostik vid kvantitativ bestämning kreatinkinasaktivitet (ATP: kreatin-Nfosfotransferas (CK), EC 2.7.3.2) i humant serum eller plasma på Konelab- och Indikoanalysatorer.
Eventuella hänvisningar till Konelab-system avser även T-serien.
SAMMANFATTNING (1, 2)
Kreatinkinasaktivitet är störst i tvärstrimmig muskulatur och hjärn- och hjärtvävnad. Annan typ av
vävnad, till exempel njurar, diafragma och prostata, har avsevärt mindre aktivitet.
CK-aktiviteten är förhöjd vid många sjukdomar, till exempel där skelettmuskulaturen, hjärtat,
centrala nervsystemet eller sköldkörteln påverkas. Efter en akut muskelskada börjar den totala
CK-aktiviteten i blodet att öka och når patologiska nivåer efter i genomsnitt 4–5 timmar för 50 %
av patienterna. Värdena ökar regelbundet från den 8:e till den 24:e timmen efter att hjärtinfarkten
inträffar och återgår till referensintervallet med stora fluktuationer mellan enskilda värden.
TESTPRINCIP
CK-analysen är en vätskeanalys i två delar där tre enzymer utnyttjas för bestämning av CK-aktivitet.
Kreatinekinas katalyserar reaktionen mellan kreatinfosfat och ADP (adenosin-5’-difosfat) genom att
kreatin och ATP (adenosin-5’-trifosfat) bildas. Den senare substansen fosforylerar glukos till G-6-P
(glukos-6-fosfat) vid förekomst av HK (hexokinas). G-6-P oxideras till 6-PG (glukonat-6-fosfat) och
inom samma tidsperiod reduceras samma molmängd NADP (nikotinamid-adenindinukleotid-fosfat)
till NADPH i en reaktion som katalyseras av G-6P-DH (glukos-6-fosfatdehydrogenas). Ökningen i
absorbans vid 340 nm, som uppstår genom att NADPH bildas, är proportionell mot aktiviteten för
kreatinkinas i provet (3).
Prov
4 timmar i 20…25 °C,
1 månad i 4…8 °C eller
1 månad i -20 °C; skyddat från ljus.
CK-BB inte stabilt.
TESTUTFÖRANDE
Se Application Notes för automatiskt utförande på aktuell analysator. Varje applikation som inte
har validerats av Thermo Fisher Scientific Oy kan inte garanteras vad gäller prestanda och måste
därför utvärderas av användaren.
Indiko - instrumentinställningar
Mata in parametrar för tillämpningen via streckkoden på Indiko tillämpningsblad eller via
elektronisk fil, efter behov.
Bifogat material
Reagens enligt ovan.
Erforderligt material som ej medföljer
Kalibrator och kontroller enligt nedan.
Kalibrering
Svaret (dA/min) omvandlas till resultatenheter med en omräkningsfaktor.
Använd alternativt eCal (981830) som en kalibrator, enligt anvisningarna som ges på
bipacksedeln för eCal (981830).
HK
ATP + Glukos → ADP + G-6-P
Kvalitetskontroll
Använd kvalitetskontrollprover (QC) minst en gång om dagen, efter varje kalibrering och varje
gång en ny reagensflaska används. Vi rekommenderar att kontroller eller prov-pooler på minst två
nivåer används (låg och hög). Följ alltid lokala, regionala och statliga bestämmelser vid
kvalitetskontroll.
Tillgängliga kontroller:
CK-MB Control, kod 981908
CK-MB Control High, kod 981255
Nortrol, artikelnr. 981043
Abtrol, artikelnr: 981044
Kontrollens intervall och gränser måste anpassas till laboratoriets egna krav. Resultaten från
kvalitetskontrollproverna bör ligga inom de av laboratoriet fastställda gränserna.
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
RESULTATBERÄKNING
Resultaten beräknas automatiskt av analysatorn enligt följande:
REAGENSINNEHÅLL
Aktivitet i U/l = Faktor x dA/min
CK
Kreatinfosfat + ADP → Kreatin + ATP
Satsartikelnr 981828 innehåller
2 flaskor med 52 ml Reagens A
2 flaskor med 13 ml Reagens B
Satsartikelnr 981829 innehåller
2 flaskor med 20 ml Reagens A
2 flaskor med 5 ml Reagens B
TV
SV
6.22
P
Koncentrationer
Reagens A
Buffert (Imidazole), pH 6.5
D-glukos
N-acetyl-L-cystein (NAC)
Magnesiumacetat
EDTA-Na2
Nikotinamid-adenindinukleotid-fosfat (NADP)
Hexokinas (HK)
NaN3
Reagens B
Buffert (Imidazole)
Adenosin-5’-difosfat (ADP)
Adenosin-5’-monofosfat (AMP)
Di(adenosin-5’)pentafosfat (AP5A)
Glukos-6-fosfatdehydrogenas (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Kreatinfosfat
NaN3
TV x 1000
Teoretisk faktor = 
6.22 x SV x P
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5 000 U/l
< 0.1 %
Total reaktionsvolym i ml
Provvolym i ml
Extinktionskoefficient för NADPH vid 340 nm
Kyvettväglängd = 1
Konverteringsfaktor µkat/l = (U/l)/60
Om eCal (981830) används som en kalibrator kommer resultaten att beräknas automatiskt av
analysatorn med hjälp av en kalibreringskurva.
Kalibreringskurva (exempel)
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14 000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< 0.1 %
Försiktighetsåtgärder
Reagens B är farlig.
Se separat blad inuti satsen för varnings- och försiktighetsfraser: H315, P280, P302+P352,
P305+P351+P338.
I reagenser finns natriumazid som konserveringsmedel.
Vidta normala försiktighetsåtgärder som vid all hantering av laboratoriereagenser.
Produkten måste kasseras som laboratoriekemikalier enligt lokala bestämmelser.
Preparering
Reagens A och B är färdiga för användning.
Anmärkning: Kontrollera att det inte finns bubblor i flaskhalsen eller på ytan av reagenset då
behållarna placeras i analysatorn.
Förvaring och hållbarhet
Reagens i oöppnad behållare är hållbar vid 2…8 °C till på etiketten angivet utgångsdatum.
Se Application Notes för aktuell analysator för information om reagensernas hållbarhet i
instrumentet.
Om reagenserna är grumliga ska de inte användas.
PROVTAGNING
Anmärkning: Vid bearbetning av prover i provrör ska du följa anvisningarna från rörtillverkare
noggrant för att undvika felaktiga resultat. Var särskilt uppmärksam på preanalytiska variabler,
t.ex. blandning, väntetid före centrifugering och centrifugens inställningar.
Provmaterial
Ohemolyserat serum eller heparinplasma kan användas.
Anmärkning: Hemolys kan leda till avvikande resultat. Exponera inte prover för starkt ljus.
Försiktighetsåtgärder
Humana prover ska behandlas som potentiellt smittförande, både vid hantering och kassering.
Kalibreringskurvan är batchberoende.
BEGRÄNSNINGAR I UTFÖRANDET
För diagnostik ska resultaten alltid bedömas tillsammans med patientens anamnes, kliniska
undersökningar och andra resultat.
Interferens
En studie har utförts enligt anvisningarna i CLSI dokument EP7-A2.
Kriterium: Skillnad inom ± 10 % av initialvärdena.
Konelab
Interfererande ämne
Konjugerat bilirubin
Okonjugerat bilirubin
Hemoglobin i hemolysat
Lipemi: Intralipid
(varumärket tillhör
Fresenius Kabi AB)
Interferenskoncentration
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
CKmålvärde
(U/l)
188
498
180
495
184
505
Skillnad
från mål
(%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
981828
981829
Förvaring (4)
Provet kan förvaras enligt nedan.
Indiko
Interfererande ämne
Interferenskoncentration
Konjugerat bilirubin
Okonjugerat bilirubin
Hemoglobin i hemolysat
(varumärket tillhör
Fresenius Kabi AB)
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
CKmålvärde
(U/l)
179
477
175
469
187
502
Skillnad
från mål
(%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Använd ej hemolyserat prov.
Det är dålig korrelation mellan grumlighet och triglyceridkoncentration.
I mycket sällsynta fall kan gammopati, särskilt typ IgM (Waldenströms makroglobulinemi),
ge otillförlitliga resultat (6). Ej testat hos Thermo Fisher Scientific Oy.
För andra interfererande ämnen, se referens (5).
REFERENSOMRÅDE (3)
Män
< 171 U/l (< 2.85 µkat/l) vid 37 °C
Kvinnor < 145 U/l (< 2.41 µkat/l) vid 37 °C
Angivna värden är endast avsedda som vägledning. Vi rekommenderar att varje laboratorium
verifierar detta område eller fastställer ett referensintervall för populationen som betjänas.
REFERENSER
1)
2)
Germany, 1998, p. 73.
3)
40(6): 635 - 642.
4)
p. 28.
5)
Washington, D.C., 3-234 - 3-239, 2000.
6)
Konverteringsfaktor
µkat/l = (U/l)/60
TILLVERKARE
Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa, Finland
Tel. +358 10 329 200
MÄTOMRÅDE
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
Utökat mätområde efter sekundär spädning: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
Revisionsdatum (åååå-mm-dd)
2015-05-08
UTFÖRANDETS KARAKTERISTIKA
Resultaten som erhålls vid varje enskilt laboratorium kan skilja sig från angivna data för prestanda.
Detekteringsgräns
En studie har utförts enligt anvisningarna i EP17-A-dokumentet.
Gräns för blankprov (LoB) representerar det högsta mätresultat som sannolikt kan förekomma för
ett analytfritt prov (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Detekteringsgränsen (LoD) representerar den lägsta mängden analyt i ett prov som kan
detekteras (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Kvantiteringsgränsen (LoQ) representerar den lägsta faktiska koncentrationen i ett prov som kan
bestämmas kvantitativt (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Gräns för blankprov (LoB) representerar det högsta mätresultat som sannolikt kan förekomma för
ett analytfritt prov (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Detekteringsgränsen (LoD) representerar den lägsta mängden analyt i ett prov som kan
detekteras (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Kvantiteringsgränsen (LoQ) representerar den lägsta faktiska koncentrationen i ett prov som kan
bestämmas kvantitativt (n = 42).
Imprecision
Imprecisionen för CK-analysen är ≤ 5.0 % Total CV.
Konelab
CK
Repeterbarhet
(inom serie)
Inom instrument
(totalt)
Medel 92 U/l
SD
CV%
1.7
1.8
Medel 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Medel 616 U/l
SD
CV%
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
Precisionsstudien utfördes enligt anvisningarna i CLSI:s dokument EP5-A2 på en plats, med tre
Konelab 60-analysatorer, en användare, två reagenspartier, ett kalibratorparti och sex kalibreringar
under 21 dagar. Antalet mätningar var n = 84. Resultaten från varje analysator kombinerades.
Indiko
CK
Repeterbarhet
(inom serie)
Inom instrument
(totalt)
Medel 95 U/l
SD
CV%
1.2
1.2
Medel 226 U/l
SD
CV%
2.0
0.9
Medel 637 U/l
SD
CV%
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
Precisionsstudien utfördes enligt anvisningarna i CLSI Dokument EP5-A2 på en plats, med tre Indikoanalysatorer, en användare, två reagenspartier, ett kalibratorparti och sju kalibreringar under 21 dagar.
Antalet mätningar var n=84. Resultaten från varje analysator kombinerades.
Metodjämförelse
Konelab
En jämförelsestudie har utförts på en Konelab Prime 60-analysator enligt anvisningarna i CLSI:s
dokument EP9-A2 och med föregående 981372 CK(IFCC)-metod (x) som referens.
Linjär regression (Deming) (resultatenhet U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Provens koncentration låg mellan 17 och 2253 U/l.
Indiko
1) En jämförelsestudie har utförts på en Indiko-analysator enligt anvisningarna i CLSI:s dokument
EP9-A2 och med föregående 981372 CK(IFCC)-metod på Konelab Prime 60 (x) som referens.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) En jämförelsestudie har utförts på en Indiko-analysator enligt anvisningarna i CLSI:s dokument
EP9-A2 och med samma CK(IFCC)-metod på Konelab Prime 60 (x) som referens.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
Ändringar från tidigare utgåva
Raden vid sidan av texten anger ändringar.
Page 36
Page 37
TR
981828
981829
BU PROSPEKTÜS ABD DIŞINDA KULLANIM İÇİN
GEÇERLİDİR.
KULLANIM AMACI
Konelab ve Indiko analizörlerinde insan serum veya plazmasında kreatin kinaz aktivitesinin
miktar tayininde in vitro tanı amaçlı kullanım içindir (ATP: Kreatin N-Fosfotransferaz (CK),
EC 2.7.3.2).
Konelab sistemlerine yönelik referanslar aynı zamanda T Serisi için de geçerlidir.
ÖZET (1,2)
En yüksek kreatin kinaz aktivitesi çizgili kas, beyin ve kalp dokusunda görülür. Böbrekler,
diyafram ve prostat gibi diğer dokular anlamlı ölçüde daha az aktivite içerir.
İskelet kası, kalp, merkezi sinir sistemi ve tiroid ile ilişkili olanlar da dahil olmak üzere
birçok hastalıkta CK aktivitesi yükselir. Akut kas hasarından sonra kandaki total CK
aktivitesi yükselmeye başlayarak hastaların %50'sinde ortalama 4 – 5 saat içinde patolojik
düzeylere ulaşır. Değerler enfarktüsün başlangıcından itibaren 8. – 24. saatten itibaren
düzenli olarak yükselir ve referans aralığa geri döner, bu süreçte hastalar arasında büyük
dalgalanmalar görülür.
PROSEDÜR PRENSIBI
CK testi, CK aktivitesini belirlemek üzere üç enzimin kullanıldığı iki bölümden oluşan bir
sıvı testidir.
Kreatin kinaz; kreatin ve ATP (adenozin-5’-trifosfat) oluşumuyla kreatin fosfat ile ADP
(adenozin-5’-difosfat) arasındaki reaksiyonu katalize eder. ATP bileşiği, HK (heksokinaz)
varlığında glukozu G-6-P'ye (glukoz-6-fosfat) fosforile eder. G-6-P, 6-PG'ye (glukonat-6fosfat) oksitlenir ve aynı zamanda, eşmolar miktarda NADP (nikotinamid adenin
dinükleotid fosfat), G-6P-DH (glukoz-6-fosfat dehidrojenaz) tarafından katalize edilen bir
reaksiyonda NADPH'ye indirgenir. NADPH oluşumu nedeniyle 340 nm'deki absorbansta
meydana gelen artış, numunedeki kreatin kinaz aktivitesiyle orantılıdır (3).
CK
Kreatin fosfat + ADP → Kreatin + ATP
HK
ATP + Glukoz → ADP + G-6-P
G-6-P-DH
G-6-P + NADP+ → 6-PG + NADPH + H+
REAKTIF BILGILERI
Kit kodu 981828 şunları içerir:
2 flakon 52 ml Reaktif A
2 flakon 13 ml Reaktif B
Kit kodu 981829 şunları içerir:
2 flakon 20 ml Reaktif A
2 flakon 5 ml Reaktif B
Konsantrasyonlar
Reaktif A
Tampon (İmidazol), pH 6.5
D-glukoz
N-asetil-L-sistein (NAC)
Magnezyum asetat
EDTA-Na2
Nikotinamid adenin dinükleotid fosfat (NADP)
Heksokinaz (HK)
NaN3
Reaktif B
Tampon (İmidazol)
Adenozin-5’-difosfat (ADP)
Adenozin-5’-monofosfat (AMP)
Di(adenozin-5’)penta-fosfat
(AP5A)
Glukoz-6-fosfat dehidrojenaz (G-6-P-DH)
EDTA -Na2
Kreatin fosfat
NaN3
60 mmol/l
27 mmol/l
27 mmol/l
14 mmol/l
2 mmol/l
2.7 mmol/l
≥ 5000 U/l
< %0.1
160 mmol/l
11 mmol/l
28 mmol/l
55 µmol/l
≥ 14000 U/l
2 mmol/l
160 mmol/l
< %0.1
Önlemler
İnsan numuneleri kullanırken veya atılırken potansiyel olarak enfeksiyöz nitelikte olduğu
kabul edilmelidir.
Saklama (4)
Numuneler aşağıda gösterildiği gibi saklanabilir.
Numune
20…25°C'de 4 saat, 4…8°C'de 1 ay veya -20°C'de 1 ay; ışıktan
korunmak kaydıyla. CK-BB stabil değildir.
TEST PROSEDÜRÜ
Analizörünüzdeki otomatik bir prosedür için Uygulama Notlarına bakın. Thermo Fisher
Scientific Oy tarafından valide edilmemiş uygulamaların performansına ilişkin teminat
verilememektedir; bu nedenle söz konusu uygulamalar kullanıcı tarafından
değerlendirilmelidir.
Indiko cihaz ayarları
Indiko uygulama talimatları sayfasındaki barkod veya elektronik dosyada (duruma göre)
bulunan bilgilere göre uygulama parametrelerini girin.
Sağlanan malzemeler
Yukarıda açıklanan reaktifler.
Gerekli olan ancak sağlanmayan malzemeler
Kalibratör ve aşağıda belirtilen kontroller.
Kalibrasyon
Yanıt (dA/dak.), bir hesaplama faktörüyle sonuç birimlerine dönüştürülür.
Ya da eCal'in (981830) prospektüsünde verilen talimatlara göre kalibratör olarak eCal'i
(981830) kullanın.
Kalite Kontrol
Günde en az bir kez ve her kalibrasyondan sonra kalite kontrol (QC) numunelerini kullanın;
her seferinde yeni bir reaktif şişesi kullanılır. En az iki kontrol seviyesi (düşük ve yüksek)
veya numune havuzu kullanılması önerilir. Kalite kontrol gerçekleştirirken daima yerel ve
federal düzenlemelerle devlet düzenlemelerine uyun.
Kullanılabilir kontroller:
CK-MB Control, kod 981908
CK-MB Control High, kod 981255
Nortrol, kod 981043
Abtrol, kod 981044
Kontrol (QC) aralıkları ve limitleri, ayrı laboratuvar gereksinimlerine uyarlanmalıdır. Kalite
kontrol numunelerinin sonuçları, laboratuvar tarafından önceden ayarlanmış limitler
dahilinde olmalıdır.
SONUÇLARIN HESAPLANMASI
Sonuçlar, analizör tarafından otomatik olarak aşağıdaki gibi hesaplanır:
U/l cinsinden aktivite = Faktör x dA/dak.
TV x 1000
Teorik faktör = 
6.22 x SV x P
TV
SV
6.22
P
ml cinsinden toplam reaksiyon hacmi
ml cinsinden numune hacmi
340 nm'de NADPH'nin sönüm katsayısı
Küvet yol uzunluğu = 1
Dönüştürme faktörü µkat/l = (U/l)/60
eCal (981830), kalibratör olarak kullanılırsa sonuçlar, bir kalibrasyon eğrisi kullanılarak
analizör tarafından otomatik olarak hesaplanır.
Kalibrasyon Eğrisi (örnek)
Önlemler
Reaktif B tehlikelidir.
Tehlike ve Önlem ifadeleri için kitin içindeki ayrı belgeye bakın: H315, P280, P302+P352,
P305+P351+P338.
Reaktifler koruyucu olarak sodyum azit içerir.
Tüm laboratuvar reaktiflerinin kullanımı için gerekli normal önlemleri uygulayın.
Ürün, yerel düzenlemelere göre laboratuvar kimyasalı olarak atılmalıdır.
Preparasyon
Reaktif A ve B kullanıma hazırdır.
Not: Reaktif flakonlarını veya kaplarını analizöre yerleştirirken şişe boynu veya reaktif
yüzeyinde kabarcık olmadığını kontrol edin.
Saklama ve Stabilite
Açılmamış flakonlardaki reaktifler 2…8°C sıcaklıkta etiket üzerinde belirtilen son kullanma
tarihine kadar kararlıdır.
Reaktiflerin cihazdaki kararlılığı hakkında detaylı bilgi almak için analizörünüzün Uygulama
Notları kısmına bakın.
Türbidite gösteren reaktifleri kullanmayın.
NUMUNE TOPLAMA
Not: Numune toplama tüplerinde numune işlerken hatalı sonuçları önlemek için tüp
imalatçısının talimatlarını dikkatli bir şekilde izleyin. Karıştırma, santrifügasyon öncesi
bekleme süresi ve santrifüj ayarları gibi preanalitik değişkenlere ayrıca dikkat edin.
Numune Tipi
Hemolize olmayan serum veya heparin plazma kullanılabilir.
Not: Hemoliz farklı sonuçlara neden olabilir. Numunelerin güçlü ışığa maruz kalmasını
önleyin.
Kalibrasyon eğrisi lota bağlıdır.
PROSEDÜR SINIRLAMALARI
Tanı amaçlı olarak, sonuçlar daima hastanın tıbbi geçmişi, klinik muayenesi ve diğer
bulgularıyla bağlantılı olarak değerlendirilmelidir.
Etkileşim
Kılavuz olarak CLSI dokümanı EP7-A2'nin kullanıldığı bir çalışma yürütülmüştür.
Kriter: Başlangıç değerlerinin %10'u içinde ± fark.
Konelab
Etkileşen Madde
Konjuge bilirubin
Konjuge olmayan bilirubin
Hemolizat içinde
hemoglobin
(Fresenius Kabi AB'nin
ticari markası)
Etkileşime Neden Olan
Konsantrasyon
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
677 µmol/l (39.6 mg/dl)
2.1 g/l
2.4 g/l
Hedef CK
(U/l)
188
498
180
495
184
505
Hedefe göre
Fark (%)
- 5.3
- 5.8
- 1.7
- 2.9
+ 8.5
+ 4.6
10 g/l
10 g/l
181
504
+ 2.8
+ 7.1
CK (IFCC)
Indiko
Etkileşen Madde
Konjuge bilirubin
Konjuge olmayan bilirubin
Hemolizat içinde
hemoglobin
(Fresenius Kabi AB'nin
ticari markası)
Etkileşime Neden Olan
Konsantrasyon
592 µmol/l (34.6 mg/dl)
601 µmol/l (35.2 mg/dl)
621 µmol/l (36.3 mg/dl)
676 µmol/l (39.5 mg/dl)
2.5 g/l
2.4 g/l
Hedef CK
(U/l)
179
477
175
469
187
502
Hedefe göre
Fark (%)
- 0.8
- 2.4
+0.2
- 0.1
+ 8.6
+ 3.4
10 g/l
10 g/l
185
505
+ 1.0
- 0.8
Hemolize örnek kullanmaktan kaçının.
Türbidite ve trigliserit konsantrasyonu arasında zayıf bir korelasyon vardır.
Çok nadir durumlarda gamopati, özellikle tip IgM (Waldenström makroglobülinemisi)
güvenilir olmayan sonuçlara neden olabilir (6). Thermo Fisher Scientific Oy'da test
edilmemiştir.
Etkileşen diğer maddeler için lütfen referansa bakın (5).
BEKLENEN DEĞERLER (3)
Erkek
37 °C'de < 171 U/l (< 2.85 µkat/l)
Kadın
37 °C'de < 145 U/l (< 2.41 µkat/l)
Alıntılanan değerlerin yalnızca kılavuz görevi görmesi amaçlanmıştır. Her laboratuvarın bu
aralığı doğrulaması veya hizmet ettiği popülasyon için bir referans aralığı elde etmesi önerilir.
Dönüştürme faktörü
µkat/l = (U/l)/60
ÖLÇÜM ARALIĞI
10 – 1000 U/l (0.17 – 17 µkat/l).
İkincil dilüsyondan sonra genişletilmiş ölçüm aralığı: 10 – 9000 U/l (0.17 – 150 µkat/l).
PERFORMANS ÖZELLIKLERI
Ayrı laboratuvarlarda elde edilen sonuçlar, sağlanan performans verilerinden farklılık
gösterebilir.
Saptama Limiti
Kılavuz olarak EP17-A'nın kullanıldığı bir çalışma yürütülmüştür.
Boşluk Limiti (LoB), analit içermeyen bir numune için gözlenebilecek en yüksek ölçüm
sonucunu temsil eder (n = 60).
LoD: 1.5 U/l (0.03 µkat/l)
Saptama Limiti (LoD), numune içinde saptanabilen en düşük analit miktarını temsil eder (n = 60).
LoQ: 3.2 U/l (0.05 µkat/l)
Miktar Tayini Limiti (LoQ), numune içinde kantitatif olarak belirlenebilen en düşük gerçek
konsantrasyonu temsil eder (n = 41).
Indiko
LoB: 0.2 U/l (0.003 µkat/l)
Boşluk Limiti (LoB), analit içermeyen bir numune için gözlenebilecek en yüksek ölçüm
sonucunu temsil eder (n = 60).
LoD: 2.2 U/l (0.04 µkat/l)
Saptama Limiti (LoD), numune içinde saptanabilen en düşük analit miktarını temsil eder (n = 60).
LoQ: 3.8 U/l (0.06 µkat/l)
Miktar Tayini Limiti (LoQ), numune içinde kantitatif olarak belirlenebilen en düşük gerçek
konsantrasyonu temsil eder (n = 42).
Hatalı ölçüm
CK testinin hatalı ölçümü, Toplam CV'nin %5.0'inden az veya buna eşittir.
Konelab
CK
Tekrarlanabilirlik
(Çalışma dahilinde)
Cihaz içinde
(Toplam)
Ortalama 92 U/l
SD
CV %'si
1.7
1.8
Ortalama 226 U/l
SD
CV %'si
2.0
0.9
Ortalama 616 U/l
SD
CV %'si
7.1
1.2
2.5
3.1
22.3
2.8
1.4
3.6
Üç Konelab 60 analizörü, bir operatör, 2 reaktif lotu, bir kalibratör lotu ve 6 kalibrasyon
yardımıyla bir merkezde 21 günlük süre içinde n = 84 ölçümün yapıldığı ve CLSI
Dokümanı EP5-A2'nin kılavuz olarak kullanıldığı bir hassasiyet çalışması yürütülmüştür.
Her analizörün verdiği sonuçlar birleştirilmiştir.
Indiko
CK
Tekrarlanabilirlik
(Çalışma dahilinde)
Cihaz içinde
(Toplam)
Ortalama 95 U/l
SD
CV %'si
1.2
1.2
Ortalama 226 U/l
SD
CV %'si
2.0
0.9
Ortalama 637 U/l
SD
CV %'si
4.1
0.6
1.7
2.8
11.7
1.7
1.2
1.8
Üç Indiko analizörü, bir operatör, 2 reaktif lotu, bir kalibratör lotu ve 7 kalibrasyon
yardımıyla bir merkezde 21 günlük süre içinde n = 84 ölçümün yapıldığı ve CLSI
Dokümanı EP5-A2'nin kılavuz olarak kullanıldığı bir hassasiyet çalışması yürütülmüştür.
Her analizörün verdiği sonuçlar birleştirilmiştir.
Yöntem Karşılaştırması
Konelab
Konelab Prime 60 üzerinde, CLSI Dokümanı EP9-A2'nin kılavuz olarak ve önceki 981372
CK (IFCC) yönteminin (x) referans olarak kullanıldığı bir karşılaştırma çalışması
yürütülmüştür.
Doğrusal regresyon (Deming) (sonuç birimi U/l):
y = 1.07 x – 6.3
r = 0.999
n = 95
Numune konsantrasyonları 17 ve 2253 U/l arasında olmuştur.
Indiko
1) Indiko üzerinde, CLSI Dokümanı EP9-A2'nin kılavuz olarak ve Konelab Prime 60'ta
uygulanan önceki 981372 CK (IFCC) yönteminin (x) referans olarak kullanıldığı bir
karşılaştırma çalışması yürütülmüştür.
y = 1.10 x – 4.7
r = 0.999
n = 95
2) Indiko üzerinde, CLSI Dokümanı EP9-A2'nin kılavuz olarak ve Konelab Prime 60'ta
uygulananla aynı CK (IFCC) yönteminin (x) referans olarak kullanıldığı bir karşılaştırma
çalışması yürütülmüştür.
y = 1.03 x + 1.4
r = 1.00
n = 98
BIBLIYOGRAFYA
1) Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,
5th edition, W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 357 – 358.
2) Thomas, L. (ed.), Clinical Laboratory Diagnostics; Use and Assessment of Clinical
Germany, 1998, p. 73.
3) IFCC 2002/3: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic
Measurement of Catalytic Concentrations of Creatine Kinase, Clin.Chem.Lab.Med.
2002, 40(6): 635 – 642.
4) WHO/DIL/LAB/99.1 Rev.2, 2002: Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory
Investigations & Stability of blood, plasma and serum samples. Geneva, 15 January
2002, p. 28.
5) Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC
Press, Washington, D.C., 3-234 – 3-239, 2000.
6) Bakker A.J. et. al. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms,
detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007; 45(9), 1240 – 1243.
İMALATÇI
Tel. +358 10 329 200
Revizyon tarihi (yyyy-aa-gg)
2015-05-08
Önceki versiyona göre değişiklikler
Metnin yanındaki satır değişiklikleri ifade eder.
Page 38

CODE REV ENREV PRODNAME LANG replace spaces with underline

Transcription

Similar documents

CK-MB

Model W1742S 15" Planer with Spiral Cutterhead

Untitled

Catalog Accesorii - Sisteme de Incalzire

October 2009

October 2010

April 2010

Zubehörkatalog Accessories catalogue Catalogue des accessoires

20 11 agopuntura - Aghi per agopuntura SEIRIN

home catalogo 2015

- Unnes - Universitas Negeri Semarang

E - Biblioteca Virtual Miguel de Cervantes