Quantitative Multiplex-Protein Biochip Arrays für die Serumdiagnostik

Quantitative Multiplex-Protein Biochip Arrays für die Serumdiagnostik

Poster-2.3 Quantitative
Serumdiagnostik
1
Multiplex-Protein
1
1
Biochip
Arrays
1
für
die
1
S. Bünger , K. Klempt-Gießing , B. Fritzsche , T. Gemoll , U. Roblick , H.-P.
1
1
Bruch , J.K. Habermann
1
Univ.kl. S.-H., Campus Lübeck
Hintergrund: Das Ziel der Studie war es, den potentiellen klinischen Wert von im
Serum
zirkulierenden
Zytokinen
und
Wachstumsfaktoren
kolorektaler
Tumorpatienten zu analysieren. Zytokine sind eine Gruppe heterogener, löslicher
Proteine, die als interzelluläre Signalmoleküle zur Regulation verschiedener
Zellfunktionen wie Zellproliferation, Migration und Apoptose-Initiierung agieren.
Zytokin-Überexpressionen ist mit Tumorgenese und Progression assoziiert. Die
Analyse der Konzentrationen von Zytokinen und Wachstumsfaktoren im Serum
von Patienten könnte somit als prognostisches und diagnostisches Verfahren
dienen. Bislang mussten diagnostische Immunoassays an Patientenproben einzeln
für verschiedene Marker durchgeführt werden. In dieser Studie wurden die Level
von 12 Zytokinen und Wachstumsfaktoren in kolorektalen Tumor-Patientenseren
mittels eines simultanen Multiplex-Protein-Biochip-Arrays ermittelt. Methoden: Der
auf dem Sandwich-ELISA-Prinzip basierende Multiplex-Protein-Biochip detektiert
simultan quantitativ ein Panel von 12 Analyten in einer Patientenprobe. Die CoreTechnologie ist der Randox-Biochip, der aus Protein-Arrays mit immobilisierten,
spezifischen Antikörpern besteht und semiautomatisiert durch den Evidence
Investigator™ chemilumineszenz-basiert analysiert wird. Maximal 54 PatientenProben können mit diesem Verfahren in 3 Stunden untersucht werden. In dieser
Studien wurden Seren von jeweils 50 gesunden und 50 unbehandelten kolorektaleTumor-Patienten hinsichtlich der Level von IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10,
VEGF, TNF-α, IFN-γ, EGF, MCP-1 analysiert.
Ergebnisse und Diskussion: Interessanterweise konnten die Ergebnisse anderer
Gruppen für die meisten Marker nicht durch die des Biochips bestätigen werden.
Diese Marker unterscheiden sich in der Multiplex-Analyse nicht signifikant in Seren
von gesunden und Tumor-Patienten. Allein IL-8 und VEGF zeigen eine signifikant
höhere Konzentration in Tumor-Seren im Vergleich zu Seren gesunder Patienten
(p < 0,05). Die Spezifität beträgt dabei 93%. Die Ergebnisse dieser Studie zeigen,
dass Multiplex-Protein-Biochip-Arrays in der klinischen und speziell in der
onkologischen Serumdiagnostik einen deutlichen Fortschritt liefern könnten.