Informerende artikel (pdf)

Det afgørende Bevis
Efterår 2011, Nr. 4
I denne tid begås flere og flere
voldtægter, folk bliver skudt på
åben gade i forbindelse med
bandekrigen og flere kvinder får
børn uden at vide hvem faderen
er. I dette nummer vil vi belyse
hvordan disse sager bliver
opklaret.
Dna – profil bliver det afgørende bevis i
efterforskningen på dræbt lærer.
En lærer fra Greve Gymnasium er
På gerningsstedet er der senere blevet
En retsmediciner fortæller hvordan
blevet fundet dræbt i eget hjem.
fundet noget DNA som ikke stammer
man laver en DNA – profil.
Læreren er blevet skudt i hovedet
fra læreren selv.
Materialeliste kan findes på næste
med to riffelskud. På gerningsstedet
er der fundet nogle fingeraftryk og
nogle tøjfibre.
Det viser sig i imidlertid at
fingreaftrykket stammer fra en anden
lærer på skolen, men at tøjfibrene
stammer fra en elev, som læreren
underviste. Politiet arbejder på at
finde flere beviser, som kan bekræfte
Det vil vise sig at DNA – profilen,
side.
bliver det afgørende spor i sagen om
’Det første man skal gøre, er at finde
den dræbte lærer.
alle materialerne frem. Så skal man
På de næste sider kan du læse om,
hvordan en DNA- profil bliver lavet
og hvordan den skal analyseres og
forstås. Detaljeret fremgangsmåde vil
være at finde.
tage fire tomme eppendorfrør og
skrive 1,2,3 og 4 på dem, så man kan
skelne dem fra hinanden. Rørene
placeres i en skumplastholder. Først
kommer man 10 µl RXN – puffer i
hvert af de fire tomme rør, efter at
hvem af de to mistænkte, der er
man har banket røret med RXN –
gerningsmanden.
puffer ned i bordet, så man er sikker
på at det hele ligger i bunden af røret.
I DETTE NUMMER
Detaljeret fremgangsmåde og materialeliste til fremstilling af en DNA- profil.
RXN – puffer fremmer enzymernes
virkning, så processen går hurtigere.
Så fulgte vi skemaet bagerst i vores
forsøgsvejledning og kom først 15 µl
På billedet ses en lidt forenklet udgave af en DNA – profil, men ellers er den magen
DNA fra mistænkte 1 (person A) i de
til dem politiet bruger.
to første rør (1&2) og bagefter kom vi
15 µl DNA fra mistænkte 2 (person
B) i de to sidste rør (3&4). I
Lorem Ipsum
MATERIALER

Vandbad 37 C

Vandbad 60 C

Isterninger

Agar

Måleglas og tragt til agar

Elektroforesepuffer

Måleglas til elektroforesepuffer

Elektroforeseapparat

Strømforsyning

DNA-farve

Bakker til DNA-farvning
RXN – puffer fremmer enzymernes
Først tager man gelkammeret og
virkning, så processen går hurtigere.
lukker hver af enderne med
Så kommer man først 15 µl DNA fra
malertape og derefter kommer man
mistænkte 1 (i dette tilfælde eleven) i
kammen i. Så tager man lidt

4 eppendorfrør
de to første rør (1&2) og bagefter 15
flydende agar med en pipette og

1 rør GS 1
µl DNA fra mistænkte 2 ( her er det
kommer rundt langs siderne for at

1 rør GS 2
læreren) i de to sidste rør (3&4). I
lukke eventuelle udgange. Efter det

1 rør DNA 1 (fra person A)
forbindelse med pipetring af DNA er
tager man 40 ml agar og hælder ned i

1 rør DNA 2 (fra Person B)
det vigtigt at man skifter pipettespids
gelkammeret, og så lader man

1 rør markør
efter hver afpipetering, så ikke man
massen størkne i ca. 20 minutter.

1 rør RXN puffer
får blandet DNA’et sammen. Efter
Når DNA – blandingerne har stået i

det tager man 15 µl af enzym 1 og
ca. 45 minutter tages de op og så
1 rør enzym 1 på is
1 rør enzym 2 på is
kommer ned i rør 1 og 3 og 15 µl af
kommer man 5 µl loading opløsning

(LO) i hvert rør for at stoppe

enzym 2 og kommer ned i rør 2 og 4.
1 rør loading-opløsning (LO)
Enzymerne er dem der klipper
enzymernes reaktion. Loading

Krus med is
DNA’et i små stykker. Når man har
opløsningen er blå, og det betyder at

Skumplastholder til
gjort det knipser man lidt på rørene,
man kan se hvornår man skal stoppe
eppendorfrør
så det hele blandes og efterfølgende
elektroforesen, for den blå farve går

Pipetter til 5, 10, 15 og 40 µl
lukker man rørene. Så sætter man de
nemmere gennem gelen end DNA

Pipettespidser
4 rør med blandinger i ned i et 37
gør, så når den blå farve når ned mod

Affaldsstativ
grader varmt vandbad, så enzymerne
den anden ende, er det tid til at

Gelkammer med kam
kan arbejde under de vilkår de
slukke. Når man har gjort det,

arbejder bedst i - så går det hurtigst.
kommer man sin gel op i
Markørpen
Der skal de stå i ca. 45 minutter.
elektroforesen, sådan at ’hullerne’
Mens at rørene står i vandbadet skal
vender mod den negative pol. Efter
man lave gelen, som skal bruges til
det fylder man elektroforesepuffer
elektroforesen.
ned i karret. Elektroforesepuffer
optager en hydron (H+ ) fra DNA’et,
3
sådan at det bliver lidt negativt ladet. Så kommer man 20 µl af hver opløsning i
hullerne, som vist i skemaet under.
Brønd
1
2
3
4
5
6
7
8
Markør
GS1
GS2
1
2
3
4
markør
nr.
Prøve
Markøren viser, om DNA’et er vandret mod den positive pol, som den skal. Så
sætter man 135 V over gelen og lader den stå i ca. 30 minutter. Når elektroforesen er færdig, tager man gelkammeret op og skubber forsigtigt gelen over i
en plastbakke, hvor den skal farves. Så tager man handsker på og lægger den blå
side af et DNA-farvekort på gelen. Man tager et par fingre og glatter kortet ud på
hele gelen. Farven vil trænge ned til DNA’et og farve det, så man kan se hvordan
båndene lægger sig, og det skal man vide til analysen. Gelen skal stå med farven
på i ca. 10 minutter og så skal den ’skylles’ med destilleret vand.
rutrufermentum sagittis, libero leo mollis libero, eget facilisis mauris neque
vitae nisi. Mauris odio nunc, dapibus non ornare et, feugiat nec dolor.
Curabitur nec tortor risus. Ut fringilla, massa eu sodales blandit, lorem nulla
lobortis sem, vel accumsan leo turpis eget metus.
In justo nulla, elementum non convallis at, venenatis interdum arcu.
Pellentesque habitant morbi tristique senectus et netus et malesuada fames ac
turpis egestas. Phasellus in sem erat, et rhoncus purus. Cras dapibus dolor vel
tortor molestie vulputate. Sed nec placerat odio. Mauris est nisi, rhoncus sed
tincidunt sit amet, semper ut sapien. Vestibulum interdum purus in orci
Analyse af DNA-profil
bibendum sit amet pretium nulla sodales.
Når man kigger på DNA rækkerne fra gerningsstedet (række to og tre) kan man
Pellentesque scelerisque ullamcorper adipiscing. Phasellus sed suscipit justo.
se at der i række tre er et DNA stykke der ligger længere oppe end de andre. I
Aenean venenatis lectus sed nisl pellentesque porta.
række syv kan man ligeledes se, at der også ligger et stykke DNA højere oppe
Vestibulum
lectusNår
magna,
nec blandit
Nam
scelerisque
nec
end de andrenec
stykker.
man kigger
på denlacus.
nederste
DNA
– profil påaugue
billedet
mi
bibendum.
consectetur,
lorem
nonsyv.
rhoncus
kanelementum
man se at række
to og treQuisque
er identiske
med række
seks og
Det betyder at
porttitor,
tortor nulla consectetur
quam,
interdum
sapien
vi
har en gerningsmand.
Gerningsmanden
hara samme
DNA,
somturpis
det dersed
er
risus.
ante ipsum
faucibus
luctus et
fundetVestibulum
på gerningsstedet.
Rækkeprimis
fire oginfem
er heltorci
anderledes
endultrices
to og tre, og
posuere
Curae;
sodales,
nisl sit amet aliquam eleifend, nulla
derfor kancubilia
det ikke
være Integer
eleven, der
er gerningsmanden.
elit adipiscing ligula, consectetur facilisis lacus felis quis dolor.
Man kan ud fra DNA – profilen konkludere, at det er læreren der er
Cras
vehicula malesuada
fermentum.
laciniabevis.
felis interdum risus
gerningsmanden,
og det blev
hermed detNulla
afgørende
interdum tincidunt. Mauris condimentum dignissim ligula, id eleifend ante
mollis et. Nulla blandit, augue sed viverra rhoncus, eros nulla blandit nisl,
PCR – maskinen
Når man finder DNA på et gerningssted
finder man ofte kun en lille smule og det
er ikke nok til at lave en DNA- profil.
Man kan bruge en PCR – maskine til at
forstørre mængden af DNA op.
Processen består af 3 trin.
Først bliver DNA’et varmet op til ca. 90
grader, så hydrogenbindingerne mellem
baserne forsvinder. DNA – stigen bliver
delt i to ’kamme’.
Så bliver DNA’et nedkølet til 55 grader,
og primerne kommer på. Primere er små
stykker af RNA, som fortæller, at her skal
replikationen starte.
I det tredje trin bliver DNA’et igen
opvarmet, men denne gang til 72 grader.
Nu vil Taq polymerase sørge for at
nukleotiderne, som er baser, bliver sat
rigtigt på.
Primere og nukleotider er noget, man
selv skal putte ned i maskinen. Der skal
mange nukleotider til.
Replikationen gentages til man har nok
DNA.