Norovirustartunnat ja niiden estäminen

Norovirustartunnat ja niiden estäminen
Hoitoon liittyvät infektiot ja
sairaalahygienia ilman rajoja
22.9.2015
Maria Rönnqvist, Evira/Helsingin yliopisto
Esityksen aiheita
• Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä
• Noroviruksen siirtymiskokeet
• Noroviruksen tuhoutuminen pinnoilta UV säteilyn
avulla
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Norovirus on tehokas leviämään
• Matala infektiivinen annos
• Korkea pitoisuus virusta oireilevien ulosteessa ja
oksennuksessa
• Pitkä viruksen eritysaika, jopa 8 vk ”perusterveillä”
• Tartunnan saaneet voivat olla oireettomia
• Kestävä ympäristössä
• Leviää useita reittejä pitkin (feko-oraalisesti)
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen leviämisreitit
Ympäristön
pinnat
Mathijs ym. 2012
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä
1. Pintanäytteenottomenetelmän kehittäminen
norovirukselle
2. Noroviruksen esiintymisen selvittäminen
A. Tiloissa, joissa epäily noroviruksen
aiheuttamasta epidemiasta
B. Tiloissa, joissa ei ole (tiedossa) käynnissä
olevaa norovirusepidemiaa
I.
Ravintolat
II. Elintarviketeollisuuden tilat
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä
Pintanäytteenottomenetelmän kehittäminen
 Norovirus lisättiin pisaroina tutkittavalle pinnalle ja
pisaroiden annettiin kuivua
 Näyte otettiin hankaamalla pintaa kostutetulla
näytteenottovälineellä (näytteenottotikku tai liina)
MK
D
Maria Rönnqvist
22.9.2015
P
Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä
 Virus irrotettiin näytteenottovälineestä
puskuriliuokseen
 Puskuriliuoksesta eristettiin viruksen perimä
 Viruksen läsnäolo osoitettiin reaaliaikaisella
käänteiskopiointi-PCR:llä
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä
Tulokset
Saanto: pinnan pyyhkimisen jälkeen
näytteenottovälineestä osoitettu virusmäärä
suhteessa pinnalle alun perin lisättyyn virusmäärään
100
90
80
70
60
% 50
40
30
20
10
0
PBS
Glycine buffer pH 9.5
Polyesteri
Mikrokuitu
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Nukkatikku
Puuvilla
Noroviruksen esiintyminen pintanäytteissä
 Kuinka pitkään pintanäytettä voi säilyttää?
 Miten hyvin virukset selviävät pintanäytteessä
 Viileässä?
 Huoneenlämmössä?
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
Vastasivat kysymyksiin:
1. Siirtyykö norovirus käsistä suojakäsineisiin
käsineiden pukemisen aikana?
2. Siirtyykö norovirus käsin koottavaan voileipään
1.
2.
Työntekijän käsistä?
Voileivän raaka-aineesta (kurkku)?
3. Kuinka paljon käsissä pitää olla noroviruksia, jotta
yksikin virus siirtyy voileipään?
4. Kuinka moneen voileipään noroviruksia siirtyy
1.
2.
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Työntekijän käsistä?
Voileivän raaka-aineesta?
Noroviruksen siirtymiskokeet
Hiiren
norovirus:
Ihmisen
norovirus:
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
Käsineiden pukeminen:
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
Näytteenotto käsineiden pinnalta
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
Viruksen perimän puhdistaminen -> perimän osoitus
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
Noroviruksen ja hiiren noroviruksen lisääminen pinnoille:
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
1. Kurkusta otettiin kiinni vasemmalla kädellä,
veitsestä oikealla
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
2. Kurkusta leikattiin kuusi viipaletta
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
3. Viipaleet aseteltiin ”leivän” päälle oikealla kädellä
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
4. Avustaja otti pintanäytteet puskuriliuokseen
kastetulla polyesteritikulla -> perimän osoitus
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
Virus
Viruksen
siirtyminen
Siirtynyt määrä %, KA
Vasen
3/3
1.5
60
Oikea
3/3
2.6
60
Vasen
1/3
0.0
60
Oikea
3/3
0.1
Ihmisen
0
Vasen
3/3
11.4
norovirus
0
Oikea
2/3
2.1
60
Vasen
3/3
0.1
60
Oikea
2/3
0.1
0
Vasen
3/3
32.4
0
Oikea
3/3
8.7
60
Vasen
3/3
3.6
60
Oikea
2/3
0.2
Hiiren norovirus
Maria Rönnqvist
22.1.2015
Käsi
Kuivaus
min
Tutkittu
käsi
60
Noroviruksen siirtymiskokeet
2,4 %, 1,2 %, 1,1 % (3/3)
~106 hiiren noroviruspartikkelia
0,06 % (1/3)
0,2 %, 0,3 % (2/3)
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
11,7 %, 5,2 %, 2,2 % (3/3)
~106 hiiren noroviruspartikkelia
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
0,1 %, 0,3 %, 0,8 % (3/3)
~106 hiiren noroviruspartikkelia
0,1 %, 0,1 % (2/3)
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
MuNoV: 1.2% ± 0.6% (3/3)
HuNoV GII: 1.5% ± 1.9% (3/3)
MuNoV: 0.7% ± 0.5% (3/3)
HuNoV GII: 0.5% ± 0.4% (3/3)
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen siirtymiskokeet
• Norovirus levisi herkästi
työntekijän käsineiden
välityksellä
• Virus levisi
kontaminoituneesta raakaaineesta vain pistemäisesti
• Noin 1000 virusta käsissä
voisi riittää monen
voileipäannoksen
kontaminoitumiseen
Antti Mikkelä, Evira
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Noroviruksen esiintymisen selvittäminen
A. Tiloissa, joissa epäily noroviruksen
aiheuttamasta epidemiasta
B. Tiloissa, joissa ei ollut (tiedossa) käynnissä
olevaa norovirusepidemiaa
I.
Ravintolat
II. Elintarviketeollisuuden tilat
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Tilat, joissa ei epäilyä noroviruksen
aiheuttamasta epidemiasta
I. Ravintolat
 Näytteenotto maalis-huhtikuussa 2012 kolmesta
ravintolasta ja niiden läheisyydessä olevista yleisöWC tiloista
 Yhteensä 256 näytettä neljällä
näytteenottokerralla
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Aho ym. 2013
Tilat joissa ei epäilyä
Paljon positiivisia –sittenkin epidemia käynnissä?
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Aho ym. 2013
Tilat joissa ei epäilyä
II. Elintarviketeollisuuden tilat
 Näytteitä otettiin sellaisenaan syötäviä
elintarvikkeita valmistavien yritysten linjastoista ja
taukotiloista
 Yksittäiset näytteenottokerrat
 Vuoden seurantatutkimus
 Vuoden seurantatutkimuksen aikana yritysten työntekijät
täyttivät puolen vuoden välein kyselylomakkeen, jossa
kysyttiin työntekijöiden vatsatautisairastumisista
Maria Rönnqvist
22.9.2015
 Vatsataudin oireita
 Keväällä 38,9 %:lla
 Syksyllä 20,3 %:lla
 Noin 50 % vastaajista myönsi
työskennelleensä päivinä, jolloin
heillä oli ollut vatsataudin oireita
Eläinlääke-tieteellinen
tiedekunta
/
Maria
31
Rönnqvist/
Tekes
kokous
21.9.2015
Tilat joissa ei epäilyä
Näytteenotto- Linja
kerta
Taukotila
Työntekijöiden WC
Kevät 2010
3/30 (GII)
2/30 (GII)
0/30
Vuoden
seuranta
2011
0/36
4/132 (GII)
2/tammi
1/touko
1/marras
-
Kevät
2012
0/30
2/30 (GII)
4/30 (GII)
Maria Rönnqvist
22.9.2015
UV säteilyn vaikutus noroviruksiin pinnoilla
• Norovirusta esiintyy melko yleisesti ympäristön pinnoilla
 Tarvitaan tehokas menetelmä näiden virusten
tuhoamiseksi (pinnoilta ja ilmasta)
• Vahvoja kemikaaleja ei voi käyttää kaikille pinnoille
 Pintojen UV desinfiointi tavanomaisen puhdistuksen
jälkeen
• Toimiiko UV säteily norovirusten tuhoamiseen pinnoilta?
Maria Rönnqvist
22.9.2015
UV säteilyn vaikutus noroviruksiin pinnoilla
Norovirusta ei pysty viljelemään soluviljelmässä, vaan osoitus perustuu
geenimonistusmenetelmiin (PCR)
 PCR –menetelmillä voidaan saada positiivinen tulos vaikka virus ei
olisi enää infektiivinen
Näytteille pyritään kehittämään esikäsittelyjä, joiden avulla
geenimonistusmenetelmillä saadaan viljelyä vastaavia tuloksia
Maria Rönnqvist
22.9.2015
UV säteilyn vaikutus noroviruksiin
Hiiren noroviruksen reagoiminen UV
käsittelyyn lasipinnalla
5
4
3
Log
(PCR yksiköt)
Ei entsyymikäsittelyä
Entsyymikäsittely
2
1
0
UV (mJ/cm2)
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Soluviljelytulos
Lopuksi lisälukemista
 Väitöskirja:
http://www.evira.fi/files/attachments/fi/tieteellinen_tutkimus/ronn
qvist_vaitoskirja.pdf
 Suomenkielinen julkaisu:
Rönnqvist, M., Maunula, L.
Kättelitkö itsellesi noroviruksen?
Suomen Sairaalahygienialehti 2015: nro 2, s. 80-84.
Maria Rönnqvist
22.9.2015
Kiitokset
Helsingin yliopisto
Tekes hanke, Virushallinta
Leena Maunula
Elina Aho
Kirsi Söderberg
Carl-Henrik von Bonsdorff
EVIRA:
Pirkko Tuominen, Jukka Ranta,
Antti Mikkelä
Mari Nevas
VTT:
Marjaana Rättö, Satu Salo,
Hanna Miettinen, IrinaTsitko
TEKES
Helsingin ympäristökeskus
Yhteistyöyritykset
Rahoittajat
Maria Rönnqvist
22.9.2015