Bli kjent med begreper Kirsten Midtbøen Olsen
Transcription
Bli kjent med begreper Kirsten Midtbøen Olsen
04.02.2015 Kromatografi Kirsten M Olsen Avdeling for rusmiddelforskning og metodeutvikling Folkehelseintituttet Kromatografi benyttes til: Først og fremst til å separere stoffer fra hverandre ved at de vandrer med forskjellig hastighet i et system med en mobil‐ og en stasjonær fase. Et stoff veksler mellom å være I mobilfasen og bundet tilsatsjonærfasen. Kvalitativ identifisering: Sammenligne stoffenes retensjonstider med kjente standarder. Kvantitativ bestemmelse v.h.a. kalibreringskurver 1 04.02.2015 Kromatografiske metoder • Kromatografisk separasjon – – – – Gasskromatografi Væskekromatografi Tynnsjiktskromatografi Papirkromatografi 2 04.02.2015 3 04.02.2015 Kromatogram. • BAC1 • Retensjonstid: • • • • Metanol: 0,9 min Etanol: 1,2 min Aceton: 1,7 min N‐propanol: 1,9 min • Relativ Retensjonstid • • • Metanol: 0,9/1,9 = 0,474 Etanol: 1,2/1,9 = 0,632 Aceton: 1,7/1,9 = 0,895 Viser prinsippet av en TLC‐ separasjon • 4 04.02.2015 • Gasskromatografi Vanligvis helium GC-kolonne = 15-30 meter lang 9 • Væskekromatografi LC-kolonne = 2-30 centimeter lang 10 5 04.02.2015 Kromatografiske metoder • Detektorer FID NPD UV Fluoresens Massespektrometri TOF Prinsipp for MS • Danner og analyserer ioner – stoffet ioniseres og spaltes (fragmenterer) • Analyserer i vakuum (gassfase) • Svært spesifikk teknikk veier ioner! Derav navnet massespektrometri 12 6 04.02.2015 Analyse med TOF • Gir en meget sikker identifikasjon av komponenter og baserer seg på: • Eksakt masse • Retensjonstid • Spektertreff • Isotopfordelingsmønster 7