Nyhetsavis nr 2 2015 - Oslo universitetssykehus

TEST 099
NYHETSAVIS NR. 2/2015
Juni 2015
INNHOLD:
Informasjon
ƒ
ƒ
ƒ
Åpningstider og avvikling av kveldspoliklinikk ved
prøvetakningsenheten ved endokrinologisk poliklinikk, Aker.
Det er viktig med kliniske opplysninger ved genanlyser.
Holdbarhet av prøver til analysene insulin, c-peptid og proinsulin.
Klinikk
ƒ
Analyse av steroidhormoner med LC-MS/MS.
Analysenytt
ƒ Ny kvantifiseringsgrense for testosteron fra 16/6-2015.
ƒ Ny metode for bestemmelse av 11-deoksikortisol i serum fra 13/4-2015.
ƒ Ny metode for bestemmelse av deoksikortikosteron (DOC) i serum fra
27/5-2015.
ƒ Ny metode for bestemmelse av østradiol i serum fra 27/3-2015.
ƒ Ny analyse for undersøkelse av 3-beta-hydroksisteroid dehydrogenase
type II mangel fra 30/4-2015.
Oppdatert oversikt over akkrediterte analyser foreligger på:
http://www.hormonlaboratoriet.no/maleusikkerhet
Hormonlaboratoriet
Klinikk for diagnostikk og intervensjon – MBK
Oslo universitetssykehus, Aker
1
INFORMASJON
Åpningstider og avvikling av kveldspoliklinikk ved
prøvetakningsenheten ved endokrinologisk poliklinikk, Aker.
1. Åpningstider sommer 2015:
Laboratoriet og poliklinikken i bygg 98 holder stengt uke 29 ( fra 13. til 19. juli).
De øvrige ukene holdes vanlig åpningstid som er mandag til torsdag 07.30-14.30 og
fredager fra 07.30-14.00. Telefontid: kl.0800-1130 og 1300-1500.
2. Kveldspoliklinikk avvikles:
Fra 30. juni 2015 (uke 27) vil det ikke lenger være mulighet for å ta spesielle
endokrinologiske prøver på tirsdagskveldene. Dette gjelder i hovedsak kortisol og
ACTH. I Oslo området holder Fürst medisinsk Laboratorium kveldsåpent fra 10.
august (uke 33): Fürst Majorstua til kl 20 tirsdager og Fürst Furuset til kl 20 på
onsdager, og er behjelpelige med å ta kveldsprøver. Det er ønskelig med
timebestilling og aktuelle pasienter kan ringe 22 90 96 00 for dette.
Det er viktig med kliniske opplysninger ved genanlyser.
Gensekvensering er kostbare og tidkrevende analyser. Det bes om at rekvirenten
oppgir kliniske opplysninger ved rekvirering da Hormonlaboratoriets leger vurderer
indikasjonen for gentesten. Spesielt opplysninger om slektninger med samme tilstand
er nyttig. Tidkrevende innhenting av relevant klinisk informasjon forsinker svartiden.
Det må gis opplysninger fra rekvirenten om hvorvidt den aktuelle testen utføres i
diagnostisk eller prediktiv hensikt. Bioteknologiloven krever genetisk veiledning ved
prediktiv testing.
Holdbarhet av prøver til analysene insulin, c-peptid og proinsulin.
Hormonlaboratoriet har den siste tiden undersøkt holdbarheten av analyttene insulin,
c-peptid og proinsulin. Konsentrasjonen av insulin, c-peptid og proinsulin synker fort
ved henstand i gelglass ved romtemperatur.
Vi anbefaler derfor å avpipettere serum etter sentrifugering.
Dersom forsendelse av serum ikke skjer samme dag, må prøven oppbevares kjølig
før forsendelse.
KLINIKK
Analyse av steroidhormoner med LC-MS/MS
Hormonlaboratoriet har overført total 5 rutineanalyser av steroidhormoner (17-OHprogesteron,
testosteron,
androstendion,
11-deoksikortisol
og
11deoksikortikosteron) til LC-MS/MS metodikk.
2
Prøve
Dataoppsamling
LC
MS
LC-MS/MS står for væskekromatografi – tandem massespektrometri. Dette er en
teknikk der analytter i en blanding (prøven) blir separert på en kolonne og deretter
detektert som ladete molekyler. Man utnytter analyttens vekt og ladning i deteksjonen
og metoden er derfor svært spesifikk. LC-MS/MS kan settes opp som en multikomponent metode, der flere aktuelle analytter bestemmes fra en og samme prøve.
Analyse av steroidhormoner er en slik multi-komponent metode, og fra et prøvevolum
på 0,7 ml vil man kunne få svar på 13 forskjellige steroidhormoner. Det betyr at
dersom man ønsker svar på 17-OH-progesteron, androstendion og testosteron, så
holder det med én prøve på 0,7 ml.
Tre av de 13 steroidhormonene er ”nye” analytter: 18-hydroksikortikosteron, kortison
og 21-deoksikortisol. Hormonlaboratoriet har ikke hatt metoder for påvisning av disse
tidligere.
For tre av de 13 steroidhormonene (DHEA, DHT, 17-hydroksipregnenolon) er ikke
metoden helt ferdig utviklet.
Vi jobber nå med å endre vår måte å se på svar på, fra enkeltsvar til et mer helhetlig
bilde. I en senere utgave av nyhetsavisen vil vi følge opp med noen eksempler på
prøvesvar der vi har vurdert flere analytter fra binyrer i sammenheng.
I framtiden vil vi derfor tilby rekvirering av enkeltanalyser (utredning og oppfølging
med en markør) eller paneler (til utredning av f. eks. binyrecancer).
ANALYSENYTT
Ny kvantifiseringsgrense for testosteron fra 16/6-2015.
Kvantifiseringsgrensen for testosteron (analyseres med LC-MS/MS) er endret fra 0,2
nmol/l til 0,1 nmol/l.
Ny metode for bestemmelse av 11-deoksikortisol i serum fra 13/42105.
Ny metode er væskekromatografi-tandem massespektrometri (LC-MS/MS). Bruk av
LC-MS/MS til kvantifisering av steroider er mer fleksibelt, spesifikt og som regel mer
sensitivt enn immunoassays, samt at flere steroider kan påvises fra en enkelt
prøveinjeksjon.
3
11-deoksikortisol separeres fra andre steroidhormoner og eventuelle interferenser
med omvendt-fase kromatografi. Deteksjon med elektrospray-MS/MS.
Forventede verdier:
Barn (1-18 år): <2,3 nmol/l
Voksne (> 18 år): <3,2 nmol/l
Barn < 1år kan ha 11-deoksikortisol konsentrasjon opp mot 5,3 nmol/l.
Prøvemateriale:
0,7 ml serum.
Korrelasjon mot tidligere metode: r = 0,88
Regresjon mot tidligere metode: Y(LC-MS/MS) = 0,7 X(RIA) – 0,6
Total analytisk variasjon:
CV% = 5,3% (0,6 nmol/l); CV% =7,0% (2,2 nmol/l)
Funksjonell sensitivitet:
0,3 nmol/l
Ny metode for bestemmelse av deoksikortikosteron (DOC) i serum
fra 27/5-2015.
Ny metode er væskekromatografi-tandem massespektrometri (LC-MS/MS). Bruk av
LC-MS/MS til kvantifisering av steroider er mer fleksibelt, spesifikt og som regel mer
sensitivt enn immunoassays, samt at flere steroider kan påvises fra en enkelt
prøveinjeksjon.
Deoksikortikosteron (DOC) separeres fra andre steroidhormoner og eventuelle
interferenser med omvendt-fase kromatografi. Deteksjon med elektrospray-MS/MS.
Forventede verdier:
Menn og kvinner: <0,41 nmol/l
Barn <1år kan ha høyere DOC-konsentrasjon
Prøvemateriale:
0,7 ml serum.
Korrelasjon mot tidligere metode: r = 0,84
Regresjon mot tidligere metode: Y(LC-MS/MS) = 0,94 X(RIA) – 0,07
Total analytisk variasjon:
CV% = 19% (0,1 nmol/l); CV% =17% (1,4 nmol/l)
Funksjonell sensitivitet:
0,07 nmol/l
Ny metode for bestemmelse av østradiol i serum fra 27/3-2015.
Den nye metoden er en kompetitiv kjemiluminesens immunoassay (CLIA) som
utføres på Liaison analysemaskin fra DiaSorin Inc.
4
Klinisk relevans:
Hos kvinner: Utredning av menstruasjonsforstyrrelser.
Hos menn: Utredning av gynekomasti.
Prøvemateriale:
0,5 ml serum.
Regresjon og korrelasjon mot tidligere metode:
y(Liaison) = 0,92X (Immulite) – 0,02
r = 0,95
Total assay variasjon:
CV% < 11 for konsentrasjoner ≥ 0,13 nmol/l
Funksjonell sensitivitet:
0,06 nmol/l
Antiserum kryssreaksjon:
- 17 α- Østradiol
- 17 β-Østradiol 3-benzoate
- 17 β-Østradiol 17-propionate
- 11 hydroksi-østradiol
- 4 hydroksi-østradiol
- Østron
- Østriol
- Progesterone
- 17-hydroksi-progesterone
- Testosteron
- Androstendion
- Kortisol
- DHEA
- Aldosterone
- 11-deoksikortisol
- Clomiphene
- Tamoxifen
≤ 0,17%
≤ 1,4%
≤ 0,62%
≤ 1,8%
≤ 12,3%
≤ 1,4%
≤ 0,15%
ikke målbar
ikke målbar
ikke målbar
ikke målbar
ikke målbar
ikke målbar
ikke målbar
ikke målbar
ikke målbar
ikke målbar
For fullstendig liste over kryssreaksjoner testet av produsent se lenke:
http://www.oslo-universitetssykehus.no/omoss_/avdelinger_/hormonlaboratoriet_/analyser_/Sider/ostradiol-i-serum-e2.aspx
Referanseområde:
Menn >16 år:
Kvinner 12 - 49 år:
Follikkelfase:
Midtsyklisk topp:
Lutealfase:
Kvinner ≥ 50 år:
Postmenopausalt:
0,06 - 0,14 nmol/l
0,09 - 0,21 nmol/l
0,43 - 2,20 nmol/l
0,27 - 1,05 nmol/l
<0,12 nmol/l
Ny analyse for undersøkelse av 3-beta-hydroksisteroid
dehydrogenase type II mangel fra 30/4-2015.
På forespørsel har Hormonlaboratoriet satt opp sekvensering av HSD3B2-genet for
undersøkelse av 3-beta-hydroksisteroid dehydrogenase type II mangel.
5
Gen:HSD3B2, hydroksi-delta-5-steroid dehydrogenase, 3 beta- og steroid deltaisomerase 2 locus 1p12.
Inaktiverende mutasjoner i exon 1-4 med UTR og intron-exon overganger
undersøkes.
Mutasjon i HSD3B2 er en autosomal recessiv tilstand som gir en sjelden form (110%) av kongenital adrenal hyperplasi (CAH). Alle heterozygote bærere av
mutasjoner i HSD3B2 er asymptomatiske.
Genet utrykkes hovedsakelig i binyrer og gonader. 3-beta-hydroksisteroid
dehydrogenase omdanner Pregnenolon,17α(OH)-pregnenolon, DHEA og
Androstendion til Progesteron, 17α(OH)-progesteron, Androstenedion og
Testosteron.
Lutfallah C et al J Clin Endocrinol Metab. 2002 Jun;87(6):2611-22 har ved ACTH
stimulering av genotype-normale pasienter funnet at følgende hormon-kriterier
utelukker 3-beta HSD mangel:
Barn med prematur pubarke:
17α(OH)-pregnenolon ≤ 72 nmol/l
= <11 SD over gjennomsnittlig normalnivå.
17α(OH)-pregnenolon/ Kortisol-ratio ≤ 67 = < 5 SD over gjennomsnittlig normalratio.
Simard et al Endocrine Reviews, June 2005, 26(4):525-582 angir ACTH stimulert
17α(OH)-pregnenolon ≥ 100 nmol/l som kriterium for diagnose av 3-beta
hydroksisteroid dehydrogenase mangel.
Det er ved sekvensering av HSD3B2 hittil ikke vært bekreftet late-onset (ikke-klassisk
form) for 3-beta-hydroksisteroid dehydrogenase mangel.
Hormonlaboratoriet tilbyr også sekvensering av Cyp11B1 og Cyp17A1 for utredning
av 11- beta-hydroksilasemangel og 17-alfa-hydroksilasesvikt som er andre sjeldne
årsaker til kongenital adrenal hyperplasi.
Nyheter fra forskningen
Publikasjoner siden sist
ƒ
Aass C, Norheim I, Eriksen EF, Thorsby PM, Pepaj M (2015). Single unit filter-aided
method for fast proteomic analysis of tear fluid. Anal Biochem. 480:1-5.
Postadresse: Hormonlaboratoriet, Oslo universitetssykehus HF, Postboks 4959
Nydalen, 0424 Oslo.
Gateadresse: Bygg 23, Aker sykehus, Trondheimsveien 235
Telefon: 22 89 47 08, Telefaks: 22 15 87 96
E-post: [email protected] Internett: http://www.hormonlaboratoriet.no
Klinikk for diagnostikk og intervensjon – MBK
Oslo universitetssykehus, Aker
6