PN-Scoring

PN-Scoring
Dipl. Biol. Martin Greuner
IVF - SAAR
GMP Happel - Thaele - Happel
Kaiserstrasse 5-7
D-66111 Saarbrücken
MG01
AKQM 0300Th
1
IVF/ICSI-Programm
Mit ein entscheidender Faktor für den Erfolg einer IVF/ICSI-Behandlung
ist die Qualität der transferierten Embryonen
Das Embryonenschutzgesetz
§1 Abs.1 Nr.3, 5
Mit Freiheitsstrafe bis zu drei Jahren oder mit Geldstrafe wird bestraft, wer
3. es unternimmt, innerhalb eines Zyklus mehr als drei Embryonen auf
eine Frau zu übertragen,
5. es unternimmt, mehr Eizellen einer Frau zu befruchten, als ihr innerhalb
eines Zyklus übertragen werden sollen,
MG02
AKQM 0300Th
IVF-SAAR
2
Befruchtungskaskade
Was bedeutet Befruchtung
•Eizelle; arretierten Metaphase der 2. Reifeteilung
•Spermium
•biochemische Aktivierung der Eizelle; Abschluß der 2. Meioseteilung
•Pronukleusbildung des maternalen und paternalen Vorkerns
•18-20 Stunden Pronukleusbildung IVF-SAAR
abgeschlossen
•Nächsten 6 Stunden (S-Phase), identische Reduplizierung der haploiden
Chromosomensätze jedes Pronukleus, nach Auflösung der Vorkernmembranen;
Abschluß der Befruchtungskaskade
•Nach deutscher Gesetzgebung wird der Zeitpunkt, zu dem der Schutz der
Menschenwürde anzuwenden ist, mit dem Abschluß der Befruchtung
gleichgesetzt
•Auswahl der zu transferierenden, einzufrierenden und zu vernichtenden
Zellen im Pronukleusstadium
MG03
AKQM 0300Th
IVF-SAAR
3
Was bedeutet Befruchtung
•Reife Eizelle
•Spermium
IVF-SAAR
•Pronukleusbildung des maternalen und paternalen Vorkerns ; nach 18-20h abgeschlossen
MG04
AKQM 0300Th
IVF-SAAR
4
Multicenterstudie
Kann unter Berücksichtigung der Morphologie der Vorkerne eine Prognose
für den Eintritt einer Schwangerschaft abgegeben werden?
Grundlage: PN-Beurteilung von Tesarik & Greco (Hum.
Reprod. 14, 1318-1323)
Einteilung Aufgrund der Anordnung der Nucleoli
0A
0B
PN-Pattern 0 =
hohes Entwicklungspotential
> 7 Nucleoli = nicht polarisiert
< 7 Nucleoli = polarisiert
nicht weniger als 3 Nucleoli
PN-Pattern 1-5 =
geringes Entwicklungspotential
Pronuclei unterschiedlich
asynchrone Entwicklung
MG05
AKQM 0300Th
IVF-SAAR
5
Multicenterstudie
Vorkernstadien mit guter
Schwangerschaftsprognose
Vorkernstadien mit schlechter
Schwangerschaftsprognose
PN-Scoring
MG06
AKQM 0300Th
IVF-SAAR
6
Multicenterstudie
Teilnehmende Centren
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
MG07
Universitäts-Frauenklinik Düsseldorf; PD Dr. Bielfeld, Dr. Hirchenhain
Praxis Dres. Verhoeven Scholtes Marx Düsseldorf; Dr. Marx, Dr. Weidner, Dr. Schanze
Praxis Dres. Tigges Doerner Tuchel Grevenbroich; Dr. Tigges, Dr. Herrmann
Abt. Gyn. Endokrinologie u. Reproduktionsmedizin; Prof. Dr. van der Ven, Dr. Montag
Universitäts-Frauenklinik Münster; PD Dr. Behre, Dr. Gaßner, Hr. Schepers
Zentrum f. Reproduktionsmedizin Leipzig; Dr. Hmeidan, Fr. Blumenauer, Fr. Schuster
Funktionsbereich Gyn. Endokrinologie u. Fortpflanzungsmedizin des Klinikum
Neubrandenburg; Prof. Dr. Sudik, Fr. Balko, Dr. Kissing
Abt. Gyn. Endokrinologie u. Fertilitätsstörungen der Universitäts-Frauenklink
Heidelberg; Prof. Dr. Strowitzki, Dr. Eberhardt, Dr. Seehaus
Praxis Dres. Happel Thaele Happel; Dr. Thaele, Hr. Greuner, Fr. Roth
Universitäts-Frauenklinik Freiburg; Prof. Dr. Breckwoldt, Dr. Keck, Dr. Ecke
AKQM 0300Th
IVF-SAAR
7
Multicenterstudie
Prospektive Studie mit 495 Zyklen
Alter:
Vorversuche:
Gewonnene Eizellen / Zyklus:
Vorkernstadien:
Transferrierte Embryonen / Zyklus:
Anzahl untersuchter Vorkerne:
OA: 135
OB: 351
1: 111
2: 120
3: 92
4: 47
5: 267
MG08
33.2 ± 4.2
1.6 ± 0.8
10.1 ± 6.1
5.5 ± 3.4
2.3 ± 0.6
1123
Gute Prognose:
486
Schlechte Prognose:
637
AKQM 0300Th
IVF-SAAR
8
Ergebnisse
50
40
42.3%
34.6%
30
20
26.3%
25.8%
20.7%
10
17.8%
0
O/O
1
O/X
2
3
X/X
R2
SS-Rate
R1
Impl.-rate
Signifikanzen
SS-Rate:
P<0.025 für O/O bzw. O/X versus X/X
Impl.-rate: P<0.05 für O/O versus X/X
MG09
AKQM 0300Th
IVF-SAAR
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Schlußfolgerungen *
Pattern
SS-Prognose
0A / 0B
OA: / OB: +++
1
(+)
2
-
3
(+)
4
-
5
-
•Embryonen, die sich aus Vorkernstadien mit dem Pattern OB
entwickeln zeigen die höchsten Implantationsraten (33.3%)
•Patienten, die 2 oder 3 Embryonen aus OB Vorkernstadien transferriert
bekommen, zeigen hohe Schwangerschaftsraten (43%)
*nach den Ergebnissen unserer prospektiven Multizenterstudie
MG10
AKQM 0300Th
IVF-SAAR
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Das PN-Scoring ist eine Momentaufnahme in einem fließenden Prozeß
und zeigt die Schnelligkeit und damit das Entwicklungspotential der Zelle
Parallele Entwicklung der Vorkerne
und des Cytoplasmas
Anlagerung der Vorkerne
Anordnung der Chromosomen an der
Metaphaseplatte
Auflösung der Vorkernmembran
Zellteilung
MG11
AKQM 0300Th
11
Zusammenfassung
•PN-Scoring korreliert mit den Schwangerschaftsraten
•Anhand des PN-Scores sind die Vorkernstadien mit einem hohen
Entwicklungspotentials auswählbar
Bei mehreren Zyklen ohne Schwangerschaft trotz positivem
PN-Score, ev. Therapieunterstützung durch:
•Immuntherapie (Endobulin)
•Assisted hatching
_______________________________________________
Literatur: Höchste Schwangerschaftsraten
Selektion nach:
1.Vorkernstadien
2.Blastocysten mit anschließendem Blastocystentransfer
MG12
AKQM 0300Th
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