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TALLER DE ENZIMAS 1. Qué son las enzimas? 2. Realice un esquema general de su estructura y señale los sitios importantes que presentan las enzimas. Además, escribe la ecuación general de la reacción enzimática. 3. ¿Qué es una holoenzima? Y represente por medio de un esquema como está conformada. 4. ¿Cuáles son las características principales de las enzimas? En qué consiste cada una de ellas. 5. Señale en cuantas clases se clasifican las enzimas. 6-. Explique brevemente en que consiste una enzima alostérica y enzimas moduladas covalentemente. 7-. Que son los zimógenos. 8. Grafique y explique cómo afectan la actividad enzimática el pH, la temperatura y la concentración de la enzima. 9. Defina: qué es Km? Y explique que representa un valor de Km alto y un valor de Km bajo. 10. En la grafica de Michaelis-Menten señale: la velocidad máxima y el valor de Km. 11. Defina: qué son los inhibidores? y como se clasifican. 12. Indique cuales son los tipos de inhibición reversible, y grafique que ocurre con los parámetros enzimáticos (Vmáx y Km) en presencia y ausencia del inhibidor según Michaelis-Menten y Lineweaver-Burk para cada tipo de inhibición. 13. Los siguientes datos experimentales fueron obtenidos a partir de un estudio de la actividad catalítica de la Fosfoglucosa isomerasa con la glucosa-6-fosfato para formar frutosa-6-fostato en la célula. Concentración [S] (mM) 2.10-5 3.10-5 4.10-5 5.10-5 7.10-5 8.10-5 1.10-6 4.10-6 7.10-6 9.10-6 Vo (µmoles/min) Con inhibidor Sin inhibidor 10,5 15,4 14,8 20,0 18,1 24,0 20,0 31,2 25,8 36,5 31,1 39,2 35,5 40,0 38,2 40,0 40,0 40,0 40,0 40,0 a.- Indique el nombre de la enzima y el nombre del sustrato que participaron en la reacción enzimática estudiada. Escriba la ecuación que define la reacción. b. De la inspección de los datos numéricos, deduzca la velocidad máxima de la reacción y el valor de Km. c. Cuál es la naturaleza del inhibidor. ¿Por qué? 14. Si la reacción enzimática tiene una velocidad máxima de 46,0 mol/s a una concentración de sustrato de 7 M. Explique que variación tiene la misma si se aumenta la concentración de sustrato a 7,5. 15. Para estudiar la velocidad de una reacción enzimática en función de la concentración de sustrato, se prepararon series de incubaciones con diferentes concentraciones de sustrato y una cantidad constante de enzima, habiéndose determinado previamente las condiciones óptimas de reacción. Así fueron obtenidos los siguientes datos experimentales: Concentración de sustrato (mM) 0,05 0,08 0,12 0,20 0,30 0,40 0,50 0,60 0,70 Velocidad inicial (µmoles/min) 15,4 20,0 24,0 31,2 36,5 39,2 40,0 40,0 40,0 a. De la inspección de los datos numéricos, deduzca la velocidad máxima de la reacción y el valor de Km. b. ¿Cuál será la concentración de la enzima libre a una concentración de 0,8 mM del sustrato? c. Si la concentración de la enzima en la mezcla de reacción se incrementa al doble. ¿Cómo de varía la Vmax? 16. Con los datos obtenidos, en forma experimental, al estudiar el efecto de la concentración de (H2O2) sobre la actividad de la enzima catalasa, realice los cálculos o procedimientos correspondientes para determinar el valor de Km y Vmáx. Fiola 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 [S]=[H2O2] en mg/30 ml PM H2O2= 34 KMnO4=0,05 Mc H2O2 H2O KMnO4 H2O2(mmolc) [S]=[H2O2] en V 1/[S] (ml) (ml) (ml) mg/30 ml 2 8 22,8 2 8 3,0 4 6 45,0 4 6 9,7 6 4 66,2 6 4 20,3 8 2 90,3 8 2 35,0 10 0 113,4 10 0 53,5 1/V