principes generaux de l`analyse microbiologique des aliments

FICHE MILIEU DE
CULTURE
GELOSE DL (Desoxycholate Lactose)
Le milieu DL est à la fois :
o Un milieu sélectif des Enterobactéries (bacille Gram -)
o Un milieu différentiel (mise en évidence de l’utilisation de lactose)
Il est préférentiellement utilisé pour la mise en évidence des coliformes (bacilles gram -, fermentant le lactose avec
production de gaz).
I- COMPOSITION ET ROLE DES CONSTITUANTS
Constituants
Peptone trypsique de viande (10 g)
Lactose (10 g)
Désoxycholate de sodium (0,5 g)
Citrate de sodium (2 g)
Chlorure de sodium (5 g)
Rouge neutre (0,03 g)
Agar (15g)
Eau qsp 1L
Rôle
Source d'azote et d’énergie
Source de carbone et d’énergie
Agent sélectif (inhibiteur des Gram +)
Agent sélectif (inhibiteur des Gram +)
Source de minéraux
Indicateur pH
Agent gélifiant
Solvant du milieu
pH= 7,1
Incubation 24h à 30°C (coliformes) ou 44°C (coliformes thermotolérants)
II- LECTURE
ETUDE DU
DEVELOPPEMENT EN
PRESENCE DE
DESOXYCHOLATE
ETUDE DE
L’UTILISATION DU
LACTOSE
OBSERVATION
INTERPRETATION
RESULTAT
Pas de développement
bactérien
Bactérie sensible à la présence
de désoxycholate
Bactéries Gram +
Développement bactérien
Bactérie résistante à la
présence de désoxycholate
Bactéries Gram –
Colonies rouge-foncé
(virage de l’indicateur
coloré)
Acidification du milieu due à
la fermentation du lactose
SUSPICION DE COLIFORMES
Colonies incolores
(pas de virage de l’indicateur
coloré)
Pas d’acidification du milieu
Bactérie LACTOSE -
Bactérie LACTOSE +
Procéder au comptage des colonies rouge-foncé de diamètre égal ou supérieur à 0,5 mm pour chaque boîte.