congrès - CRCHUM - Centre hospitalier de l`Université de Montréal

Transcription

17
e
CONGRÈS
DES ÉTUDIANTS,
STAGIAIRES ET RÉSIDENTS
Vendredi 5 décembre 2014
Centre de recherche du CHUM
Pavillon R - Amphithéâtre et Agora, 5e étage
17e CONGRÈS
DES ÉTUDIANTS, STAGIAIRES ET RÉSIDENTS
BIENVENUE!
C’est avec grand plaisir que nous vous
accueillons à ce rendez-vous scientifique.
Ce Congrès vous offre l’opportunité de présenter les résultats de vos projets de recherche et de rencontrer des chercheurs du CRCHUM de réputation internationale, dont les programmations de recherche s’inscrivent dans
un continuum allant de la recherche fondamentale à la recherche clinique
et à la santé des populations. La diversité de leurs thèmes et approches
méthodologiques illustre la qualité de la symbiose entre l’enseignement, la
recherche, la prévention et le traitement des maladies.
Ce Congrès favorise également le partage des connaissances entre les étudiants, chercheurs, professionnels de recherche et cliniciens ainsi que le
développement de nouvelles collaborations facilitées par le regroupement
des activités sur un site unique et à la fine pointe de la technologie.
Cette 17e Édition du Congrès annuel des étudiants, stagiaires et résidents du
CRCHUM se démarque par ses 13 présentations orales sélectionnées parmi
les 136 résumés soumis, ainsi que 123 présentations par affiche. Elles sont en
majeure partie issues de projets de recherche financés par des organismes
subventionnaires dotés de comités de pairs/experts.
Nous sommes très reconnaissants envers nos partenaires financiers que
sont les chefs de services et de départements ainsi que la haute direction du CHUM, de même que les institutions, organismes et compagnies
qui ont manifesté leur appartenance au CRCHUM, en participant aux prix
d’excellence.
Finalement, nous remercions sincèrement les membres du comité pédagogique et des comités d’évaluation qui, par leur compétence et dévouement, collaborent au succès du Congrès.
Dr Vincent Poitout
Pierrette Gaudreau
Directeur intérimaire
Directrice adjointe scientifique
CRCHUM
Affaires étudiantes
CRCHUM
17e CONGRÈS
PROGRAMME
VENDREDI 5 DÉCEMBRE 2014
CONFÉRENCE DE PRESTIGE
9 h
16 hJacques A. de Guise. ing. Ph. D.
Responsable de l’axe Imagerie
et ingénierie, CRCHUM
Mot de bienvenue
Pierrette Gaudreau, Ph. D.
Directrice adjointe scientifique,
Affaires étudiantes, CRCHUM
Amphithéâtre, 5e étage
SÉANCE DE PRÉSENTATIONS ORALES
« L’imagerie et l’ingénierie aux
confluences de l’innovation en
technologies de la santé »
Amphithéâtre et Agora, 5e étage
9 h
10 h 30
10 h 45
12 h 30
REMISE DES PRIX
Présentations orales
Pause-santé
Présentations orales
Lunch
PRÉSENTATIONS PAR AFFICHE
Agora, 5e étage
13 h 30 à Présentations par affiche
16 h
Évaluation des présentations
(13 h 30 à 15 h 30)
15 h
Pause-santé
17 h
Vincent Poitout, DVM, Ph. D., FCAHS
Directeur intérimaire et
directeur scientifique, CRCHUM
Remise des prix du congrès
17 h 30
Cocktail
Agora, 5e étage
17e CONGRÈS
CONFÉRENCIER DE PRESTIGE
JACQUES A. DE GUISE
La direction scientifique du
CRCHUM est fière de présenter
pour la 17e édition du Congrès
des étudiants, Jacques A. de
Guise, professeur à l’École de
technologie supérieure et responsable au CRCHUM de l’axe
Imagerie et ingénierie.
Jacques de Guise s’est illustré
en mettant au point un appareil pour décortiquer avec précision le mouvement du genou, le KneeKG ou GCG pour
graphie de la cinématique du
genou. Cet appareil permet de
prévenir, détecter et traiter les
pathologies comme l’arthrose,
les tendinites ou les blessures
au genou.
Le professeur Jacques A. de GUISE a complété un baccalauréat
en génie électrique en 1977, puis un doctorat en génie biomédical en 1984 à l’École Polytechnique de Montréal. Il a ensuite
effectué un stage postdoctoral de 1984 à 1986 au Computer
Vision and Robotics Laboratory de l’Université McGill comme
boursier du Conseil de recherche en sciences naturelles et en
génie du Canada (CRSNG). De 1986 à 1990, il a été Chercheur
boursier du CRSNG à l’Institut de génie biomédical de l’École
Polytechnique et de la Faculté de médecine de l’Université de
Montréal. En 1990, il rejoignait l’École de technologie supérieure
(ÉTS) du réseau de l’Université du Québec en tant que professeur adjoint.
Aujourd’hui professeur titulaire au Département de génie de la
production automatisée de l’ÉTS, Jacques de Guise occupe aussi
le poste de professeur associé au Département de chirurgie de
la Faculté de médecine de l’Université de Montréal. Il est titulaire
de la Chaire de recherche du Canada en imagerie 3D et ingénierie biomédicale depuis 2004, et détient également la Chaire Marie-Lou et Yves Cotrel de recherche en orthopédie de la Faculté
de médecine de l’Université de Montréal. Il a fondé et dirigé le
Laboratoire de recherche en imagerie et orthopédie (LIO),
affilié à l’ÉTS ainsi qu’aux centres de recherche du Centre
hospitalier de l’Université de Montréal (CRCHUM), du Centre
hospitalier universitaire (CHU) Sainte-Justine de Montréal et de
l’Hôpital Sacré-Cœur de Montréal.
Au sein du CRCHUM, Jacques de Guise est responsable de l’Axe
Imagerie et ingénierie et de la Plateforme d’imagerie expérimentale. Ses travaux de recherche portent sur l’imagerie et la
modélisation morpho fonctionnelle des structures biologiques,
ainsi que sur le développement de méthodes d’interventions
thérapeutiques guidées par les images et les modèles. Avec ses
collaborateurs et ses étudiants, il a publié plus de 135 articles
dans des revues scientifiques ainsi que plus de 450 conférences.
À ce jour, il a aussi contribué à 15 demandes de brevets dont six
sont actuellement homologués. Ces brevets sont licenciés à des
compagnies européennes et canadiennes œuvrant spécifiquement dans le domaine des technologies de la santé. Le professeur de Guise est membre du Club d’Excellence de l’Université
du Québec et a été nommé Fellow de l’Académie canadienne du
génie en juin 2011.
17e CONGRÈS
REMERCIEMENTS À TOUS CEUX QUI ONT CONTRIBUÉ
AU FINANCEMENT DES PRIX ET DU CONGRÈS
Centre de recherche du CHUM
Dr Vincent Poitout, directeur intérimaire et
directeur scientifique, CRCHUM
Centre de recherche du diabète de Montréal
Dr Marc Prentki, directeur
Centre hospitalier de l’Université de Montréal
M. Jacques Turgeon, directeur général
Direction de l’enseignement du CHUM
Dre Marie-Josée Dupuis, directrice
Fondation du CHUM
M. Ekram A. Rabbat, président-directeur général
Fonds de recherche du Québec – Santé (FRQS)
Dr Renaldo Battista, directeur scientifique
Institut du cancer de Montréal
Mme Maral Tersakian, directrice générale
Laboratoire de recherche en imagerie
et orthopédie (LIO)
Dr Jacques A. de Guise, directeur
SARSTEDT
Université de Montréal, Vice-décanat
à la recherche et à l’innovation scientifique
Faculté de médecine
Dr Daniel Bourbonnais, vice-doyen
LES DÉPARTEMENTS ET SERVICES DU CHUM
Biochimie
Dr François Lessard
Médecine d’urgence
Dre Emmanuelle Jourdenais
Chirurgie
Dr Patrick Harris
Microbiologie et infectiologie
Dr François Lamothe
Chirurgie cardiaque
Dr Ignacio Prieto
Neurologie
Dr Michel Panisset
Gériatrie
Dre Lucie Boucher
Obstétrique-gynécologie
Dre Marie-Josée Bédard
Hématologie-médecine transfusionnelle
Dr Harold J. Olney
Ophtalmologie
Dr Salim Lahoud
Médecine
Dr Paul Hébert
Pneumologie
Dr Charles Poirier
Médecine générale
Dre Julie Bruneau
Psychiatrie
Dr Paul Lespérance
Médecine préventive et
santé publique
Dre Marie-France Raynault
Radiologie et
médecine nucléaire
Dr Vincent Oliva
Médecine des toxicomanes
Dre Suzanne Brissette
Radio-oncologie
Dr David Roberge
17e CONGRÈS
MEMBRES DU COMITÉ PÉDAGOGIQUE DU CRCHUM
CHERCHEURS
Dre Pierrette Gaudreau, présidente
[email protected]
Dr Jean-François Cailhier
[email protected]
Dr Thierry Alquier
[email protected]
Dre Mira Johri
[email protected]
Dr Francis Rodier
[email protected]
Dr Christopher Rose
[email protected]
Dr Shaoling Zhang
[email protected]
ÉTUDIANTS
Elie Abed
Stagiaire postdoctoral, CRCHUM
[email protected]
Patrick Fournier
Étudiant de 3e cycle, CRCHUM
[email protected]
Cristina Bosoi
Étudiante de 3e cycle, CRCHUM
[email protected]
Sarah Nebbaki
[email protected]
Estelle Simo
[email protected]
ADMINISTRATION
ENSEIGNEMENT
Mme Brigitte Lespérance, M. Éd.
Directrice adjointe – administration
[email protected]
Mme Christine Roberge
Adjointe interdisciplinaire DEAC
[email protected]
COMMUNICATION
GESTION
Mme Isabelle Girard
Conseillère en information
[email protected]
Mme Joanne Auclair
Agente administrative
[email protected]
Séance de présentations orales – Amphithéâtre, 5e étage
Président de séance, le Docteur Dr Daniel Lajeunesse
Membres du jury, les docteurs Daniel Lajeunesse et Andrés Finzi
9 h 00
Tremblay N*, Baril M & Lamarre D.
UNEXPECTED ROLE OF THE SEC63 DOMAIN OF SPLICEOSOMAL SNRNP200 RNA
HELICASE IN ANTIVIRAL INNATE IMMUNITY.
*CRCHUM, Département de Médecine, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
9 h 15
Stil A*, Drapeau P.
MODELING SPINAL CORD INJURY IN ZEBRAFISH.
*CRCHUM, Department of Neuroscience, University of Montreal, QC, CA.
9 h 30
Charabati M*, Larochelle C, Lécuyer MA, Bourbonnière L, Terouz S, Larouche S, Alvarez JI
and Prat A.
MCAM & NEUROINFLAMMATION: INSIGHT FROM A NOVEL MURINE KNOCKOUT MODEL.
*CRCHUM, Faculté de Médecine, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
9 h 45
Chapuy L*1, Bsat M1, Rubio M1, Panzini B2, Bouin M2, Wassef R2, Richard C2, Soucy G2,
Sarfati M1.
IDENTIFICATION OF FUNCTIONAL INFLAMMATORY DENDRITIC CELLS THAT
ACCUMULATE IN THE COLON AND MESENTERIC LYMPH NODES OF CROHN’S DISEASE
PATIENTS.
1
CRCHUM, Immunoregulation laboratory, University of Montréal, QC, CA. 2CHUM, University of
Montréal, QC, CA.
10 h 00 Tan P1,2*, Blais C2, Michel C1, Kajla S1, Nguyen TMD3, Schiller PW3, Gutkowska J1, Lavoie
JL1.
ROLE OF THE PRORENIN/RENIN RECEPTOR ON FAT ACCUMULATION AND GLUCOSE
HOMEOSTASIS.
1
CRCHUM, 2Department of Biochemistry and Molecular Medicine, University of Montreal, 3IRCM,
QC, CA.
10 h 15 Moullé VS*1, Zarrouki B1, Vivot K1, Ghislain J1, Poitout1 V2.
LIEN ENTRE INSULINORESITANCE ET PROLIFERATION DES CELLULES BETA
PANCREATIQUES DANS UN MODELE D’EXCES DE NUTRIMENTS CHEZ LE RAT.
1
Centre de Recherche du Diabète de Montréal, CRCHUM, et 2Département de médecine,
Université de Montréal, QC, CA.
10 h 30 – 10 h 45 Pause-santé - l’Agora, 5e étage
10 h 45 Campion CG1*, Matsuda Hiroyuki M2, Tremblay J1.
HCARG/EGFR SIGNALING: A NOVEL MECHANISM OF REPAIR AFTER KIDNEY INJURY.
1
Centre de recherche du Centre Hospitalier de l'Université de Montréal (CRCHUM), Montréal,
QC, CA, 2Division of General Medicine, Department of Internal Medicine, Nihon University School
of Medicine, Tokyo, Japan, 173-8610.
11 h 00 Ghadaouia S, Cardin GB, Rodier F.
ÉTUDE DES MÉCANISMES D’ENTRÉE EN SÉNESCENCE SUITE À UNE DYSFONCTION DE
LA CHROMATINE TÉLOMÉRIQUE.
CRCHUM, Institut du Cancer de Montréal, Université de Montréal, QC, CA.
11 h 15 Fabre T*1, 2, Shoukry N.H 1, 2, 3.
IL-22 ENHANCES TGF-BETA PRO-FIBROTIC FUNCTION IN HEPATIC STELLATE CELLS IN A
P-38/MAPK DEPENDENT MANNER.
1
Centre de recherche du CHUM (CRCHUM), Montréal, QC, CAa, 2 Département de microbiologie
et immunologie, 3 Département de médecine, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
11 h 30 Bertrand-Grenier A*1,2,4,5,7, Zehtabi F1,6,8, Kauffmann C1,2,4, Cloutier G1,2,5, Lerouge S1,6,8,
Soulez G1,2 3,4,5.
ENDOLEAK AND THROMBUS CHARACTERIZATION WITH DYNAMIC ELASTOGRAPHY
AFTER ENDOLEAK EMBOLIZATION FOLLOWING ANEURYSM ENDOVASCULAR REPAIR.
1
Centre de Recherche du Centre Hospitalier de l’Université de Montréal (CRCHUM),
2
Département de Radiologie, Radio-oncologie et Médecine Nucléaire, et Institut d’Ingénierie
Biomédicale de l’Université de Montréal, 3Département de Radiologie du Centre Hospitalier de
l’Université de Montréal, 4Laboratoire Clinique du Traitement de l’Image, CRCHUM (LCTI),
5
Laboratoire de Biorhéologie et d’Ultrasonographie médicale, CRCHUM (LBUM), 6Laboratoire de
Biomatériaux EndoVasculaires, 7Département de physique de l’Université de Montréal, 8École de
Technologies Supérieures (ETS).
11 h 45 Steinmetz-Wood M*1,2, Kestens Y1,2, Srinivasan S3.
THE MODIFIABLE AREAL UNIT PROBLEM: IMPLICATIONS FOR THE RELATIONSHIP
BETWEEN LAND-USE AND ACTIVE TRANSPORTATION.
1
CRCHUM, QC, CA, 2Department of Social and Preventative Medicine, University of Montreal,
QC, CA, 3Department of Government, Harvard University, MA, US.
12 h 00 Lacouture A*1, 2, 3, Rouxel J1, Le Garjean N1, Ridde V3, Dagenais C4, Pommier J1, 2.
PROMOUVOIR LA SANTE DES POPULATIONS AU NIVEAU DES TERRITOIRES : ENJEUX DU
TRANSFERT DE CONNAISSANCES ENTRE CHERCHEURS ET DECIDEURS EN FRANCE.
1
EHESP Ecole des Hautes Etudes en Santé Publique, Rennes, Sorbonne Paris Cité, France,
2
CNRS, UMR CRAPE Centre pour la recherche sur l’action politique en Europe – 6051, Rennes,
France, 3CRCHUM, Centre de Recherche du Centre Hospitalier de l’Université de Montréal,
Montréal, QC, CA. 4Faculté de psychologie, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
12 h 15 Pagé MG*, Ware M, Romero Escobar EM*, Choinière M*.
LES TRAJECTOIRES DE DOULEUR DES PATIENTS TRAITÉS DANS DES CLINIQUES DE
TRAITEMENT MULTIDISCIPLINAIRE DE LA DOULEUR.
*CRCHUM, Centre de recherche du Centre Hospitalier de l’Université de Montréal, Montréal, QC,
CA; †Alan Edward Center for Research on Pain, McGill University, *Département de Psychologie,
Université York.
   Fin des présentations orales   
12 h 30 à 13 h 30
Lunch - l’Agora, 5e étage
13 h 30 à 16 h 00
Séance de présentations par affiche - L’Agora, 5e étage
1
2
UNEXPECTED ROLE OF THE SEC63 DOMAIN OF SPLICEOSOMAL
SNRNP200 RNA HELICASE IN ANTIVIRAL INNATE IMMUNITY.
Tremblay N*, Baril M, Lamarre D. *CRCHUM, Département de
Médecine, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
SNRNP200 is a core component of the spliceosome and member of
the Ski2-like RNA helicase family that is associated with degenerative
eye disease retinitis pigmentosa-33 (RP33); however whether
SNRNP200 functions in other biological processes is unknown. Here
we showed that SNRNP200 gene silencing drastically inhibits IFN-β
and transcriptional IFN regulatory factor 3 (IRF3) expression. Epistasis
analyses uncover a new role of SNRNP200 in viral RNA sensing and
IRF3 phosphorylation. Antiviral response of knockdown cells is rescued
by the expression of wild type SNRNP200, but not of RP33-associated
S1087L mutant located in the N-terminal Sec63 domain. The functional
rescue correlates with SNRNP200 ability to bind viral surrogate dsRNA
poly(I:C) or hepatitis C virus (HCV) RNA through its Sec63 domain. We
found that SNRNP200 interacts with TANK-binding kinase 1 (TBK1)
and contributes to IRF3 phosphorylation. Immunofluorescence studies
showed a relocalization of SNRNP200 with TBK1 co-staining into
punctuate cytosolic structures following viral infection. A role of
SNRNP200 in IFN-β production is further confirmed in knocked down
monocyte-derived macrophages (MDM), and in peripheral blood
mononuclear cells (PBMCs) of RP33 patients that revealed a
significantly hindered immune response when challenged with Sendai
virus (SeV). This work identifies a crucial immunoregulatory role of
Sec63-competent SNRNP200 in viral RNA sensing and activation of
IRF3-dependent antiviral immune response without affecting
inflammatory responses.
MODELING SPINAL CORD INJURY IN ZEBRAFISH. Stil A*,
Drapeau P. *CRCHUM, Department of Neuroscience, University of
Montreal, QC, CA.
In Canada 50,000 people live with a spinal cord injury (SCI) and
healthcare represents 3.6 billion$/year. Crucial efforts must be devoted
in the hope of making these lesions reversible. Zebrafish is a model for
many human diseases including neural disorders. Furthermore,
zebrafish have the impressive capacity to regenerate the spinal cord.
Our aim was to develop a model of SCI in zebrafish. Larvae are
transparent and particularly suitable for in vivo imaging and following
regenerative processes. We then developed a semiautomated method
in order to effectively and rapidly model SCI in larvae. We are able to
lesion 100 fish/hour, with 75% of survival and a high reproducibility.
Zebrafish is a powerful organism to high-throughput drug screening in
vivo, valuable in the preclinical pipeline to bridge the gap between in
vitro assays and more costly screens in mammals. Our model is
relevant and convenient for drug screening and could be used to
identify molecules that modulate the repair process after SCI. It
appears that the zebrafish is invaluable for discovering targets for
functional regeneration of the spinal cord, serving as a very effective
compliment to mammalian models. Studying mechanisms of how
anamniotes such as zebrafish utilize stem cells to replace neurons of
the spinal cord is valuable for helping us to understand why mammals
mostly lack this regenerative ability and more importantly, will provide
us with ideas of how human spinal tissue could be stimulated to
regenerate after injury.
This work was supported by grants from the CIHR (CIHR-MOP-115010
and CIHR-CI6-103135), the Novartis/Canadian Liver Foundation
Hepatology Research Chair and an FRQ-S Ph.D. training scholarship
to Tremblay N.
Project Supported by CIHR.
Stil A holds a scholarship from the GRSNC (FRSQ).
3
4
MCAM & NEUROINFLAMMATION: INSIGHT FROM A NOVEL
MURINE KNOCKOUT MODEL. Charabati M*, Larochelle C, Lécuyer
MA, Bourbonnière L, Terouz S, Larouche S, Alvarez JI, Prat A.
*CRCHUM, Faculté de Médecine, Université de Montréal, Montréal,
QC, CA.
Introduction: Multiple Sclerosis (MS) is a neuroinflammatory disease
of the central nervous system (CNS) characterized by the perivascular
infiltration of immune cells and subsequent appearance of
demyelinating lesions. To cross the blood-brain barrier (BBB) and
accumulate in the CNS, inflammatory lymphocytes use different
adhesion molecules. Our group has previously identified Melanoma
Cell Adhesion Molecule (MCAM) as a surface marker of TH17
lymphocytes involved in their recruitment into the CNS. We also
showed that MCAM is upregulated on endothelial cells of the BBB
(BBB-ECs) in lesions of both MS and its animal model, EAE. The
objective of this project is to further evaluate the role of MCAM on
lymphocytes and on BBB-ECs, and to define its contribution to
neuroinflammatory processes using a new knockout (KO) model
generated on the C57BL/6 background.
Methods & Results: In naïve animals, immunohistofluores-cence
demonstrated no apparent structural differences in cerebellar blood
vessels between MCAM KO and wild-type (WT) mice. Similarly, flow
cytometry analysis showed no differences in proportions of immune cell
subsets or in expression of adhesion molecules in peripheral immune
compartments between the two groups. During MOG35-55-induced
EAE in MCAM KO mice and in WT littermates, our data suggest no
significant difference in clinical symptoms, in CNS infiltration or in
peripheral immune cell proportions.
However, preliminary data
currently show a peripheral upregulation of LFA-1, ICAM-1 and ALCAM
on CD4+ and CD8+ T cells just before disease onset in MCAM KO but
not in WT mice, suggesting a compensatory mechanism. In order to
delineate the role of MCAM on the BBB-ECs versus leukocytes, we are
currently performing adoptive transfer of MCAM KO or WT T
lymphocytes into MCAM KO mice versus WT littermates.
Conclusion: Our new MCAM KO model will not only allow us to refine
our understanding of the role of MCAM in immune cell activation and
its interactions within CNS compartments in EAE, but will also provide
insight on its specific role on T lymphocytes versus on BBB-ECs.
IDENTIFICATION OF FUNCTIONAL INFLAMMATORY DENDRITIC
CELLS THAT ACCUMULATE IN THE COLON AND MESENTERIC
LYMPH NODES OF CROHN’S DISEASE PATIENTS. CHAPUY L*1,
BSAT M1, RUBIO M1, PANZINI B2, BOUIN M2, WASSEF R2,
RICHARD C2, SOUCY G2, SARFATI M1. 1CRCHUM, IMMUNOREGULATION LABORATORY, UNIVERSITY OF MONTRÉAL, QC,
CA, 2CHUM, UNIVERSITY OF MONTRÉAL, QC, CA.
Introduction: we previously showed that HLADR+SIRPαβhigh
mononuclear phagocytes accumulated in the mesenteric lymph nodes
(mLNs) and the inflamed colons of patients with Crohn’s disease (CD)
relative to non-inflamed colons of CD or control (non CD) subjects. We
also demonstrated that pro-inflammatory cytokine production was
restricted to these cells that can be targeted by CD47-Fc fusion
protein. However, whether HLADR+SIRPαβhigh cells belong to the
dendritic cell (DC) or macrophage (Mθ) lineage in colonic and/or
lymphoid tissues remains unclear. Moreover, an emerging population
of DCs, called inflammatory DCs, was recently described in psoriasis
and rheumatoid arthritis. So, we aimed to define the precise nature
and function of the cells that accumulated in tissues of CD patients.
Methods: we isolated cells from colonic biopsies or surgical samples
of CD or non CD patients. We studied their nature and function by
flow-cytometry staining and sorting, ELISA and cell cultures.
Results: we demonstrated that inflammatory but not conventional
DCs, defined by phenotypic, morphological and functional criteria,
significantly augmented in the lamina propria as well as mLNs of CD
patients. These inflammatory DCs did not express the DC marker
CD1c or the Mθ marker CD163, induced the proliferation of naïve
allogeneic T cells and produced pro-inflammatory cytokines that
included IL-1β and IL-23.
Conclusion: inflammatory SIRPαβhigh DCs that are distinct from
conventional DCs and Mθ may contribute to disease pathogenesis
and thus represent a potential target for the therapeutic management
of CD patients.
Project funded by CIHR. Student funded by FRQS.
Project funded by CIHR.
5
ROLE OF THE PRORENIN/RENIN RECEPTOR ON FAT
ACCUMULATION AND GLUCOSE HOMEOSTASIS. Tan P*1,2, Blais
C2, Michel C1, Kajla S1, Nguyen TMD3, Schiller PW3, Gutkowska J1,
Lavoie JL1. 1CRCHUM, 2Department of Biochemistry and
Molecular Medicine, University of Montreal, 3IRCM, QC, CA.
Introduction: We had previously observed that the prorenin/renin
receptor [(P)RR] is increased in mouse adipose tissue with obesity.
Obese mice treated with the handle region peptide (HRP), a (P)RR
blocker, had reduced visceral adipose tissue (VAT). Improved glucose
homeostasis was also a feature of the treatment. The objective of this
study was to elucidate the mechanisms behind these observations.
Methods: Mice received a normal or a high fat/high carbohydrate diet
for 10 weeks in concomitance with saline or the HRP. Two VAT depots
including peri-gonadal fat (PGF), peri-renal fat (PRF) were collected at
the end of the treatment and blood was also withdrawn from the mice.
Modulation of the enzyme catalyzing lipogenesis, diglyceride
acyltransferase 1 (DGAT1), and the enzyme catalyzing lipolysis,
hormone sensitive lipase (HSL), were evaluated in VAT. Dipeptidyl
peptidase-4 (DPP4), an enzyme that degrades glucagon-like peptide 1
(GLP-1), a hormone which stimulates insulin secretion, was
investigated in both VAT and the circulation.
Results: In obese mice treated with the HRP, DGAT1 gene expression
was decreased by 60% and 40% in PGF and PRF respectively
compared to control obese mice suggesting reduced triglyceride
synthesis. HSL activation was reduced by 50% and 30% in PGF and
PRF respectively suggesting less lipolysis in obese mice. DPP4 protein
was decreased by 20% and 50% in PGF and PRF respectively in
obese mice and its circulating activity seemed to increase whereas the
HRP normalized it.
Conclusion: The HRP treatment might reduce fat accumulation by
regulating lipogenesis rather than lipolysis and could also increase
GLP-1 half-life.
Project funded by CDA, HSF, SQHA, Diabète Québec.
25
6
+
LIEN+]i/[K
ENTRE
INSULINORESITANCE
ET PROLIFERATION
DES
[Na
]i-INDEPENDENT
DEATH
OF
RENAL
CELLULES
BETA
PANCREATIQUES
DANS
UN
MODELE
D’EXCES
EPITHELIAL CELLS TRIGGERED BY CARDIOTONIC
DE NUTRIMENTS CHEZ LE RAT. Moullé VS*1, Zarrouki B1, Vivot
STEROIDS
IS MEDIATED BY P38 MAPK ACTIVATION
K1, Ghislain J1, Poitout V1,2.. 1Centre de Recherche du Diabète de
2
N. Orlov
Olga
A. Akimova,
Hamet and
Montréal,
CRCHUM,Pavel
Département
deSergei
médecine,
Université de
ResearchQC,
Centre,
Montréal,
CA. CHUM – Technopôle Angus, Montreal, PQ
Objectif : En réponse à l’insulinorésistance induite par l’obésité, la
masse
des cellules
bêta itpancréatiques
et the
la cytotoxic
sécrétion action
d’insuline
Introduction.
Recently,
was shown that
of
augmentent pour maintenir l’homéostasie glucidique. Lorsque ces
cardiotonic
steroids
in
renal
epithelial
C7-MDCK
cells
is
caused
mécanismes compensatoires sont défaillants,
le diabète de type 2
is
by their
interaction
withune
the quantité
Na+,K+-ATPase
(DT2)
apparait.
Maintenir
suffisante -subunit
de cellulesbut
bêta
+ +
fonctionnelles
représente
donc une
thérapeutique potentielle
independent of
the inhibition
ofstratégie
Na ,K -ATPase-mediated
ion
pour
le DT2.
avons montré
la co-perfusion
de phenomenon
glucose et de
fluxes.
The Nous
mechanism
of thisquecell
type-specific
lipides
le rat entraîne
une examined
augmentation
des
remainschez
unknown.
This study
the de
rolelaofprolifération
MAP kinases
cellules bêta mais les effets individuels des nutriments restent à
in death Le
signaling
by ouabain
in C7-MDCK
cells.
étudier.
but de induced
cette étude
était d’évaluer
l’effet d’un
excès de
Methods.
Cell
morphology,
cell
attachment,
chromatin
cleavageà
nutriments sur la prolifération des cellules bêta et la sensibilité
l’insuline.
and caspase-3 activity were employed to estimate cell death.
+ Lewis (2 ou 6 mois) ont été perfusés pendant 72h
Méthode
: Des
was measured as the steady-state distribution of
Intracellular
Narats
22
avec
une
solution
saline
0,9%in(témoins),
du dextrose
(GLU),
une
Na after 6-hr incubation
control and
K+-free 70%
media.
Protein
émulsion de lipides additionnée d’héparine 20 mU/ml (Clinoleic 20%;
phosphorylation
was et
detected
using Western
BlotLaanalysis.
CLI)
ou du glucose
du Clinoleic
(GLU+CLI).
glycémie était
Results. 6-hr
exposure
of C7-MDCK
cells toa3 été
µM prélevé
ouabainpour
led
maintenue
entre
13,9-19,4
mM. Le pancréas
l’analyse
de la prolifération
parnot
immunohistochimie
La
to phosphorylation
of p38 but
JNK ½ and ERK(anti-Ki67).
MAPK. We
sensiblité
à
l’insuline
a
été
mesurée
par
un
clamp
hyperinsulinémique
revealed that the death of ouabain-treated cells was suppressed
euglycémique.
by SB 202190, a potent p38 inhibitor. Previously, we reported
Résultats : La glycémie et l’insulinémie des rats de 2 et 6 mois
that modest
intracellular
acidification
from pHpar7.4
to aux
6.7
perfusés
avec GLU
et GLU+CLI
étaient augmentées
rapport
suppresses
death signaling
in ouabain-treated
cells.
témoins
(p<0,001).
La concentration
en acides grasC7-MDCK
plasmatiques
des
groupes
CLI etthat
GLU+CLI
était augmentée
par p38
rapport
aux contrôles
We observed
in contrast
to cell death,
phosphorylation
(p<0,001).
La ouabain
prolifération
des cellules
bêtacells
étaitwas
augmentée
chez les
triggered by
in renal
epithelial
not affected
by
rats
GLU
et
GLU+CLI
de
2
et
6
mois
(p<0,001).
Les
rats
GLU+CLI
de 2
medium acidification.
et 6 mois présentaient une résistance à l’insuline lors du clamp.
Conclusions.
Our ledata
strongly
suggestdethat
activation
of p38
Conclusion
: Chez
rat Lewis,
la perfusion
GLU+CLI
entraîne
une
MAPK
in
ouabain-treated
C7-MDCK
cells
contributes
cell
augmentation de la prolifération des cellules bêta ainsi to
qu’une
insulinorésistance.
des rats
uni-sensitive
insulinosensibilisant
element.
death signaling atLea traitement
step upstream
of avec
its pH
permettra
de
confirmer
le
lien
entre
insulinorésistance
et intermediates
prolifération.
The molecular origin of upstream and downstream
of p38-mediated signaling evoked by ouabain should be
examined further.
Supported
by ;KFOC
Organismes
subventionnaires
: NIH
NIDDKand CIHR.
7
HCARG/EGFR SIGNALING: A NOVEL MECHANISM OF REPAIR
AFTER KIDNEY INJURY. Campion CG1*, Hiroyuki M2, Tremblay J1.
1
Centre de recherche du Centre Hospitalier de l'Université de
Montréal (CRCHUM), Montréal, Qc, CA, 2Division of General
Medicine, Department of Internal Medicine, Nihon University
School of Medicine, Tokyo, Japan, 173-8610.
The kidneys play a central role in the regulation of arterial pressure and
the development of hypertensive disorders. Our group has identified a
gene, HCaRG (Hypertension-related Calcium-Regulated Gene) whose
overexpression in renal proximal tubules of transgenic mice
accelerated recovery of renal tissue integrity, physiological functions
and reduced the expression of proinflammatory genes after injuryby
facilitating redifferentiation of tubular epithelial cells. Furthermore,
overexpression of HCaRG in an in vivo model of renal carcinoma
inhibits tumor growth and angiogenesis by cell cycle arrest, facilitating
redifferentiation of cells. In this model, HCaRG inhibited the activation
of EGFR, ErbB3 and ErbB2 receptors and downstream signaling
pathways. EGFR activation is as an important mediator of renal repair
following injury. On the other hand, constitutive/chronic ErbB activation
is thought to be important in the evolution of renal diseases and
cancer.
In this project, we focus our attention on the role of HCaRG in the
down-modulation of ErbB receptors. Our hypothesis is that HCaRG is a
protein that modulates endocytic trafficking of EGFR/ErbB receptors
and thereby promotes repair of the epithelium.
We will determine the function of HCaRG in several renal cell lines
which constitutively express it in the cytoplasm. Confocal imaging and
co-immunoprecipatation will be used to investigate interaction between
HCarG and EGFR in specific cell compartments. EGFR activation will
be analysis using HCaRG siRNA in cells treated with EGF or TGFα.
This project will not only aim to clarify some regulatory mechanisms of
EGFR/ErbB receptors, but will also consider HCaRG as a new
potential therapeutic target in tissue repair mechanisms. HCaRG is
also expressed in several other tissues; therefore, our results could
also have an impact on various diseases and cancers where the
receptors EGFR/ErbB are overexpressed.
This project is supported by the Canadian Institutes of Health Research
(CIHR).
8
ÉTUDE DES MÉCANISMES D’ENTRÉE EN SÉNESCENCE SUITE À
UNE DYSFONCTION DE LA CHROMATINE TÉLOMÉRIQUE.
Ghadaouia S, Cardin GB, Rodier F.
Introduction : La senescence est un mécanisme suppresseur de
tumeur caractérisé par un arrêt de croissance irréversible et pouvant
être causé par des cassures double brin (CDB). La Réponse aux
Dommages de l’ADN (RDA) va entrainer la formation de foyers de
dommages à l’ADN (foci) qui, si persistants, vont évoluer en DNASCARS (DNA Segment with Chromatin Alteration Reinforcing
Senescence) permettant l’arrêt de croissance définitif. Certaines
études proposent que ces DNA-SCARS correspondent à des cassures
télomériques non réparées, tandis que d’autres suggèrent qu’ils soient
des marques de la chromatine indépendantes de la CDB et donc
possiblement réversibles. Or, le caractère permanent de la sénescence
est indispensable à la lutte contre la prolifération tumorale. Pour étudier
cette contradiction, nous proposons d’induire une déstructuration de la
chromatine télomérique sans réelle CDB afin de générer une RDA et
d’établir un phénotype sénescent.
Méthode : Nous induisons l’expression d’un dominant négatif de Tin2
(Tin2DN), une protéine du télosome, conduisant à une déstructuration
télomérique interprétée par la cellule comme une CDB. Nous testons la
formation de foci et l’arrêt de croissance suivant l’induction.
Résultats : L’induction de Tin2DN provoque une augmentation du
nombre de foci persistants, confirmant le déclenchement d’une RDA.
Nous observons également un arrêt de croissance partiel s’établissant
avec un délai par rapport à nos contrôles. De plus, cet arrêt de
croissance n’est que temporaire puisque suivi d’une reprise de la
prolifération, évoquant un échappement des points de contrôle du
cycle cellulaire. Cette hypothèse est appuyée par la présence de ponts
chromosomiques dans les cellules en mitose.
Conclusion : L’ensemble de ces résultats suggère que les dommages
télomériques sont tolérés par la cellule, mais qu’ils causent des fusions
chromosomiques qui évoluent en réelles CDB lors de la mitose,
déclenchant une RDA persistante et menant à la sénescence.
9
IL-22 ENHANCES TGF-BETA PRO-FIBROTIC FUNCTION IN
HEPATIC STELLATE CELLS IN A P-38/MAPK DEPENDENT
MANNER. Fabre T*1,2, Shoukry NH1, 2, 3. 1Centre de recherche du
CHUM (CRCHUM), Montréal, QC, CA, 2Département de
microbiologie et immunologie, 3Département de médecine,
Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
Activation of hepatic stellate cells (HSCs) is a key event in liver fibrosis,
characterized by enhanced extracellular matrix (ECM) production and
altered degradation. The immune system modulates activation of HSCs
through production of cytokine. IL-22 is an enigmatic cytokine, from the
IL-10 family, with both pro- and anti-inflammatory properties. IL-22
deficient mice have high hepatic inflammation during acute injury
compare to their wild type littermates. IL-22 is also elevated in the sera
of patients with liver cirrhosis and carcinoma. However, in a mouse
model of hepatitis B, IL-22 indirectly induces fibrosis by recruiting profibrotic Th17. We hypothesized that IL-22 may modulate activation and
induction of the fibrogenic process of HSCs. The human HSC line LX2
and primary human HSCs were stimulated with increase doses of IL-22
and compared to TGF-β- and PBS- treated cells as positive and
negative controls, respectively. IL-22 did not induce activation of HSCs.
However, IL-22 enhanced the response of HSCs to suboptimal doses
of TGF-β as observed by strong induction of alpha-smooth muscle
actin (α-SMA), collagen type I (COL1A1) and tissue inhibitor of matrix
metalloproteinase (TIMP-I). IL-22 stimulation did not enhance cell
surface expression of TGF-β-RII. However, pretreatment of HSCs with
IL-22 led to increase phosphorylation of SMAD2/3 in response to
suboptimal doses TGF-β. This effect was dependent on the activation
of the p38/MAPK pathway. IL-22 also downmodulated the expression
of IL-22BP which may further increase the HSC response to IL-22. Our
results suggest a novel pro-fibrotic function for IL-22 through
enhancement TGF-β signaling in a p38/MAPK dependent manner.
10
ENDOLEAK AND THROMBUS CHARACTERIZATION WITH
DYNAMIC ELASTOGRAPHY AFTER ENDOLEAK EMBOLIZATION
FOLLOWING ANEURYSM ENDOVASCULAR REPAIR. BertrandGrenier A*1,2,4,5,7, Zehtabi F1,6,8, Kauffmann C1,2,4, Cloutier G1,2,5,
Lerouge S1,6,8, Soulez G1,2,3,4,5. 1CRCHUM, 2Dép. de Radiologie,
Radio-Oncologie et Médecine Nucléaire, Institut d’Ingénierie
Biomédicale de l’Univ. de Montréal, 3Dép. de Radiologie du Centre
Hosp. de l’Univ. de Montréal, 4Lab. Clinique du Traitement de
l’Image, CRCHUM (LCTI), 5Lab. de Biorhéologie et d’Ultrasonographie médicale, CRCHUM (LBUM), 6Lab. de Biomatériaux EndoVasculaires, 7Dép. de physique de l’Université de Montréal, 8École
de Technologies Supérieures (ETS). Introduction: The purpose of
this study was to characterize in a canine model of aneurysm
endovascular repair (EVAR) residual endoleak and thrombus
organization with Supersonic Shear Imaging (SSI) after endoleak
embolization. Methods: EVAR was done with creation of type I
endoleak in eighteen aneurysms created in nine dogs (common iliacs
arteries). Two embolization gels (Chitosan (Chi) or Chitosan-SodiumTetradecyl-Sulfate (Chi-STS)) were injected in the sac to seal the
endoleak and promote healing. SSI and Doppler Ultrasound were
performed at baseline (implantation, 1-week, 1-month, 3-months)
whereas angio-graphy and CT-scan were performed at sacrifice.
Macroscopic and histopathological analyses were processed to identify
and segment five different regions of interest (ROIs) (endoleak, fresh or
organized thrombus, Chi or Chi-STS). Elasticity modulus values were
compared in these ROIs. Results: At sacrifice, ten aneurysms had
endoleaks, nine had fresh thrombus, fifteen had organized thrombus
and three were completely sealed. At 3 months, elasticity modulus (in
kPa) of 0.1±0.2, 9.2±3.5, 47.3±25.7, 55.9±21.7 and 69.6±29.0 were
respect-tively found in endoleak, fresh and organized thrombus, Chi
and Chi-STS regions. Elasticity values of endoleak and fresh thrombus
areas were significantly lower than organized thrombus, Chi and ChiSTS areas (p<0.001). Elasticity values of fresh thrombus ranged
between 3 and 19 kPa (8.7±3.6 kPa) at 1-week and 30.2±13.8 kPa at
3-months indicating that SSI can evaluate thrombus maturation.
Aneurysm with fresh thrombus did not shrink as fast as aneurysm with
only organized thrombus. Conclusion: The results show that SSI was
able to characterize thrombus organization, embolization agents and
healing over time after endoleak embolization following EVAR.
Projet subventionné par les IRSC et FRQ-S-ARQ.
11
THE MODIFIABLE AREAL UNIT PROBLEM: IMPLICATIONS FOR
THE RELATIONSHIP BETWEEN LAND-USE AND ACTIVE
TRANSPORTATION. STEINMETZ-WOODM*1,2, KESTENS Y1,2,
SRINIVASAN S3. 1CRCHUM, QC, CA, 2Department of Social and
Preventative Medicine, University of Montreal, QC, CA,
3
Department of Government, Harvard University, MA, US.
Introduction: The incorporation of active transport (AT) within the daily
routine of an individual can contribute to the prevention of obesity by
providing an important source of regular physical activity. Land-use mix
(LUM) is a feature of the built environment that is thought to incite
individuals to choose active modes of transport. The spatial units used
to measure land-use mix include: census blocks, block groups and
tracts. Each of these units will vary in area depending on the density of
the population; producing a non-uniform variation in area. Recent
literature urges to correct for the area of these units in the analysis, as
it has been suggested that using a unit that aggregates data at differing
geographic scales could dilute the association between LUM and AT.
Methods: The dependent variable mode of transport to work was
obtained from the 2010-11 Massachusetts travel survey. The
independent variable land-use mix was measured using a land-use file
from the office of geographic information of Massachusetts. Land-use
mix was measured for the residence and the workplace at three
different levels of analysis: the census block, bloc group, and the tract.
Separate binary logistic models were used to model the relationship for
the residence and the workplace at each level of analysis.
Results: Correcting for area strengthened the relationship between
land-use mix and active transport at all levels of analysis. The
relationship also strengthened as the size of the type of census unit
increased (was weakest at the block level and strongest at the tract
level).
Discussion / Conclusion: The results illustrate the dependency of the
land-use mix active transport relationship on the size and scale of the
unit of analysis. This emphasizes the importance of accounting for
geographical size when measuring land-use mix using census units
and the importance of using spatial units of a meaningful scale in
health geography.
Steinmetz-Wood M is a recipient of the FRSQ masters training bursary.
12
PROMOUVOIR LA SANTE DES POPULATIONS AU NIVEAU DES
TERRITOIRES : ENJEUX DU TRANSFERT DE CONNAISSANCES
ENTRE CHERCHEURS ET DECIDEURS EN FRANCE. Lacouture
A*1,2,3, Rouxel J1, Le Garjean N1, Ridde V3, Dagenais C4, Pommier
J1,2. 1EHESP École des Hautes Etudes en Santé Publique, Rennes,
Sorbonne Paris Cité, France. 2CNRS, UMR CRAPE Centre pour la
recherche sur l’action politique en Europe – 6051, Rennes,
France. 3CRCHUM Centre de Recherche du Centre Hospitalier de
l’Université de Montréal, Montréal, QC, CA, 4Faculté de
psychologie, Université de Montréal, Mtl, QC, CA. Introduction: En
France, pour promouvoir la santé des populations, de récentes
propositions ont été faites en faveur du renforcement des liens entre
chercheurs et décideurs au sein des territoires, à travers le transfert de
connaissances (TC). Malgré des collaborations déjà existantes, ce
processus TC est encore peu étudié. Afin de caractériser les conditions
facilitantes ou limitantes du TC, une investigation exploratoire a été
faite dans deux régions françaises (Bretagne et Provence-Alpes Côte
d’Azur) d’avril à juin 2014. Méthode: Des entretiens non-directifs,
individuels ou collectifs, ont été menés afin d’inciter les personnes
rencontrées à explorer, de façon large, les interrogations possibles
concernant les conditions du TC. Résultats: 29 personnes ont été
rencontrées, 15 chercheurs et 14 décideurs, institutionnels et
politiques. Le TC est perçu comme 1) un processus qui permet la mise
en commun de connaissances pour développer une culture partagée,
et 2) un dispositif à part entière, un espace de dialogue. Le TC est
d’autant plus facilité s’il s’inscrit dans une dynamique durable de
réseau. Pour favoriser le TC, différents aspects sont mis en lumière : le
caractère pragmatique et concret de la recherche qui doit être ancrée
dans le contexte du territoire, les rôles joués par les chercheurs et les
décideurs perçus comme facilitateurs, experts, ou leaders, les relations
de qualité et pérennes basées sur le respect et la confiance, les
ressources disponibles et le contexte institutionnel. Conclusion : Les
constats de cette phase exploratoire nous ont permis de réinterroger,
de façon itérative, le cadre théorique du projet à l’égard des pratiques
et expériences relatées. Il s’agira dans un second temps de
documenter de façon plus exhaustive les mécanismes et les facteurs
contextuels associés aux processus/dispositifs de TC. Le projet est
financé par l’Institut national de prévention et d’éducation pour la santé
(INPES), France. Lacouture A. est récipiendaire d’une bourse de
formation doctorale PHIRNET-RISP, financée par les IRSC.
13
LES TRAJECTOIRES DE DOULEUR DES PATIENTS TRAITÉS
DANS DES CLINIQUES DE TRAITEMENT MULTIDISCIPLINAIRE
DE LA DOULEUR. Pagé G*, Ware M†, Romero-Escobar EM',
Choinière M*. *CRCHUM; †Alan Edward Center for Research on
Pain, McGill University; *Dép. de Psychologie, Université York.
Introduction: Les objectifs de cette étude étaient d'identifier parmi
des patients traités dans une clinique de traitement multidisciplinaire
de la douleur (CTMD) différentes trajectoires d'intensité de douleur
et d'évaluer l'impact de ces trajectoires sur le devenir psychosocial
des patients. MÉTHODES: Les patients inscrits au Registre Québec
Douleur (RQD) (2008-2012) et visitant une CTMD pour la première
fois ont complété des questionnaires dOment validés portant sur des
caractéristiques de OC et des variables psychosociales avant leur
première visite de même que six, 12 et 24 mois plus tard. Les
résultats ont été analysés à l'aide de modèles mixtes de croissance
et d'analyses de variance multivariées.
R é s u l t a t s : L'échantillon était composé de 2540 patients
(moyenne d'âge= 53.4 ±14.2; 60.2% de femmes). Le modèle
statistique final a identifié six trajectoires d'intensité de OC qui
étaient associées à des différences significatives dans certaines
autres caractéristiques de la douleur (ex., impact sur le sommeil) de
même que pour des variables psychosociales (ex., dépression) à 24
mois.
Discussion / Conclusion: Les résultats ont démontré l'existence de
sous-groupes pour qui la douleur s'améliorait ou restait stable sur
une période de 24 mois. Ces trajectoires étaient associées à des
différences au niveau des caractéristiques de OC et certaines
variables psychosociales à 24 mois. Ces résultats soutiennent
l'importance d'évaluer l'efficacité de programmes d'intervention en
utilisant des approches centrées sur les différences intraindividuelles.
Le RQD est financé par le Réseau québécois de recherche sur la
douleur du FRQ-S.
Projet subventionné par des fonds du CRCHUM. MGP est
récipiendaire d'une bourse postdoctorale des IRSC.
17e CONGRÈS
PRÉSENTATIONS PAR
AFFICHE
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage
Étudiants de niveau maîtrise et stagiaires de 1er cycle
Membre du jury, les docteurs Véronique Michaud, Richard Bertrand, Hassan Fahmi, Michel Roger,
Hélène Héon, Manuella Santos, Christopher Rose, John Stagg
1.
Allard D*, Spring Kathleen, Stagg J.
ÉTUDE DU RÔLE DE L'ENZYME CD73 ET DE L'ADÉNOSINE DANS LA TRANSFORMATION
CELLULAIRE ONCOGÉNIQUE. *CRCHUM, Faculté de pharmacie, Université de Montréal, QC, CA.
2.
Almeida R*, Tremblay M, Rose C, Bémeur C et le Consortium de l'acidose lactique.
CARACTÉRISATION D'UN MODÈLE CELLULAIRE DE STRESS DE TYPE INFLAMMATOIRE ET
NUTRITIONNEL LORS DU SYNDROME DE LEIGH VERSION CANADIENNE FRANÇAISE.
*CRCHUM, Département de nutrition, Université de Montréal, QC, CA.
3.
Artenie AA*, Bruneau J, Zang G, Puzhko S, Jutras-Aswad D.
ATTEMPTED SUICIDE AMONG PERSONS WHO INJECT DRUGS: EXAMINING THE ROLE OF
SUBSTANCE USE PATTERNS. *CRCHUM, Université de Montréal, QC, CA.
4.
Astolfi M*1,2, Péant B2, Kendall-Dupont J2, Lateef A2, Provencher D2,3, Saad F2,3, Mes-Masson AM2,3,
Gervais T1,2,4.
PLATEFORME MICROFLUDIQUE POUR LA PRÉDICTION DE LA RÉPONSE DE TUMEURS
SOLIDES AUX TRAITEMENTS ANTI-CANCER. 1Institut de génie biomédical, École Polytechnique de
Montréal, QC, CA, 2Institut du Cancer, CRCHUM, QC, CA, 3Département de médecine, Université de
Montréal, QC, CA, 4Département de génie physique, École Polytechnique de Montréal, QC, CA.
5.
Bilodeau C*1,2, Ruffin M1,2, Trinh NTN1,2, Maillé É1, Brochiero E1,2.
IMPACT OF CORRECTORS AND POTENTIATOR COMBINATIONS ON CF AIRWAY EPITHELIAL
REPAIR UNDER INFECTIOUS CONDITIONS. 1CRCHUM, 2Department of Medicine, Université de
Montréal, QC, CA.
6.
Calvo Gonzalez LL*, Cheng S, Skulimowski M, Mes-Masson AM, Rodier F.
DEFINING THE MOLECULAR PATHWAYS LEADING TO SENESCENCE IN HUMAN PRIMARY
OVARIAN CANCER CELLS. *CRCHUM, Université de Montréal, QC, CA.
7.
Charlebois R*, John Stagg.
COMBINING ANTI-HER2 MAB WITH TLR-3 AND -9 AGONISTS. *CRCHUM, Département de
microbiologie, infectiologie et immunologie, Faculté de médecine, Université de Montréal, Qc, CA.
8.
Chebli J*1,2, GIRAULT A1,2, TRINH NTN1,2, PRIVÉ A1, MAILLÉ É1, BROCHIERO E1,2.
RÔLE COOPERATIF DU CANAL POTASSIQUE KCA3.1, DE L’INTÉGRINE β1 ET DU CANAL
CALCIQUE TRPC4 DANS LES MÉCANISMES DE RÉPARATION ALVÉOLAIRE. 1CRCHUM,
2
9.
Clément MA*, Bosoi CR, Tremblay M, Bémeur C, Rose C.
BILE-LIGATED RATS ARE SUSCEPTIBLE TO HYPOTENSION-INDUCED NEURONAL CELL LOSS:
IMPLICATIONS FOR PERSISTING NEUROLOGICAL COMPLICATIONS FOLLOWING LIVER
TRANSPLANTATION.
*CRCHUM, Département de Pharmacologie, Université de Montréal, QC, CA.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage 10. Coutu M*, Andrés Finzi.
ÉTUDE DU RÔLE DES RÉGIONS VARIABLES V4 ET V5 DANS LES CHANGEMENTS DE
CONFORMATION DES GLYCOPROTÉINES DE L'ENVELOPPE DU VIH-1. *CRCHUM, Université de
Montréal, Montréal, QC, CA.
11. Sharma S1,2, Decarie-Spain L*1,2, Hryhorczuk C1,2, Barker PA3, Alquier TA1,2, Fulton S1,2.
STRIATAL NEUROINFLAMMATION ELICITED BY A SATURATED HIGH-FAT DIET. 1CRCHUM,
2
Montreal Diabetes Research Centre, 3Montreal Neurological Hospital, Montreal, QC, CA.
12. Dessureault M*, Laplante P, Cailhier JF, Rodier F.
EFFET DU SÉCRÉTOME DES CELLULES SÉNESCENTES SUR LA RÉPONSE INFLAMMATOIRE
ORCHESTRÉE PAR LES MACROPHAGES. *CRCHUM, Département de Médecine, Université de
Montréal, QC, CA.
13. Dionne PO*, Drouin A, Stevens LM, Noiseux N, Chin A, Basile F, Prieto I, Mansour S, Soulez G,
Chartrand-Lefebvre C.
PERMÉABILITÉ D'UN NOUVEAU TYPE DE PONTAGE CORONARIEN DU TERRITOIRE
MYOCARDIQUE ANTÉROLATÉRAL – ÉTUDE DE COHORTE : RÉSULTATS PRÉLIMINAIRES.
*CRCHUM, Hôtel-Dieu, Radiologie, Montréal, QC, CA.
14. Drouin A*, Noiseux N, Chartrand-Lefebvre C, Soulez G, Mansour S, Basile F, Prieto I, Stevens LM.
ESSAI CLINIQUE RANDOMISÉ SUR DEUX STRATÉGIES DE PONTAGES CORONARIENS DU
TERRITOIRE ANTÉROLATÉRAL (AMI-PONT). *CRCHUM, Hôpital Hôtel-Dieu, Service de chirurgie
cardiaque. (Résident en chirurgie cardiaque)
15. Dzieciolowska, S*, Armstrong GAB, Drapeau P.
DÉFAUTS SYNAPTIQUES DANS UN MODÈLE GÉNÉTIQUE DE LA SLA. *CRCHUM, Département
de Neurosciences, Université de Montréal, QC, CA.
16. El-Diwany M*, Giot JP, Bernard M, Paek L, Nizard N, Rodier F, Hébert MJ, Danino MA.
LE RÔLE DE L'AUTOPHAGIE ET DE LA SÉNESCENCE DANS LA PATHOPHYSIOLOGIE DE LA
FIBROSE TISSULAIRE EN RÉPONSE À LA RADIOTHÉRAPIE. *CRCHUM, Département de
Médecine, Université de Montréal, QC, CA.
17. Gagné B*, Baril M, Lamarre D.
THE NUCLEAR PORE COMPLEX AND ITS TRANSPORTERS: FROM VIRUS-HOST INTERACTORS
TO SUBVERTING THE INNATE ANTIVIRAL IMMUNITY. *CRCHUM, Faculté de Médecine, Université
de Montréal, QC, CA.
18. Gagnon F*#, Viel É#, Beauseigle D#, Duquette P†#, Girard JM†, Prat A†#, Arbour N#.
ROLE OF CD4+CD8+ T LYMPHOCYTES IN THE PATHOGENESIS OF MULTIPLE SCLEROSIS.
#
Department of Neurosciences, Université de Montréal, *CRCHUM and †Multiple Sclerosis Clinic,
CHUM.
19. Gowing E*, Gendron S*, Lécuyer MA, Terouz S, Prat A.
A ROLE FOR INTEGRIN ALPHA8 IN MEDIATING CD4+ T LYMPHOCYTE MIGRATION ACROSS
THE BBB IN MS. *CRCHUM, Département de Neuroscience, Université de Montréal, QC, CA
20. Gravel S*1,2, Jade Huguet1,2, Éric Rousseau3, Fleur Gaudette2, Jacques Turgeon1,2, Veronique
Michaud1,2. ÉTUDE DU MÉTABOLISME DES MÉDICAMENTS PAR LES CYP450s PULMONAIRES.
1
Faculté de Pharmacie, Université de Montréal, Montréal, QC, CA, 2CRCHUM, Montréal, QC, CA,
3
CHUS, Sherbrooke, QC, CA.
21. Kasaei-Roodsari A1,2, Genest DS1, Falcao S1, Michel C1, Kajla S1, Lavoie JL1,2,3.
IMPLICATION OF RENAL ANGIOTENSIN-(1-7) AXIS IN THE DEVELOPMENT OF PREECLAMPSIA
IN PREVIOUSLY HYPERTENSIVE. 1CHUM Research Center, 2Department of Kinesiology, University
of Montreal, 3Montreal Diabetic Research Center, Montréal, QC, CA.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage 22. Kouassi NPF*, Sylla M, Chamberland A, Zhang Y, Ancuta P, El-Far M, Tremblay C.
ÉVALUATION DU RÔLE DE L’INTERLEUKINE-32 DANS LA PROGRESSION DE L’INFECTION PAR
LE VIH-1. *CRCHUM, Département de médecine, Université de Montréal, QC, CA.
23. Le Serbon E*, Auger N.
HOMICIDE ET ESPÉRANCE DE VIE AU BRÉSIL. *CRCHUM, Risques à la santé.
24. Ma X, Makhzoum RA*, Heravi M, Lafontaine L, Wong P.
IDENTIFICATION DES VOIES DE RADIOSENSIBILISATION MODULEES PAR DES MICROARNS
DANS LES SARCOMES DES TISSUS MOUS. *CRCHUM, Département de Radiologie, Médecine
Radio-oncologique et nucléaire, Université de Montréal, QC, CA. Institut du Cancer de Montréal, QC,
CA.
25. Marcoux S*1,2, Aissaoui R1,2.
MODÈLE TEMPS-RÉEL DE DÉTERMINATION DE LA VITESSE DE MARCHE – VERS UN TAPIS
ROULANT HAPTIQUE À DEUX VOIES. 1Laboratoire LIO, *CRCHUM. 2École de technologie
supérieure.
26. Mariani M*1,2, Cervantes-Gomez S1,4, Mukawera E1, Kalamujic M1,5, Grandvaux N1,3.
IDENTIFICATION OF THE SIGNALING PATHWAY INVOLVED IN THE DEVELOPMENT OF LATE
ANTIVIRAL RESPONSE INDUCED BY THE SYNERGISTIC ACTION OF IFN /TNF IN LUNG
EPITHELIAL CELLS. 1Centre de recherche du CHUM (CRCHUM), Montréal, QC, CA, 2Program of
Biomedical Sciences, Faculty of Medicine, Université de Montréal, Montreal, QC, CA, 3Department of
Biochemistry and Molecular Medicine, Faculty of Medicine, Université de Montréal, Montréal, QC, CA,
4
Department of Biomedical Sciences, Universidàd de Guadalajara, Mexico, 5Department of
Pharmacology, Faculty of Medicine and Health Sciences, Université de Sherbrooke, Sherbrooke, QC,
CA.
27. Martineau X*, Abed E, Kuzbari, Z, Siwing V, Delalandre A, Lajeunesse D.
ALTERATIONS OF THE NON-CANONICAL WNT/PKC and JNK PATHWAYS IN HUMAN
OSTEOARTHRITIS OSTEOBLASTS. *CRCHUM, Département de Biochimie-Université de Montréal,
QC, CA.
28. Maximos S*1,3, Leung YH1,2, Gravel S1,2, Bélanger F1, Michaud V1,2,3 .
EFFETS DU DIABÈTE TYPE 2 SUR L'EX PRESSION ET l'ACTIVITÉ DES CYP3as. 1CRCHUM,
2
Faculté de Pharmacie, 3Faculté de Médecine.
29. Méjane J*1, Faubert J3, Labbé D1,2
ÉVALUATION DE L'IMPACT D'UNE CHARGE COGNITIVE SUR LE RISQUE DE RUPTURE SANS
CONTACT DU LIGAMENT CROISÉ ANTÉRIEUR (LCA). 1Laboratoire de recherche en imagerie et
orthopédie, *Centre de recherche du CHUM, 2Département de génie logiciel et des TI, École de
technologie supérieure, 3Laboratoire de psychophysique et de perception visuelle, École d’optométrie,
30. Niessl J*1,2, DaFonseca S1,2, Routy JP3, Ancuta P1,2.
CONTRIBUTION OF NAIVE CD4+ T-CELLS TO THE PERSISTENCE OF HIV DURING ART.
1
Universite de Montreal, Faculty of Medicine, Department of Microbiology, Infectiology and
Immunology, Montreal, QC, CA, 2CHUM-Research Centre, Montreal, QC, CA, 3McGill University
Health Centre, Montreal, QC, CA.
31. Ouertani F*, de Guise JA, Vazquez C, Cresson, T.
SEGMENTATION DE L’ARTICULATION DE LA HANCHE À PARTIR DE RADIOGRAPHIES BIPLANS
EN UTILISANT UNE APPROCHE MULTI-STRUCTURES. *CRCHUM, École de Technologie
Supérieure, Montréal, QC, CA.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage 32. Puzhko S*, Roy E, Jutras-Aswad D, Artenie A, Bruneau J.
PRESCRIPTION OPIOIDS INJECTORS OF MONTREAL: A CHALLENGE FOR HEPATITIS C
PREVENTION AND TREATMENT. *CRCHUM, Département de Médecine Familiale, Département de
Psychiatrie, Université de Montréal; Faculté de médecine et des sciences de la santé, Université de
Sherbrooke; McGill University, Department of Family Medicine; QC, CA.
33. Robitaille A*, Grandvaux N.
RÔLE DE DUSP1 DANS LA DÉFENSE DE L'HÔTE CONTRE LES VIRUS RESPIRATOIRES DANS
LES CELLULES ÉPITHÉLIALES DU TRACTUS RESPIRATOIRE. *CRCHUM, Département de
Biochimie, Université de Montréal, QC, CA.
34. Sabourin-Poirier C*, Thibodeau V, Poudrier J**, Roger M**.
LES NIVEAUX DE B LYMPHOCYTE STIMULATOR (BLYS) SONT ASSOCIÉS À LA
PRÉSERVATION DU COMPARTIMENT DES CELLULES B CHEZ DES TRAVAILLEUSES DU SEXE
BÉNINOISES HAUTEMENT EXPOSÉES ET VIH NÉGATIVES. *CRCHUM, Département de
Microbiologie, Infectiologie & Immunologie, Université de Montréal. **Co-séniors.
35. Sénécal V.
RÔLE DE L'IL-27 EN SCLÉROSE EN PLAQUES. CR-CHUM.
36. Tep TS*1,2, Wacleche VS1,2, El-Far M2, Chouick Y2, Routy JP3, Ancuta P1,2.
ROLE OF AUTOPHAGY IN THE CONTRIBUTION OF CD16+ MONOCYTE-DERIVED DENDRITIC
CELLS TO HIV-1 PATHOGENESIS. 1Département de microbiologie, infectiologie et immunologie,
Univesité de Montréal, QC, CA, 2CRCHUM, QC, CA, 3CUSM, QC, CA.
37. Vu MQ*, Borie M, Bessette PO, Mansour S., Steven LM, Roy DC, Jankowski M, Gutkowska J, Der
Sakissian S, Noiseux N. OPTIMISATION DU POTENTIEL THÉRAPEUTIQUE DES CELLULES
SOUCHES À L'OCYTOCINE : EN ROUTE VERS DE FUTURS ESSAIS CLINIQUES. *CRCHUM,
Département de chirurgie, Université de Montréal, QC, CA.
38. Youreva V*, Srivastava AK.
INVOLVEMENT OF MAPKs AND PKB PATHWAYS IN INSULIN-LIKE GROWTH FACTOR-1 (IGF-1)INDUCED EARLY GROWTH RESPONSE PROTEIN-1 (EGR-1) EXPRESSION IN VASCULAR
SMOOTH MUSCLE CELLS (VSMC). *CRCHUM, Faculty of medicine, University of Montreal, QC, CA.
Étudiants de niveau doctorat
Membres du jury, les docteurs Francis Rodier, Paolo Renzi, Betrand Lussier, Thierry Alquier,
Emmanuelle Brochiero, Stéphanie Fulton, Greg Fitzharris,
Jianping Wu, Nathalie Grandvaux, Pierrette Gaudreau
39. Agostinone J*, Di Polo A.
INSULIN-MEDIATED ACTIVATION OF MTORC1 AND MTORC2 PROMOTES DENDRITE
REGENERATION AFTER AXONAL INJURY. *CRCHUM, Département de neurosciences, Université
40. Alsahafi N*1, Mwimanzi P2, Markle T2, Miura T3, Walker B4, Brockman M2, Finzi A1.
NEF PROTEINS FROM ELITE CONTROLLERS ARE INEFFICIENT AT PREVENTING EXPOSURE
OF ENV ADCC-MEDIATING EPITOPES. 1CRCHUM, 2SFU, 3Tokyo U, 4Harvard U.
41. Baruah PS*, Beauchemin M, Hébert J, Parker A, Bertrand R.
BCL-XL PHOSPHORYLATION DURING MITOSIS AND GENOMIC STABILITY. *CRCHUM, Institut du
cancer de Montréal, Université de Montréal, QC, CA.
42. Beillevaire D*, Turgeon J, Dieudé M, Hébert MJ.
ÉTUDE DU TRAFFICKING DE L’ENDOREPELLINE MENANT À LA PRODUCTION DE LG3.
*CRCHUM, Université de Montréal, QC, CA.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage 43. Bergeron MA*, Pommey S, Stagg J.
ÉTUDE DES MÉCANISMES DE L'ACTIVITÉ ANTI-TUMORALE DE LA CHIMIO-IMMUNOTHÉRAPIE
COMBINÉE. *CRCHUM, Département de Pharmacie, ICM, Université de Montréal, QC, CA.
Bergeron V*, Ghislain J, Vivot K, Poitout V.
44. ROLE DU GROUPE 2 DE LA FAMILLE PAK DANS LA VOIE DE SIGNALISATION DE GPR40 ET LA
SÉCRÉTION D’INSULINE. *CRCHUM, Centre de Recherche du Diabète de Montréal, Département
de Médecine de l’Université de Montréal, QC, CA.
45. Bernard M*, Underwood K, El-Diwany M, Yang B, Rodier F, Hébert MJ.
L'AUTOPHAGIE RÉGULE LA SÉNESCENCE ET LA DIFFÉRENCIATION MYOFIBROBLASTIQUE.
CRCHUM, Axe 4i, Université de Montréal. QC, CA.
46. Bouyakdan K*1, Taib B1, Budry L1, Rodaros D1, Chretien C2, Pénicaud L2, Mandrup S3, Fioramonti X2
et Alquier T1.
DUAL ROLE OF ACBP IN THE HYPOTHALAMUS: REGULATOR OF ASTROCYTE FATTY ACID
METABOLISM AND GLIOTRANSMITTER TARGETING ANORECTIC POMC NEURONS. 1CRCHUM,
2
Université de Bourgogne, 3University of Southern Denmark.
47. Bsat M*1, Chapuy L1, Baba N2, Rubio M1, Panzini B3, Wassef R4, Richard C4, Soucy G5, Mehta H1,
Sarfati M1.
THE PRO-INFLAMMATORY SLAN+ MONOCYTE/DENDRITIC CELLS ACCUMULATE IN THE
COLON AND THE MESENTERIC LYMPH NODES OF CROHN’S DISEASE PATIENTS.
1
Immunoregulation Laboratory, Centre de Recherche du Centre Hospitalier de l'Université de Montréal
(CRCHUM), Canada, 2Center for Innovative and Translational Medicine, Kochi University Medical
School, Japan, 3Department of Gastroenterology, 4Department of Digestive Tract Surgery and
5
Department of Pathology, Centre Hospitalier de l'Université de Montréal (CHUM), QC, CA.
48. Buisseret L*1,2, Garaud S1, Naveaux C1, Duvillier H3, de Wind A1, Stagg J2, Sotiriou C1, Willard-Gallo
K1.
A PROSPECTIVE STUDY OF LYMPHOCYTES INFILTRATING THE BREAST CANCER
MICROENVIRONMENT. 1Institut Jules Bordet, Université Libre de Bruxelles, Belgique, 2CRCHUM,
Faculté de Pharmacie et Institut du Cancer de Montréal, QC, CA.
49. Chang SY*1, Lo CS1, Zhao XP1, Aliou Y1, Chenier I1, Bouley R2, Ingelfinger JR2, Chan JSD1, Zhang
SL1.
FUNCTIONAL ROLE OF AQUAPORIN-1 IN RENIN ANGIOTENSIN SYSTEM- INDUCED
HYPERTENSION AND KIDNEY INJURY. 1CRCHUM, Montreal, QC, CA, 2Mass. Gen. Hosp., Boston,
USA.
50. Chiasseu M, Destroismaisons L, Van de Velde C, Leclerc N, Di Polo A.
INCREASED EXPRESSION OF RETINAL TAU IN EXPERIMENTAL GLAUCOMA IS NEUROTOXIC.
CRCHUM, Department of Neurosciences, University of Montreal, QC, CA.
51. Cueva-Vargas JL*, Belforte N, Di Polo A.
THE PHOSPHODIESTERASE INHIBITOR IBUDILAST ATTENUATES GLIAL CELL REACTIVITY,
PRODUCTION OF PROINFLAMMATORY CYTOKINES AND NEURONAL LOSS IN EXPERIMENTAL
GLAUCOMA. Department of Neuroscience, University of Montreal Hospital Research Center,
Montreal, QC, CA.
52. Desjarlais M*, Dussault S, Dhahri W, Mathieu R, M, Rivard A.
DIRECT RENIN INHIBITION WITH ALISKIREN IMPROVES ISCHEMIA-INDUCED NEOVASCULARIZATION. Centre Hospitalier de l'Université de Montréal (CRCHUM), QC, CA.
53. Es-Saad S*, Baril M, Duchaine, J, Bonneil É, Thibault, P et Lamarre, D.
NOVEL ROLE OF THE WNT/CTNNB1 SIGNALING PATHWAY IN REGULATION OF ANTIVIRAL
INNATE IMMUNITY. Laboratoire d’immunovirologie moléculaire. IRIC and CRCHUM.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage 54. Fleury H1*, Carmona E1, Masson JY2, Tonin PN3, Provencher D1,Mes-MassonAM1.
PARP INHIBITORS IN THE TREATMENT OF OVARIAN CANCER. 1CRCHUM, Notre-Dame/Institut
du Cancer de Montréal, Montréal, QC, CA, 2.Centre de Recherche en Cancérologie de l’Université
Laval, QC, CA. 3The research institute of the McGill University Heath Centre.
55. Garcia-Duitama J*1,2, Chayer B1,2, Cloutier G 1,2,3.
IMAGERIE ULTRARAPIDE PAR ULTRASONS POUR LA CARACTÉRISATION SPECTRALE DU
SANG: VALIDATION EXPÉRIMENTALE. 1CRCHUM, Laboratoire de biorhéologie et d’ultrasonographie médicale. 2Institut de génie biomédical; 3Département de radiologie de l’Université de
Montréal, QC, CA. Projet subventionné par les IRSC. M. Garcia-Duitama est récipiendaire des
bourses d'excellence Hydro-Québec, Méditis (CRSNG) et IGB (Université de Montréal).
56. Garneau AP*, Noël M, Drolet MC, Lavoie JL, Couet J, Larivière R, Isenring P.
RÔLE DU TRANSPORTEUR KCC3 DANS LA PHYSIOLOGIE CARDIOVASCULAIRE CHEZ LA
SOURIS. CRCHU de Québec, Département de médecine expérimentale, Université Laval et
CRCHUM, Département de kinésiologie, Université de Montréal.
57. Ghosh A*, Maachi H, Lo CS, Abdo S, Chenier I, Zhang SL, Chan JSD.
HIGH FAT DIET ENHANCES BCL-2 MODIFYING FACTOR (BMF) INDUCTION OF RENAL
PROXIMAL TUBULAR CELL APOPTOSIS VIA OXIDATIVE STRESS. CRCHUM, Université de
Montréal, Montréal, QC, CA
58. Hryhorczuk C*1,2, Sheng Z3, Giguère N2, Bourque MJ2, Trudeau LE2, Routh V3, Alquier T1,2, Fulton
S1,2.
THE MONOUNSATURATED FATTY ACID OLEATE IN THE VENTRAL TEGMENTAL AREA
INHIBITS FEEDING BEHAVIOUR AND DOPAMINE NEUROTRANSMISSION.
1
CRCHUM et MDRC, 2Université de Montréal, 3-Rutgers New Jersey Medical School.
59. Hu Y*, Charpentier JWT, Lamarre A, Wu J.
A NOVEL ROLE OF ARMC5 IN T CELL FUNCTION. CRCHUM, Montréal, QC. CA.
60. Huguet J*1,2, Gaudette F1, Bélanger F1, Michaud V1,2, Turgeon J1,2.
IMPACT DU POLYMORPHISME CYP2J2*7 SUR LE MÉTABOLISME DES MÉDICAMENTS DANS LE
COEUR HUMAIN. 1CRCHUM, Centre hospitalier de l’Université de Montréal, QC, CA, 2Faculté de
Pharmacie, Université de Montréal, QC, CA.
61. Huon Y*1, Péant B1, Leclerc-Desaulniers K1, Delvoye N1, Mes-Masson AM1,2, Saad F1,3.
INTERPLAY BETWEEN IKKΕ AND ANDROGENS IN PROSTATE CANCER TUMOR GROWTH.
1
University of Montreal – CRCHUM, 2University of Montreal - Department of Medicine, 3University of
Montreal - Departement of Surgery, Montreal, QC, CA.
62. Joly F*, Soulez G. and Kauffmann C.
INFLUENCE OF THE ALTERATION OF FLOW TOPOLOGY ON THE ABDOMINAL AORTIC
ANEURYSM LOCAL GROWTH. *CRCHUM, UNIVERSITY OF MONTREAL, QC, CA.
63. Khanji C*, Berbiche D, Martin E, Lévesque L, Gagnon MM, Bareil C, Hudon E, Goudreau J, Duhamel
F, Lussier MT, Perreault S, Lalonde G, Turcotte A, Lalonde L.
MONITORING THE QUALITY OF CARDIOVASCULAR DISEASE PREVENTION IN PRIMARY CARE:
VALIDATION OF THE TRANSIT QUALITY INDICATORS. *CRCHUM, Faculty of Pharmacy, University
of Montreal, QC, CA.
64. Lécuyer MA*, Bourbonnière L, Larouche S, Terouz S, Larochelle C, Michel L, Ghannam S, Kebir, H,
Alvarez JI, Prat A.
ALCAM REGULATES BBB INTEGRITY AND PLAYS AN IMPORTANT DUAL ROLE IN
NEUROINFLAMMATION. Neuroimmunology Research Laboratory, CRCHUM, Université de Montréal,
QC. CA.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage 65. Legroux L*, Pittet C, Deblois G, Cadieux-Dion C, Mohebiany AN, Beauseigle D, Arbour N.
ELEVATED
NKG2D
LIGANDS
EXPRESSION
IN
EXPERIMENTAL
AUTOIMMUNE
ENCEPHALOMYELITIS. Department of Neurosciences, Université de Montréal, CRCHUM, Montréal,
QC, CA.
66. Leung YH*1,2, Turgeon J1,2, Michaud V1,2.
INHIBITION DE L'EFFLUX DE L'ACIDE LACTIQUE PAR L'ATORVASTATIN DANS DES CELLULES
MUSCULAIRES SQUELLETTIQUES HUMAINES. 1Faculté de Pharmacie, Université de Montréal,
Montréal, QC, CA, 2CRCHUM, QC, CA.
67. Liao MC*1, Chang SY1, Zhao XP1, Chenier I1, Zhang SL1.
AT2R DEFICIENCY IMPAIRS PODOCYTE FUNCTION VIA THE ALTERATION OF ACE2 GENE
EXPRESSION. 1CRCHUM, Montréal, QC, CA.
68. Lu J*1,2, Grangeon A1,2, Gaudette F3, Keiser M4, Michaud V1,2, Turgeon J1,2,3.
EFFETS DES COMPOSÉS TRICYCLIQUES SUR LE TRANSPORT DU ZOLMITRIPTAN PAR
OATP1A2.
1
Université de Montréal; 2CRCHUM; 3CRCHUM, plateforme pharmacocinétique; 4Department of
Clinical Pharmacology, University of Greifswald, Greifswald, Germany.
69. Lupien-Meilleur J, Santos MM.
CONTRÔLE DES MALADIES INFLAMMATOIRES INTESTINALES ET DU CANCER PAR LA
MODULATION. DES SIDÉROPHORES. CRCHUM, Département de microbiologie, infectiologie,
immunologie.
70. Manolescu DC*1, Jankowski M1, Danalache BA1, Wang D1, Broderick TL2, GutkowskaJ1, Chiasson JL.
RETINOIC ACID (RA) PRESERVES OXYTOCIN-NATRIURETIC PEPTIDES SYSTEM AND
PROTECTS AGAINST FIBROSIS IN DIABETIC (ob/ob) MICE HEART. 1CRCHUM, Méd/Nutrition,
Université de Montréal, 2Midwestern U, USA
71. Nadeau S*1.2, O’Hagan-Wong K3, Colmegna I3, Rodier F1,2.
EFFETS COMPARATIFS DE LA SÉNESCENCE CELLULAIRE ET DU VIEILLISSEMENT DANS UN
MODÈLE HUMAIN DE NICHE HÉMATOPOÉTIQUE. 1CRCHUM, Department of Radiology, RadioOncology and Nuclear Medicine, Université de Montréal, QC, CA, 2Institut du Cancer de Montréal, QC,
CA, 3Division of Rheumatology, McGill University Health Centre, Montreal, QC, CA.
72. Nchienzia HA*, Abdo S, Zhao XP, Chang SY, Chenier I, Chiasson JL and Zhang SL.
ROLE OF HEDGEHOG INTERACTING PROTEIN (HHIP) IN PANCREATIC Β CELL FUNCTION IN
DIABETES. *CRCHUM, Department of Medicine, Montreal, QC, CA.
73. Pickles S*, Stubbs H, Legroux L, Arbour N, Meiering EM, Vande Velde C.
UNCOVERING THE ROLE OF MISFOLDED SOD1 IN ALS PATHOGENESIS. *CRCHUM,
Département de médecine, Université de Montréal, QC, CA.
74. Planas D*1,2, Monteiro P1,2, Goulet JP3, Gosselin A1, Routy JP4, Ancuta P1,2.
MOLECULAR MECHANISMS OF HIV-1 PERMISSIVENESS IN GUT-HOMING CD4+ T-CELLS.
1
CHUM-Reseacrh Centre, Montréal, 2Department of Microbiology, Infectiology, and Immunology,
Université de Montréal, 3CATRaGENE, Montréal, 4McGill University Health Center, Montréal, QC, CA.
75. Ponomarchuk OO*, Boudreault F & Grygorczyk R.
ROLE OF INTRACELLULAR CALCIUM SIGNALLING IN REGULATORY VOLUME DECREASE
CRCHUM, Département de Médecine, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
76. Possamaï D*, Monette A, Lapointe R.
CONTRÔLE DES FONCTIONS ALTERNATIVES DES LYMPHOCYTES B. *CRCHUM, Département
de médecine, Université de Montréal, QC, CA.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage 77. Quintana Bárcena P*1, Lord A2, Lizotte A2, Jouini G3, Berbiche D, Lalonde L1, 3.
DEVELOPMENT AND VALIDATION OF SEVERITY CATEGORIZATION FOR PHARMACEUTICAL
EVALUATION (SCOPE) CRITERIA TO EVALUATE DRUG-RELATED PROBLEMS IN CHRONIC
KIDNEY DISEASE: A COMMUNITY PHARMACY PERSPECTIVE.
1
Faculty of Pharmacy, Université de Montréal, 2Centre de Santé et des Services Sociaux de Laval,
3
Centre de recherche, Centre Hospitalier de l'Université de Montréal (CRCHUM).
78. Samba-Mondonga M*, Constante M, Santos MM.
LE RÔLE DE MYD88 DANS LE METABOLISME DU FER. *CRCHUM, Hôpital St-Luc, Département
de Microbiologie, infectiologie et immunologie, Université de Montréal. QC, CA.
79. Savoji H*1,3,5, Maire M3, Wertheimer MR5,1, Ajji A2,1, Lerouge S3,4.
ELECTROSPUN NANOFIBER SCAFFOLDS AND PLASMA POLYMERIZATION: A PROMISING
COMBINATION TOWARDS COMPLETE, STABLE ENDOTHELIAL LINING FOR VASCULAR
GRAFTS. École Polytechnique de Montréal, Montreal, QC, Canada, 1Institute of Biomedical
Engineering, 2Department of Chemical Engineering, 5Department of Engineering Physics), 3Laboratory
of Endovascular Biomaterials (LBeV), Research Centre, Centre Hospitalier de l’Université de Montréal
(CRCHUM), Montreal, QC, CA, 4Department of Mechanical Engineering, École de technologie
supérieure (ÉTS), Montreal, QC, CA.
80. Semmler S*1,5, Pickles S1,2, Destroismaisons L1, McBride H4,5, Vande Velde C1,2,3.
THE E3 UBIQUITIN LIGASE TRAF6 STIMULATES ALS-LINKED MUTANT SOD1 AGGREGATION
AND INTERACTS WITH MISFOLDED SPECIES ON SPINAL CORD MITOCHONDRIA. 1CRCHUM,
2
Département de Biochimie et 3Neuroscience, Université de Montréal, QC, CA, 4Montreal Neurological
Institute, 5Department of Neurology and Neurosurgery, McGill University, QC, CA.
81. Shamansurova ZM*, Tan P, Ahmed B M-A, Michel C, Kajla S, Seda, O and Lavoie JL. EFFECTS OF
THE PRORENIN RECEPTOR ON BODY WEIGHT AND INSULIN SENSITIVITY. *CRCHUM,
Department of Physiology, Biochemistry, Kinesiology of the University of Montreal, MDRC.
82. Shi Y*, Lo CS, Abdo S, Chenier I, Zhang SL And Chan JSD.
MOLECULAR MECHANISM OF ANGIOTENSIN 1-7 IN PREVENTING SYSTEMIC HYPERTENSION
AND KIDNEY INJURY IN DIABETIC MICE. CRCHUM, Montréal, QC, CA.
83. Sima A, Manolescu DC, Bhat PV, Chiasson JL.
IMPLICATION DES MOLECULES RELIÉES AU MÉTABOLISME DES RETINOIDES DANS
L’OBESITÉ ET A RÉSISTANCE A L’INSULINE. CRCHUM, Faculté Médecine/Nutrition, Université de
84. Simo-Cheyou ER*, Srivastava AK.
ANGIOTENSIN-II (ANG-II)-INDUCED EXPRESSION OF THE EARLY GROWTH RESPONSE
PROTEIN 1 (EGR-1) IS MEDIATED BY CAMKII-DEPENDENT PATHWAY IN VASCULAR SMOOTH
MUSCLE CELLS (VSMC). *CRCHUM, Faculty of Medicine, University of Montreal, QC, CA.
85. Tan JJ*, Brochiero E, Grygorczyk R.
STRETCH-INDUCED ATP RELEASE IN RAT ALVEOLAR TYPE II CELLS. *CRCHUM, Département
de médecine, Université de Montréal, QC, CA.
86. Therrien M*1,3, Parker JA2,3.
USING C.ELEGANS TO UNDERSTAND FRONTOTEMPORAL DEMANTIA. 1Pathology and Cell
biology department, University of Montréal, 2Neuroscience Department, University of Montréal, QC,
CA, 3CRCHUM.
87. Turcotte M*, Spring K, Cousineau I, Chouinard G, Pommey S, Lepage C, Gorges J, Bowtell D, Rahimi
K, Provencher D, Mes-Masson AM, Stagg J.
CD73 IS ASSOCIATED WITH POOR PROGNOSIS IN HIGH-GRADE SEROUS OVARIAN CANCER
CRCHUM, Université de Montréal, QC, CA.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage 88. Veillette M*, Coutu M, Richard J, Batraville LA, Dagher O, Kaufmann DE, Roger M, Finzi
A.L’ÉLIMINATION DES CELLULES INFECTÉES PAR LE VIH, VIA LA RÉPONSE CYTOTOXIQUE
DÉPENDANTE DES ANTICORPS, REQUIERT UNE CONFORMATION PARTICULIÈRE DE
L’ENVELOPPE VIRALE. *CRCHUM.
89. Veriepe J*, Parker P.
ACTIVATION
DU
SYSTEME
IMMUNITAIRE
VIA
TIR-1/SARM
LORS
DE
LA
NEURODEGENERESCENCE DANS DES MODELES GENETIQUES DE SCLEROSE LATERALE
AMYOTROPHIQUE. CRCHUM, Département de Pathologie et Biologie Cellulaire, Département de
Neurosciences, Université de Montréal, QC, CA.
90. Wacleche V, Ancuta P. CARACTÉRISATION D'UNE NOUVELLE POPULATION TH17 AVEC DES
CONTRIBUTIONS DISTINCTES À LA PATHOGENÈSE À VIH. CRCHUM, Université de Montréal,
QC, CA.
91. Wang Y*, Wu J.
OVEL ROLES OF EPHS/EFNS IN CATECHOLAMINE SECRETION AND HYPERTENSION
CRCHUM, NOUVEAU CRCHUM, Department of Biomedical.
92. Yang B*, Hamelin K, Pomerleau L, Peng J, Tremblay J, Patey N, Hébert MJ.
ANTI-LG3 ANTIBODIES AGGRAVATE IRI CAUSED AKI. CRCHUM, Université de Montréal, QC, CA.
93. Zeighami A*, Dumas R, Aissaoui R.
TIBIOFEMORAL CONTACT POINTS MEASURED WITH BIPLANAR RADIOGRAPHIC IMAGES TO
BE INTRODUCED IN A DYNAMIC INVERSE MODEL OF KNEE JOINT. CRCHUM, Département de
génie de la production automatisée, École de technologie supérieure, QC, CA.
94. Zhao S, Mugabo Y, Iglesias J, Attané C, Thomas G, Poursharifi P, Nguyen TA, Zhang D, Peyot ML,
Joly E, Brown M, Madiraju M, Prentki M.
MONOACYLGLYCEROL ACTIVATION OF PPARa MEDIATES WHITE ADIPOSE BROWNING IN AbHYDROLASE DOMAIN6-ko MICE. MDRC-CRCHUM, Département de Biochimie et Nutrition,
95. Zhao XP*1, Chang SY1, Liao MC1, Chenier I1, Ingelfinger JR2, Chan JSD1, Zhang SL1.
MATERNAL DIABETES MODULATES KIDNEY FORMATION IN PROGENY: THE FUNCTIONAL
INTERACTION BETWEEN CATALASE AND HEDGEHOG INTERACTING PROTEIN (HHIP).
1
CRCHUM, Montreal, QC, CA, 2Harvard Medical School, Pediatric Nephrology Unit, Massachusetts
General Hospital, Boston, MA, USA.
Étudiants de niveau postdoctoral
Membres du jury, les docteurs Mira Johri, Naglaa Shoukry, Adriana Di Polo , Johanne Tremblay
96. Aceros H*, Der Sarkissian S, Borie M, Vu MQ, Bessette PO, Stevens LM, Mansour S, Roy DC,
Noiseux N.
DISCOVERY OF A NATURAL COMPOUND TO STIMULATE STEM CELL ACTIVITY AND
RESILIANCE TO HYPOXIC MICROENVIRONMENT. *CRCHUM, Université de Montréal, Montréal,
QC, CA.
97. Allard B*, Chrobak P, Stagg J.
ETUDE DU ROLE DE CD73 ET DES RECEPTEURS ADENOSINERGIQUES DANS LA
LYMPHANGIOGENESE INFLAMMATOIRE CRCHUM, Axe Cancer, Université de Montréal, Montréal,
QC, CA.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage 98. Attané C*, Peyot ML, Wang S, Mitchell G.A, Lussier R, Zhao S, Pineda M, Madiraju S.R. M, Joly E et
Prentki M.
ROLE DE L’ADIPOSE TRIGLYCERIDE LIPASE ET DE LA LIPOLYSE DANS LA REGULATION DE
LA REPONSE INSULINIQUE AU GLUCOSE. CRCHUM et Hôpital Sainte Justine, Centre de
recherche du Diabète de Montréal, QC, CA.
99. Baxter AE*1, 2, Russell RA1, Kauffmann DE2, Sattentau QJ1.
HIV-1 TRANSMISSION FROM T CELLS TO MACROPHAGES. 1Sir William Dunn School of
Pathology, University of Oxford, UK, 2CR-CHUM, Université de Montréal, QC, CA.
100. Communal L*1, Medrano M2, Sircoulomb F2, Labouba I1, Chouinard G1, Provencher D1,3, Rottapel R2,
Mes-Masson AM1.
VALIDATION DE CIBLES THERAPEUTIQUES DU CANCER DE L'OVAIRE. 1CRCHUM, Institut du
Cancer de Montréal, Montreal, QC, CA, 2Institut d’Ontario de Recherche contre le Cancer, Toronto,
ON, CA, 3Département de Médecine, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
101. Constante M*, Fragoso G, Santos MM.
THE INTERPLAY OF IRON, MICROBIOTA AND HOST AT THE MUCOSAL INTERFACE *CRCHUM,
Montréal, QC, CA.
102. Debbeche O*, Finzi A.
STABILISATION DU TRIMÈRE DE L’ENVELOPPE DU VIH-1. *CRCHUM, Université de Montréal,
Montréal, QC, CA.
103. Dhahri W*, Dussault S, Haddad P, Turgeon J, Tremblay S, Desjarlais M, Mathieu R, Rivard A.
RÔLE OF MICRO RNA LET-7F IN CIGARETTE SMOKE-INDUCED IMPAIRMENT OF
NEOVASCULARIZATION. *CRCHUM, Département de Médecine, Université de Montréal, QC, CA.
104. Fisette A*1, Madiraju M, Prentki M1,2, Alquier T3 et Fulton S1.
LA PERTE DE FONCTION D’ABHD6 DANS L’HYPOTHALAMUS VENTROMEDIAN ALTERE LA
DEPENSE ENERGETIQUE ET INDUIT L’OBESITE CHEZ LA SOURIS. CRCHUM et CRDM,
1
Département de Nutrition, 2Biochimie, 3Médecine, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
105. Girault A1, Chebli J1, Privé A1, Maillé E1, Peloquin F1, Robichaud A2, Brochiero E1. KvLQT1
FUNCTION IN LUNG PHYSIOLOGY. 1Department of Medicine, Université de Montréal, CRCHUM,
Montréal, QC, CA, 2SCIREQ Inc., Montréal, QC, CA.
106. Grasland-Mongrain P1, Miller-Jolicoeur E1, Souchon R2, Catheline S2, Cloutier.
ELASTOGRAPHIE PAR FORCE DE LORENTZ. 1LBUM, CRCHUM, Université de Montréal, QC, CA,
2
INSERM u1032, Université de Lyon, F-69003, Lyon, France.
107. Ho, V*, Parent, ME, Pintos J, Abrahamowicz, M, Gauvin, L, Siemiatycki, J, Koushik, A.
LIFETIME OCCUPATIONAL PHYSICAL ACTIVITY AND LUNG CANCER RISK. *CRCHUM, Axe
Risques à la santé, QC, CA.
108. Koppe L*1, Nyam E1, Moullé V1, Poitout V1.
MÉCANISMES DU DÉFAUT INSULINOSÉCRÉTOIRE ASSOCIÉ À L’INSUFFISANCE RÉNALE
CHRONIQUE (IRC). 1CRCHUM et département de médecine, Université de Montréal, Montréal, QC,
CA.
109. Lo CS*, Shi Y, Ghosh A, Chenier I, Zhang SL and Chan JSD.
OVEREXPRESSION OF HETEROGENEOUS NUCLEAR RIBONUCLEOPROTEIN F INHIBITS
RENAL ANGIOTENSINOGEN EXPRESSION, ATTENUATES SYSTOLIC BLOOD PRESSURE AND
TUBULAR INJURY IN TYPE 2 DIABETIC DB/DB TRANSGENIC MICE. CRCHUM, Montréal, QC, CA.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage 110. Malaquin N*1,2, Carrier-Leclerc A1,2, Coppé JP3, Dessureault M1,2, Martinez A1,2, Cardin G1,2, Campisi
J3,4, Rodier F1,2.
CHROMATIN STRESS TRIGGER TIP60/ATM-MEDIATED CELLULAR SENESCENCE AND RAPID
INFLAMMATORY SECRETION WITHOUT DNA DAMAGE. 1CRCHUM, Université de Montréal,
2
Institut du cancer de Montréal, 3Lawrence Berkeley National Laboratory, Berkeley, USA, 4Buck
institute for age research, Novato, USA.
111. Mancini A+*, Bertrand G@, Vivot K+, Carpentier E#, Ghislain J+, Bouvier M#, Poitout V+#.
L'AGONISME BIAISÉ DU RECEPTEUR DES ACIDES GRAS FFAR1. +CRCHUM, Département de
médecine et #Département et de Biochimie, Université de Montréal, @Institut de Génomique
Fonctionnelle, Universités de Montpellier 1 & 2.
112. Mehta H*1, Nguyen V1, Perez G2, Goulet PO1, Koenig M2, Sénécal JL2, Sarfati M1.
A DENDRITIC CELL INDUCED MODEL OF EXPERIMENTAL SYSTEMIC SCLEROSIS.
1
Immunoregulation Laboratory and 2Laboratory for Research in Autoimmunity, *CRCHUM, Montréal,
QC, CA.
113. Morou A*, Brassard N, Langois S, Peneau C, Routy JP, Kaufmann DE.
IMPACT OF PD1 BLOCKING ON THE MOLECULAR SIGNATURE OF HIV-SPECIFIC CD4 T CELLS
*CRCHUM, University of Montreal, QC, CA.
114. Plante E*, Menaouar A, Yip D, Jankowski M, Gutkowka J.
UN TRAITEMENT AVEC DE L’OCYTOCINE PRÉVIENT LE DÉVELOPPEMENT DE LA
CARDIOMYOPATHIE DIABÉTIQUE DASN UN MODÈLE DE SOURIS DB/DB. *CRCHUM,
Département de Médicine, Université de Montréal, QC, CA.
115. Richard J*1, Coutu M1, Veillette M1, Batraville LA1, Alsahafi N1, Chapleau JP1, Cheng-Mayer C2, Wu X2
and Finzi A1.
IDENTIFICATION OF NEW ADCC-MEDIATING ANTIBODIES TARGETING THE HIV-1 ENVELOPE.
1
CRCHUM, 2ADARC, NY.
116. Ruffin M*1, Bilodeau C1, Maillé E1, Lafayette S2, Trinh NTN1, Beaudoin T2, Desrosiers MY1, Rousseau
S2, Nguyen D2, Brochiero E1.
PSEUDOMONAS AERUGINOSA PROTEASES UNDER LASR CONTROL IMPAIR AIRWAY
EPITHELIAL REPAIR. 1CRCHUM, Département de médecine, Université de Montréal, Montréal, QC,
CA; 2Mc Gill, Meakins Christie Laboratories.
117. Samarut E*, Bekri A, Drapeau P.
HOW GLYCINE SIGNALING REGULATES EARLY EMBRYO NEUROGENESIS IN ZEBRAFISH?
*CRCHUM, Département de neurosciences, Université de Montréal, QC, CA.
118. Schmeisser K, Ghassemi YF , Parker JA.
RAPID DRUG DISCOVERY IN GENETIC MODELS OF AUTISM SPECTRUM DISORDERS
CRCHUM, Department of Neuroscience, Université de Montréal, QC, CA.
119. Tchakarska G1*, Culot E1, Huntsman D2, Shah S2, Tonin P3,4, Provencher D1,5, Mes-Masson AM1,5.
CHROMOSAL INSTABILITY MAY BE DUE TO SPINDLE ASSEMBLY CHECKPOINT
MISREGULATION AND SEGREGATION DEFECTS IN HITH GRADE SEROUS EPITHELIAL
OVARIAN CANCER. 1CRCHUM/Institut du cancer de Montréal, 2Molecular Oncology, BC Cancer
Agency, Vancouver, 3Department of Human Genetics, McGill University, Montreal, 4The Research
Institute of the McGill University Health Centre, Montréal, 5Département de Médecine, Université de
120. Vivot K1, Zarrouki B1, Moullé V1, Mancini A1, Ghislain J1, Poitout V1,2.
RGS16 CONTRÔLE LA SÉCRÉTION D’INSULINE EN LIMITANT LE RETROCONTROLE NEGATIF
EXCERCÉ PAR LA SOMATOSTATINE. 1Centre de Recherche du Diabète de Montréal, CRCHUM,
2
Département de Médecine, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
Séance de présentations par affiche – Agora, 5e étage Étudiants de niveau Stagiaire 1er cycle
121. Chapleau JP*, Richard J, Finzi A.
DÉVELOPPEMENT D’UN ESSAI CELLULAIRE À HAUT DÉBIT POUR ÉTUDIER LA
CONFORMATION DE L’ENVELOPPE DU VIH-1 SOUS SA FORME TRIMÉRIQUE. Département de
microbiologie, infectiologie et immunologie, Université de Montréal et Centre de Recherche du CHUM,
Montréal, QC, CA
122. Zoubchenok D*, Veillette M, Finzi A.
ÉTUDE DE L’IMPACT DE LA CO-EXPRESSION DU RÉCEPTEUR CD4 SUR LA FUSION
CELLULAIRE MÉDIÉE PAR LES GLYCOPROTÉINES DE L'ENVELOPPE VIRALE DU VIRUS DE
L’IMMUNODÉFICIENCE HUMAINE DE TYPE 1 (CHRONIQUES ET FONDATEURS). CRCHUM,
Département de microbiologie, infectiologie et immunologie, Université de Montréal, Montréal, QC,
CA.
   Fin des présentations par affiche   
15 h Pause-santé - l’Agora, 5e étage
16 h 00 à 17 h 00
CONFÉRENCE DE PRESTIGE
Jacques A. de Guise
Responsable de l’axe imagerie et ingénierie « L’imagerie et l’ingénierie aux
confluences de l’innovation en technologies de la santé »
17 h 00
Remise des prix du congrès
17 h 30
Cocktail - Agora, 5e étage
1
2
ÉTUDE DU RÔLE DE L'ENZYME CD73 ET DE L'ADÉNOSINE DANS
LA TRANSFORMATION CELLULAIRE ONCOGÉNIQUE.
Allard D*, Spring KATHLEEN, Stagg J.
CRCHUM, FACULTÉ DE PHARMACIE, UNIVERSITÉ DE
MONTRÉAL, QC, CA.
Les récents travaux du Dr. Stagg ont permis d’identifier l’enzyme
CD73, qui catalyse la génération d’adénosine extracellulaire, comme
cible thérapeutique afin de stimuler la réponse immunitaire antitumorale (Stagg et al, PNAS, 2010). Bien que CD73 et l’axe
adénosinergique ont largement été étudiés pour leurs fonctions protumorigéniques (Stagg et Smyth, Oncogene, 2010), l’activité directe de
CD73 et de l’adénosine sur les cellules pré-cancéreuses et
cancéreuses sont moins définies. Une question importante demeure :
l’ecto-enzyme CD73 régule-t-elle la transformation cellulaire? Des
données préliminaires suggèrent que CD73 soit requise à la
sénescence prématurée des fibroblastes embryonnaires de souris
(MEF). De plus, il semble que les MEF n’exprimant pas CD73 sont plus
tolérantes à la transformation cellulaire oncogénique. Les MEF
exprimant CD73 présentent des niveaux réduits d’activité de la voie de
signalisation des MAPK, reflétant probablement une stratégie
d’échappement à la sénescence induite par un stress oncogénique
(Deschenes-Simard et al, Cancer Res, 2014). Cette diminution
d’activité des MAPK se traduit en une croissance tumorale moins
agressive des MEF exprimant CD73 in vivo et in vitro. De plus,
l’absence de CD73 dans les MEF semble stabiliser le génome de ces
cellules et limiter la présence d’aberrations chromosomiques suivant la
transformation cellulaire oncogénique. Ces observations étonnantes
révèlent un rôle inattendu de CD73 lors de la transformation cellulaire
oncogénique. Considérant son activité immunosuppressive et protumorigénique, il est intriguant de constater que CD73 pourrait
également posséder des fonctions suppressive de tumeurs. En accord
avec la théorie de la pléiotropie antagoniste, il n’est pas impossible que
CD73 puisse procurer à la fois un bénéfice et un effet délétère à
différents moments. Nous proposons donc de tester l’hypothèse selon
laquelle l’expression de CD73 sur les cellules pré-cancéreuses
restreint la transformation oncogénique et le développement tumorale.
CARACTÉRISATION D'UN MODÈLE CELLULAIRE DE STRESS DE
TYPE INFLAMMATOIRE ET NUTRITIONNEL LORS DU SYNDROME
DE LEIGH VERSION CANADIENNE FRANÇAISE.
Almeida R*, Tremblay M, Rose C, Bémeur C et le Consortium de
l'acidose lactique.
CRCHUM, Département de nutrition, Université de Montréal, QC, CA.
Introduction : Le Syndrome de Leigh version canadienne française
(LSFC) ou « acidose lactique » est une maladie mitochondriale rare
causée par la mutation du gène LRPPRC (leucine-rich
pentatricopeptide repeat motif containing). Elle est caractérisée
principalement par une déficience tissu-spécifique (cerveau et foie) en
cytochrome c oxydase de la chaîne respiratoire ainsi que par des
crises fatales d'acidose lactique. Celles-ci sont déclenchées, entre
autres, par l'infection/inflammation et la surcharge nutritionnelle. À ce
jour, aucun traitement n'existe pour les prévenir et l'identification d'un
modèle expérimental de stress inflammatoire et nutritionnel est
essentiel afin d'élucider les mécanismes par lesquels la mutation
affecte les cellules LSFC.
Méthodes : Nous avons évalué la viabilité des fibroblastes de peau de
sujets contrôles et de patients atteints d'acidose lactique par Resazurin
dans différentes conditions de stress inflammatoire et nutritionnel,
telles que LPS (2 μg/ml), TNF-α (100 ng/ml) et palmitate (1 mM), et ce,
à différentes périodes d'incubation (0, 24, 48 et 72h).
Résultats : Une diminution significative (p<0,001) de la viabilité
cellulaire a été observée 48h après l'exposition de palmitate ou en
combinaison avec TNF-α. De plus, une tendance à une susceptibilité
accrue au stress est notée dans les fibroblastes de patients LSFC.
Discussion/Conclusion : Le stress inflammatoire et nutritionnel
semble influencer la viabilité des fibroblastes de patients LSFC. À plus
long terme, la modulation de la réponse cellulaire par des agents
« thérapeutiques » incluant les acides gras oméga 3, pourrait s'avérer
intéressante.
Projet subventionné par les IRSC.
Projet subventionné par le Grand défi Pierre Lavoie.
3
ATTEMPTED SUICIDE AMONG PERSONS WHO INJECT DRUGS:
EXAMINING THE ROLE OF SUBSTANCE USE PATTERNS.
Artenie AA*, Bruneau J, Zang G, Puzhko S, Jutras-Aswad D.
CRCHUM, QC, CA.
Introduction: While the elevated risk of suicide attempt (SA) among
persons who inject drugs (PWID) is well documented, whether use of
different substances is associated with varying degrees of risk remains
unclear. We sought to examine the associations between substance
use patterns and SA in a prospective cohort of PWID in Montreal.
Results : Between 2004 and 2011, participants completed a
questionnaire eliciting information on socio-demographics, substance
use patterns, related behaviors, and mental health markers.
Generalized estimating equations were used to model the relationship
between self-reported use of six common substances (cocaine,
amphetamine, opioids, sedative-hypnotics, cannabis and alcohol),
associated patterns of use (chronic, occasional and none), and a
recent (past six-month) SA.
Methods : At baseline, of 1,240 participants (median age: 39, 84%
male), 71 (5.7%) reported a recent SA. Among 5,621 observations
collected during follow-up, 221 attempts were reported by 143 (11.5%)
participants. In multivariate analyses adjusting for socio-demographics
and psychosocial stressors, among primary drugs of abuse, chronic
[Adjusted Odds Ratio (AOR): 1.97] and occasional (AOR: 1.92)
cocaine use, and chronic amphetamine use (AOR: 1.96) were
independently associated with SA. Among co-used substances,
chronic sedative-hypnotic use was independently associated with an
attempt (AOR: 2.29). No statistically significant association was found
for the remaining substances.
Discussion : Among PWID at high risk of SA, stimulant users appear
to constitute a particularly vulnerable sub-group. While the
mechanisms underlying these associations remain to be elucidated,
findings suggest that stimulant-using PWID should constitute a prime
focus of suicide prevention efforts.
Project funded through the RQSHA-FRQS.
4
PLATEFORME MICROFLUDIQUE POUR LA PRÉDICTION DE LA
RÉPONSE DE TUMEURS SOLIDES AUX TRAITEMENTS ANTICANCER.
Astolfi M*1,2, Péant B2, Kendall-Dupont J2, Lateef A2, Provencher D2,3,
Saad F2,3, Mes-Masson AM2,3, Gervais T1,2,4.
1
Institut de génie biomédical, École Polytechnique de Montréal, QC,
CA, 2Institut du Cancer, CRCHUM, QC, CA, 3Département de
Médecine, Université de Montréal, QC, CA, 4Département de génie
physique, École Polytechnique de Montréal, QC, CA.
Introduction : Le cancer s’avère difficile à traiter dû à la réponse
différente des patients aux traitements disponibles. Notre approche
consiste à découper des échantillons primaires de tumeur à des tailles
sous-millimétriques, puis à les exposer à différents traitements afin de
trouver l’option la plus prometteuse pour chaque patient. Pour ce faire,
notre objectif primaire vise à développer un protocole permettant de
préserver la viabilité des tissus cancéreux primaires in vitro.
Méthodes : Des xénogreffes de souris ont été utilisées pour
modéliser les tissus cancéreux. Suite à leur découpe, les
microtumeurs ont été chargées dans les microsystèmes et incubées
pendant 1 à 10 jours, pour ensuite être marquées avec des
fluorophores de viabilité et être imagées par microscopie confocale.
Les résultats de segmentation des images obtenues ont été validés
par deux autres méthodes d’analyse de viabilité : la cytométrie en flux
et l’analyse par colorimétrie de la libération de marqueurs de mort
cellulaire (LDH).
Résultats : Les microsystèmes conçus sur mesure ont permis un
piégeage stable des microtumeurs qui ont atteint des niveaux de
viabilité supérieurs à 55% après 10 jours.
Conclusion : Les microtumeurs de souris peuvent être maintenues
en vie suffisamment longtemps pour que les tests de sensibilité aux
chimiothérapies soient initiés et pour que le protocole soit appliqué à
différents types de tumeurs solides humaines.
Subventionné par le CRSNG, le FRQNT, le CQDM, le MovemberPCC et le CUOG.
5
IMPACT OF CORRECTORS AND POTENTIATOR COMBINATIONS
ON CF AIRWAY EPITHELIAL REPAIR UNDER INFECTIOUS
CONDITIONS.
Bilodeau C*1,2, Ruffin M1,2, Trinh NTN1,2, Maillé É1, Brochiero E1,2.
1
CRCHUM, 2Department of Medicine, Université de Montréal,
Montréal, QC, CA.
Introduction : Cystic fibrosis (CF), caused by CFTR mutations, is
characterized by bacterial colonization and chronic inflammation
leading to a progressive damage of the airway epithelium. Our previous
studies revealed a delayed CF airway wound repair, in part due to the
basic defect of CFTR, which is partially reverse after CFTR rescue.
However CFTR correction was compromised in the presence of
Pseudomonas aeriginosa diffusible material (PsaDM) and wound repair
was impaired. In order to find the best combination of compounds to
improve epithelial repair, we decided to test the impact of correctors
and potentiator under non-infectious and infectious conditions.
Method : We evaluated the efficiency of the CFTR correctors (VRT325, Vx-809) and potentiator (Vx-770) on the early phases of epithelial
repair, by performing wound healing experiments on different cell
models.
Results: Our results in the absence of infection showed a higher
increase in repair rates in cell lines (CuFi-4, CuFi-1) and in CF human
primary airway cells treated with combination of a corrector (VRT-325
or Vx-809) and a potentiator (Vx-770) compared to a corrector alone.
Unfortunately, in the presence of infection (PsaDM), the beneficial
effect of VRT-325 or Vx-809 alone on human primary airway epithelial
repair was severely impaired. A significant improvement of wound
repair was however observed with the combination of one corrector
and one potentiator. Interestingly the combination of all three
components (VRT-325, Vx-770, Vx-809) seemed to further enhance
the repair rates in the presence of PsaDM.
Conclusion : Altogether, our data first showed that the presence of
infectious products affected the ability of CFTR correctors to improve
CF airway epithelial repair. However, CFTR functional rescue with
CFTR correctors in combination with a potentiator allowed a better
restoration of repair rates, even in the presence of infection.
Project supported by Cystic Fibrosis Canada and Biobank of of
CRCHUM and RHN of FRQS.
25
6
+
DEFINING
THE MOLECULAR DEATH
PATHWAYS OF
LEADING
TO
[Na
]i/[K+]i-INDEPENDENT
RENAL
SENESCENCE
IN
HUMAN
PRIMARY
OVARIAN
CANCER
CELL.
EPITHELIAL CELLS TRIGGERED BY CARDIOTONIC
Calvo-Gonzalez LL*, Cheng S, Skulimowski M, Mes-Masson AM,
STEROIDS
IS MEDIATED BY P38 MAPK ACTIVATION
Rodier
F.
and Sergei
N. Orlov
Olga A. Akimova,
Hamet
CRCHUM,
Institut duPavel
Cancer,
Universite
de Montreal,
Montréal, QC,
Research Centre, CHUM – Technopôle Angus, Montreal, PQ
CA.
Introduction : Advanced ovarian cancer (OvCa) is very lethal with 5
years
survival rate
belowit30%.
To improve
treatments
is
Introduction.
Recently,
was shown
that the
cytotoxicefficacy
action of
crucial to understand how OvCa cells respond to therapies. Using
cardiotonic
steroids in renal epithelial
C7-MDCK cells is caused
tissues/cells from CRCHUM biobanks,
we find that more than 90% of
+ +
,K arrest
-ATPase
-subunit
but isa
by
theirOvCa
interaction
thea Na
primary
cultures with
undergo
growth
in culture
suggesting
+ +
senescent-like ofphenotype.
Senescence
a tumor suppressor
independent
the inhibition
of Na ,Kis-ATPase-mediated
ion
mechanism
regulated
by the
p53type-specific
pathway, but phenomenon
close to 95 %
fluxes. Thegenerally
mechanism
of this
cell
of
OvCa are
p53 mutated.
Our hypothesis
thatrole
primary
human
OvCa
remains
unknown.
This study
examinedisthe
of MAP
kinases
cells retain the ability to undergo senescence in a p53 independent
in
death Our
signaling
induced
ouabain intheC7-MDCK
manner.
objective
is to by
characterize
senescent cells.
phenotype of
Methods.
Cell
morphology,
cell
attachment,
chromatin cleavage
OvCa cells in culture and whether it happens in tissues.
Methods
: To demonstrate
that OvCa
cells retain
the abilitycell
to undergo
and
caspase-3
activity were
employed
to estimate
death.
senescence we
early as
growing
and late passage
growth
was measured
the steady-state
distribution
of
Intracellular
Na+compared
22
+
arrested
cultures
for
selected
hallmarks
of
senescence.
We
also
Na after 6-hr incubation in control and K -free media. Protein
treated the cells with irradiation to evaluate if this stimulus could trigger
phosphorylation
was detected
using Western
Blot analysis.
their senescence response.
To validate
whether tumors
are undergoing
Results. 6-hr
exposure
of C7-MDCK
cells to 3(TMA).
µM ouabain led
senescence
in vivo
we analyzed
Tissue microarrays
Results
: We found that
growth
to phosphorylation
of p38
but arrested
not JNKand
½ irradiated
and ERKprimary
MAPK.OvCa
We
cultures
are
positive
for
the
selected
hallmarks
of
senescence.
revealed that the death of ouabain-treated cells was suppressed
Moreover
we finda they
were
for p16INK4a,
potent
by SB 202190,
potent
p38positive
inhibitor.
Previously,another
we reported
tumor suppressor gene. The preliminary TMA data revealed that
that modest
intracellular
acidification
from from
pH patients
7.4 to after
6.7
p16INK4a
it’s also
overexpressed
in tumor tissues
suppresses death signaling in ouabain-treated C7-MDCK cells.
chemotherapy.
Conclusion
We demonstrate
cells retain the
We observed: that
in contrast tothat
cellprimary
death, OvCa
p38 phosphorylation
ability
to
undergo
senescence.
Since
treated
OvCa
tumors
are positive
triggered by ouabain in renal epithelial cells was not affected
by
for
p16INK4a,
we
conclude
that
senescence
may
be
the
medium acidification.
major outcome after treatment. As the role of cellular senescence
Conclusions.
strongly
suggest
that activation
of p38
remains
unclearOur
in thedata
context
of cancer
treatment,
it will be interesting
MAPK
in
ouabain-treated
C7-MDCK
cells
contributes
to cell
to determinate how it affects patients survival
death signaling at a step upstream of its pHi-sensitive element.
The molecular origin of upstream and downstream intermediates
of p38-mediated signaling evoked by ouabain should be
examined
further.by Supported
byResearch
KFOC and
CIHR.
Project
supported
the Terry Fox
Institute
7
COMBINING ANTI-HER2 MAB WITH TLR-3 AND -9 AGONISTS.
Charlebois R, Stagg J.
CRCHUM,
Département
de microbiologie,
infectiologie et
immunologie, Faculté de médecine, Université de Montréal, QC, CA.
Introduction : HER2 is receptor overexpressed in approximately
30% of breast cancer, hence being a good target for therapy.
Trastuzumab (anti-HER2) is approved since 1998 and has
considerably improved the standard care of breast cancer, but
unfortunately some patients eventually relapse and develop a
metastatic disease. Trastuzumab inhibits tumor cel! proliferation and
promotes anti-tumor immunity through mechanisms such as
antibody-dependent cellular cytotoxicity. ln mice, anti-Erb82 mAb
therapy requires IFN-y-producing T CD8+ cells, type 1 IFN responses
and MyD88-dependent Toll-like receptor signaling. Polyi:C and CpG
are well-known agonists of TLR-3 and TLR-9, and are potent inducers
of type 1 IFN, IFN-y, and IP-1O. These agonists have also been
shown to enhance ADCC and the recruitment of tumor-specific T
cells. ln two mouse models of Erb82+ breast cancer, we
demonstrated that combined administration of anti-Erb82 mAb and
CpG/polyi:C resulted in synergistic anti-tumor effects. Treatment of
well-established Erb82+ breast tumors with the combination regimen
resulted in complete responses in the majority of mice, in contrast to
single agent treatments. Mice with complete responses were
protected against a re-challenge of tumor cells, implying the presence
of an immune memory. Mice treated with anti-HER2 mAb in
combination with TLR agonists achieved complete responses. Ali
mice that rejected their primary tumor also rejected the secondary
tumor challenge on the opposite flank. ln an independent experiment,
on mice bearing two tumors, the action of the anti-HER2 mAb was
seen on both tumors. lnterestingly however, the TLR agonists injected
in one tumor enhanced the activity of anti-HER2 mAb on the distant
tumor as weil. Co-administration of an anti-HER2 mAb with CpG and
polyi:C promotes tumor rejection, offers protection against a
challenge, and induce systemic immune responses.
8
RÔLE COOPERATIF DU CANAL POTASSIQUE KCA3.1, DE
L’INTÉGRINE β1 ET DU CANAL CALCIQUE TRPC4 DANS LES
MÉCANISMES DE RÉPARATION ALVÉOLAIRE.
Chebli J*1,2, Girault A1,2, Trnh NTN1,2, Privé A1, Maillé É1, Brochiero E1,2.
1
CRCHUM, 2Département de Médecine, Université de Montréal, QC,
CA.
Introduction : Suite à une insulte au niveau de l’épithélium alvéolaire,
les mécanismes de réparation sont essentiels pour restaurer l’intégrité
et les fonctions tissulaires. Nous avons préalablement montré que les
canaux KvLQT1 et KATP participent à la réparation alvéolaire. Or, le
rôle du canal K+ activé par le calcium KCa3.1 n’a jamais été étudié.
Méthode/Résultats : À l’aide d’un modèle de plaies mécaniques sur
monocouches de cellules primaires alvéolaires de rat (ATII), nous
avons montré que la présence de fibronectine (FN) augmentait la
vitesse de réparation comparativement à celles cultivées en absence
de matrice. La vitesse de réparation était aussi augmentée suite à
l’activation du KCa3.1 alors que son inhibition ralentit la vitesse de
réparation uniquement en présence de FN. La migration et la
prolifération des cellules ATII sont aussi en partie dépendantes de la
présence de FN et du KCa3.1. Nous avons donc évalué une possible
relation entre le KCa3.1 et un récepteur de la FN, l'intégrine β1. Nous
avons observé que ces protéines étaient localisées dans les mêmes
domaines et qu'elles semblent interagir physiquement. Par la suite, le
rôle du Ca2+ dans ces mécanismes a été étudié et nous avons montré
que la présence de FN augmentait la [Ca2+]i, la perméabilité
membranaire au Ca2+ ainsi que l'expression du canal Ca2+ TRPC4.
Enfin, nous avons démontré un rôle complémentaire des canaux
KCa3.1 et TRPC4 pendant la réparation en présence de FN.
Discussion/Conclusion : Cette étude rapporte pour la première fois
un rôle coopératif de KCa3.1, de l'intégrine β1 et du TRPC4 dans les
mécanismes de réparation alvéolaire.
Financé par IRSC, FRQS et RSR du FRQS.
9
10
BILE-LIGATED RATS ARE SUSCEPTIBLE TO HYPOTENSIONINDUCED NEURONAL CELL LOSS: IMPLICATIONS FOR
PERSISTING NEUROLOGICAL COMPLICATIONS FOLLOWING
LIVER TRANSPLANTATION.
Clément MA*, Bosoi CR, Tremblay M, Bémeur C, Rose CF.
CRCHUM, Département de Pharmacologie, Université de Montréal,
QC, CA.
Introduction : L’encéphalopathie hépatique (EH) est une complication
neuropsychiatrique causée par les maladies du foie. Ce syndrome est
considéré comme un désordre métabolique réversible, qui devrait être
réglé par la transplantation hépatique (TH), cependant les
complications neurologiques persistent chez près de 47% des patients.
La TH est une procédure accompagnée de stress intra-opératoires
dont l’hypovolémie et l’hypotension. Nous supposons que le cerveau
fragilisé devient plus susceptible à une hypotension, résultant en un
stress ainsi que la mort cellulaire.
Méthodologies : Une hypotension par hypovolémie de l’artère
fémorale est effectuée pour atteindre une pression artérielle de 30
mmHg durant 2 heures chez des rats de 6 semaines avec ligation de la
voie biliaire (BDL) et leurs contrôles respectifs (SHAM). Les cerveaux
sont prélevés pour immunobuvardage et immunohistochimie.
Résultats : Les rats BDL avec hypotension ont démontré une
diminution du compte neuronal dans le cortex préfrontal en utilisant
NeuN+DAPI et le Crésyl violet, comparativement aux contrôles SHAM
hypotendus. De plus, la protéine de stress cellulaire HSP32 était
augmentée chez les groupes BDL hypotendus, tout comme la
caspase-3 clivée, suggérant une mort cellulaire par apoptose. Les
groupes contrôles SHAM et BDL sans hypotension ne démontrent
aucune perte neuronale avec les marqueurs précédents.
Discussion : Ces résultats démontrent que les patients atteints d’EH
sont plus susceptibles à une insulte hypotensive induisant une mort
neuronale, et peuvent expliquer pourquoi certains patients ayant reçu
une TH expérimentent des complications neurologiques.
ÉTUDE DU RÔLE DES RÉGIONS VARIABLES V4 ET V5 DANS LES
CHANGEMENTS DE CONFORMATION DES GLYCOPROTÉINES
DE L'ENVELOPPE DU VIH-1
Coutu M*, Finzi A.
CRCHUM, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
Introduction : Le VIH infecte les cellules par fusion de la membrane
avec la membrane de la cellule cible. Cette fusion est effectuée par les
glycoprotéines de l'enveloppe (Env) qui sont synthétisées en tant que
précurseur, gp160, qui est ensuite clivé en gp120 et gp41. La protéine
gp41 est la partie transmembranaire du complexe de l'enveloppe et
l’ancre à la particule virale alors que la gp120 assure la liaison au
récepteur cellulaire CD4 et corécepteur CCR5 ou CXCR4. Ces
interactions successives induisent des changements de conformation
d’Env qui alimentent le processus d'entrée du virus conduisant
finalement à l'insertion du peptide de fusion de la gp41 dans la
membrane de la cellule cible. La sous-unité gp120 contient cinq
régions variables (V1 à V5), dont trois (V1, V2 et V3) ont été
démontrées comme étant impliquées dans l’adoption spontanée de la
conformation liée à CD4. Cependant, le rôle de régions variables V4 et
V5 vis-à-vis de ces changements de conformation reste inconnue.
Méthodologie : Des mutants contenant une délétion de la V5 ont été
générés. Dû à un problème de repliement causé par la délétion de la
V4, la fonction de celle-ci a été plutôt évaluée en enlevant les sites
potentiels de N-glycosylation (PNGS). L'effet des mutations sur la
conformation d’Env a été analysé par immunoprécipitation et
résonance de plasmon de surface. Résultats: La délétion de la V5 ou
des PNGS de la V4 ne semble pas affecter la conformation d’Env.
Conclusion : Ni le retrait des PNGS de la V4 ni la délétion de V5 n’a
affecté les changements conformationnels d’Env tels que mesurés par
ces techniques, ce qui suggère que les régions variables V1, V2 et V3
sont les principaux acteurs dans la prévention de l’adoption de la
conformation lié de CD4 d’Env.
Projet subventionné par IRSC et CLF
Projet subventionné par les IRSC et le FRQS.
11
STRIATAL NEUROINFLAMMATION ELICITED BY A SATURATED
HIGH-FAT DIET.
Sharma S1,2, Decarie-Spain L*1,2, Hryhorczuk C1,2, Barker PA3, Alquier
TA1,2, Fulton S.1,2.
1
CRCHUM, 2Montreal Diabetes Research Centre, 3Montreal
Neurological Hospital, Montreal, QC, CA.
Background : Excessive lipid intake is known to result in increased
body fat composition and induce metabolic impairments that can
promote an inflammatory state as well as reactive gliosis. However, the
impact of different types of dietary fat on neuroinflammatory markers in
the neural circuitry important for the control of motivation and emotions
has yet to be established.
Objectives & Design : Adult C57Bl6 male mice were put on a
saturated high-fat diet (50% kcal from palm oil), unsaturated high-fat
diet (50% kcal from olive oil) or a low-fat diet (16.8% from soybean oil)
for a 12 week period. Body composition, glycemia, cytokine plasma
levels and neuroinflammatory markers expression in the nucleus
accumbens were assessed.
Results : While both palm and olive high-fat diets were associated to
an increase in body fat mass, mice on the olive diet appeared to be
protected from the metabolic disturbances and the inflammatory
response found in ones receiving the palm diet. In the nucleus
accumbens, neuroinflammatory markers expression, at both protein
and mRNA levels, were increased only with the palm diet. Accordingly,
immune activation of microglial cells and astrocytes was specific to
saturated dietary fats.
Conclusion : A prolonged saturated high-fat diet induces an
inflammatory response that is observed in a core structure of the
reward circuitry.
This work is supported by a grant from Sunlife Financial Quebec.
Sharma S received a post-doctoral fellowship from the
Neuroinflammation Training Program. Decarie-Spain L received MSc.
fellowships from Faculte de Medecine, Université de Montréal,
Montreal Diabetes Research Centre and FRQS.
12
EFFET DU SÉCRÉTOME DES CELLULES SÉNESCENTES SUR LA
RÉPONSE
INFLAMMATOIRE
ORCHESTRÉE
PAR
LES
MACROPHAGES.
Dessureault M.*, Laplante P., Cailhier JF, Rodier F.
CRCHUM, Département de médecine, Université de Montréal, QC,
CA.
La sénescence cellulaire prévient la prolifération des cellules stressées
ou endommagées constituant un mécanisme essentiel pour la
suppression tumorale. Le phénotype sécrétoire associé à la
sénescence (SASP) des cellules sénescentes semble contribuer à
l’établissement d’une inflammation chronique et au développement de
maladies associées au vieillissement tel que le cancer. L'accumulation
de ces cellules dans les tissus vieillissant résulte d’un déséquilibre
entre leur apparition et leur élimination par des cellules immunitaires
tels que les cellules «natural killer» et les macrophages (Mφ). Les Mφ
sont essentiels pour la coordination, la résolution de la réponse
immunitaire et la réparation du tissu via la phagocytose des cellules
apoptotiques et possiblement sénescentes. Notre hypothèse est que le
SASP modifie le phénotype inflammatoire des Mφ contribuant à
l’élimination des cellules sénescentes. Nos objectifs sont de déterminer
les conséquences du SASP sur le phénotype des Mφ en analysant des
marqueurs de surface et en quantifiant des cytokines sécrétées,
d’évaluer par co-culture la capacité des Mφ à tuer les cellules
sénescentes et d’étudier les effets du SASP sur les capacités de
phagocytose des Mφ. Nos données préliminaires suggèrent que les
Mφ sont activés par les cellules sénescentes et qu’ils peuvent les
phagocyter, mais pas aussi efficacement que les cellules apoptotiques.
Le SASP semble aussi atténuer les habiletés de phagocytose des Mφ
envers ces dernières. Les Mφ semblent bel et bien participer à
l’élimination des cellules sénescentes, mais leur rôle concret ainsi que
les conséquences du SASP sur leur phénotype inflammatoire restent
encore à être déterminés. Ce projet devrait nous permettre de
proposer de nouvelles formes de thérapies ayant pour cible la
modulation de la réponse des Mφ au SASP, par exemple suite à la
chimiothérapie, afin de promouvoir une résolution ordonnée des
maladies associées au vieillissement et conduisant à l’inflammation.
13
14
PERMÉABILITÉ
D'UN
NOUVEAU
TYPE
DE
PONTAGE
CORONARIEN DU TERRITOIRE MYOCARDIQUE ANTÉROLATÉRAL – ÉTUDE DE COHORTE : RÉSULTATS PRÉLIMINAIRES.
Dionne PO, Drouin A*, Stevens LM, Noiseux N, Chin A, Basile F,
Prieto I, Mansour S, Soulez G, Chartrand-Lefebvre C.
CRCHUM, Hôtel-Dieu, Radiologie.
Introduction : Une nouvelle stratégie composite de pontages
coronariens implique un greffon veineux saphène (GVS) (pont veineux
(PV)) distribuant le flux de l’artère mammaire interne gauche (AMIG)
au territoire antérolatéral.
Méthodes : 110 patients sont recrutés après chirurgie avec PV et ≥1
GVS aortocoronarien sur un territoire autre qu’antérolatéral. L’objectif
principal est de comparer la perméabilité des greffons composites
AMIG-PV vers les cibles antérolatérales autres que l’IVA et la
perméabilité des GVS vers les autres territoires 12-18 mois postchirurgie
par
tomodensitométrie
(comparaison
intrapatient).
Résultats : De 09/2013 à 06/2014, 37 patients ont été recrutés (64±7
ans) avec suivi moyen de 14±2 mois (total 139 greffons). Parmi les 37
axes AMIG-PV-IVA, 35(95%) n’avaient aucune sténose et 2(5%)
avaient une sténose ≥70%. Des 42 greffons AMIG-PV vers une cible
antérolatérale autre que l’IVA, 33(80%) étaient perméables et 9(21%)
occlus. Parmi les 60 GVS non antérolatéraux, 54(92%) étaient
perméables et 5(8%) occlus. L’indice de perméabilité des GVS
antérolatéraux autres que vers l’IVA était 0,77±0,42 et celui des
greffons des autres territoires 0,90±0,26 (p=0.07). Les lits pontés par
GSV conventionnel sont plus grands que les lits du PV autres que l’IVA
(p = 0.002). Une méthode visant à ajuster l’indice de perméabilité
selon la taille du lit distal est en cours d’élaboration.
Discussion : Les résultats préliminaires a) ne démontrent pas de
différence significative entre l’indice de perméabilité des greffons PV
autres que ceux vers l’IVA et celui des GVS des autres territoires, et b)
un taux sécuritaire de perméabilité de l’IVA.
ESSAI CLINIQUE RANDOMISÉ SUR DEUX STRATÉGIES DE
PONTAGES CORONARIENS DU TERRITOIRE ANTÉROLATÉRAL
(AMI-PONT).
Drouin A*, Noiseux N, Chartrand-Lefebvre C, Soulez G, Mansour S,
Basile F, Prieto I, Stevens LM.
CRCHUM, Hôpital Hôtel-Dieu, Service de chirurgie cardiaque.
Introduction : Une technique de pontages coronariens qui pourrait
étendre les bénéfices de perméabilité de l’artère mammaire interne
gauche (AMIG) au territoire antérolatéral a été conçue.
Méthodes : 200 patients bénéficiant d’un pontage coronarien de
l’artère interventriculaire antérieure (IVA) et d’au moins une autre cible
du territoire antérolatéral sont randomisés selon 1) stratégie composite
avec greffon veineux saphène (GVS) distribuant le flux de l’AMIG au
territoire antérolatéral; 2) stratégie conventionnelle avec anastomose
AMIG-IVA et revascularisation des autres cibles antérolatérales avec
un GVS aortocoronarien. L’objectif est d’évaluer si la stratégie
composite permet un indice de perméabilité des pontages
antérolatéraux non inférieur à celui de la stratégie conventionnelle et
de comparer les résultats cliniques.
Résultats : Entre juillet 2012 et août 2014, 74 patients ont été
randomisés (63±7 ans; 91% homme). 30 jours post-chirurgie, 2(3%)
décès, 2(3%) infarctus du myocarde, 2(3%) réinterventions
coronariennes percutanées, 1(1%) accident vasculaire cérébral et
0(0%) angine ont été observés. Parmi les 47 patients avec un suivi à 1
an, 2(6%) patients ont présenté de l’angine, 1(2%) un infarctus du
myocarde avec revascularisation coronarienne percutanée et 0 (0%)
patient est décédé. Des 36 patients avec tomodensitométrie cardiaque
à 1 an, aucun (0%) ne présentait de sténose significative de l'axe
AMIG-IVA et 10(28%) avaient une sténose significative d’au moins un
des autres greffons du territoire antérolatéral.
Conclusion : Les résultats cliniques et angiographiques préliminaires
tendent à démontrer la sécurité à court terme des stratégies.
Projet financé par les FRSQ et l’Université de Montréal.
Projet financé par les IRSC. ClinicalTrials.gov : NCT01585285.
15
DÉFAUTS SYNAPTIQUES DANS UN MODÈLE GÉNÉTIQUE DE LA
SLA.
Dzieciolowska, S*, Armstrong GAB, Drapeau P.
CRCHUM, Département de Neurosciences, Université de Montreal,
QC, CA.
Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a devastating neurodegenerative
disease characterized by the progressive death of upper and lower
motor neurons in the spinal cord and cerebral cortex. About 4% of all
ALS cases can be attributed to mutations in TARDBP which encodes
the DNA/RNA binding protein TDP-43, involved in regulating
transcription and splicing of nuclear transcripts. To study the role of
TDP-43 in developing nervous systems we have obtained (by TILLING
mutagenesis) a mutant zebrafish line containing a point mutation
generating a premature stop codon (Y220X) in the zebrafish tardbp
gene. Interestingly, homozygous tardbY220X/Y220X zebrafish do not
translate a truncated tdp-43 but instead generate a full-length protein. It
was recently found that an alternative splicing of tardbp-like gene
(tardbp ortholog) compensates for the shortened tardbp transcript and
a full-length TDP-43 transcript is generated in these fish. In order to
obtain a true reduction of tardbp function, we injected an antisense
morpholino (MO) targeting the ATG site of the tardbp-like gene. We
hypothesize that tardbpY220X/Y220X mutant larvae injected with the
MO will display impaired locomotor performance, qualified by a
reduction in swim distance, swim duration and reduced maximum swim
velocity when compared to heterozygous and wild type larvae
counterparts. Locomotor performance will be examined at 48 hours
post-fertilization. Additionally, protein extraction and Western Blots will
be performed to confirm the collective loss of tardbp and tardbp-like in
the MO injected tardbpY220X/Y220X larvae. Future experiments will
utilize electrophysiological patch-clamp of glutamatergic miniature
excitatory post-synaptic currents in primary motoneurons in order to
characterize alterations in synaptic inputs following tdp-43 depletion.
This work will aid in our understanding of the pathological mechanisms
that result in motor neuron death in TDP-43-related ALS cases.
16
LE RÔLE DE L'AUTOPHAGIE ET DE LA SÉNESCENCE DANS LA
PATHOPHYSIOLOGIE DE LA FIBROSE TISSULAIRE EN RÉPONSE
À LA RADIOTHÉRAPIE.
El-Diwany M*, Giot JP, Bernard M, Paek L, Nizard N, Rodier F, Hébert
MJ, Danino MA. CRCHUM, Département de médecine, Université de
Montréal, QC, CA.
Introduction : L’autophagie et la sénescence des cellules
endothéliales et fibroblastiques semblent être les éléments centraux de
la réponse inflammatoire et fibrotique du tissu cutané irradié. Notre
objectif est de décrire les phénotypes cellulaires sécrétoires,
microscopiques et structurales dans le tissu cutané irradié.
Méthodes : Nous avons obtenu des biopsies de tissu cutané irradié
auprès de patientes qui sont opérées pour reconstruction mammaire
après consentement, dans le cadre d’une étude déjà en cours dans le
service de Chirurgie Plastique au CHUM. Nous réalisons des analyses
en microscopie électronique (ME) à balayage de la surface et de la
coupe de de la capsule. Nous réaliserons, dans un second temps, des
analyses en ME à transmission afin de rechercher des phénomènes
d’autophagie et d’apoptose ainsi que des études protéiques pour la
recherche de l’expression de LC3, p62 pour l’autophagie et
l’expression de p16, p21 et p53 qui sont des marqueurs de
sénescence; et l'expression du smooth muscle actin (aSMA) qui est un
marqueur pour la fibrose. Les biopsies tissulaires permettront aussi de
déterminer par Western blot le niveau d’expression protéique de
médiateurs inflammatoires qui modulent de la voie de fibrose TGFβCTGF. Afin de mieux caractériser le rôle de chaque type cellulaire
dans l’expression des médiateurs de la fibrose, nous avons exposé
des lignées cellulaires fibroblastiques (et dans un second temps
endothéliales), qui ont irradiées à de différentes doses (0.5Gy, 2Gy,
4Gy, 8Gy, 10Gy) de radiothérapie pour déterminer la dose qui induit
l’autophagie et la sénescence. Nous avons également induit
l'autophagie par une méthode de carence de sérum pour étudier l'effet
de l'autophagie sur la fibrose.
Résultats : L'irradiation de cellules fibroblastiques induit la sénésence
in vitro tel que confirmé par la présence des marqueurs p16 et p21.
Ces cellules expriment également du aSMA. D'autre part, des
fibroblastes autophagiques montrent une diminution des niveaux de
p62 et l'expression de aSMA.
Discussion : Ces résultats préliminaires confirment le rôle de
l'autophagie et de la sénescence dans le processus fibrotique.
17
18
THE NUCLEAR PORE COMPLEX AND ITS TRANSPORTERS:
FROM VIRUS-HOST INTERACTORS TO SUBVERTING THE
INNATE ANTIVIRAL IMMUNITY.
Gagné B*, Baril M, Lamarre D.
CRCHUM, Faculté de médecine, Université de Montréal, QC, CA
Introduction : The majority of individuals infected with Hepatitis C
Virus (HCV) become chronic due to viral persistence. One reason is
due to the successful evasion of the immune response by the virus. It
has then become paramount to understand how this cytoplasmic virus
interacts with host proteins to subvert the immune response, as well as
promote its replication within the host cell.
Methods : 132 HCV-host interactors elucidated by LC-MS/MS were
knocked down in a innate immunity RNAi screen where cell lines
expressing inducible IFNB1 promoter coupled to luciferase and were
infected with Sendai Virus (SeV) to induce the innate immune
response. Performing Gene Ontology (GO) on the hits with modulatory
effects on the response showed an enriched group involved with the
Nuclear Pore Complex (NPC) and protein import. These proteins were
then studied for their effect on the nuclear translocation of key
transcription factors of the response, such as IRF3 and p65, via
microscopy in a SeV infection time course.
Results : 53 out of 132 interactors were found to have a significant
modulatory effect on the innate immune response when knocked down.
From these 53 was an enrichment of proteins in the NPC and protein
import as determined by GO. Many of the proteins associated with the
NPC and nucleocytoplasmic transport, such as KPNB1, reduced the
number of cells with IRF3 and p65 in the nucleus during SeV infection,
as well as diminishing IFNB1 production.
Discussion/Conclusion: The interaction of HCV with the NPC and its
transporters may be part of a novel evasion mechanism against the
innate immune response and could be applied to other viral infections
for panviral therapies.
ROLE OF CD4+CD8+ T LYMPHOCYTES IN THE PATHOGENESIS
OF MULTIPLE SCLEROSIS.
Gagnon F*#, Viel É#, Beauseigle D#, Duquette P†#, Girard JM†, Prat A†#,
Arbour N#.
#
Department of Neurosciences, Université de Montréal, CRCHUM and
†
Multiple Sclerosis Clinic, CHUM.
Introduction : We have observed that a small population of T
lymphocytes expressing both CD4 and CD8 (CD4+CD8+ T
lymphocytes) is present in the peripheral blood of multiple sclerosis
(MS) patients and controls. We hypothesize that CD4+CD8+ T
lymphocytes represent a highly activated cell subset contributing to the
pathogenesis of MS. Our goal are to a)assess the phenotype and
functional properties of these cells and b) determine the impact of IL-15
on these cells. We have previously shown that IL-15 is elevated both in
the periphery and CNS of MS patients.
Methodology: Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) obtained
from healthy donors or MS patients are analyzed using multiparametric
flow cytometry.
Results : We confirmed that CD4+CD8+ T lymphocytes represent a
distinct cell subset that expresses elevated levels of the IL-15 receptor
chains compared with CD4 or CD8 T lymphocytes in MS patients and
controls. Moreover, IL-15 triggers the phosphorylation of STAT5 in a
greater proportion of CD4+CD8+ T lymphocytes compared with other
T cells in healty controls, experiment is still ongoing for MS patients. To
characterize the functional properties of CD4+CD8+ T lymphocytes we
also assessed their capacity to produce cytokines and observed that a
greater percentage of CD4+CD8+ T lymphocytes produce
inflammatory mediators including: IFNgamma, Granzyme B and
perforin compared with other T cell subsets but those capacity was
lowered in untreated MS pateints. We are currently assessing
additional functional properties of CD4+CD8+ T lymphocytes such as
senescence marker.
Conclusions : Our data support the notion that CD4+CD8+ T
lymphocytes are highly activated T cells in healthy controls but seems
to lose some of their ability in the pathological contexte of MS. Our
work will determine whether this T cell population represents a relevant
target for future MS therapies.
Project funded by CIHR.
Projet subventionné par le CIHR and MSSOC
19
A ROLE FOR INTEGRIN ALPHA8 IN MEDIATING CD4+ T
LYMPHOCYTE MIGRATION ACROSS THE BBB IN MS.
Gowing E*, Gendron S*, Lécuyer MA, Terouz S, Prat A.
CRCHUM, Départment de Neuroscience, Université de Montréal, QC,
CA.
Introduction : Multiple sclerosis (MS) is a neuroinflammatory disease
characterized by migration of peripheral blood (PB) leukocytes across
the blood-brain barrier (BBB) into the central nervous system (CNS).
Integrins are heterodimeric alpha/beta transmembrane proteins that
facilitate this process by mediating cell-cell or cell-extracellular matrix
protein interactions. Specifically, the beta1 integrin family has been
associated with migration of PB lymphocytes across the BBB, as
supported by the clinical efficacy of Natalizumab (anti-alpha4beta1).
However, due to widespread expression of alpha4 on most leukocyte
subsets, Natalizumab treatment is associated with impaired immune
surveillance and enhanced susceptibility to lethal viral infections.
Therefore, the goal of this study is to characterize the role of novel,
subset specific beta1 integrin partners in the migration of pathogenic T
lymphocytes across the BBB.
Methodology & Results : Proteomic analysis reveals that TH17 cells
express integrin alpha8, which heterodimerizes exclusively with the
beta1 subunit. Here we show through RT-PCR and western blot that
alpha8 is expressed in activated memory CD4+ T lymphocytes and is
upregulated in TH1 and TH17 polarized cells. Immunofluorescence
reveals that alpha8 localizes to the cell surface and is expressed on
CD4+ T cell infiltrates in MS and mouse experimental autoimmune
encephalomyelitis (EAE) brains. Moreover, RT-PCR and western blot
reveal that nephronectin (NPNT), the main ligand of alpha8, is
expressed on in vitro primary human BBB endothelial cells (ECs).
Blockade of the alpha8-NPNT interaction using a blocking peptide
decreases TH1 and TH17 but not TH2 lymphocyte migration in vitro
across an EC monolayer.
Conclusion : These data highlight a potentially important role of
alpha8 in mediating pathogenic TH1 and TH17 lymphocyte migration
across the BBB in MS. Further studies are aimed at demonstrating the
therapeutic benefit of alpha8 blocking agents in vivo.
E.G. is supported by the Neuroinflammation CIHR Strategic Training
Program. This study is funded by a CIHR operating grant.
20
ÉTUDE DU MÉTABOLISME DES MÉDICAMENTS PAR LES
CYP450s PULMONAIRES.
Gravel S*1,2 Huguet J1,2, Rousseau É3, Gaudette F2, Turgeon J1,2,
Michaud V1,2 .
1
Faculté de Pharmacie, Université de Montréal, Montréal, QC, CA,
2
CRCHUM, Montréal, QC, CA, 3CHUS, Sherbrooke, QC, CA.
Introduction : Le métabolisme local par les CYP450 retrouvés dans
les poumons peut jouer un rôle dans la clairance de certains
médicaments et ainsi, influencer la réponse à ces derniers. L’objectif
était de caractériser l’activité des CYP450s dans les poumons humains
en utilisant des cocktails de substrat-marqueurs pour différentes
isoenzymes des CYP450s.
Méthodes : Des spécimens de tissu pulmonaire humain ont été
obtenus (n=6; 1.7-13 g) et des microsomes de poumon ont été
préparés par technique d’ultracentrifugation différentielle. Des
incubations in vitro ont été réalisées avec ces microsomes et 4
cocktails de substrat-marqueurs (concentration équivalente à 3Km); 1)
bupropion (CYP2B6), ébastine (CYP2J2), midazolam (CYP3A4/5) et
chlorzoxazone (CYP2E1); 2) bufuralol (CYP2D6) et répaglinide
(CYP2C8); 3) tolbutamide (CYP2C9); et 4) acide laurique (CYP4A11).
Les substrat-marqueurs et leurs métabolites ont été quantifiés par LCMS/MS.
Résultats : Nos données montrent que les isoenzymes CYP450
retrouvées dans les poumons présentent une capacité à métaboliser
des médicaments. Une activité de métabolisme a été détectée avec les
substrat-marqueurs correspondant aux CYP2J2, 3A4/5 et 2C9. Le
niveau d’activité le plus élevé a été mesuré pour la formation de
l’hydroxyébastine, puis l’hydroxytolbutamide et le 1-hydroxymidazolam
(0.56 ±0.68, 0.17 ±0.07 et 0.08 ±0.02 pmoles/min/mg prot.,
respectivement). Aucun métabolite pour les autres substrats testés n’a
été détecté.
Discussion et Conclusion : Nos résultats indiquent que les poumons
sont pourvus d'activité de métabolisme pour des médicaments
substrats des CYP2J2, 2C9 et 3A4/5. L’activité associée avec le
CYP2J2 dans les poumons était la plus élevée et très variable.
Contrairement à des données de la littérature suggérant une faible
variabilité dans l’expression du CYP2J2 entre les individus, nos
résultats ont montré une variabilité interindividuelle importante (45-fois)
dans l’activité du CYP2J2 dans les poumons humains.
*Projet subventionné par FRQS
21
IMPLICATION OF RENAL ANGIOTENSIN-(1-7) AXIS IN THE
DEVELOPMENT
OF
PREECLAMPSIA
IN
PREVIOUSLY
HYPERTENSIVE.
Kasaei-Roodsari A1,2, Genest DS1, Falcao S1, Michel C1, Kajla S1,
Lavoie JL1,2,3.
1
CHUM Research Center, 2Department of Kinesiology, University of
Montreal and 3Montreal Diabetic Research Center, Montréal, QC, CA.
Introduction : Gestational hypertensive disorders, such as preeclampsia, affect 6% to 8% of all pregnancies in North America, and
are the leading causes of maternal mortality in industrialized countries.
Method : We used female mice overexpressing human
angiotensinogen and human renin (R+A+) as a model of preeclampsia
superimposed on chronic hypertension (PESCH). As we have shown
that exercise improves preeclampsia features in this mouse model. we
trained mice by placing them in cages with free access to an exercise
wheel 4 weeks prior to and throughout pregnancy. At the end of
gestation, mice were sacrificed to harvest and weigh fetus, placentas
and kidneys.
Results : We found that the Mas receptor was decreased in the kidney
of pregnant sedentary transgenic mice compared to their control
littermates whereas this was significantly increased in the trained
group. This may cause an increase in angiotensin-(1–7) effects which
may counter the negative effects of Angiotensin II. We also found
increased renal angiotensin converting enzyme type 2 in trained
transgenic mice compared with sedentary mice. Furthermore, we found
that most of the pathological features observed in sedentary transgenic
mice were prevented in trained mice such as increased blood pressure
and, proteinuria.
Conclusion : This study demonstrates that modulation of the
angiotensin-(1-7) axis seems to be a key mechanism in the
development of PESCH, which can be improved by exercise training to
prevent disease features in an animal model.
Fundings: RQR, CIHR, Pfizer
22
ÉVALUATION DU RÔLE DE L’INTERLEUKINE-32 DANS LA
PROGRESSION DE L’INFECTION PAR LE VIH-1.
Kouassi P*, Sylla M, Chamberland A, Zhang Y, Ancuta P, El-Far M,
Tremblay C.
CRCHUM, Département de Médecine, Université de Montréal, QC,
CA.
Introduction : L’interleukine-32 (IL-32) est connue comme une
cytokine pro-inflammatoire impliquée dans plusieurs pathologies. Nous
nous sommes intéressés à étudier le rôle de l’IL-32 dans la
progression de l’infection par le VIH-1 chez les sujets virémiques et les
élites contrôleurs. Ces derniers ont la capacité de maintenir la virémie
à un niveau indétectable (<50 copies ARN viral/mL) sans thérapie
antirétrovirale pour >7 années tout en demeurant asymptomatiques.
Méthodes : Les PBMC provenant de sujets VIH positif virémiques, EC
et VIH négatif ont été activées par PHA et IL-2. À jour 1, le surnageant
et le culot cellulaire ont été prélevés. Les culots cellulaires ont été lysés
et les protéines totales quantifiées par la méthode de Bradford. L’IL-32
a été dosée par ELISA sur les lysats de PBMC. Pour ces mêmes
sujets, l’IL-32 a été dosée dans le plasma. Également, nous avons
dosé le taux d’IL-32 chez les sujets EC avant et après la perte de
contrôle.
Résultats préliminaires : Le taux d’IL-32 était plus élevé chez les
sujets virémiques et EC contrairement aux sujets VIH négatif.
Cependant, ce taux a été supérieur chez les sujets virémiques
comparativement aux sujets EC. Comme attendu, le taux d’IL-32
augmente chez un sous groupe des sujets EC qui subissent une perte
du contrôle de la virémie et corrèle positivement avec des facteurs proinflammatoires telle que le sCD14.
Conclusions : Ces résultats suggèrent que l’IL-32 est beaucoup plus
sécrétée en faveur d’un processus pro-inflammatoire. L’IL-32 pourrait
constituer une cible thérapeutique afin de réduire le processus
inflammatoire chronique chez les sujets VIH positif pour réduire
l’épuisement immunitaire.
23
HOMICIDE ET ESPÉRANCE DE VIE AU BRÉSIL.
Le Serbon E*, Auger N - CRCHUM, Risques à la sante.
Introduction : Le Brésil est le plus grand pays d’Amérique latine, et les
raisons de sa faible espérance de vie par rapport au Canada, qui a
l’espérance de vie la plus élevée en Amérique, ne sont pas claires.
Nous avons identifié les facteurs responsables de la faible espérance
de vie au Brésil en mettant l’accent sur le rôle de la violence.
Méthode : Nous avons estimé les taux de mortalité par âges et causes
utilisant la Classification Internationale des Maladies. Nous avons
calculé les espérances de vie à la naissance du Canada et du Brésil en
2010 et avons déterminé les âges et causes de décès responsables de
cet écart entre les deux pays. Nous avons mis l’accent sur la mortalité
liée aux homicides et aux accidents.
Résultats : Les principales causes de décès au Brésil étaient liées à la
violence et aux maladies circulatoires. En revanche, au Canada, ce
sont les maladies circulatoires et les tumeurs qui sont les causes de
décès les plus communes. Les Brésiliens vivaient 8,2 ans de moins
que les Canadiens et les Brésiliennes 5,2 ans de moins que les
Canadiennes. Les homicides par armes à feu et objets tranchants
diminuaient l’espérance de vie des hommes de 1,2 ans au Brésil. La
contribution des traumas, incluant les homicides, était plus élevée que
toutes les maladies circulatoires combinées. Pour les femmes, ce sont
les maladies de l’appareil circulatoire qui contribuent le plus à réduire
l’espérance de vie des Brésiliennes.
Conclusion : Chez les hommes, l’écart d’espérance de vie est en
grande partie lié aux homicides par armes à feu, notamment chez les
adultes de 20 à 44 ans. L’économie du Brésil est en pleine croissance,
mais les homicides pourraient avoir un coût économique et social très
importants. Pour améliorer l’espérance de vie des Brésiliens, il faudrait
traiter les causes profondes des inégalités qui alimentent le commerce
illicite de la drogue et de la violence.
24
IDENTIFICATION DES VOIES DE RADIOSENSIBILISATION
MODULEES PAR DES MICROARNS DANS LES SARCOMES DES
TISSUS MOUS.
Xiya Ma, Rim A. Makhzoum*, Mitra Heravi, Julie Lafontaine, Philip
Wong.
CRCHUM, Département de Radiologie, Médecine Radio-oncologique
et nucléaire, Université de Montréal, QC, CA, Institut du Cancer de
Montreal, QC, CA.
Introduction : Les sarcomes des tissus mous (STS) constituent 80%
des sarcomes touchant l’être humain. Le traitement relève sur la
chirurgie, qui extrait complètement la tumeur; la radiothérapie la
complémentarise afin d’atteindre une thérapie curative. Au fait, cette
combinaison permet 20 à 25% de réduction de récurrence locale,
comparée à la chirurgie seule. En outre, des données récentes
suggèrent que les microARNs (miR) jouent un rôle potentiel dans
l’optimisation de la radiothérapie. En effet, les miRs, petites séquences
d’ARN non codants, composants 1% du génome humain, peuvent
réguler plus de 50% des gènes codants pour des protéines. Or,
plusieurs miRs ont été identifiés pour leur rôle modulatoire potentiel de
radiosensibilité des cellules de sarcomes des tissus mous.
Méthodes : Nous avons appliqué une transfection par des PreMir et
AntiMir afin d’augmenter ou diminuer respectivement la quantité de
miR d’intérêt dans trois lignées cellulaires différentes; cela suivi d’une
irradiation à 2Gy et des essais clonogéniques pour déterminer la survie
des colonies.
Résultats : Une corrélation positive a été observée. Une
l’augmentation du MiR-224 (PreMiR 224, p<0.05) ou du MiR-139
(PreMiR 139, p<0.05) a été accompagnée d’une plus grande
radiosensibilité de la lignée STS-117. La banque de gènes cibles
potentiels a été générée.
Discussion/conclusion : Les microARNs 224 et 139 représentent des
pistes intéressantes à explorer dans les expériences futures.
Prochainement, nous visons explorer les voies moléculaires en aval
afin d’identifier des cibles thérapeutiques dans l’optique d’améliorer
l’efficacité de la radiothérapie.
25
MODÈLE TEMPS-RÉEL DE DÉTERMINATION DE LA VITESSE
DE MARCHE – VERS UN TAPIS ROULANT HAPTIQUE À DEUX
VOIES.
Marcoux S*1,2, Aissaoui R1,2.
1
Laboratoire LIO, CRCHUM 2École de technologie supérieure
Introduction : Au laboratoire du LIO, on conçoit actuellement un
système de tapis roulant haptique dans le but de permettre au sujet
de contrôler de manière continue la vitesse du tapis uniquement en
marchant. Un tel système offre des perspectives de recherche dans
plusieurs domaines : la réadaptation pour certaines pathologies
(hémiparésie, gonarthrose), l’analyse du patron de la démarche
naturelle, ainsi que la réalité virtuelle.
Méthodologie : Un modèle utilisant seulement les forces de
réactions au sol a été conçu afin d'estimer 3 paramètres de la
marche: la longueur de pas (LP) et la cadence de pas (CP) et la
vitesse de marche (VM). Pour valider le modèle, les 3 paramètres
estimés ont été comparés à ceux estimés par un système
optoélectronique 3D (VICON M460). 17 sujets sains ont marché
sur un tapis roulant instrumenté à 2 voies à trois vitesses (0.75 m/s,
1 m/s et une vitesse de confort v_conf choisi par le sujet). Les
erreurs quadratiques moyennes (RMS), ainsi qu’une analyse de
variance (ANOVA) ont été évaluées (p<0.05).
Résultats : Pour chaque paramètre, les résultats ont été obtenus en
regroupant les résultats des erreurs relatives moyennes des 17
sujets par vitesse (0.75 m/s, 1 m/s et v_conf). Les résultats suivants
ont été obtenus : CP (0.26%, 0.19%, 1.19%) RMS, LP (2.93%,
3.57%, 3.06%) RMS et VM (2.64%, 2.78%, 3.23%) RMS. De plus,
les analyses ANOVA n'ont pas décelé de différence significative
entre les deux approches.
26
IDENTIFICATION OF THE SIGNALING PATHWAY INVOLVED IN
THE DEVELOPMENT OF LATE ANTIVIRAL RESPONSE INDUCED
BY THE SYNERGISTIC ACTION OF IFN /TNF
IN LUNG
EPITHELIAL CELLS
Mariani M*1,2, Cervantes-Gomez S1,4, Mukawera E1, Kalamujic M1,5,
Grandvaux N1,3.
1
Centre de recherche du CHUM (CRCHUM), Montréal, QC, CC,
2
Program of Biomedical Sciences, Faculty of Medicine, Université de
Montréal, Montreal, QC, CA, 3Department of Biochemistry and
Molecular Medicine, Faculty of Medicine, Université de Montréal,
Montréal, QC, CA, 4Department of Biomedical Sciences, Universidàd
de Guadalajara, Mexico, 5Department of Pharmacology, Faculty of
Medicine and Health Sciences, Université de Sherbrooke, Sherbrooke,
QC, CA.
Our knowledge of cytokine-mediated signaling and functions has
tremendously increased over the past decades. However, studies
aimed at depicting cytokine functions were mainly conducted according
to a single cytokine stimulation model, a situation that unlikely occurs
under physiological conditions. A cell is rather subjected
simultaneously to several cytokines, which can induce a disctinct
synergistic response. We recently unveiled that costimulation of airway
epithelial cells (AEC) with Interferon (IFN ) and tumor necrosis
factor (TNF ) triggers a novel delayed antiviral signaling pathway.
This pathway is dependent on STAT2 and IRF9, but is independent on
STAT1, unlike the pathway triggered by IFN alone that signals
through the ISGF3 complex (STAT1/STAT2/IRF9). This novel
STAT2/IRF9-dependent pathway is still poorly characterized. Our
objective is to identify new regulating factors of this IFN /TNF
pathway. First, we have identified by qPCR a panel of genes that
respond synergistically to IFN /TNF , including the DUOX2 gene that
is known to be regulated by STAT6 in other contexts. We are currently
studying the activation of STAT6 in response to IFN /TNF and its
role in the induction of DUOX2 by a RNAi strategy. Our preliminary
data suggest that STAT6 could be a negative regulator. Additional
regulators will be characterized through proteomic analysis of the
STAT2 and IRF9 interactome in the U3A cell line deficient in STAT1.
These studies will provide a better understanding of the molecular
mechanisms that allow sustained antiviral response in order to identify
new potential therapeutic targets.
27
ALTERATIONS OF THE NON-CANONICAL WNT/PKC and JNK
PATHWAYS IN HUMAN OSTEOARTHRITIS OSTEOBLASTS.
Martineau X*, Abdel-Kuzbari E, Siwing ZW , Delalandre A, Lajeunesse
D.
CRCHUM, Département de Biochimie-Université de Montréal, QC, CA.
Purpose : Clinical and in vitro studies suggest that subchondral bone
sclerosis due to abnormal osteoblasts (Ob) is involved in the
progression and/or onset of osteoarthritis (OA). Human OA Ob shows
an altered phenotype, a decreased canonical Wnt/ß-catenin signaling
pathway (cWnt), and a reduced mineralization in vitro. Besides the
cWnt pathway, at least two non-canonical signaling pathways, the
Wnt/PKC and Wnt/PCP pathway have been described. However, there
are no reports of either pathway in OA Ob. The Wnt/PKC pathway is
activated after a non-canonical Wnt ligand such as Wnt5a triggers a
leucine-rich G-coupled protein receptor (LGR), typically LGR4 or LGR5
in Ob. This then drives the phosphorylation of PKC (phosphoPKC)
and/or of JNK, and downstream signaling targets. Here, we studied if
alterations of the Wnt/PKC and/or JNK pathways could be observed in
OA Ob.
Methods : We prepared primary human subchondral Ob using the
sclerotic medial portion of the tibial plateaus of OA patients undergoing
total knee arthroplasty, or from tibial plateaus of normal individuals at
autopsy. Gene expressions were evaluated by qRT-PCR and the
protein production by Western blot analysis. The Wnt/PKC and JNK
pathways were evaluated using WB analysis of PKC, phosphoPKC,
JNK and phosphoJNK. Mineralization was evaluated by Alizarin Red
staining.
Results : The expression of Wnt5a and LGR5 was increased in OA
Ob compared to normal, whereas the expression of LGR4 was similar.
Moreover, Wnt5a directly stimulated the expression of LGR5 both at
the mRNA level and protein level, but not that of LGR4. Wnt5a
increased the expression of phosphoPKC without altering PKC levels,
and it also stimulated the phosphorylation of JNK without affecting JNK
levels. OA Ob show reduced mineralization in vitro and reducing Wnt5a levels by siRNA corrected the mineralization of OA Ob.
Conclusion: These data indicate that Wnt5a, which is increased in OA
Ob, can directly increase the expression of LGR5 which in turn
stimulates the Wnt/PKC and JNK pathways. The exact role of the noncanonical pathways in OA still remains to be determined.
28
EFFETS DU DIABÈTE TYPE 2 SUR L'EX PRESSION ET l'ACTIVITÉ
DES CYP3as.
Maximos S*.1,3, Leung H1,2, Gravel S1,2, Bélanger F1, Michaud V.1,2,3 .
1
CRCHUM, 2 Faculté de Pharmacie, 3Faculté de Médecine.
Introduction : Une variabilité interindividuelle importante est observée
dans la réponse aux médicaments chez les patients diabétiques. Il est
suggéré que des états pathologiques comme le diabète de type 2
(DT2) peuvent influencer l'expression et l'activité fonctionnelle des
CYP450s lesquels ont un rôle majeur dans le métabolisme des
médicaments. L'objectif est d'évaluer les effets du DT2 sur l'expression
des isoenzymes des CYP450s.
Méthodes: Des souris C57BL6 sous diète riche en gras ont été
utilisées comme modèle de DT2 et ont été stratifiées selon leur
phénotype; 1) souris avec une faible réponse (LR) à la diète riche en
gras (n=12), 2) avec réponse élevée (HR) (n=16) et 3) souris contrôle
sous diète normale (ND) (n=12). Différents organes (foie, intestin,
reins, cœur et poumons) ont été prélevés. L'ARN total a été extrait et
les niveaux d'ARNm ont été mesurés par q-RT-PCR pour cyp3a11 et
cyp3a13. Des microsomes ont été préparés avec le foie et des
incubations ont été réalisées avec le midazolam (MDZ) comme
substrat-marqueur des cyp3a. Le MDZ et ses métabolites 1- et 4-0H
MDZ ont été analysés par LC-MS/MS.
Résultats : L'expression hépatique d'ARNm cyp3a11 est diminuée
de 16-fois dans les groupes de souris DT2 LR et HR. L'expression
intestinale d'ARNm cyp3a11 est aussi moindre dans les groupes DT2
comparativement au ND.Aucune différence significative n'a été
observée dans les autres organes pour l'expression des cyp3a.
L'activité hépatique du cyp3a (MDZ) est diminuée dans les groupes
avec DT2; la vitesse de formation du 1-0H-MDZ= 1,00; 0,18; 0,10
pmol/min/mg de protéine pour ND, LR et HR respectivement , et celle
du 4-0H-MDZ = 0,1200; 0,0023; 0,0020 pmol/min/mg de protéine pour
ND, LR et HR respectivement.
Conclusion : Nos résultats suggèrent que le DT2 affecte l'expression
et l'activité des cyp3as. Nos données indiquent que cette modulation
semble tissus-spécifique. La présence du DT2 pourrait influencer la
capacité à métaboliser les médicaments substrats des CYP3A,
isoenzyme majeur responsable du métabolisme des médicaments
utilisés en clinique, et ainsi entrainer une variabilité dans la réponse à
ces derniers.
Projet subventionné par les IRSC et FRQS
29
ÉVALUATION DE L'IMPACT D'UNE CHARGE COGNITIVE SUR LE RISQUE
DE RUPTURE SANS CONTACT DU LIGAMENT CROISÉ ANTÉRIEUR
(LCA).
Méjane J*1, Faubert J3, Labbé D1,2.
1
Laboratoire de recherche en imagerie et orthopédie, Centre de recherche du
CHUM, 2Département de génie logiciel et des TI, École de technologie
3
supérieure, Laboratoire de psychophysique et de perception visuelle, École
d’optométrie, Université de Montréal.
Introduction : Les ruptures du LCA sont parmi les blessures sportives les
plus fréquentes (estimées à 100 000-200 000/an aux É-U). La majorité des
blessures du LCA arrivent par des mécanismes sans contact. La plupart des
protocoles de prévention des blessures sont focalisés sur le renforcement des
muscles; ce qui a pour effet de retarder la fatigue et ses effets biomécaniques.
Or, des études récentes ont montré que la dégradation de la biomécanique du
genou serait aussi liée à des facteurs cognitifs. Les objectifs de la présente
étude sont de : - Quantifier les changements biomécaniques des membres
inférieurs occasionnés par l’exécution simultanée d’une tâche cognitive visuospatiale de suivi de cibles multiples (MOT : Multiple Object Tracking) Quantifier l’effet de la fatigue physique sur les changements occasionnés par
l’ajout d’une tâche cognitive.
Méthodologie : La biomécanique du genou, sera établie lors de tâches
motrices de saut/atterrissage et de déplacements latéraux. Un protocole par
seuillage sera utilisé pour établir la vitesse maximale des cibles que le sujet est
capable de suivre à la tâche de MOT. S’en suivra un protocole visant à fatiguer
physiquement le sujet. Avant et pendant ce protocole, les tâches motrices
seront répétées par le sujet pendant qu’il effectue les tâches de MOT (sans
anticipation). Pendant toutes les tâches motrices, la cinématique des membres
inférieurs sera enregistrée à l’aide de caméras optoélectroniques. Les forces
au sol et l’activité musculaire aussi à l’aide de plateformes de force et
d’électromyographie.
Résultats et discussion : On s’attend à ce que l’ajout de tâches cognitives
entraîne des changements dans la biomécanique des membres inférieurs lors
des tâches motrices, qui augmentent la mise sous tension du LCA. Par
exemple, à l’atterrissage : - Les angles et moments d’abduction du genou et la
rotation interne de la hanche vont augmenter - L’angle de flexion du genou et
son moment de flexion vont diminuer. On s’attend aussi à voir que la fatigue
physique accentue ces dégradations.
Conclusion : Notre étude permettra de comprendre davantage le rôle que
joue l’aspect cognitif dans les blessures sans contact du LCA. Les études
futures porteront sur l’entraînement cognitif du sujet afin de réduire les
dégradations causées par cet impact.
30
CONTRIBUTION OF NAIVE CD4+ T-CELLS TO THE PERSISTENCE
OF HIV DURING ART.
Niessl J1,2*, DaFonseca S1,2,Routy JP3, Ancuta P1,2.
1
Université de Montréal, Faculty of Medicine, Department of
Microbiology, Infectiology and Immunology, Montreal, QC, CA, 2CHUMResearch Centre, Montreal, QC, CA, 3McGill University Health Centre,
Montréal, QC, CA.
Background : Proviral HIV-DNA persists in memory CD4+ T-cells of
chronically infected subjects under antiretroviral treatment (CI+ART).
Naive T cells are relatively resistant to infection due to the restriction of
the viral replication. The contribution of naive T-cells to HIV-persistence
through their differentiation to effector/memory cells remains unknown.
We hypothesize that naive CD4+ T-cells of CI+ART can differentiate ex
vivo in Th1 or Th17 effector/memory CD4+ T-cells carrying integrated,
replication competent HIV-DNA.
Methods : Naive and memory CD4+ T-cells were sorted by FACS and
cultured under Th1 or Th17 polarization conditions for 12 days. Total
and integrated HIV-DNA was quantified via qPCR ex vivo and after
polarization. Early reverse transcripts (RU5) were quantified via PCR.
HIV-RNA was quantified by real-time-RT-PCR in the supernatant of the
polarized cells after CD3/CD28-restimulation.
Results : We demonstrate that naive CD4+ T-cells carry similar
amounts of early reverse transcripts but lower quantities of integrated
HIV-DNA compared to memory T-cells. Under Th1 or Th17 polarization
conditions, a fraction of memory T cells carrying integrated HIV-DNA
survives with a tendency for better reactivation in Th1 conditions. In
certain subjects, integrated HIV-DNA with reactivation can be observed
in naive Th1- or Th17-polarized cells.
Conclusion : Naive CD4+ T-cells of CI+ART harbor integrated HIVDNA in vivo and differentiate in vitro under Th1/Th17 conditions in
effector/memory T cells carrying competent proviral DNA. This
indicates a contribution of naive CD4+ T-cells to the persistence of HIV
under ART.
31
SEGMENTATION DE L’ARTICULATION DE LA HANCHE À PARTIR
DE RADIOGRAPHIES BIPLANS EN UTILISANT UNE APPROCHE
MULTI-STRUCTURES.
Ouertani F*, de Guise JA, Vazquez C, Cresson T. CRCHUM, École de
Technologie Supérieure, Montréal, QC, CA.
Introduction : La reconstruction en 3D de l'articulation de la hanche
fournit des informations précises pour le diagnostic et la planification
chirurgicale. En produisant une paire de radiographies en position
debout, le système EOS, beaucoup moins irradiant que le CT scan,
offre la possibilité de reconstruire en 3D des structures osseuses. Pour
ce faire, les contours d'une structure extraits dans les images sont
associés à des informations a priori 3D. Ce travail porte sur l’extraction
simultanée de contours des deux structures adjacentes de l’articulation
de la hanche : la tête fémorale et le cotyle. Cette tâche est très difficile
à cause du bruit élevé, de la superposition de structures et du faible
contraste. Nous adoptons une approche multi-structures permettant de
segmenter simultanément deux contours correspondant chacun à une
structure.
Méthodes : Notre méthode requiert une initialisation manuelle de la
tête fémorale pour localiser la région de l'articulation. Le processus de
la segmentation, alors, s'applique uniquem ent sur cette région où les
deux contours recherchés correspondent à deux chemins alignés.
Nous avons développé un algorithme permettant la recherche d’un
chemin minimal 3D dans un volume pour détecter simultanément ces
deux chemins tout en imposant des contraintes inter-structures. Deux
contours distincts et labellisés sont récupérés dans l'image originale.
Résultats : Nous avons appliqué cette méthode sur 100 images
radiographiques acquises dans les directions frontale, oblique et
latérale. L'évaluation de la précision a donné une erreur globale de
1,27±0,79 mm pour la tête fémorale et de 1,26±0,74 mm pour le cotyle.
Pour la répétabilité de la méthode, nous avons obtenu en moyenne
80% d'erreurs locales au dessous de 1mm.
Conclusion : Les résultats révèlent que la méthode est précise, mais
elle dépend aussi de la complexité de l'image segmentée. Ce travail
servira à améliorer le processus de la reconstruction en termes de
précision et temps de calcul.
Projet subventionné par le Réseau d’Innovation en Technologies de la
Santé (FRSQ + FQRNT).
32
PRESCRIPTION OPIOIDS INJECTORS OF MONTREAL: A
CHALLENGE FOR HEPATITIS C PREVENTION AND TREATMENT.
Puzhko S*, Roy E, Jutras-Aswad D, Artenie A, Bruneau J.
CRCHUM, Dép. de Médecine Familiale, Dép. de Psychiatrie, Univ. de
Montréal; Faculté de médecine et des sciences de la santé, Univ. de
Sherbrooke; McGill Univ., Dept. of Family Medicine; QC, CA.
Introduction : The emergence of prescription opioid (PO) injection in
Canada is of great concern as PO injection was recently shown to be
an independent predictor of hepatitis C virus (HCV) transmission.
Characterization of PO injectors is therefore important for improvement
of HCV control and treatment. The purpose of the study was to
examine socio-demographic and behavioral characteristics associated
with PO injection in Montreal. Methods : A cross-sectional analysis of
baseline characteristics of 1243 injection drug users participating in a
prospective cohort study, the St Luc/HEPCO Cohort of Montreal, was
conducted. Data were collected in 2004 - 2011 by validated
interviewer-administered questionnaire. Bivariate comparisons were
assessed by Chi-square statistics and Student’s t-tests. Logistic
regression modeling was applied to identify correlates of PO injection.
Results : Of the 1243 participants (83.8% males; mean age: 38.3
years), 380 (30.6%) reported PO injection in the past month. In
multivariate regression analysis, factors independently associated with
PO injection included: age (adjusted odds ratio (aOR) by 5-year
increment: 0.78; 95% confidence interval (95%CI): 0.71,0.85); being
Caucasian (aOR:1.93; 95%CI:1.16,3.19), being non-francophone
(aOR:1.87; 95%CI:1.28,2.72); reporting use of injection heroin
(aOR:2.98; 95%CI:2.17,4.11), non-injectable stimulants (aOR:1.95;
95%CI:1.26,3.01), or smoking cocaine (aOR:1.44; 95%CI:1.07,1.93);
reporting unstable housing conditions (aOR:1.89; 95%CI:1.40,2.56),
injecting in public place (aOR:1.58; 95%CI:1.10,2.26) or with other
people (aOR:1.70; 95%CI:1.15,2.52); and HCV (aOR:1.56;
95%CI:1.13,2.16) or HIV (aOR:0.50; 95%CI:0.28,0.88) seropositivity.
Discussion/Conclusion : PO injectors are younger than non-PO
injectors and are more likely to be infected with HCV, but not HIV.
Moreover, PO injectors report behaviours associated with HCV and
HIV transmission. A better understanding of PO injectors’
characteristics may help develop more adapted prevention and
treatment strategies in the future.
Projet subventionné par les IRSC et le réseau SIDA maladies infectieuses du FRQS. S
Puzhko est récipiendaire d'une bourse de formation a la maitrise du FRQS et de la
subvention nationale de formation sur l'hépatite C des IRSC.
33
RÔLE DE DUSP1 DANS LA DÉFENSE DE L'HÔTE CONTRE LES
VIRUS RESPIRATOIRES DANS LES CELLULES ÉPITHÉLIALES DU
TRACTUS RESPIRATOIRE.
Robitaille A.*, Grandvaux N.
CRCHUM, Département de Biochimie, Université de Montréal, QC,
CA.
Introduction : Le virus respiratoire syncytial (RSV), un Paramyxovirus,
est l'agent étiologique causant le plus d'infections respiratoires
pédiatriques sévères pour lequel aucun vaccin ou traitement n'est
disponible. Pour défendre l'hôte, les cellules épithéliales du tractus
respiratoire (AEC) sécrètent des cytokines/chimiokines antivirales et
pro-inflammatoires, dont les interférons (IFNs), qui contrôlent la
réplication virale et la réponse immunitaire subséquente. Cette réponse
doit être strictement régulée, car une réponse d'une intensité/durée
incontrôlée cause des dommages associés à la pathogenèse. Les
facteurs de transcription AP-1, NF-κB et IRF3, dont l’activation implique
de nombreux évènements de phosphorylation, régulent l'expression de
gènes codant pour les cytokines. Les phosphatases impliquées dans la
régulation négative de cette réponse ont récemment commencé à être
identifiées.
But : Identifier de nouvelles phosphatases impliquées dans la
régulation négative de la réponse antivirale induite par les
Paramyxovirus dans les AEC.
Méthodes et résultats : Afin d’identifier les phosphatases impliquées
dans la régulation de l'expression de l'IFNβ, nous avons réalisé un
criblage shRNA en utilisant comme rapporteur l’induction du promoteur
de l’IFNβ par le virus Sendai (SeV), un Paramyxovirus très proche de
RSV. Ce crible nous a permis d’identifier le rôle potentiel de la dualspecific phosphatase 1 (DUSP1). Nous avons montré que DUSP1 est
induit de manière précoce en réponse à l'infection par SeV et RSV
dans des cellules A549. Nous avons aussi observé que l'expression
ectopique de DUSP1 entraîne une diminution de la phosphorylation de
JNK et p38, qui contribuent à activer AP-1, induite par SeV et RSV
dans des cellules A549. Par contre, les voies d’activation de NF-κB et
IRF3 ne sont pas modulées par l’expression de DUSP1. Nos données
suggèrent que DUSP1 agit comme un régulateur négatif de la réponse
antivirale via la régulation de la voie d’activation d'AP-1.
Projet subventionné par les IRSC. Robitaille A. est récipiendaire d'une
bourse du Programme de Formation en Santé Respiratoire du Québec
34
LES NIVEAUX DE B LYMPHOCYTE STIMULATOR (BLYS) SONT
ASSOCIÉS À LA PRÉSERVATION DU COMPARTIMENT DES
CELLULES B CHEZ DES TRAVAILLEUSES DU SEXE BÉNINOISES
HAUTEMENT EXPOSÉES ET VIH NÉGATIVES.
Sabourin-Poirier C*, Thibodeau V, Poudrier J**, Roger M**
CRCHUM, Département de Microbiologie, Infectiologie & Immunologie,
Université de Montréal. **Co-séniors.
Nous avons démontré dans un modèle de progression de la maladie
causé par le VIH qu’un excès de BLyS dans le plasma et à la surface
des cellules dendritiques (DC) chez les progresseurs était associé à
une dérégulation des cellules B. Par contre, le compartiment B et les
niveaux de BLyS n’étaient pas altérés chez les contrôleurs d’élites,
suggérant que la capacité de maintenir les niveaux de BLyS est
associée au contrôle de la maladie. La résistance au VIH pourrait aussi
être en lien avec les niveaux de BLyS. Nous avons mesuré les niveaux
de BLyS dans le sang et les lavages cervico-vaginaux (CVLs) de
travailleuses du sexe (TS) Béninoises qui demeurent séronégatives
malgré une haute exposition au virus, et avons comparé leurs niveaux
avec des TS VIH+. Les niveaux de BLyS dans le sang, à la surface des
monocytes, précurseurs mDC et lymphocytes T, et dans les CVLs des
TS VIH+ sont supérieurs à ceux mesurés chez les TS VIH-. Ces
niveaux sont concomitants avec un compartiment B dérégulé,
caractérisé par une hyperglobulinémie et une diminution du nombre
total de cellules B avec une plus grande fréquence de populations
présentant des caractéristiques communes aux cellules B
transitionnelles immatures et de la zone marginale (MZ) que nous
avons désignées “précurseurs” MZ-like. Un excès de BLyS dans le
contexte du VIH pourrait donc promouvoir des populations B de
première ligne dont les fonctions pourraient nuire à des réponses
protectives efficaces. En revanche, les niveaux de BLyS chez les TS
VIH- coïncident avec un compartiment B préservé qui pourrait être
impliqué dans la protection contre le VIH.
Projet subventionné par les IRSC. Sabourin-Poirier C est récipiendaire
d’une bourse de maîtrise des IRSC et d’une bourse de recherche du
département de microbiologie de l’Université de Montréal
35
36
RÔLE DE L'IL-27 EN SCLÉROSE EN PLAQUES.
Sénécal V. CR-CHUM.
Introduction : La sclérose en plaques (SEP) est une maladie
inflammatoire et démyélinisante du système nerveux central (SNC).
Dans notre laboratoire, nous cherchons à identifier des facteurs
immuns produits par des cellules du SNC qui influenceraient les
réponses immunes chez les patients. Il a été rapporté récemment que
l’expression de la cytokine IL-27 est augmentée dans la moelle
épinière du model murin de la maladie et corrélée à l’activité clinique.
Nous pensons que l’IL-27 est davantage produit dans le SNC de
patients atteints et joue un rôle important dans la neuroinflammation.
Méthodes/données : Par la technique d’immunohistofluorescence sur
échantillons post-mortem de tissus cérébraux, nous avons observé que
l’IL-27 est davantage produit chez les patients, que les astrocytes et
microglies humains produisent la cytokine, et que les lymphocytes
auto-immuns contenus dans le sang périphérique et le cerveau des
patients expriment de plus hauts niveaux du récepteur. Par qPCR et
ELISA, nous avons observé que des stimuli pro-inflammatoires connus
d’être augmentés dans le liquide céphalo-rachidien des patients
induisent l’expression d’IL-27 par les astrocytes et microglies. Les
macrophages pro-inflammatoires M1 produisent plus la cytokine que
leurs confrères de phénotype M2. Par cytométrie et western, nous
avons respectivement observé que les astrocytes expriment aussi le
récepteur et répondent à la cytokine en phosphorylant la molécule
STAT1. Encore par cytométrie, nous avons observé que l’IL-27
augmente l’expression de molécules effectrices sur les astrocytes.
Conclusion : L’IL-27 permet de faire le pont entre le SNC et le
système immunitaire chez les patients. Cette cytokine est produite par
des cellules du SNC en condition inflammatoire, influence les réponses
auto-immunes et augmente les réponses effectrices des astrocytes et
pourrait donc influencer le développement pathologique de la maladie.
ROLE OF AUTOPHAGY IN THE CONTRIBUTION OF CD16+
MONOCYTE-DERIVED
DENDRITIC
CELLS
TO
HIV-1
PATHOGENESIS.
Tep T-S*1,2, Wacleche VS1,2, El-Far M2, Chouick Y2, Routy JP3, Ancuta
P1,2.
1
Département de microbiologie, infectiologie et immunologie, Université
de Montréal, QC, CA, 2CRCHUM, QC, CA, 3CUSM, QC, CA.
Introduction : CD16+ monocytes are highly expanded during HIV
infection and represent a source of pro-inflammatory cytokines.
Functional characteristics of CD16+ monocyte-derived DC (MDDC)
remain unknown. To determine whether CD16+ MDDC contribute to
HIV pathogenesis, we investigated the trans-infection ability and the
immunogenic potential of CD16+ versus CD16- MDDC in relationship
with autophagy.
Methodology : Monocytes were isolated from PBMC of healthy donors
by negative selection using magnetic beads. CD16+ and CD16subsets were sorted by flow cytometry. MDDCs were obtained upon
monocyte culture in presence of GM-CSF/IL-4. The trans-infection
ability (intracellular HIV-p24) and immunogenic potential (CFSE dilution
assay) were evaluated by co-culture of MDDC with autologous CFSEloaded CD4+ T-cells in the presence or absence of HIV (NL4.3BaL)
and antigens (SEB, CMV, C. albicans, S. aureus) or CD3/CD28.
MDDC were pretreated with autophagy drugs rapamycine, bafilomycin
and 3-MA.
Results : FACS analysis shows that CD16+ vs. CD16- MDDC exhibit
an altered immunogenic potential. They have an altered ability to
induce the proliferation of antigen-specific CD4+ T-cells and an
impaired secretion of both IL17-A and F. Rapamycin decreased HIV
trans-infection and also impedes on the antigen-specific proliferation of
CD4+ T-cells. Bafilomycin and 3-MA did not significantly affect these
processes.
Conclusion : The expansion of CD16+ monocytes in peripheral blood
of HIV-infected subjects may favor the generation of MDDC prone to
HIV pathogenesis. New therapeutic strategies aimed at restoring
autophagy in CD16+ MDDC may promote potent antiviral responses
while limiting HIV dissemination.
Projet subventionné par le FRSQ.
Project funded by CIHR
37
OPTIMISATION DU POTENTIEL THÉRAPEUTIQUE DES CELLULES
SOUCHES À L'OCYTOCINE : EN ROUTE VERS DE FUTURS
ESSAIS CLINIQUES. Vu MQ*, Borie M, Bessette PO, Mansour S,
Steven LM, Roy DC, Jankowski M, Gutkowska J, Der Sakissian S,
Noiseux N. CRCHUM, Dép. de chirurgie, Univ. de Montréal, QC, CA.
Introduction : L'ischémie myocardique entraîne des dommages irréversibles
aux cardiomyocytes associés à la perte de la fonciton cardiaque. Les études
cliniques démontrent la faisabilité et la sécurité de la thérapie cellulaire pour
améliorer l'évolution des séquelles secondaires à l'infarctus. Les résultats
restent toutefois marginaux en raison de la faible survie et rétention des
cellules dans l'environnement ischémique. Notre objectif est d'adresser ces
limites en optimisant la thérapie cellulaire par préconditionnement à l'ocytocine
(OT). Méthode : On utilise des cellules souches mésenchymateuses humaines
(CSMh) dérivées de la moelle. On les a soumises à l'OT (10-10M à 10-6M)
pendant différentes périodes d'exposition (préconditionnement 1h à une
exposition continue). Le PCR a permis de charactériser nos cellules et
démontrer la présence de récepteurs d'ocytocine (OTR). L'étude des voies de
signalisation a été possible par Western Blot. L'étude de viabilité a été faite par
LIVE/DEAD suivant un stress hypoxique et un stress oxydatif dans un milieu
dépourvu de sérum. La prolifération a été étudiée par décompte cellulaire
après 1 semaine de culture. On a étudié le potentiel de dfférentiation en
ostéocytes et adipocytes. Résultats : On a démontré la présence d'OTR sur
les CSMh. L'activation de ces récepteurs active Akt et ERK1/2, des kinases
impliquées dans la réponse de survie au stress, la capacité de prolifération et
de différentiation. De ce fait, on a démontré une amélioration de survie lors du
stress hypoxique chez les CSMh de 30%. La prolifération également a été
positivement affectée. Le potentiel de différentiation cellulaire a été préservée,
voire promue lorsqu'on soumet les cellules à une exposition continu d'OT, et
ce, jusqu'à 11%. Malgré l'exposition à l'OT, le phénotype des cellules est
toutefois préservé. Discussion : L'OT permet d'adresser les limites actuelles
de la thérapie cellulaire. L'OT déclenche des voies de signalisation impliquées
dans la survie des cellules à un stress ischémique tout en potentialisant la
prolifération et la différentiation. Cela nous a permis de conclure que des doses
physiologiques OT (10-8M à 10-10M) avec un préconditionnement >24h
amène les meilleurs effets. Ciblant ces conditions, on est en cours de valider
ces expériences in vivo et protocoliser des essais cliniques de phase I.
Support : Thécell, FRSQ, HMR, Pfizer CIHR, Département de chirurgie
Université de Montréal.
38
NVOLVEMENT OF MAPKs AND PKB PATHWAYS IN INSULIN-LIKE
GROWTH FACTOR-1 (IGF-1)-INDUCED EARLY GROWTH
RESPONSE PROTEIN-1 (EGR-1) EXPRESSION IN VASCULAR
SMOOTH MUSCLE CELLS (VSMC).
Youreva V*, Srivastava AK.
CRCHUM, Faculty of medicine, University of Montreal, QC, CA.
Introduction : Egr-1 is a transcription factor that plays an important
role in vascular biology. Egr-1 expression has been shown to be
upregulated in cardiovascular disease (CVD). IGF-1, a potent mitogen
and vasoactive factor, is believed to contribute to the development of
CVD, such as atherosclerosis, through the hyperactivation of mitogenic
and growth promoting pathways, including mitogen-activated protein
kinase (MAPK) and protein kinase B (PKB) pathways, as well as
regulation of multiple transcription factors. Reactive oxygen species
(ROS) have been shown to mediate the effects of IGF-1 and is
believed to contribute to the pathogenesis of vascular abnormalities.
We have previously shown that IGF-1 can induce the expression of
Egr-1 in VSMC, however, the signaling pathways involved in this
process remain unexplored.
Methods/Results : Therefore, we have investigated the involvement of
MAPK, PKB and ROS in IGF-1-induced Egr-1 expression. Treatment of
VSMC with IGF-1 enhanced Egr-1 protein levels in a time and dosedependent fashion. Pharmacological blockade of RNA synthesis and
protein synthesis by Actinomycine D and Cycloheximide, respectively,
attenuated IGF-1-induced Egr-1 expression. AG1024, a selective
pharmacological inhibitor of IGF-1R, also inhibited IGF-1-induced Egr-1
expression. Moreover, PD98059 and SP600125, two selective
inhibitors of MEK/ERK1/2 and JNK family of MAPKs, respectively,
significantly decreased IGF-1-stimulated increase in Egr-1 expression
in VSMC. In addition, pharmacological blockade of PI3K/PKB pathways
by Wortmannin/SC-66 respectively, also attenuated IGF-1-induced
Egr-1 expression. DPI (Diphenyleneiodonium), an NAD(P)H oxidase
inhibitor, also blocked the Egr-1 expression in response to IGF-1.
Conclusion : In summary, these data demonstrate that ERK1/2/JNK,
PI3K/PKB and ROS-dependent signaling events play a critical role in
IGF-1 induced expression of Egr-1 in VSMC.
Supported by CIHR grants.
39
INSULIN-MEDIATED ACTIVATION OF MTORC1 AND MTORC2
PROMOTES DENDRITE REGENERATION AFTER AXONAL
INJURY.
Agostinone J*, Di Polo A.
CRCHUM, Département de neurosciences, Université de Montréal,
QC, CA.
Goal : Loss of vision in glaucoma is caused by the death of retinal
ganglion cells (RGCs). Emerging data indicate that early retraction of
dendrites plays a prominent role in neurodegeneration. Our recent data
demonstrate that: 1) the activity of the mammalian target of rapamycin
(mTOR) is reduced soon after axonal injury; 2) mTOR is a key
mediator of dendritic stability in adult RGCs. Here, we sought to
determine whether mTOR upregulation promotes dendrite
regeneration.
Methodology : Acute axonal injury was induced by optic nerve
axotomy in transgenic mice (Thy1-YFP). A daily intraperitoneal
injection of insulin was used to activate mTOR. Treatment started three
days after axotomy, when there is substantial dendritic retraction, and
analysis was assessed one week post-injury. Rapamycin, a specific
inhibitor of mTORC1 and KU-0063794, an inhibitor of both mTORC1
and mTORC2, were used to assess the specificity of the effects.
Results : Our data show that mTOR activation promotes robust
dendrite regeneration and restores dendritic length and field area to
values similar to those found in intact RGCs. KU-0063794 treatment
completely abrogated the regenerative effect of mTOR activation.
Interestingly, inhibiting mTORC1 only abolish regenerative effects on
dendrite complexity, the dendritic field area is not affected and the total
dendritic length is partially altered.
Conclusion : Our data demonstrate that mTOR activation promotes
dendritic regeneration in injured neurons. mTORC1 is involved in
dendrite complexity whereas mTORC2 mediates dendrite regrowth.
This study is the first showing the effects of mTORC1 and mTORC2 on
dendrite morphology and regeneration in adult.
Supported by IRSC and Faculté des Etudes Supérieures et Postdoctorales de l’Université de Montréal.
40
NEF PROTEINS FROM ELITE CONTROLLERS ARE INEFFICIENT
AT PREVENTING EXPOSURE OF ENV ADCC-MEDIATING
EPITOPES.
Alsahafi N*1, Mwimanzi P2, Markle T2, Miura T3, Walker B4, Brockman
M2, Finzi A1.
1
CRCHUM, 2SFU, 3Tokyo U, 4Harvard U.
Introduction : Impairment of Nef functions were described in elite
controllers (EC), rare HIV-1 infected individuals who suppress plasma
viremia to <50 RNA copies/mL in the absence of antiretroviral
treatment. Understanding viral and host elements that result in the
controllers phenotype is essential for new therapeutic approaches. We
recently reported that exposure of HIV-1 envelope (Env) epitopes
targeted by antibody mediating cellular-cytotoxicity (ADCC) could be
modulated by the HIV-1 Nef accessory protein. Importantly, we
showed that this was dependent on its well-known ability to
downregulate CD4 receptor from the cell surface. We also reported
that Nef proteins isolated from EC were less efficient at downregulating
CD4, but whether this contributed to the EC status remains unknown.
Here we investigated whether the inability of Nef from EC to
downregulate CD4 resulted in exposure of HIV-1 Env epitopes targeted
by ADCC-mediating antibodies and compared them to Nef from chronic
progressors(CP).
Method : 95 Nef clones isolated from plasma of EC and CP were
studied. Cell Based ELISA were performed to detect Env epitopes
exposure at the surface of cells in presence of CD4 and all the different
Nef clones.
Results : Our results indicated that the inability of Nef clones from EC
to efficiently downregulate CD4 correlated with enhanced exposure of
Env ADCC-mediating epitopes.
Conclusion/Discussion : Our results suggest that the inability of Nef
from EC to fully-downregulate CD4 may correlate with enhanced
ADCC killing of HIV-1-infected cells; thus, unraveling a new
mechanism of immune evasion by HIV-1 in CP and suggesting that
Nef’s ability to downregulate CD4 should be considered as a
therapeutic target.
Funding: CIHR.
41
BCL-XL PHOSPHORYLATION DURING MITOSIS AND GENOMIC
STABILITY.
Baruah PS.*, Beauchemin M, Hébert J, Parker A, Bertrand R.
CRCHUM, Institut du cancer de Montréal, Université de Montréal, Qc,
CA.
Introduction : Bcl-xL, a major anti-apoptotic protein of the Bcl-2 family,
plays specific functions during mitosis. Its loop region undergoes
dynamic phosphorylation at S62 during prophase, metaphase and the
anaphase boundary, and at S49 during telophase and cytokinesis.
Expression of Bcl-xL (S62A) and (S49A) mutants in cancer cells yields
aberrant cell cycle behavior during mitotis but retain their anti-apoptotic
functions. Silencing Bcl-xL expression yields mitotic defects with
chromosome mis-segregation and aneuploidy.
Methods and Results : To understand the role of Bcl-xL
phosphorylation events during mitosis and in maintaining genomic
stability, in-vitro studies are conducted in BJ normal foreskin fibroblast
cells expressing Bcl-xL(wt), Bcl-xL(S49A), (S49D), (S62A), (S62D) and
dual (S49/62A) & (S49/62D) mutants. Kinetics of cell proliferation,
senescence, cell death and occurrence of chromosomal aberrations
are monitored. In parallel, the kinetics of mitotic length, mitotic spindle
formation, chromosome alignment, segregation and cytokinesis will be
monitored in cells expressing YFP-tagged Bcl-xL(wt)/mutants and
CFP-tagged H2B. Further, in-vivo studies on transgenic C.elegans
expressing Bcl-xL(wt)/mutants are analyzed by progeny test, life-span
assay and nuclear staining at the gonads of the hermaphrodite worms.
These transgenic worms will be crossed with the ced-9 lethal mutant
(ced-9(n2812)/qC1 dpy-19(e1259) glp-1(q339) III) and similar assays
will be conducted to evaluate their effects on mitotic progression.
Conclusion and Discussion : Bcl-xL potentially influences genomic
stability and tumorigenesis via its function during mitosis. On a midterm perspective, these findings could have an impact on cancer
therapy strategies targeting the Bcl-2 family members.
42
ÉTUDE DU TRAFFICKING DE L’ENDOREPELLINE MENANT À LA
PRODUCTION DE LG3.
Beillevaire D*, Turgeon J, Dieudé M, Hébert MJ.
Le fragment C-terminal du perlécan, LG3, relâché en association avec
le dommage endothélial, est augmenté en circulation chez les patients
greffés rénaux atteint d’un rejet vasculaire. Nous avons pu observer
dans le laboratoire la présence de LG3 dans des vésicules
membranaires issues de cellules endothéliales apoptotiques. Chez des
souris subissant une transplantation aortique, ces vésicules sont
capables d’induire un rejet quand elles leurs sont injectées. Nous
émettons donc l’hypothèse que la production du LG3 durant l’apoptose
est issue de la recirculation d’un fragment du perlécan, l’endorepelline,
qui est processé au sein de la cellule endothéliale et externalisé à
l’intérieur de vésicules membranaires.
Notre étude est réalisée sur des HUVEC déprivées en facteurs de
croissance en présence ou non de peroxyde d’hydrogène, un modèle
de stress oxydant. Un inhibiteur de la caspase 3 prévient l’apoptose
induite par le H2O2 à de faible concentration. Nous avons pu observer
une diminution de la présence de LG3 extracellulaire en présence
d’H2O2 ainsi qu’en présence de l’inhibition de la caspase 3 et de
l'inhibition de l’acidification du lysosome. L’ajout d’inhibiteur de la
clathrine, nous a permis de voir une diminution de l’uptake de
l’endorepelline recombinante ajoutée sur des HUVEC déprivées en
facteurs de croissance.
Nos résultats préliminaires suggèrent que l’endorepelline est
internalisée par des voies clathrine dépendante et qu’elle subit un
processing au sein de la cellule endothéliale menant à la production de
LG3. Le LG3 est alors sécrété en association avec des vésicules
membranaires après activation de la caspase 3 et de l’acidification du
lysosome. De plus, le H2O2 inhibe la sécrétion de LG3 dans les
vésicules de manière caspase 3 indépendante. Le trafficking du LG3
au sein de la cellule endothéliale pourrait alors lui permettre d’acquérir
un pouvoir immunogène lui permettant ainsi de favoriser le rejet
vasculaire.
43
ÉTUDE DES MÉCANISMES DE L'ACTIVITÉ ANTI-TUMORALE DE
LA CHIMIO-IMMUNOTHÉRAPIE COMBINÉE.
Bergeron MA*, Pommey S, Stagg J.
CRCHUM, Département de Pharmacie, ICM, Université de Montréal,
QC, CA.
Les approches immuno-thérapeutiques ciblant les points de contrôle
immunologique ont été associées avec des réponses cliniques
impressionnantes dans les quelques dernières années. Toutefois, il
reste encore à investiguer si bloquer ces points de contrôle pourrait
augmenter l’activité thérapeutique de la chimiothérapie. Parmi ces
drogues, certaines sont associées à une mort cellulaire
immunogénique. Les anthracyclines en font parties et pourrait donc
bénéficier des effets thérapeutiques des « immune checkpoints ».
Nous avons donc décidé d’investiguer à savoir si la chimiothérapie
combinée à l’immunothérapie pouvait avoir un effet anti-tumoral
synergétique chez la souris.
Une lignée cellulaire dérivée de la souris (AT3) a été injectée souscutanée chez des souris. Au jour 11, les souris ont reçu une injection
intra-tumorale de doxorubicine. Simultanément, les souris ont subi un
premier traitement immuno-thérapeutique consistant en un simple
agent immunologique (soit anti-PD-1, anti-CTLA-4 ou anti-TIM3) ou
encore une combinaison de deux agents (anti-PD-1 et anti-CTLA-4 ou
anti-PD-1 et anti-TIM3).
La combinaison de la chimiothérapie avec un seul agent immunothérapeutique n’a pas augmenté l’activité anti-tumorale de la
doxorubicine. Toutefois, lorsque les souris étaient traitées avec et la
doxorubicine et une combinaison de plusieurs agents immunothérapeutiques (soit anti-PD-1/CTLA-4 ou soit anti-PD-1/TIM3), nous
avons pu observer une augmentation significative de l’activité
thérapeutique anti-tumorale.
Ces résultats semblent indiquer que les traitements chimioimmunothérapeutiques requièrent l’inhibition de plusieurs « immune
checkpoints ». Les mécanismes impliqués dans ce processus sont
encore inconnus, mais des résultats préliminaires semblent prouver
qu’il existe un système de compensation entre l’expression des
différentes protéines, expliquant ainsi pourquoi l’inhibition de plusieurs
points de contrôle augmenterait l’effet anti-tumoral de la doxorubicine.
44
ROLE DU GROUPE 2 DE LA FAMILLE PAK DANS LA VOIE DE
SIGNALISATION DE GPR40 ET LA SÉCRÉTION D’INSULINE.
Bergeron V*, Ghislain J, Vivot K, Poitout V.
CRCHUM, Centre de Recherche du Diabète de Montréal; Département
de Médecine de l’Université de Montréal.
Introduction : Le récepteur couplé à la protéine G GPR40 est une
cible thérapeutique potentielle pour le diabète de type 2 puisque son
activation par les acides gras de moyenne à longue chaîne potentialise
la sécrétion d’insuline stimulée par le glucose. L’objectif de cette étude
consiste à déterminer le rôle des kinases activées par p21 (PAK) dans
la voie de signalisation de GPR40 et la sécrétion d’insuline.
Méthodes : L’activation des groupes 1 et 2 PAK a été étudiée par
technique d’immunobuvardage dans les ilots de Langerhans isolés de
souris sauvages et déficientes pour GPR40 (GPR40 KO) et dans les
cellules insulino-sécrétrices MIN6 et INS832/13. La sécrétion d’insuline
a été mesurée dans les cellules insulino-sécrétrices INS832/13
électroporées avec de petits ARN interférents (siRNA) pour PAK4,
PAK6 ou PAK7 dont l’efficacité a été vérifiée par qPCR.
Résultats : Dans les cellules MIN6, le glucose induit la
phosphorylation des PAK du groupe 1, tel que décrit précédemment, et
du groupe 2. Toutefois, seule la phosphorylation du groupe 2 est
potentialisée par la présence d’oléate. Cette potentialisation de la
phosphorylation des PAK du groupe 2 est aussi observée dans les ilots
de souris sauvages. Cependant, elle n’est pas observée dans les ilots
GPR40 KO. D’autre part, l’électroporation avec les siPAK4 réduit non
seulement la phosphorylation des PAK du groupe 2 mesurée par
immunobuvardage, elle diminue aussi la potentialisation de SIIG par
les acides gras.
Conclusion : L’activation de GPR40 mène à la phosphorylation de
PAK4 et l’activation de PAK4 semble être essentielle à la
potentialisation de SIIG par les acides gras. Le mécanisme par lequel
PAK4 permet une potentialisation de la sécrétion d’insuline demeure à
être étudié.
45
46
L'AUTOPHAGIE
RÉGULE
LA
SÉNESCENCE
ET
LA
DIFFÉRENCIATION MYOFIBROBLASTIQUE.
Bernard M*, Underwood K, El-Diwany M, Yang B, Rodier F, Hébert MJ.
CRCHUM, Axe 4i, Université de Montréal. QC, CA.
La fibrose est un mécanisme de réparation tissulaire anormal associée
à l’accumulation de myofibroblastes, qui par leur production accrue de
matrice extracellulaire, entravent la fonction du tissu. Nous avons
identifié une nouvelle voie fibrogénique impliquant l’autophagie, un
mécanisme de survie cellulaire, et la différenciation myofibroblastique.
Une autophagie soutenue permet l’activation de MTORC2/AKT
conduisant à la surexpression du facteur pro-fibrotique CTGF et à la
différenciation. Dans cette étude, l’autophagie est activée en condition
où la prolifération cellulaire est arrêtée. Comme un lien a été montré
entre sénescence (arrêt irréversible du cycle cellulaire) et fibrose,
nous émettons l’hypothèse qu’une autophagie soutenue entraîne la
sénescence du fibroblaste et la différenciation myofibroblastique.
Pour vérifier cette hypothèse, nous étudierons des marqueurs de
sénescence dans des fibroblastes autophagiques au cours de leur
différenciation en myofibroblastes. Nous analyserons l’effet d’une
inhibition de l’autophagie ou de la voie fibrogénique que nous avons
caractérisée sur les marqueurs de sénescence.
Nos résultats préliminaires indiquent que l’autophagie est nécessaire à
l’établissement de la sénescence. L’inhibition biochimique ou génique
de l’autophagie bloque l’expression des marqueurs de sénescence p16
ou p21. MTORC2 et les ROS joueraient un rôle dans la régulation de la
sénescence induite par l’autophagie car l’inhibition de MTORC2 ou le
NAC (chélateur de ROS) affectent la phosphorylation d’AKT, cible de
MTORC2, et bloquent l’expression des marqueurs de sénescence. Nos
résultats indiquent que la production de ROS associée au stress est
nécessaire à l’activation de l’autophagie qui induit la sénescence et la
différenciation myofibroblastique.
DUAL ROLE OF ACBP IN THE HYPOTHALAMUS: REGULATOR OF
ASTROCYTE
FATTY
ACID
METABOLISM
AND
GLIOTRANSMITTER TARGETING ANORECTIC POMC NEURONS.
Bouyakdan K*1, Taib B1, Budry L1, Rodaros D1, Chretien C2, Pénicaud
L2, Mandrup S3, Fioramonti X2 et Alquier T1.
1
CRCHUM, 2Université de Bourgogne, 3University of Southern
Denmark.
In the hypothalamus, the arcuate nucleus (ARC) detects changes in
circulating nutrients levels (glucose, fatty acid (FA)) via two antagonist
neuronal populations, NPY and POMC neurons to regulate energy
balance. However, little is known on the cellular mechanisms involved
in FA inhibition of feeding. In the periphery, Acyl-CoA Binding Protein
(ACBP) is an Acyl-CoA pool former, FA activated forms, which is
important for their metabolism. In the brain, ACBP is secreted by
astrocytes and inhibits the GABAA receptor. We show that ACBP is
mainly localized in hypothalamic astrocytes and its central
administration inhibits food intake (FI). We propose that ACBP plays a
dual role in the hypothalamus as a regulator of FA metabolism in
astrocytes and a gliotransmitter targeting ARC neurons to inhibit FI.
Using complementary models generated from ACBP WT and KO mice,
we show that ACBP deficiency reduces oleate, but not palmitate and
stearate, oxidation and esterification in hypothalamic astrocytes. Our
electrophysiological data show that ODN (active ACBP fragment)
reduces the frequency of inhibitory postsynaptic currents on anorectic
POMC neurons leading to increased activity. Using MC4R KO mice,
we show that ODN-induced POMC neurons activation is required for
ODN anorectic effect. Furthermore, female mice with an astrocyte
specific ACBP deficiency (GFAP-Cre x ACBP-Flox) are more
susceptible to high fat diet-induced obesity than their WT littermates.
Collectively, these data suggest the existence of an ACBP-dependent
cross-talk between astrocytes and neurons involved in hypothalamic
regulation of feeding and development of obesity.
Funded by CIHR, Diabète Québec and réseau CMDO of FRQS
47
THE PRO-INFLAMMATORY SLAN+ MONOCYTE/DENDRITIC
CELLS ACCUMULATE IN THE COLON AND THE MESENTERIC
LYMPH NODES OF CROHN’S DISEASE PATIENTS
Bsat M*1, Chapuy L1, Baba N2, Rubio M1, Panzini B3, Wassef R4,
Richard C4, Soucy G5, Mehta H1, Sarfati M1.
1
Immunoregulation Lab., CRCHUM, QC, CA; 2Center for Innovative
and Translational Medicine, Kochi University Medical School, Japan;
3
Dept.t of Gastroenterology, 4Dept. of Digestive Tract Surgery and
5
Dept. of Pathology, CHUM, QC, CA.
Introduction : Human 6-sulfo LacNac+ (Slan+) cells are considered a
minor monocyte or major dendritic cell subset in peripheral blood.
These cells have been studied in patients with psoriasis, rheumatoid
arthritis and autoimmune diseases. The two main inflammatory bowel
disease (IBD) disorders are Crohn’s disease (CD) and ulcerative colitis
(UC), which show overlapping and distinct clinical and pathological
characteristics. We here investigate the frequency, phenotype and
function of Slan+ cells in blood, colon and mesenteric lymph nodes
(mLNs) of IBD patients using flow cytometry. Methods : Fifty-two
active CD, 44 active UC and 17 non-IBD patients as well as 19 healthy
subjects were included in the present study. We quantified Slan+ cells,
examined their expression of CD172ab and assessed their proinflammatory cytokine profile in blood, colon as well as mesenteric
lymph nodes (mLNs) of CD and UC patients using flow cytometry.
Their presence was further examined by IHC in tissues. Results :
First, the frequency of Slan+ cells was significantly reduced in
peripheral blood of CD but not UC patients. Their expression of
CD172a, but not CD172b, increased in CD patients relative to control
subjects. Second, Slan+ cells preferentially accumulated in inflamed
CD, but not UC or non-IBD, colon as detected by flow cytometry and
IHC. Third, Slan+ cells were detected for the first time in mLNs of CD
patients, where they accumulate. Fourth, circulating Slan+ cells
produced increased amounts of TNFα, IL1β and IL12/23p40 in vitro in
response to NOD2 stimuli in CD, but not UC, patients. Finally, the
phenotype and pro-inflammatory profile of Slan+ cells was similar in
blood, mLNs and ex vivo isolated cell suspensions from inflamed colon
of CD patients. Conclusion: Pro-inflammatory CD172a+Slan+ cells
accumulate in lymphoid and non-lymphoid tissues in CD, but not UC,
patients and thus may contribute to CD pathogenesis. This project was
supported by a grant from CIHR. M Bsat received an award from
Faculté des études supérieures de l’Université de Montréal.
48
A PROSPECTIVE STUDY OF LYMPHOCYTES INFILTRATING THE
BREAST CANCER MICROENVIRONMENT.
Buisseret L1,2*, Garaud S1, Naveaux C1, Duvillier H3, de Wind A1, Stagg
J2, Sotiriou C1, Willard-Gallo K1. 1Institut Jules Bordet, Université Libre
de Bruxelles, Belgique, 2CRCHUM, Faculté de Pharmacie et Institut du
Cancer de Montréal, QC, CA, 3Flow Cytometry Core Facility, Université
Libre de Bruxelles, Belgique.
The clinical relevance of tumor infiltrating lymphocytes (TIL) in breast
cancer (BC) is controversial due to variation in the subpopulations of
immune cells detected in tumors, with the balance of key players
potentially explaining the protective immunity observed in some
patients. To gain insight, we performed comprehensive
immunophenotyping of T and B-TIL in early stage BC. This prospective
analysis used flow cytometry to examine TIL in fresh tumor
homogenates (n=122). TIL were compared to lymphocytes in
nonadjacent non-tumor breast tissue (NANT, n=116) and normal tissue
from mammary reductions (n=47). TIL organization and spatial
distribution
was
analyzed
by
immunohistochemistry
and
immunofluorescence on paraffin sections. The fresh tissue analyses
revealed that tumors have a higher TIL density compared to normal
tissue and NANT, the latter two being remarkably similar. TIL density
was correlated with proliferation (Ki-67 & histological grade) and
inversely correlated with hormone receptor expression. Tumors have
higher frequencies of lymphocytes compared with normal tissue, with
associated increases in CD4+ T cells and CD19+ B cells. In all tissues,
T cells are predominantly CD45RO+ memory cells, with a significant
proportion expressing PD-1. The B cell population was more
heterogeneous with higher numbers of memory B cells detected in
tumors relative to normal tissues. The distribution pattern of TIL (CD4+,
CD8+ & B cells) in infiltrated tumors was dispersed in the tumor bed
and lymphocyte aggregates were principally in the peritumoral regions.
Closer examination of these lymphoid aggregates shows they are
tertiary lymphoid structures containing a T cell zone and a B cell follicle
with an active germinal center. These data suggest that establishment
of organized immune microenvironment in or adjacent to the tumor bed
could be an effective mechanism for generating anti-tumor memory T
and B cell responses. This work was supported by grants from the Belgian
Fund for Scientific Research (FRS-FNRS), Opération Télévie, Plan National de
Cancer, Les Amis de l’Institut Bordet, the Medic Foundation, the Fonds JeanClaude Heuson, FRS-FNRS affiliations: Buisseret L is a fellow of the FRSFNRS and Sotiriou C is a research director of the FRS-FNRS.
49
FUNCTIONAL ROLE OF AQUAPORIN-1 IN RENIN ANGIOTENSIN
SYSTEM- INDUCED HYPERTENSION AND KIDNEY INJURY.
Chang SY1*, Lo CS1, Zhao XP1, Aliou Y1, Chenier I1, Bouley R2,
Ingelfinger JR2, Chan JSD1, Zhang SL1.
1
CRCHUM, Montreal, Ca; 2Mass. Gen. Hosp., Boston, USA.
Introduction : The present studies explored the role of aquaporin-1
(AQP1) in intrarenal renin angiotensin system (RAS)-induced
hypertension and kidney injury, focusing on underlying molecular
mechanisms in vivo and in vitro.
Methods : Male angiotensinogen (Agt)-transgenic (Tg) mice specifically overexpressing Agt in their renal proximal tubular cells (RPTCs)
(non-Tg littermates as controls) ± RAS blockade (losartan and
perindopril treatment from 13 to 20 weeks) were used. Hypertension,
biological parameters and renal morphology were determined. Renal
proximal tubular Agt, AQP1, Nrf2, and heme oxygenase-1 (HO-1),
were tested in both in vitro and in vivo studies.
Results : As compared with non-Tg littermates, untreated Agt-Tg mice
developed hypertension, renal hypertrophy and tubulointerstitial fibrosis
with up-regulation of Nrf2, but down-regulation of HO-1 and AQP1
within the kidney. The enhanced phospho-GSK3β in the kidney of AgtTg activated export of the nuclear Nrf2 to cytosol, where it underwent
either ubiquitous degradation or apoptosis process. Dual RAS
blockade prevented these abnormalities. Moreover, naïve immortalized
RPTCs (IRPTCs) and a stable Agt-RPTC clone (i.e., stable transfection
of rat Agt cDNA) was used for our in vitro studies. Although total Nrf2
was augmented by overexpression of Agt, the majority of Nrf2
expression remained cytosolic. AQP1 gene expression is significantly
regulated by HO-1, which was directly targeted by nuclear portion of
Nrf2 in both naïve RPTCs and stable Agt-RPTC clone.
Conclusion : Our data suggest that nuclear Nrf2 targeting HO-1 pathway regulated AQP1 expression plays a key role in RAS -induced
hypertension and kidney injury, both in vivo and in vitro.
This project is funded by CDA and MDRC.
50
INCREASED EXPRESSION OF RETINAL TAU IN EXPERIMENTAL
GLAUCOMA IS NEUROTOXIC.
CHIASSEU M, DESTROISMAISONS L, VAN DE VELDE C,
LECLERC N, DI POLO A.
CRCHUM, Department of Neurosciences, University of Montreal, QC,
CA.
Glaucoma is a degenerative retinopathy characterized by the extensive death
of Retinal ganglion cells (RGC). Glaucoma is the main cause of irreversible
blindness worldwide, yet there is no cure against the disease mainly because
its exact cause remains elusive. Interestingly, several studies have reported
the existence of common pathological features between glaucoma and
Alzheimer’s disease (AD) such as the presence of amyloid plaques and Tau
aggregates. In this study, we hypothesized that Tau is involved in RGC death
during glaucoma following mechanisms similar to AD. To test our hypothesis,
we used an experimental rat glaucoma model wherein we examined changes
in retinal Tau expression and the effects of Tau on RGC survival.
Ocular hypertension (OHT) was induced in rats by injection of hypertonic saline
solution into an episcleral vein. Retinal Tau expression was assessed by
western blot using antibodies against total, phosphorylated, and oligomeric tau.
The cellular distribution of Tau was investigated by retinal and optic nerve
immunohistochemistry using Tau conformation specific antibodies in
conjunction with cell-specific markers. The effect of OHT on retinal Tau gene
expression was assessed by RT-PCR using specific Tau primers.
Our results demonstrate that in the retina, OHT leads to rapid accumulation of
both monomeric and oligomeric Tau. Both hyperphosphorylated and
hypophosphorylated forms of Tau were detected in glaucomatous retinas
compared to intact controls. Surprisingly, retinal Tau increase could not be
ascribed to a change in gene expression as OHT retina showed no significant
change in Tau mRNA levels when compared to intact controls. Instead, we
show that the increase of Tau in OHT retina actually resulted from the
relocalization of the protein from the axonal to the somato-dendritic
compartment of RGC. Importantly, Tau deletion using siRNA led to substantial
protection of RGC soma and axons from glaucomatous damage compared to
retinas treated with a control siRNA.
In conclusion, in the glaucomatous retina, Tau displays features reminiscent of
taupathies namely altered phosphorylation profile, oligomerization,
compartmental redistribution, and neurotoxicity, glaucoma treatment.
Furthermore, this study demonstrates that the glaucomatous retina can be
used as a model to study the molecular mechanisms mediating Tau
neurotoxicity.
Funding: CIHR, Alzheimer Society Canada.
51
THE
PHOSPHODIESTERASE
INHIBITOR
IBUDILAST
ATTENUATES GLIAL CELL REACTIVITY, PRODUCTION OF
PROINFLAMMATORY CYTOKINES AND NEURONAL LOSS IN
EXPERIMENTAL GLAUCOMA.
Cueva-Vargas JL*, Belforte N, Di Polo A.
Department of Neuroscience, University of Montreal Hospital Research
Center, Montreal, QC, CA.
Purpose : Ibudilast, a phosphodiesterase inhibitor with glial cell
modulation, anti-inflammatory and vasodilator properties, has been
used for over 20 years for the treatment of asthma and stroke. Here,
we characterized the role of ibudilast on the response of glia and retinal
ganglion cells (RGCs) to ocular hypertension (OHT) glaucoma.
Methods : OHT was induced by injection of hypertonic saline solution
into an episcleral vein in Brown Norway rats. Ibudilast or vehicle was
administered by intravitreal injection. Animals were euthanized at 3
weeks after OHT induction, and the retinas and optic nerves were
collected for histological and biochemical analyses. Tumor necrosis
factor α, (TNFα), interleukin 1 (IL-1β), interleukin 6 (IL-6), macrophage
migration inhibitory factor (MIF), glial fibrillary acidic protein (GFAP)
and ionized calcium binding adaptor molecule 1 (Iba1) expression were
evaluated by immunohistochemistry and western blots. RGC soma or
axon density was assessed on Brn3a-stained flat-mounted retinas or
toluidine blue-stained optic nerve cross sections, respectively.
Results : Our data demonstrate a striking decrease in the number of
GFAP-positive astrocytes and Iba1-labeled microglia in ibudilasttreated glaucomatous retinas and optic nerves compared to vehicletreated controls. Ibudilast treatment also led to a marked reduction in
the levels of the pro-inflammatory cytokines TNFα, IL-1β, IL-6, and MIF
in ocular hypertensive eyes compared to vehicle treatment. Ibudilast
promoted robust RGC soma (91%, 1884±43 RGCs/mm2, n=5) and
axonal protection (90%, 90639±2657 axons, n=5) with respect to
vehicle (68% soma, 1475±95 RGCs/mm2, n=6; 61% axons,
61318±8112 axons, n=6). Ibudilast did not alter intraocular pressure
(IOP) in after hypertonic saline injection; therefore these responses
could not be attributed to changes in IOP.
Conclusions : Our data demonstrate that Ibudilast attenuates glial cell
reactivity, reduces production of pro-inflammatory cytokines, and
promotes RGC soma and axon protection in experimental glaucoma.
This study was supported by the Canadian Institutes of Health
Research (CIHR-VIH-105439)
52
DIRECT RENIN INHIBITION WITH ALISKIREN IMPROVES
ISCHEMIA-INDUCED NEOVASCULARIZATION.
Desjarlais M*, Dussault S, Dhahri W, Mathieu R, Rivard A.
Centre Hospitalier de l'Université de Montréal CRCHUM, QC, CA.
Background : The activation of the renin-angiotensin system is
associated with impaired formation of new blood vessels
(neovascularization) in response to ischemia . Aliskiren is the only
direct renin inhibitor that is clinically used as an orally active
antihypertensive drug. Here we tested the hypothesis that aliskiren
might improve neovascularization following ischemia.
Methods and results: C57BL/6 mice were treated with aliskiren
(10 mg/kg) or drinking water only. After two weeks of treatment,
hindlimb ischemia was surgically induced by femoral artery removal.
At day 21 after surgery, treatment with aliskiren led to a
significantly faster rate of blood flow recovery (Doppler flow; 69+/7% vs. 52+/-5% p<0.05). ln addition, capillary density was increased
in ischemie muscles of mice treated with aliskiren.These findings
were associated with an increased expression of angiogenic factors
in ischemie muscles (VEGF and eNOS), and plasmatic NO.
Endothelial progenitor cells (EPCs) have been shown to have an
important role in postnatal neovascularisation. We found that aliskiren
significantly increased the number of bone marrow EPCs at day 7
after ischemia (172+/-7% vs CTL). Moreover, the adhesive properties
(175+/-5%) and migratory properties (182+/-12%) of EPCs were
significantly improved in mice treated with aliskiren. ln vitro, aliskiren
improves cellular migration and tubule formation in HUVECs. This
is associated with an increased expression of nitric oxide (DAF
staining), and a significant reduction of oxidative stress levels (DHE
staining). lmportantly, the antioxidant and angiogenic properties of
aliskiren in HUVECs are abolished following treatment with the
NOS inhibitor L-NAME.
Conclusions: Direct renin inhibition with aliskiren leads to improved
ischemia-induced neovascularization. The mechanisms involve
beneficiai effects of aliskiren on NO and angiogenic pathways in
ischemie tissues, together with an increase in the number and the
functional activity ofEPCs.
Projet subventionné par Lrsc.
53
NOVEL ROLE OF THE WNT/CTNNB1 SIGNALING PATHWAY IN
REGULATION OF ANTIVIRAL INNATE IMMUNITY
Es-Saad S*, Baril M, Duchaine, J, Bonneil É, Thibault, P, Lamarre, D.
Laboratoire d’immunovirologie moléculaire. IRIC and CRCHUM.
The host innate response to viral infection relies on the presence of
pattern recognition receptors that specifically recognize pathogen
associated molecular patterns, and then initiate signaling pathways
leading to the activation of key transcription factors such as IRF3 and
NF-kB and the synthesis of type I interferon (IFN-α/β).
Our laboratory performed a genome-wide RNA interference (RNAi)
screen to identify new regulators of the innate immune response to
Sendai virus (SeV) infection. WNT2B and WNT9B were discovered as
negative regulators of the innate antiviral response. Our results
demonstrated that WNT2B and WNT9B are secreted in response to
viral infection. This secretion induced the stabilization of CTNNB1
leading to a decreased magnitude of IFNB1 production and effector
response in a feedback inhibition mechanism. We further demonstrate
that inhibition of glycogen synthase kinase 3(GSK3) reduces the
antiviral innate response in a CTNNB1-dependent manner.
Using combined proteomics and functional genomics approaches in
HEK293T cells, we identified CTNNB1 interactors that are recruited or
depleted from a protein complex induced by SeV infection.
Subsequently, a shRNA screen was performed to investigate the
contribution of these specific interactors in the regulation of the innate
antiviral immunity. Functional characterization of interactors will pave
the way for further insight into the mechanistic aspect of the
transcriptional regulation of IFNB1 by CTNNB1 following viral infection.
Over the last 20 years, WNT proteins were identified as of global
importance in numerous developmental processes and diseases.
Exploiting the actions of human encoded regulators of the innate
immune response by developing immunomodulatory molecules
presents an alternative strategy with a potential to treat a broad range
of viral infections. In particular, the discovery of drugs that target a
canonical-like WNT pathway regulating innate immunity may be
therapeutically useful for limiting viral infection or virus-induced
inflammation.
Ce projet est subventionné par les IRSC. Es-Saad S est récipiendaire
d'une bourse de formation doctorale du FRQS.
54
PARP INHIBITORS IN THE TREATMENT OF OVARIAN CANCER.
Fleury H*1, Carmona E1, Masson JY2, Tonin PN3, Provencher D1, MesMasson AM1.
1
CRCHUM Notre@Dame/InsLtut du Cancer de Montréal, Montréal,
QC, CA, 2Centre de Recherche en Cancérologie de l’Université Laval,
QC, CA, 3The research insLtute of the Mc Gill University Heath Centre.
Introduction : Epithelial ovarian cancer (EOC) is the most lethal
gynecolo-gical cancer in North America. In phase II clinical trials,
Poly@ADP Ribose Polymerase inhibitors (PARPi), such as Olaparib,
demonstrated a good eﬃcacy even in non BRCA1/2 carriers. In order
to be\er target this therapy, it is important to define a specific DNA
repair biomarker signature delineaLng PARPi sensiLvity.
Methods : SensiLvity of EOC cell lines to PARPi was assessed by
clono-genic assay. Gene and protein expression of component of the
HR system were done by microarray and immunobloang. DNA repair
pathways have been evaluated by funcLonal assay. ValidaLon was
verified by siRNA and Tissu Microarray.
Results : Using 18 EOC cell lines we determined three groups of
Olaparib sensiLvity; i.e. sensiLve, intermediate and resistant. An
integrated analysis with the use of microarray data was performed to
idenLfy DNA repair pathways and genes clustering based on PARPi
sensiLvity. A list of 6 highly specific candidate genes belonging to the
major DNA repair pathways was idenLfied by this approach. These
targets were validated by both funcLonal analyses of each DNA repair
pathway and by siRNA. Homologous recombinaLon assay (RAD51
foci) demonstrated an incomplete correlaLon with PARPi sensiLvity.
Furthermore, siRNA against mismatch repair proteins (MLH1 or MLH3)
induced an approximate 10@fold decrease in the Olaparib IC50 for the
resistant cell line.
Conclusion : Our results suggest that PARPi response may be
predicted by the variable eﬃcacy of mulLple DNA repair pathways.
Understanding their relaLve importance may provide a more raLonal
selecLon of EOC paLent who respond to PARPi.
Projet subvenLonné par les IRSC.
55
56
IMAGERIE ULTRARAPIDE PAR ULTRASONS POUR LA
CARACTÉRISATION SPECTRALE DU SANG: VALIDATION
EXPÉRIMENTALE.
Garcia-Duitama J*1,2, Chayer B1,2, Cloutier G1,2,3.
1
CRCHUM, Laboratoire de biorhéologie et d’ultrasonographie
médicale, 2Institut de génie biomédical, 3Département de radiologie de
l’Université de Montréal, QC, CA.
Introduction : Les techniques d’imagerie échographique ultrarapide
proposées au cours de la dernière décennie permettent de générer des
milliers d’images par seconde. Ces techniques, qui sont applicables
avec les transducteurs cliniques, pourraient offrir plus de flexibilité pour
les études de caractérisation spectrale du sang comparativement aux
transducteurs mono éléments, instrumentation utilisée actuellement en
recherche fondamentale. L’objectif de notre étude est de tenter de
reproduire avec ces nouvelles techniques échographiques cliniques les
résultats obtenus en recherche fondamentale avec les mono éléments.
Méthodes : Le protocole ex vivo proposé par Yuan et Shung en 1988
pour la caractérisation du sang porcin circulant a été reproduit en
utilisant un transducteur clinique (Ultrasonix L14-5/38). Les spectres du
sang ont été obtenus à partir de l’imagerie ultrarapide et
conventionnelle et ensuite comparés avec ceux trouvés dans la
littérature.
Résultats : Les résultats suggèrent que les mêmes mesures
spectrales obtenues dans la recherche fondamentale peuvent être
obtenues avec des transducteurs cliniques, quel que soit le protocole
d’imagerie utilisé.
Discussion : Ces résultats encouragent le transfert des études
fondamentales à des applications cliniques. En plus de permettre la
caractérisation de tissus issus d’un mouvement rapide, comme les
parois cardiaques ou le sang artériel, l’imagerie ultrarapide permettra la
diminution de la variance des spectres en augmentant le nombre
d’images analysé.
RÔLE DU TRANSPORTEUR KCC3 DANS LA PHYSIOLOGIE
CARDIOVASCULAIRE CHEZ LA SOURIS.
Garneau AP*, Noël M, Drolet MC, Lavoie JL, Couet J, Larivière R,
Isenring P.
CRCHU de Québec, Département de médecine expérimentale,
Université Laval & CRCHUM, Département de kinésiologie, Université
Le cotransporteur K-Cl de type 3 (KCC3) exporte ses substrats de
différents types cellulaires comme les myocytes vasculaires,
cardiomyocytes et adipocytes. L’inactivation de KCC3 chez la souris
s’accompagne d’hypertension artérielle (HTA) et de désordres
neurologiques, mais les mécanismes impliqués demeurent à élucider.
Pour approfondir le rôle de KCC3 dans la genèse de l’HTA, nous
avons évalué la fonction cardiovasculaire chez une souris inactivée
pour KCC3 par sphygmomanométrie, échocardiographie, réactivité
aortique, dosages humoraux et qPCR. Nous avons complété ces
expériences par des analyses histologiques, bilans ingesta-excreta et
mesures de pression artérielle (PA) en situation de surcharge sodique.
Nous avons trouvé que l’inactivation de KCC3 entraîne une baisse de
la PA pulsée, fréquence cardiaque et réponse adrénergique de l'aorte
ainsi qu’une hausse de la PA diastolique, la masse cardiaque et
l’expression du peptide natriurétique du cerveau. Nous avons aussi
trouvé que la masse adipeuse est très diminuée sans diminution de
l’apport calorique, et que la surcharge sodique accentue la PA
diastolique.
Les observations recueillies suggèrent ainsi que les désordres
hémodynamiques de notre modèle sont causés au moins en partie par
l’absence de KCC3 du tissu cardiovasculaire et qu'ils sont cohérents
avec une augmentation de la résistance périphérique, de la
distensibilité aortique et du volume cardiomyocytaire. Par ailleurs, la
maigreur des souris fait actuellement l’objet d’études plus poussées.
KCC3 apparaît ainsi comme une cible thérapeutique prometteuse.
Projet subventionné par les IRSC. M. Garcia-Duitama est récipiendaire
des bourses d'excellence Hydro-Québec, Méditis (CRSNG) et IGB,
Université de Montréal.
Projet subventionné par les IRSC et la KFOC. Garneau AP est
récipiendaire d'une bourse doctorale de la FESP de l'UdeM.
57
58
HIGH FAT DIET ENHANCES BCL-2 MODIFYING FACTOR (BMF)
INDUCTION OF RENAL PROXIMAL TUBULAR CELL APOPTOSIS
VIA OXIDATIVE STRESS.
Ghosh A*, Maachi H, Lo CS, Abdo S, Chenier I, Zhang SL, Chan JSD.
CRCHUM, Université de Montréal, Montreal, QC, CA.
Introduction : Apoptosis plays an important role in modulating tubular
atrophy in diabetic nephropathy. Our group has previously reported
that Bmf (a pro-apoptotic gene) is up-regulated in renal proximal
tubular cells (RPTCs) of obese diabetic mice (db/db) compared to
normal lean mice (db/m). Whether Bmf overexpression plays a crucial
role in modulating tubular apoptosis observed in diabetic kidneys, and
its underlying mechanism, however, remains to be determined.
Hypothesis: High fat diet (HF) enhances Bmf-induction of tubular
apoptosis and kidney injury via reactive oxygen species (ROS)
generation.
Methods : Non-transgenic (non-Tg) mice, catalase-Tg (Cat-Tg) and
Bmf-Tg mice overexpressing respective rat Cat and human Bmf in
RPTCs were fed HF diet from 4 to 20 weeks. Control mice were fed
normal chow. All animals were euthanized at 20 weeks. Urinary
albumin creatinine ratio (ACR) was measured, ROS generation,
apoptosis as evaluated by TUNEL assay and qPCR or western blot for
pro-apoptotic genes were measured in kidneys. Rat RPTCs stably
transfected with the 1kb promoter region for Bmf gene were also
studied in vitro.
Results : Non-Tg mice fed HF diet show an increase in ROS generation, ACR, tubular apoptosis and activated pro-apoptotic genes (i.e
Bmf), indicative of kidney injury. Catalase overexpression in RPTC
prevented the HF diet induced kidney injury. Bmf overexpression
specifically in RPTC increases urinary ACR and apoptosis in proximal
tubules. Treatment with HF diet in Bmf-Tg mice did not augment
urinary ACR further, but aggravated RPTC apoptosis. In vitro results
indicate that ROS induce Bmf expression and ROS scavengers can
downregulate Bmf expression in RPTCs.
Conclusion : Our results indicate that HF diet and Bmf act in concert
in RPTCs to induce tubular apoptosis via ROS generation, suggesting
Bmf expression plays an important role in the progression of kidney
damage.
THE MONOUNSATURATED FATTY ACID OLEATE IN THE
VENTRAL TEGMENTAL AREA INHIBITS FEEDING BEHAVIOUR
AND DOPAMINE NEUROTRANSMISSION.
Hryhorczuk C*1,2, Sheng Z3, Giguère N2, Bourque MJ2, Trudeau LE2,
Routh V3, Alquier T1,2 and Fulton S1,2.
1
CRCHUM & MDRC, 2Université de Montréal, 3Rutgers New Jersey
Medical School.
Background : Dopamine (DA) neurons of the ventral tegmental area
(VTA) are critical for the control of motivation and reward-relevant
behaviors. Evidence that DA neurons respond to leptin, ghrelin and
insulin to modulate feeding, reward-relevant behaviour and DA tone
raises the possibility that cells of the VTA act as metabolic sensors that
integrate both hormonal and nutrient signals. The aim of the present
work was to evaluate the impact of long-chain fatty acids (FA) in the
VTA on feeding and DA neurotransmission.
Methods : Following stereotaxic implantation of a double cannula into
the VTA, male Wistar rats received vehicle (Cyclodextrin in ACSF;
500nl), oleate (12mM; monounsaturated FA) or palmitate (12mM;
saturated FA). Patch clamp recordings in 2.5mM glucose were made in
mouse VTA slices preparations perifused with 6µM oleate or
oleate+phloretin (100µM), to block fatty acid transport. FAs
incorporation was assessed in DA neuron culture treated with the
fluorescent long-chain FA analog c1-BODIPY-c12. Results &
conclusion:
Results : Show that FAs are incorporated in DA neurons. A single
injection of oleate, but not palmitate, in the VTA decreased chow
intake. Oleate also decreased operant responding for sucrose rewards.
Oleate inhibited firing in ~50% of DA neurons recorded - an effect
blocked by phloretin, and reduced the amplitude of mEPSCs. Together,
the findings suggest that oleate in the VTA decreases motivation to
obtain food reward and has anorectic actions that may involve neuronal
intracellular transport of FA and inhibition of DA neurotransmission.
This offer a means whereby dietary FA may directly modulate brain
reward circuitry.
Supported by CIHR, KFC.
Supported by CIHR.
59
A NOVEL ROLE OF ARMC5 IN T CELL FUNCTION.
Hu Y*, Wei J, Charpentier T, Lamarre A, Wu J.
Introduction : The Armadillo repeat containing 5 (ArmC5) is an
intracellular protein containing 926 amino acids with seven tandem
copies of armadillo repeats and one BTB/POZ domain, however, the
function of this protein remains obscure.
Methods Armc5 strain KO mice were generated. Their T cell functions
were compared in vitro. Its role in the pathogenesis of experimental
autoimmune encephalomyelitis (EAE) and anti-virus response were
evaluated.
Results : It was partially lethal as most of the KO pups die on e15.
ARMC5 KO mice have a 40% less of body weight comparing with their
WT controls. Our in situ results showed that ARMC5 were highly
expressed in multiple organs in immune system. Reduced TCRstimulated T cell proliferation, impaired differentiation to Th1, but
increased differentiation to Treg were found in KO in vitro. ARMC5
was transiently up-regulated 1h after TCR activation and highly
expressed 72h only under Treg condition. No significantly lower
clinical scores in the KO group were found in the EAE model, however,
less lymphocytes infiltration into the CNS, less Th1 percentage and
comprised IFN-gamma secretion in response to MOG35-55 in vitro
were found in KO mice. The KO mice also showed diminished immune
response against LCMV infection.
Discussion : Our studies identify ARMC5 as a critical regulatory player
in T cell proliferation, differentiation and anti-virus response. A more
detailed dissection of how ARMC5 acts in regulation of T cell function
at the molecular level is ongoing.
This work was supported by Canadian Institutes of Health Research
Grants MOP97829 (to H.L.), MOP69089 and MOP123389 (to J.W.),
and MOP89797 (to A.L.).
60
IMPACT DU POLYMORPHISME CYP2J2*7 SUR LE MÉTABOLISME
DES MÉDICAMENTS DANS LE COEUR HUMAIN.
Huguet J*1,2, Gaudette F1, Bélanger F1, Michaud V1,2, Turgeon J1,2.
1
CRCHUM, Centre hospitalier de l’Université de Montréal, QC, CA,
2
Faculté de Pharmacie, Université de Montréal, QC, CA.
Introduction : L’isoenzyme CYP2J2, hautement exprimée dans le
cœur humain, joue un rôle important dans l’homéostasie
cardiovasculaire. Le variant allélique CYP2J2*7 (G-50T, promoteur)
entraîne une diminution de la transcription du gène. Les objectifs
étaient d’évaluer la fréquence allélique (FA) du CYP2J2*7 dans les
cœurs humains explantés (CH) de patients avec maladies cardiaques
ischémiques (I), non-ischémique (NI) et chez des cœurs humains sains
(CH-S) et de déterminer l’impact du variant CYP2J2*7 sur l’activité
enzymatique cardiaque.
Méthodes : Des microsomes de CH (MCH) (NI=20, I=20 et CH-S=9)
obtenus de la banque du RETEB ont été préparés par la technique de
centrifugation différentielle. Des incubations in vitro ont été effectuées
avec des MCH en présence d’ébastine (0,075 à 8 µM) pour
caractériser l’activité du CYP2J2. L’Ébastine et son métabolite
hydroxyébastine, sélectif au CYP2J2, ont été analysés par LC-MSMS.
Les valeurs de Km, Vmax et Clint ont été calculés. Le variant
CYP2J2*7 a été déterminé par TaqMan® qRT-PCR.
Résultats : La FA du CYP2J2*7 était de 15% chez les CH-NI (n=6/40)
et 17% chez les CH-S (n=3/18); aucun homozygote *7*7 n’a été
détecté. Aucun variant allélique CYP2J2*7 n’a été détecté chez les
CH-I. Aucune différence n’a été observée dans la Clint de l’ébastine
entre les génotypes CYP2J2*1*1 vs *1*7 chez les CH-NI (0,44±0,27 vs
0,52±0,29 mL/hr, p>0,05) et les CH-S (0,16±0,24 vs 0,34±0,2 mL/hr,
p>0,05).
Conclusions : Nos résultats montrent que le génotype CYP2J2*1*7
n’était pas associé avec une baisse de l’activité du CYP2J2 évaluée
avec l’ébastine. Ce résultat est contraire à la littérature qui indique une
diminution de transcription associée au variant CYP2J2*7 suggérant
que des facteurs épigénétiques et post-transcriptionnels pourraient
influencer l’activité métabolique cardiaque du CYP2J2.
Financement : IRSC, FMCQ, FRSQ, CRCHUM.
61
INTERPLAY BETWEEN IKKΕ AND ANDROGENS IN PROSTATE
CANCER TUMOR GROWTH .
Huon Y*1, Péant B1, Leclerc-Desaulniers K1, Delvoye N1, Mes-Masson
AM1,2 and Saad F1,3.
1
University of Montreal, CRCHUM, 2University of Montreal, Dept of
Medicine, 3University of Montreal, Dept of Surgery1,2,3, Montreal, QC,
CA.
Objectives : Following androgen depletion therapy (ADT), prostate
cancer (PCa) can progress from a hormone sensitive (HS) to castrate
resistant (CR) state. We have previously demonstrated the specific
high expression of IKKε in advanced stages of PCa. We are performing
experiment to determine whether androgen and hormono-dependence
influence the role of IKKε in late stage disease.
Methods : We used HS 22Rv1 PCa cells that overexpress IKKε in a
doxyxycline inducible manner (22Rv1-6TR-IKKε). We injected 22Rv16TR-LacZ and 22Rv1-6TR-IKKε cells into SCID mice and compared 72
castrated and 72 uncastrated animals fed with or without doxycycline.
In order to study the implication of the AR itself, we are deriving
constitutive AR knockdown clones (22Rv1-6TR-IKKε/shAR). Cell
proliferation and invasion experiments will be conduct. Furthermore, we
will describe how proliferation is affected. On the other hand,
xenografts with 22Rv1-6TR-IKKε/shAR clones will reinforce this study.
Results : As expected, due to the hormone-sensitivity of 22Rv1 cells,
growth of 22Rv1-6TR-LacZ xenografts is negatively affected by
castration but not by doxycycline. Interestingly, growth of 22Rv1-6TRIKKε xenografts is decreased when IKKε is expressed. This effect is
weakened upon castration. In vitro and complementary in vivo
experiments with our new clones modified for AR expression are being
conducted to better understand these results.
Conclusions : Our results demonstrate that the presence of androgen
concomitant with IKKε expression had a positive effect on the survival
of mice xenografted with HS cells. Unexpectedly, this benefit seems to
be reduced upon castration, suggesting that the positive tumour growth
activity of IKKε is contextual, and influenced by androgen.
Funding: Prostate Cancer Canada, Cancer Research Society, CUOG
research award, Molecular Biology grant.
62
INFLUENCE OF THE ALTERATION OF FLOW TOPOLOGY ON THE
ABDOMINAL AORTIC ANEURYSM LOCAL GROWTH.
Joly F.∗, Soulez G, Kauffmann C.
CRCHUM, University of Montreal, QC, CA.
Introduction : Usually asymptomatic, the aortic abdominal aneurysm
(AAA) is a localised dilatation of the abdominal aorta touching about
4% of the population, 15th cause of death in the USA. Currently, the
sole risk criteria is the AAA diameter and its variation. However smaller
AAA may rupture while bigger ones can remain stable. A better
understanding of the growth mechanisms through the computation of
the blood flow during AAA follow-up may help setting-up new standards
for the patient specific intervention scheduling.
Methods : (i) Numerical simulation using finite volumes validated
towards 4D MRI. Mesh: polyhedral. Boundary conditions: solid walls,
newtonian viscosity, 0D pressure outlet. Outlets stabilization: gradient
constrained during backflow (ii) Extraction of the variable of interest
from the 3D flow field: wall fields (WSS, OSI, RRT) and transport
topology. The highly time dependant transport will be studied through
the extraction of the Lagrangian coherent structures (CLS) the FTLE
field. (iii) Flow data will be compared to morphology variation between
exams.
Results : Simulated flow topology showed a good agreement with
MRI. Also, the AAA lumen segmentation on all 7 patients confirmed
the hypothesis of a rigid wall condition on elderly patients. Being highly
time-dependant, transport phenomenon understanding is greatly
improved using the CLS of the flow, allowing a quantification of the
volume of the stagnation locations and the wall exposed to it.
Discussion : Stagnation zones are known for promoting the advection
of shear-stress activated platelets to the wall leading to the apparition
of ILT. As it has been shown, the flow topology has a key role is AAA
growth, its dynamic is yet to be better explored and understood.
Grant: NSERC Discovery, Kauffmann C.
63
MONITORING THE QUALITY OF CARDIOVASCULAR DISEASE
PREVENTION IN PRIMARY CARE: VALIDATION OF THE TRANSIT
QUALITY INDICATORS.
Khanji C*, Berbiche D, Martin E, Lévesque L, Gagnon M-M, Bareil C,
Hudon E, Goudreau J, Duhamel F, Lussier M-T, Perreault S, Lalonde
G, Turcotte A, Lalonde L. CRCHUM, Faculty of pharmacy, University of
Montreal, QC, CA.
Introduction : In Quebec, the creation of family medicine group clinics (FMG)
and legislative changes allowing nurses and pharmacists to expand their scope
of practice may improve cardiovascular disease prevention in primary care.
Reliable and valid quality indicators are essential to estimate changes in the
quality of primary care. In a participatory research program (TRANSIT), primary
care actors and researchers developed a set of 81 quality indicators grouped in
7 categories.
Objective : As part of a validation process, assess the test-retest and interrater reliabilities of the TRANSIT quality indicators.
Methods : Eight FMG including 102 clinicians and 759 patients partici-pated in
the TRANSIT study. Patients were assessed at baseline and followed-up for 14
months. Indicators were documented by medical chart review for the entire
follow-up period. Reliability assessment was conducted in a sample of 123
patients randomly selected taking into account their FMG, treating physician,
and clinical characteristics at baseline. To evaluate test-retest reliability,
TRANSIT indicators were applied twice at two-month interval by the same
evaluator. To evaluate the inter-rater reliability, the indicators were applied
independently by two different evaluators. Reliability coefficients were
computed for each indicator using Kappa coefficients adjusted for prevalence
and bias (PABAK) and for each of the seven subscale scores and the overall
score using intraclass correlation coefficients (ICC) and 95% confidence
interval (CI).
Results : A total of 123 patients from 8 FMG were randomly selected. The
test-retest reliability coefficients varied from 0.96 (95% CI: 0.95-0.97) to 1.00
(1.00-1.00) for the subscale scores and was equal to 0.99 (0.99-0.99) for the
overall score. The inter-rater reliability coefficients varied from 0.55 (0.39-0.68)
to 0.94 (0.91-0.96) for the subscale scores and was equal to 0.90 (0.86-0.93)
for the overall score.
Discussion : The overall reliability of the TRANSIT indicators was excellent.
Since some indicators require substantial rater judgment, the inter-rater
reliability was fair for one indicator and moderate for 10 indicators.
Conclusion : The next steps of this research are to assess the content, the
64
ALCAM REGULATES BBB INTEGRITY AND PLAYS AN
IMPORTANT DUAL ROLE IN NEUROINFLAMMATION.
Lécuyer MA*, Bourbonnière L, Larouche S, Terouz S, Larochelle C,
Michel L, Ghannam S, Kebir, H, Alvarez JI, Prat A.
Neuroimmunology Research Laboratory, CRCHUM, Université de
Montréalm QC, CA.
The loss of blood-brain barrier (BBB) integrity is a hallmark of multiple
sclerosis and is associated with an upregulation of cell adhesion
molecules and increased leukocyte trafficking into the central nervous
system (CNS). In this study, we assessed the specific role of the
adhesion molecule ALCAM on BBB endothelial cells (BBB-ECs) and its
effect on leukocyte transmigration during the course of experimental
autoimmune encephalomyelitis (EAE).
Using a modified adhesion assay under shear stress, we demonstrated
a significant reduction in human monocytes and T helper cells
adhesion and migration across BBB-ECs following ALCAM blockade.
Furthermore, in vivo ALCAM neutralization reduced leukocyte
infiltration and EAE severity in C57BL/6. However, ALCAM KO mice
developed a more severe active EAE associated with a significant
increase in perivascular infiltration of pro-inflammatory lymphocytes
(Th1/Th17) and M1 monocytes/macrophages, as compared to WT
controls. ALCAM KO mice also displayed more extensive CNS
demyelination. In addition, EAE transfer experiments in which ALCAM
KO mice received WT MOG reactive splenocytes suggest that the
pathology observed in active EAE is linked to the absence of ALCAM
on BBB-ECs. Phenotypic characterization of un-immunized ALCAM KO
mice revealed a reduced expression of BBB junctional proteins
potentially contributing to the severity of EAE clinical course.
Preliminary results also demonstrate ALCAM indirect association with
tight junction molecules, substantiating the BBB pathophysiology
results.
Collectively, our data provide evidence of the implication of ALCAM in
leukocyte transmigration across the brain endothelium in human and
point to a biologically relevant in vivo function of ALCAM in maintaining
BBB integrity in mouse.
convergent construct and the predictive validity.
This study is funded by CSSSL, University of Montreal and FRQS.
Study supported by the MSSOC. Lécuyer MA holds a scholarship from
the FRQS.
65
ELEVATED NKG2D LIGANDS EXPRESSION IN EXPERIMENTAL
AUTOIMMUNE ENCEPHALOMYELITIS.
Legroux L*, Pittet C, Deblois G, Cadieux-Dion C, Mohebiany AN,
Beauseigle D, Arbour N.
Department of Neurosciences, Université de Montréal, CRCHUM,
Montreal, QC, CA.
It is well established that the immune system participates in the
destruction of myelin and nervous cells in multiple sclerosis (MS).
NKG2D is an activating (co)receptor expressed by numerous immune
effector cells. NKG2DL (RAE-1, MULT1 and H60) are induced by
environmental triggers suggesting that these proteins alert the immune
system to abnormal cells. Our laboratory has previously demonstrated
that oligodendrocytes express at least one NKG2DL in MS lesions but
not in control brain sections. Moreover, CD8 T cells in MS lesions are
detected in close proximity to NKG2DL expressing cells. We have also
established that disruption of the NKG2D-NKG2DL interaction inhibits
killing of human oligodendrocytes by activated immune effector cells.
Overall, these results imply that NKG2D-NKG2DL interaction can
contribute to the pathogenesis of MS and its animal model EAE. To
assess qualitatively and quantitatively NKG2D/NKG2DL expression
during the development of EAE we use flow cytometry, qPCR, western
blot and immunohistochemistry. We observed that MULT-1 is
upregulated at the mRNA levels in the CNS of EAE mice and such
elevated expression correlates with disease severity. Moreover, MULT1 is mainly detected at the protein level on microglia and macrophages
during EAE. In contrast, RAE-1 mRNA levels do not vary throughout
disease. Finally, we also observed a greater proportion of CNS
infiltrating CD4 and CD8 T cells expressing NKG2D compared with
cells from other organs. We plan to evaluate the contribution of NKG2D
on CD4 and CD8 T cells during EAE using adoptive transfer
experiments.
66
INHIBITION DE L'EFFLUX DE L'ACIDE LACTIQUE PAR
L'ATORVASTATIN DANS DES CELLULES MUSCULAIRES
SQUELLETTIQUES HUMAINES.
Leung YH*1,2, Turgeon J1,2, Michaud V1,2.
1
Faculté de Pharmacie, Université de Montréal, Montréal, QC,
Canada. 2CRCHUM, QC, CA.
Introduction : Les douleurs musculo-squelettiques sous statines
surviennent chez 10-15% des patients. Le transport de l'acide lactique
dans les cellules musculaires est régi par les transporteurs de
monocarboxylates (MCT1 et MCT4). En diminuant l'afflux de l'acide
lactique par les MCTs dans les cellules musculaires squelettiques
humaines (SkMC), les statines peuvent entrainer une acidification
intracellulaire entrainant les effets indésirables musculaires.
Méthodes : Des myoblastes humains (Cell Applications lnc.) ont été
mis en culture puis différenciés en SkMC. Ces SkMC ont été préincubées dans une solution contenant de l'acide lactique [14C] (2mM)
x10min, puis dans une autre solution contenant de l'acide lactique
[14C] et avec ou sans atorvastatine (0.3 à 3001JM) x3min, et
finalement dans une solution avec ou sans atorvastatine seule à 37"C
x2.5min. La radioactivité a été mesurée par scintillation.
Résultats : Nos données montrent que l'atorvastatine inhibe le
transport de l'acide lactique; les concentrations intracellulaires d'acide
lactique était augmenté de -14% comparés au contrôle dans des
conditions physiologiques à pH7,4. Des données préliminaires
indiquent que l'effet de l'atorvastatine sur l'accumulation de l'acide
lactique intracellulaire semble accru à des pH légèrement diminué.
Discussion et Conclusion : Nos résultats démontrent que
l'atorvastatine peut inhiber l'afflux d'acide lactique par les MCT
exprimés dans les SkMC. Nos données préliminaires supportent que
cet effet puisse être potentialisé lors d'un exercice physique. D'autres
études sont nécessaires afin de déterminer le lien entre l'accumulation
d'acide lactique, les MCT et la survenue de myopathies induites par
les statines.
Projet subventionné par le FRQS.
67
AT2R DEFICIENCY IMPAIRS PODOCYTE FUNCTION VIA THE
ALTERATION OF ACE2 GENE EXPRESSION.
Liao MC*1, Chang SY1, Zhao XP1, Chenier I1, Zhang SL1.
1
CRCHUM, Montréal, CQ, CA.
Introduction : Angiotensin type 2 receptor (AT2R) deficiency mice
(i.e., AT2RKO) exhibit a spectrum of congenital abnormalities of the
kidney and urinary tract (i.e., renal hypoplasia/dysplasia and renal
pelvis/ureteral abnormalities), however, the mechanisms by which it
occurs are incompletely delineated. The present study aimed to study
whether AT2R deficiency impairs glomerulogenesis (e.g., loss of
podocytes) in vivo and in vitro.
Methods : The suckling pups aged from neonate to 3 week-old of both
wild-type (WT) and AT2RKO (C57BL/6) mice are used as our in vivo
model.
Biological parameters, podocyte morphology and gene
expression were assessed accordingly. The immortalized mouse
podocyte cells (mPODs) were used for in vitro studies.
Results : As compared with WT pups, deficiency of AT2R is
associated with retardation of podocyte maturation, resulting in renal
dysplasia by decreased the podocyte number reviewed by WT1
staining and inhibited slit diaphragm proteins--e.g., nephrin and
synaptopodin expression. Moreover, lack of AT2R significantly
elevated reactive oxygen species (ROS) in glomeruli, mediated by
increased Nox4 and/or vascular endothelial growth factor (VEGF) and
decreased ACE2 gene expression. In studies in vitro, AT2R agonist
(CGP42112A) supported actin cytoskeleton structure; increased
synaptopodin expression, consequently maintained the integrity of
podocyte foot process, whereas AT2R antagonist (PD123319)
collapsed actin cytoskeleton structure resulting in foot process
effacement. These changes might be associated with CGP42112A upregulated ACE2, but down regulated VEGF gene expression in
mPODs.
Conclusions : AT2R deficiency is associated with retardation of
podocyte maturation, resulting in renal dysplasia via down-regulation of
ACE2.
This project is supported by Canadian Diabetes Association.
68
EFFETS DES COMPOSÉS TRICYCLIQUES SUR LE TRANSPORT
DU ZOLMITRIPTAN PAR OATP1A2.
Lu J*1,2, Grangeon A1,2, Gaudette F3, Keiser M4, Michaud V1,2,
Turgeon J1,2,3.
1Université de Montréal; 2CRCHUM; 3CRCHUM, plateforme
pharmacocinétique; 4Department of
Clinical Pharmacology, University of Greifswald, Greifswald, Germany
Introduction : Les triptans, utilisés dans le traitement de la crise aiguë
des migraines, sont des agonistes sélectifs des récepteurs 5-HT1B et
5-HT1D lesquels sont localisés au niveau de la barrière hématoencéphalique (BHE). Les triptans sont des molécules hydrophiles ce
qui limitent leur pénétration par la BHE. Il a été suggéré
qu’OATP1A2, un transporteur membranaire exprimé dans la BHE,
contribue au transport des médicaments dans le cerveau. Il a
récemment été montré que les triptans sont des substrats d’OATP1A2.
Nos travaux ont démontré que les composés tricycliques avec une
courte chaîne aliphatique peuvent inhiber le transport via OATP1A2.
L’objectif de cette étude consiste à déterminer si le transport du
zolmitriptan par OATP1A2 est affecté par ces composés tricycliques.
Méthodes : Une lignée cellulaire stable surexprimant OATP1A2 dans
les cellules HEK293 a été utilisée comme modèle in vitro. Les cellules
surexprimant OATP1A2 et les cellules contrôles ont été incubées à
37°C durant 2 minutes avec zolmitriptan et différentes concentrations
d’inhibiteurs (composés tricycliques). La quantité intracellulaire de
zolmitriptan a été quantifiée par HPLC-UV.
Résultats La majorité des composés tricycliques évalués ont inhibé le
transport du zolmitriptan par OATP1A2 : avec des valeurs d’IC50 de
2,2 à 18,4 μM. Parmi les composés évalués, le carvédilol est
l’inhibiteur le plus puissant.
Discussion/Conclusion : Nos résultats suggèrent que les composés
tricycliques avec une courte chaîne aliphatique tels que le carvédilol et
certains antidépresseurs tricycliques peuvent inhiber le transporteur
OATP1A2 et ainsi limiter la pénétration du zolmitriptan au cerveau.
L’impact clinique de la co-administration des triptans avec un inhibiteur
d’OATP1A2 sur l’efficacité antimigraineuse du zolmitriptan doit être
confirmé.
Financement : FRQS, Fondation CHUM. Lu J est récipiendaire d'une
bourse FRQS.
69
CONTRÔLE DES MALADIES INFLAMMATOIRES INTESTINALES
ET DU CANCER PAR LA MODULATION DES SIDÉROPHORES.
LUPIEN-MEILLEUR J, SANTOS MM.
CRCHUM, Département de microbiologie, infectiologie, immunologie.
Introduction :
Les maladies inflammatoires intestinales, par les saignements ou la
supplémentation en fer qui en découlent, augmentent la quantité de fer
intestinal. Cet apport en fer modifie le microbiote intestinal vers un état
de disbiose qui peut favoriser l’apparition du cancer. Les bactéries
contrôlent leur approvisionnement en fer par la production de
sidérophores, des molécules liant le fer. Ainsi, la modulation de la
concentration de sidérophore intestinal, en agissant sur la
concentration du fer intestinal, peut rétablir la situation d’eubiose du
microbiote et réduire l’apparition du cancer.
Méthodologie :
La vérification de cette hypothèse reposera sur l'étude du microbiote
intestinal ainsi que sur l'analyse des facteurs physiologiques et
immunologiques associés à l'inflammation et a l'apparition du cancer
colorectal chez des modèles murins bien définis soumis à diverses
diètes de fer. L'ajout direct de sidérophores au sein de l'intestin, la
prise alimentaire de souches bactériennes probiotiques productrices de
sidérophores et l'utilisation de souris déficientes en lipocaline 2 (Lcn2-/) moduleront la concentration intestinale de sidérophores.
Résultats
L'augmentation massive de la concentration intestinale en
sidérophores se traduira par une diminution de la concentration
intestinale de fer, le retour d’un microbiote en santé, et par la
diminution des marqueurs physiologiques et immunologiques associés
au cancer.
Conclusion
Les sidérophores étant largement impliqués dans la relation intriquée
liant le contenu intestinal en fer, le microbiote et l'hôte; cette étude fera
la lumière sur leur implication dans l'apparition de l'inflammation et les
conditions pathologiques qui en découlent.
Projet subventionné par les IRCS
70
RETINOIC ACID (RA) PRESERVES OXYTOCIN-NATRIURETIC
PEPTIDES SYSTEM AND PROTECTS AGAINST FIBROSIS IN
DIABETIC (ob/ob) MICE HEART. Manolescu DC*1, Jankowski M1,
Danalache BA1, Wang D1, Broderick TL2, Gutkowska J1, Chiasson JL1.
1
CRCHUM, Médecine/Nutrition, Université de Montréal, 2Midwestern
University, USA.
Introduction: Vitamin A prevents adverse cardiac remodeling and
improves myocardial infarction outcome in hypertensive rodents. In
equal dietary intake and physical activity, we demonstrated blood
glucose, insulin resistance and body weight were significantly
decreased with RA treatment.
Hypothesis: A RA treatment may also affect cardio- protective
genes, such as the oxitocine-natriuretic peptide (OT-NPs) system,
preventing abnormal cardiac remodelling.
Methods: Female 9-week-old B6.V-Lep/J ob/ob mice (n=16) were
divided in two groups, a group (n=8) treated with 100 μg of atRA
dissolved in 100 μl corn oil (vehicle) daily (~ 2μg/gbw/day) by stomach
intubation for 16 days, and a group (n=8) with vehicle alone. A group
of healthy non-obese, non-diabetic mice (n=9) served as controls.
Genomics, proteins and histology analyses were performed.
Results: ob/ob mice exhibited obesity, hyperglycemia and downregulation of cardiac OT-NPs system, including the transcription factor
GATA4, OT receptor mRNA, BNP (brain natriuretic peptides) mRNA
and the endothelial nitric oxide synthase (eNOs) protein
expression. Hearts from ob/ob mice demonstrated increased
apoptosis and collagen accumulation. RA induced: 1) Body weight
loss, decreased intra-abdominal adipocytes size and visceral obesity. 2)
Reduction in fasting hyperglycemia and a normalization of the OT-Nps
cardiac system expression. 3) Lower apoptosis and collagen in the
heart.
Conclusion: Lower body weight in isocaloric food intake conditions
and reduced adypocites sizes of RA treated animals suggests higher
basic metabolism (as in beige-brown fat). RA was effective in restoring
cardio-protective oxytocin-natriuretic peptides system and preventing
fibrosis and abnormal cardiac remodeling.
Support : IRSC, CRCHUM. Manolescu D.-C. is fellow of Québec FRQS
(05.2012) PhD Scholarship, Silver Medalist of Canadian Institute of
Health Research (CIHR-CSHRF.2012), and fellow of Banting and
Best/ CIHR 01.2014/12.2015) PhD Scholarship.
71
EFFETS COMPARATIFS DE LA SÉNESCENCE CELLULAIRE ET
DU VIEILLISSEMENT DANS UN MODÈLE HUMAIN DE NICHE
HÉMATOPOÉTIQUE. Nadeau S*1.2, O’Hagan-Wong K3, Colmegna I3,
Rodier F1,2. 1CRCHUM, Department of Radiology, Radio-Oncology and
Nuclear Medicine, Université de Montréal, QC, CA, 2Institut du Cancer
de ,Montréal, QC, CA. 3Division of Rheumatology, McGill University
Health Centre, Montreal, QC, CA.
La sénescence cellulaire est souvent associée à une signalisation
persistance de la réponse aux dommages de l'ADN (RDA) provenant
de télomères endommagés. Les cellules sénescentes contribuent au
dysfonctionnement des tissus et s'accumulent au cours du
vieillissement chronologique, dans le cadre de pathologies associées à
l'âge et après un traitement avec des agents endommageant l'ADN.
Il n’est donc pas surprenant que dans certains syndromes de
vieillissement prématuré tel que la polyarthrite rhumatoïde, nous
observons le raccourcissement des télomères et une l’augmentation de
la RDA dans les cellules immunitaires différenciées et dans les cellules
hématopoïétiques souches et progénitrices (HSPC). Par contre, la
cause directe du dysfonctionnement cellulaire reste inconnue, mais
nous savons que l’état des cellules résidentes dans la niche de la
moelle osseuse peut modifier le microenvironnement et affecter le
fonctionnement normal des HSPC. Notre hypothèse est que les
cellules souches mésenchymateuses (MSC), composante importante
de la moelle osseuse, peuvent être endommagées ou sénescentes et
ainsi contribuer au vieillissement prématuré des HSPC. Notre objectif
est de définir les effets de la senescence des MSC sur l’homéostasie
des HSPC pour comprendre leur rôle dans les maladies liées à l’âge.
En utilisant des cellules primaires humaines, nous avons caractérisé le
développement du phénotype de senescence induite par irradiation
chez des MSC et l'impact de la sécrétion faite par les cellules
endommagées sur la biologie des HSPC. En utilisant des cellules
provenant de donneurs d’âge différent nous avons aussi détecté
certaines caractéristiques de la senescence apparaissant de façon
chronologique et tout comme les cellules sénescentes, celles-ci
peuvent influencer les le maintien de la population primitive des HSPC.
La caractérisation des MSC sénescentes permettra d'améliorer notre
compréhension du rôle du stress tissulaire et du vieillissement dans les
maladies immunitaires associées à l'âge, et de permettre
éventuellement leur manipulation à des fins thérapeutiques.
72
ROLE OF HEDGEHOG INTERACTING PROTEIN (HHIP) IN
PANCREATIC Β CELL FUNCTION IN DIABETES.
Nchienzia HA*, Abdo S, Zhao XP, Chang SY, Chenier I, Chiasson JL
and Zhang SL.
CRCHUM, Department of Medicine, Montreal, QC, CA.
Introduction : Pancreatic beta (β) cell dysfunction plays a key role in
the development of diabetes. Hedgehog interacting protein (Hhip)
expression is essential for proper pancreatic morphogenesis and loss
of Hhip function results in 45% reduction of islet mass and decreases β
cell proliferation activity by 40%. The present pilot study aimed to
establish a linkage between Hhip expression and β cell function in vitro.
Methods : Mouse pancreatic β cell line (MIN6 cell) was studied. The
expression of mouse Hhip gene promoter activity (pGL4.20 containing
nucleotides N-1542/+9 of mHhip gene promoter), Hhip mRNA and
protein expression in normal and high glucose milieu as well as
TGFβ1/NF-kB signaling on Hhip expression were assessed
accordingly.
Results : Under normal glucose condition (5mM D-Glucose), rHhip
stimulated insulin secretion in a time- and dose-dependent
manner. Recombinant human active TGFβ1 (rTGFβ1) augmented
mouse Hhip promoter activity, mRNA and protein expression (both
intracellular and soluble forms) via phosphorylation of Smad 2/3
signaling. Vice versa, recombinant Hhip (rHhip) increased TGFβ1 gene
expression. Moreover, transient transfection of pcDNA 3.1/NF-kB/p65
significantly upregulated Hhip gene expression.
Conclusions : Our data suggested that Hhip regulates insulin
secretion in pancreatic β cell via TGFβ1 and NF-kB signalling pathway
and this phenomenon might be exaggerated in diabetic condition.
73
UNCOVERING THE ROLE OF MISFOLDED SOD1 IN ALS
PATHOGENESIS.
Pickles S*, Stubbs H, Legroux L, Arbour N, Meiering EM, Vande Velde
C.
CA.
ALS is a neurodegenerative disease characterized by motor neuron
loss, resulting in paralysis and death. Some familial ALS cases are
caused by mutations in SOD1, which lead to misfolding of SOD1
protein, and gain of a toxic function. Several antibodies have been
generated that are specific for the misfolded protein and are currently
in development as therapeutics. We have used one of these (B8H10)
to demonstrate that misfolded SOD1 associates with mitochondria
which are of significantly increased volume and produce more reactive
oxygen species. We have also demonstrated that not all of these
antibodies detect misfolded SOD1 at mitochondria. This finding
suggests that there may be multiple misfolded SOD1 conformers.
Using a panel of antibodies specific for misfolded SOD1, we will reveal
which misfolded SOD1 confomers are relevant to mitochondrial
dysfunction versus other mechanisms of disease. Using
immunofluorescence and flow cytometry, we are characterizing the
temporal and spatial localization of each misfolded SOD1 conformer in
a rat model of ALS (SOD1G93A). We detect misfolded SOD1 prior to
disease onset in motor neurons with reactivity in astrocytes becoming
apparent at later stages of disease. Three misfolded SOD1 antibodies,
B8H10, AMF7-63 and DSE2 detect high molecular weight aggregates
in lysates and isolated mitochondria from SOD1G93A rats, but not in
controls. Mitochondria derived from symptomatic rats have AMF7-63
reactive misfolded SOD1 deposited on their surface. The majority of
AMF7-63+ mitochondria also label for the B8H10–reactive conformer,
but some mitochondria have only one misfolded SOD1 species
associated. We are currently assessing the function of each of these
mitochondrial subpopulations to determine if misfolded SOD1
universally coincides with mitochondrial damage. These studies will aid
in defining that relative contribution of different SOD1 conformers to
disease.
This project funded by CIHR and the Frick Foundation. Pickles S is the
recipient of funding from ALS Canada.
74
MOLECULAR MECHANISMS OF HIV-1 PERMISSIVENESS IN GUTHOMING CD4+ T-CELLS.
Planas D*1,2, Monteiro P1,2, Goulet JP3, Gosselin A1, Routy JP4, Ancuta
P1,2.
1
CHUM-Reseacrh Centre, Montréal 2Department of Microbiology,
Infectiology, and Immunology, Université de Montréal 3CATRaGENE,
Montréal, 4McGill University Health Center, Montréal.
Background : The majority of HIV-infected CD4+ T-cells are localized
in gut-associated lymphoid tissues (GALT). Expression of gut-homing
molecules is induced by retinoic acid (RA). We identified CCR6 as a
marker for memory CD4+ T-cells permissive to HIV and demonstrated
that RA selectively increased HIV replication in CCR6+ T-cells. In
search for the identification of new molecular determinants of HIV
permissiveness, we performed a genome-wide analysis of gene
expression in RA-treated CCR6+ versus CCR6- T-cells.
Methods : CD4+ T-cells were sorted from PBMCs by negative
selection using magnetic beads. Memory CCR6+ and CCR6- T-cells
were sorted by flow cytometry. Cells were stimulated and cultivated in
the presence or absence of ATRA. Total RNA was extracted for
microarrays analysis and real-time RT-PCR quantification. In parallel,
cells were used for flow cytometry validation of gene expression.
Conclusion: We identified a molecular signature associated with HIV
permissiveness in RA-treated CCR6+ T-cells including: the RA-induced
gene RIG-I; the transcription factor KLF2; the HIV co-receptors CCR5
and CXCR6. At the opposite, RA-treated CCR6- T-cells upregulated
expression of ABCA1, a known HIV restriction factor. Our studies
reveal that transcriptional changes induced by RA in CCR6+ T-cells are
associated with HIV permissiveness and gut-homing potential thus,
providing a molecular mechanism for preferential HIV replication in
GALT CD4+ T-cells.
This work was supported by IRSC.
75
ROLE OF INTRACELLULAR CALCIUM SIGNALLING IN
REGULATORY VOLUME DECREASE.
Ponomarchuk OO*, Boudreault F, Grygorczyk R.
CRCHUM, Département de Médecine, Université de Montréal,
Montréal, QC, CA.
Introduction : Cell volume homeostasis is ubiquitous in eukaryotic
cells. However, the regulatory volume decrease (RVD) mechanism
after acute cell swelling is unclear. While involvement of intracellular
Ca2+ signalling in RVD processes has suggested, how Ca2+ is
involved in cell volume regulation remains poorly understood. A major
impediment stems from high-throughput methods typically used to
measure volume changes, like Coulter counter, and Ca2+ signalling
from several cells that are prone to inaccuracy. In this study, volume
changes and intracellular Ca2+ were simultaneously measured from a
single cell with a custom imaging technique providing high temporal
and spatial resolution.
Methods : Human lung A549 cells were tonically swelled with 50%
hypotonic solution. During the experiment, we recorded in parallel, the
changes in Ca2+ concentration ([Ca2+]) using fluorescent dye Fura-2
and stereoscopic images of the cell. Volume changes were calculated
off-line using a dual image surface reconstruction technique
implemented with MATLAB software.
Results and discussion : While hypotonic challenge causes changes
in intracellular [Ca2+] in highly confluent A549 cells, the percentage of
responding cells remains low around 30 %. Moreover, in single cellbased experiments, RVD processes were not accompanied by a
measurable increase in intracellular calcium, suggesting that Ca2+, as
a signalling messenger, is not involved in RVD.
Conclusion : Our study contributes to a better understanding of Ca2+
signalling in lung epithelial cells and its role in cell volume homeostasis.
While further investigation is under way, our preliminary results suggest
swelling-induced intracellular Ca2+ increase is occasional and not a
requirement for RVD.
76
CONTRÔLE
DES
FONCTIONS
ALTERNATIVES
DES
LYMPHOCYTES B.
Possamaï D*, Monette A, Lapointe R.
CA.
Introduction : Les lymphocytes B jouent un rôle central dans la
réponse humorale en produisant des anticorps. Toutefois, ils exercent
des fonctions alternatives telles que la sécrétion de cytokines ou la
présentation d’antigènes. Les mécanismes moléculaires et cellulaires
impliqués dans la régulation de ces fonctions, acquises suite à
l’interaction avec les des lymphocytes T CD4+ (par le CD40L et
l'interleukine [IL]-4), sont peu caractérisés. Suite à l’étude de
l’expression des gènes des cellules B activées par le CD40L et l’IL-4
(CD40-B), par puce à ADN, nous avons identifié des gènes/protéines
pouvant être impliqués dans la régulation des fonctions alternatives.
Nous avons sélectionné KIFC1, une protéine appartenant à la
superfamille des kinésines, des moteurs moléculaires impliqués dans
diverses fonctions dont le transport intracellulaire de vésicules. Ainsi,
nous avons émis l’hypothèse que KIFC1 participe au transport de
vésicules impliquées dans la présentation antigénique par CMH de
classe II (CMH II) dans les lymphocytes B.
Méthodes : Nous avons analysé KIFC1 par immunofluorescence dans
une lignée de lymphocytes B immortalisés et des CD40-B en évaluant
sa co-localisation avec des marqueurs spécifiques des endosomes et
du compartiment de CMH II (MIIC).
Résultats : Nous avons observé un co-marquage avec les marqueurs
spécifiques des endosomes tardifs et du MIIC (Rab7, HLA-DR, -DP, DQ et Lamp-1).
Conclusion : Les résultats préliminaires semblent indiquer l’implication
de KIFC1 dans le transport des vésicules de la voie de présentation
antigénique par CMH II, ce qui est nouveau pour les cellules
présentatrices
d’antigènes.
Ultérieurement,
nous
souhaitons
déterminer le rôle fonctionnel de KIFC1 en évaluant la capacité des
lymphocytes B, dont l’expression de KIFC1 aura été atténuée par
siRNA, à présenter un peptide par CMH II et ainsi activer des
lymphocytes T CD4+ ayant un TCR spécifique du peptide.
Projet subventionné par le CRSNG.
77
DEVELOPMENT
AND
VALIDATION
OF
SEVERITY
CATEGORIZATION
FOR
PHARMACEUTICAL
EVALUATION
(SCOPE) CRITERIA TO EVALUATE DRUG-RELATED PROBLEMS
IN CHRONIC KIDNEY DISEASE: A COMMUNITY PHARMACY
PERSPECTIVE.
Quintana-Bárcena P*1, Lord A2, Lizotte A2, Jouini G3, Berbiche D,
Lalonde L1, 3.
1
Faculty of Pharmacy, Université de Montréal, 2Centre de Santé et des
Services Sociaux de Laval, 3Centre de recherche, Centre Hospitalier
de l'Université de Montréal, CRCHUM.
Introduction : The prevalence of drug-related problems (DRPs) in
chronic kidney disease (CKD) patients is known to be high. However,
information about their severity remains scarce. Therefore, the
objective of this project is to develop and validate the Severity
Categorization for Pharmaceutical Evaluation (SCOPE) criteria to
evaluate the severity of DRPs in CKD patients from a community
pharmacy perspective. Methods : The criteria were adapted from an
existing tool considering interventions required to manage DRPs in
community pharmacy. Ten community pharmacists reviewed the
criteria. A modified RAND appropriateness process involving
community pharmacists (n=4), hospital pharmacists (n=4), family
physicians (n=2), and nephrologists (n=2) was conducted. The severity
of 487 DRPs identified among 168 patients was rated independently by
two evaluators and by one evaluator on two occasions. Kappa
reliability coefficients were computed. Severity as assessed by implicit
judgment and the SCOPE criteria were compared. Results : Three
severity categories were defined (mild, moderate and severe), each
including two levels (I to VI). At each level, specific interventions
required to manage DRPs in community pharmacy were listed. Testretest reliability coefficient by level was 0.85 (95% Confidence interval:
0.79 to 0.90), and inter-rater reliability coefficient was 0.77 (0.72 to
0.82). Test-retest coefficient by category was 0.89 (0.84 to 0.95), and
inter-rater coefficient was 0.90 (0.86 to 0.94). Higher level of SCOPE
severity was associated with more severe DRP as rated by implicit
judgment (p<0.05). Conclusion: SCOPE criteria constitute an
innovative research tool to evaluate the severity of DRPs in community
pharmacy. The criteria are reliable and are correlated with clinical
implicit judgment.
Projet subventionnée par les Instituts de recherche en santé du
Canada (IRSC). Amgen Inc. et Léo Pharma.
78
LE RÔLE DE MYD88 DANS LE METABOLISME DU FER.
Samba-Mondonga M*, Constante M, Santos MM.
CRCHUM, Hôpital St-Luc, Département de Microbiologie, infectiologie
et immunologie, Université de Montreal. QC, CA.
Introduction : L’hepcidine est la principale hormone régulatrice du
métabolisme du fer. L’expression de l’hepcidine est contrôlée par deux
voies de signalisation principales, une voie régulée dans l’inflammation
(voie IL-6/STAT3) et l’autre activée par le ler (voie BMP6/SMAD4). De
récentes études effectuées dans notre laboratoire ont révélées que
MyD88, la protéine adaptatrice qui est essentiel pour l'induction de
cytokines inflammatoires, joue un rôle important dans le
développement de l’hypoferremie endotoxine-induit chez la souris,
c'est-à-dire dans la voie IL6/STAT3 pour l’induction de l’hepcidine.
Notre hypothèse de travail est que MyD88 peut être en autre
impliquée dans la voie de signalisation activé par le fer, ou la voie
BMP6/SMAD4, pour l’induction de l’hepcidine.
Méthodes : MyD88 sera surexprimé ou inactivé dans deux lignées de
cellules hépatocytes Huh7 et HepG2 pour procéder à l’étude de ses
effets sur la régulation de l'hepcidine et d'autres gènes du métabolisme
du fer. Les études se concentreront aussi sur l'identification des
éléments réactifs à MyD88 présentes sur le promoteur de l’hepcidine
(HAMP) en employant la luciférase comme gène rapporteur et en
analysant des mutations ou des suppressions des éléments de control
présent sur la séquence d’ADN du promoteur. Résultats : Dans des
essaies de western blot, on a trouvé l’expression de SMAD4 et MyD88
dans des extraits nucléaires de cellules. Des expériences préliminaires
indiquent que des mutations dans des éléments présents dans le
promoteur de l’hepcidine, tel que BMP-RE1 et STAT3-RE, annulent
l’induction du promoteur HAMP par MyD88.
Conclusions/Discussion : Nos résultats indiquent que SMAD4 et
MyD88 sont co-localisés dans le noyau cellulaire et que MyD88 peut
jouer un rôle dans la voie de signalisation activé par le fer pour
contrôler l’hepcidine.
Projet subventionné par CHIR /IRSC et NSERC/ CRSNG.
79
80
ELECTROSPUN NANOFIBER SCAFFOLDS AND PLASMA
POLYMERIZATION: A PROMISING COMBINATION TOWARDS
COMPLETE, STABLE ENDOTHELIAL LINING FOR VASCULAR
GRAFTS.
Savoji H*1,3,5, Maire M3, Wertheimer MR5,1, Ajji A2,1, Lerouge S3,4.
1
École Polytechnique de Montréal, Montreal, QC, Canada, Institute of
Biomedical Engineering, 2Department of Chemical Engineering,
5
Department of Engineering Physics, 3Laboratory of Endovascular
Biomaterials (LBeV), Research Centre, Centre Hospitalier de
l’Université de Montréal (CRCHUM), Montreal, QC, CA, 4Department of
Mechanical Engineering, École de technologie supérieure (ÉTS),
Montreal, QC, CA.
Introduction : In the quest to reduce risk of thrombosis in vascular
grafts, it is essential to provide a surface with morphological and
mechanical properties close to those of the extracellular matrix beneath
the luminal endothelium, and to favor the growth of a confluent, stable
monolayer of endothelial cells.
Methods : Electrospun poly(ethylene terephthalate) (PET) mats with
an amine-rich thin plasma-polymerized coating; designated “L-PPE:N”,
are combined to provide adequate mats, destined for use as vascular
grafts. The mats’ surface chemistry, morphology, and mechanical
properties are then characterized. Moreover, the ability of the mats to
favor endothelial cells adhesion, growth, and resistance to flow-induced
shear are examined.
Results : L-PPE:N deposition does not modify the open, highly porous
mats and leads only to small changes in mechanical properties. It
significantly improves the adhesion and growth of human umbilical vein
endothelial cells(HUVEC) and their resistance to flow-induced shear
stress. These properties favor the formation of desired confluent
HUVEC monolayers on the topmost surface.
Conclusion : The combination of electrospinning and plasma polymer
coating is therefore highly advantageous for the pre-endothelialization
of the luminal side of small-diameter vascular prostheses. It may also
help overcome the clinical complications encountered when using
current generations of off-the-shelf prostheses.
THE E3 UBIQUITIN LIGASE TRAF6 STIMULATES ALS-LINKED
MUTANT SOD1 AGGREGATION AND INTERACTS WITH
MISFOLDED SPECIES ON SPINAL CORD MITOCHONDRIA.
Semmler S*1,5, Pickles S1,2, Destroismaisons L1, McBride H4,5, Vande
Velde C1,2,3. 1CRCHUM, Départements de 2Biochimie et
3
Neuroscience, Université de Montréal, QC, CA, 4Montreal
Neurological Institute, 5Department of Neurology and Neurosurgery,
McGill University, QC, CA.
Project funded by CIHR and NSERC. Savoji H received a scholarship
from FRQNT.
Supports our proposed scenario. This work was supported by ALS
Canada, Frick Foundation, CRCHUM, McGill Faculty of Medicine and
IPN.
Introduction : Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a progressive paralytic
and ultimately fatal disease of the motor neurons. Mutations in SOD1 underlie
20% of familial and 3% of sporadic ALS cases. Mutant SOD1, adopting a
misfolded protein conformation, preferentially binds to the surface of spinal
cord mitochondria. The mechanism of how misfolded SOD1 then mediates
mitochondrial dysfunction and motor neuron toxicity remains unexplained.
Using mass spectrometry, we identified the E3 ubiquitin ligase TRAF6 as an
interacting partner of misfolded SOD1 at spinal cord mitochondria in the
SOD1G93A rat model. We hypothesisze that TRAF6 ubiquitinates misfolded
SOD1 and is involved in the process that causes mitochondrial dysfunction.
Mehtods : To determine whether TRAF6 is recruited to mitochondria versus
transcriptionally upregulated, TRAF6 transcript and protein levels were
measured by quantitative PCR of whole spinal cords and immunoblotting of
isolated spinal cord mitochondria. The effect of TRAF6 on mutant SOD1
aggregation was evaluated in cell culture using a filter trapping assay. We
performed immunofluorescence on lumbar spinal cord sections to determine
TRAF6 expression in motor neurons.
Results : Misfolded SOD1 interacts in a conformation-dependent manner with
TRAF6 at spinal cord mitochondria. TRAF6 accumulates in spinal cord
mitochondrial fractions as disease progresses, but is not transcriptionally
upregulated. The TRAF6-interacting misfolded SOD1 conformer is
polyubiquitinated and aggregated at the mitochondria. In culture, TRAF6
knockdown alleviates mutant SOD1 aggregation while TRAF6 overexpression
exacerbates it. TRAF6 is predominantly expressed in lumbar spinal motor
neurons.
Conclusion : By showing predominant expression of TRAF6 in lumbar spinal
motor neurons, we have established relevance for TRAF6 in the cell type that
is primarily lost in ALS. That the TRAF6-interacting misfolded SOD1 conformer
is polyubiquitinated at the mitochondria implies the activity of an E3 ligase.
That TRAF6 is recruited to the mitochondria with disease progression, interacts
with misfolded SOD1 and is able to affect misfolded SOD1 aggregation
81
82
EFFECTS OF THE PRORENIN RECEPTOR ON BODY WEIGHT AND
INSULIN SENSITIVITY.
Shamansurova ZM *, Tan P, Ahmed B M-A, Michel C, Kajla S, Seda, O
and Lavoie JL.
CRCHUM, Department of Physiology, Biochemistry, Kinesiology of the
University of Montreal, MDRC.
Introduction : Adipose tissue (AT) renin-angiotensin system (RAS)
has been involved in the pathogenesis of obesity, where the role of the
prorenin/renin receptor [(P)RR], which acts in an angiotensindependent and -independent manner is not clear yet. Our previous
results suggest the (P)RR plays a role in the regulation of body weight
(BW), fat mass and insulin sensitivity (IS).
Material and Methods : Mice with deletion of the (P)RR gene
specificly in AT (KO) created by creloxp technology, were kept either
on regular chow (ND) or high-fat/high-carbohydrate diet (HF/HC) for 10
weeks. BW measured weekly. Body composition assessed by EchoMRI. Glucose homeostasis evaluated by OGTT. At the end of protocol,
mice euthanized, subcutaneous, visceral (VF) fat pads separated,
weighed, flash frozen. Plasma renin activity (PRA), Angiotensin I (AngI) concentration were measured by immunoassay (DBC, Canada).
Results : Male KO mice had a 20% lower BW compared to wild-type
mice (WT), p0.001, whereas KO female mice had a 4.3% decrease on
ND, p<0.01 and 14.12%, p0.001 on HF/HC . The VF mass in KO male
mice was lower by 2.4 fold, p0.001 compared to WT, in female KO
mice -1.3 fold lower on ND, p0.01 and 2.4 folds on HF/HC, p0.001. In
addition, although KO and WT mice had
similar glycemia during OGTT, fasting and stimulated insulinemia were
lower in KO mice whichsuggests an improved IS. These phenotypes
were not associated with any changes in circulating Ang-I and PRA.
Conclusion : Our results suggest that AT specific deletion of the
(P)RR regulates body weight, fat mass, glucose homeostasis without
changing circulating RAS.
IMPLICATION DES MOLECULES RELIÉES AU MÉTABOLISME
DES RETINOIDES DANS L’OBESITÉ ET A RÉSISTANCE A
L’INSULINE.
Sima A*, Manolescu DC, Bhat PV, Chiasson JL.
*CRCHUM, Faculté Médecine/Nutrition, Université de Montréal
Introduction : La vitamine A (rétinol) est impliquée dans la biologie du
tissu adipeux. Plusieurs études démontrent que certaines adipokines
secrétées par le tissu adipeux jouent un rôle important dans la
signalisation de l’insuline. L’obésité est souvent associée à la
résistance à l’insuline et prédispose au diabète de type 2. Des études
dans le modèle animal démontrent une relation entre la protéine de
liaison du rétinol 4 (RBP4) et la résistance à l’insuline.
Hypothèse/Objectifs : Nous postulons que la RBP4 est impliquée
dans le développement de la résistance à l’insuline chez les personnes
obèses, chez les personnes obèses avec diabète et chez les
personnes avec syndrome métabolique. Nous avons évalué les taux
de la RBP4 et la résistance à l’insuline chez des sujets obèses avec
ou sans diabète ± bien contrôlé comparativement à des sujets minces
et en santé.
Méthodes : Nous avons étudié 4 groupes de sujets (n ≥ 12/groupe):
A) des sujets témoins minces en santé; B) des sujets obèses
diabétiques non contrôlés; C) des sujets obèses diabétiques bien
contrôlés; et, D) des sujets obèses non-diabétiques. Nous avons
mesuré les taux sérique de RBP4 par immunobuvardage Western et la
résistance à l’insuline selon la méthode HOMA. Nous avons
également fait des mesures biochimiques et anthropométriques.
Résultats : Les taux de la RBP4 augmentent avec l’obésité et le
diabète et corrèlent avec la résistance à l’insuline, les TG, les HDL,
l’IMC et le TT, tous des composantes du syndrome métabolique.
Conclusions : La RBP4 pourrait être impliquée dans le
développement de la résistance à l’insuline, et donc, de l’obésité, du
diabète de type et du syndrome métabolique.
This study was supported by Canadian Diabetes Association and
Merk-Frost Canada
Financement projet: IRSC, CRCHUM. Étudiant : Diabète Québec,
NUT/FESP, CRCHUM et Régime Prêts Études Supérieures du Gvt.
Québec.
83
84
ANGIOTENSIN-II (ANG-II)-INDUCED EXPRESSION OF THE EARLY
GROWTH RESPONSE PROTEIN 1 (EGR-1) IS MEDIATED BY
CAMKII-DEPENDENT PATHWAY IN VASCULAR SMOOTH
MUSCLE CELLS (VSMC).
Simo Cheyou ER*, Srivastava AK.
CRCHUM, Faculty of Medicine, University of Montreal, QC, CA.
Introduction : Egr-1 is a transcription factor that has been suggested
to participate in the development of vascular disease processes such
as intimal thickening following vascular injury, atherosclerosis and
cardiac hypertrophy. Upregulation of Egr-1 was recently shown to be a
key contributing factor in stimuli-induced vascular smooth muscle cells
(VSMC) proliferation and hypertrophy. Ang-II, a potent vasoactive
peptide with pathogenic role in vascular disease, contributes to
aberrant remodeling of the vessel wall. It has been shown earlier that
Ang-II requires H2O2 generation to activate these signaling pathways
and we have shown that Ca2+, calmodulin (CaM) and Ca2+/CaMdependent protein kinase II (CaMKII), play a critical role to trigger
H2O2-induced effects in VSMC. However, Ang-II-induced modulation
of Egr-1 expression in VSMC and the participation of CaMKII in this
process remain unexplored.
Methods and results : Therefore these studies were undertaken to
characterize the effect of Ang-II on Egr-1 expression in A10 VSMC and
to examine the role of Ca2+, CaM and CaMKII in this response. Ang-II
induced an increase in Egr-1 expression in a time and dose-dependent
fashion in A10 VSMC. Pharmacological blockade of DNA transcription
and de novo protein synthesis by Actinomycin D and cycloheximide
respectively attenuated Ang-II-induced Egr-1 expression. Treatment of
VSMC with the calcium chelator BAPTA-AM, as well as with
calmidazolium and KN-93, two respective inhibitors of calmodulin and
CaMKII activities, also blunted Ang-II-induced Egr-1 expression.
Conclusions : These results demonstrate that Egr-1 expression is
upregulated in response to Ang-II via a Ca2+/CaM/CaMKII-dependent
pathway in VSMC.
STRETCH-INDUCED ATP RELEASE IN RAT ALVEOLAR TYPE II
CELLS.
Tan JJ*, Brochiero E, Grygorczyk R
CRCHUM, Département de médecine, Université de Montréal, QC, CA
Introduction :
By binding to cell surface purinergic receptors, extracellular ATP
initiates the purinergic signaling cascade, which can regulate many
functions in the lungs, such as mucociliary clearance and surfactant
secretion. Our previous work demonstrated that mechanical stresses,
particularly stretch, induce ATP release and intracellular calcium
([Ca2+]i) increase without involving cell lysis, but this mechanism is
poorly understood. Thus, this study investigates the physiological
mechanism of stretch-induced ATP release and [Ca2+]i signaling in
pulmonary cells, and the potential involvement of pannexin channels.
Methods :
Rat alveolar type II (ATII) cells are seeded onto a flexible silicone
chamber. 2-3-day-old primary cells are bathed in luciferin-luciferase
(LL) containing DMEM and subjected to a 1-second stretch of 15-60%.
Released ATP is visualized in real-time by imaging ATP-dependent LL
bioluminescence with an EMCCD camera and [Ca2+]i by Fura-2
fluorescence imaging.
Results :
After a stretch, the peak concentration of ATP released from ATII cells
varied from 1-5 μM. The number of responding cells was proportional
to the extent of stretch. 5-minute pre-treatment with carbenoxolone
(CBX, an inhibitor of pannexin) caused a 120-second-delay in ATP
response. Also, stretch-induced [Ca2+]i was elevated, with responses
proportional to the magnitude of stretch, and was reduced with CBX.
Discussion & Conclusion :
Our results show the importance of stretch-induced ATP release in
mechano-purinergic signaling in alveoli. Hemichannels may play a role
in [Ca2+]i signaling and in Ca2+-regulated ATP release. Our study
contributes to a better understanding of purinergic signaling and its role
in the lungs, which may suggest novel therapeutic approaches for
respiratory diseases, such as asthma and COPD.
Supported by CIHR grant.
Funded by CIHR to RG.
85
USING C.ELEGANS TO UNDERSTAND FRONTOTEMPORAL
DEMANTIA
Therrien M*1,3, J. Alex Parker2,3.
1
Pathology and Cell biology Department, University of Montréal,
2
Neuroscience department, University of Montréal, 3CRCHUM.
Introduction : Understanding pathogenic mechanisms causing
frontotemporal dementia (FTD) has been a difficult journey. While
many cases are reported with aggregates of TDP-43 or FUS protein,
only a small fraction of the cases are linked to genetic mutations in
MAPT, GRN, C9ORF72 or VCP. The link between the aggregated
proteins and the genetic causes of FTD is still an unresolved question
in the field.
Methods and Results : Interestingly, TDP-43, FUS, GRN, MATP,
C9ORF72 and VCP all have orthologues in the nematode C. elegans.
Our laboratory aims to understand the function of these genes and
their impact on neurodegeneration using simple genetic models. We
have developed several models to study these genes among which we
have characterized loss of function mutants to understand the impact
of C9ORF72 and we have developed a model based on the transient
RNA expression of a pathogenic GGGGCC repeat. We are also
conducting a drug screening to identify molecules specifically targeting
the motility defect caused by the loss of function of C9ORF72 in
worms. Discussion and Conclusions : We believe that using these
models we could unravel pathogenic pathways related to FTD and
identify new therapeutic avenues. An update of our work will be
presented.
86
CD73 IS ASSOCIATED WITH POOR PROGNOSIS IN HIGH-GRADE
SEROUS OVARIAN CANCER.
Turcotte M*, Spring K, Cousineau I, Chouinard G, Pommey S, Lepage
C, Gorges J, Bowtell D, Rahimi K, Provencher D, Mes-Masson AM and
Stagg J.
Introduction : De tous les cancers de l’ovaire, le type séreux de haut
grade est le plus létale. Une hypothèse expliquant ce fait est la
présence de facteurs immunosuppressifs dans le microenvironnement
tumorale. Un de ces facteurs immunosuppressifs potentiels est
l’adénosine extracellulaire générée par l’ectonucléotidase CD73. Dans
cette étude, nous avons investigué la valeur pronostique de
l’expression de CD73 dans le cancer de l’ovaire séreux de haut grade.
Méthodes et Résultats : En utilisant 2 banques de données
d’expression géniques (TCGA & AOCS) et une analyse
d’immunofluorescence, nous avons observé qu’une haute expression
de CD73 est associée à un mauvais pronostic. Une analyse
immunohistochimique a confirmé que l’expression de CD73 est
localisée au niveau des cancer-associated fibroblasts (CAFs). Pour
investiguer le rôle de CD73 sur les CAFs, nous avons utilisé le modèle
de cancer de l’ovaire de souris ID8 et des fibroblastes primaires
dérivés d’une souris CD73-/-. Les cellules tumorales ID8 ont été coinjectées avec les fibroblastes et l’immunité anti-tumorale a été évaluée
par cytométrie en flux. Nous avons observé que l’expression de CD73
sur les CAFs diminue significativement l’immunité adaptative antitumorale et augmentent significativement la croissance tumorale des
ID8 dans les souris.
Conclusions : Notre étude révèle que l’expression de CD73 est
associée avec un mauvais pronostic dans le cancer de l’ovaire séreux
de haut grade. Nos résultats expérimentaux suggèrent fortement que
l’expression de CD73 sur les CAFs crée un microenvironnement
immunosuppressif inhibant spécifiquement l’immunité anti-tumorale et
promeut la croissance du cancer de l’ovaire. Cette étude valide le
potentiel thérapeutique de CD73 dans le cancer de l’ovaire.
87
88
L’ÉLIMINATION DES CELLULES INFECTÉES PAR LE VIH, VIA LA
RÉPONSE CYTOTOXIQUE DÉPENDANTE DES ANTICORPS,
REQUIERT
UNE
CONFORMATION
PARTICULIÈRE
DE
L’ENVELOPPE VIRALE.
Veillette M*, Coutu M, Richard J, Batraville LA, Dagher O, Kaufmann
DE, Roger M, Finzi A.
CRCHUM
Introduction : Récemment, nous avons démontré que deux protéines
virales (Nef et Vpu) coopèrent afin de diminuer l’exposition d’épitopes
de l’enveloppe virale (Env) à la surface des cellules infectées afin de
diminuer leur susceptibilité à la réponse cytotoxique dépendante des
anticorps (ADCC).
Toutefois, si un tel mécanisme d'évasion immunitaire permet d'éviter
l'élimination des cellules infectées par les anticorps (Acs) médiant
l'ADCC présent dans le sérum des patients VIH-1+ demeure jusqu'à ce
jour inconnu.
Méthodes : Utilisant du sérum provenant d'une cohorte de plus de 100
individus VIH-1+, nous avons évalué la reconnaissance et la capacité
d’induire une réponse ADCC contre des cellules infectées par le VIH-1.
Des techniques d’ELISA à base cellulaire et de l’élimination des
cellules infectées via ADCC par cytométrie en flux furent développées.
Résultats : La grande majorité de sérums reconnaissent une
conformation particulière d'Env et sont capables d’éliminer les cellules
infectées. Remarquablement, les protéines Nef et Vpu modulent
indirectement la conformation d'Env et permettent aux cellules
infectées d'échapper à la réponse ADCC médiée par ces sérums.
Conclusion :
Nos résultats mettent en évidence un nouveau mécanisme d'évasion
immunitaire utilisé par le VIH-1. En identifiant la conformation d'Env
ciblée par les Acs présent dans le sérum des patients VIH-1+, nos
résultats
permettent
d'envisager
des
nouvelles
stratégies
thérapeutiques pour éradiquer ce virus.
ACTIVATION DU SYSTEME IMMUNITAIRE VIA TIR-1/SARM LORS
DE LA NEURODEGENERESCENCE DANS DES MODELES
GENETIQUES DE SCLEROSE LATERALE AMYOTROPHIQUE.
Veriepe J*, Parker A.
CRCHUM, Département de Pathologie et Biologie Cellulaire,
Département de Neurosciences, Université de Montréal, QC, CA.
Introduction : La Sclérose Latérale Amyotrophique (SLA) est une
maladie neurodégénérative caractérisée par une perte sélective et
progressive des motoneurones. Des mutations causatives dans les
gènes codant pour les protéines TAR DNA-Binding Protein (TDP)-43 et
Fused in Sarcoma (FUS) ont été identifiées. Une hypothèse émergente
est que les aberrations neuronales mènent à l’activation du système
immunitaire cependant la relation entre les mutations génétiques et la
réponse immune est inconnue.
Méthodes : Précédemment, des vers transgéniques exprimant les
protéines humaines TDP-43 ou FUS dans les neurones GABAergiques
ont montré un déficit moteur et une neurodégénérescence. Ces vers
ont été croisés avec des mutants tir-1, orthologue de la protéine SARM
(Sterile α Armadillo Motif Protein), ou pour l’un des gènes de la voie
intracellulaire TIR-1. L’activation de cette voie a été tracée grâce au
transgène nlp-29::GFP, exprimé uniquement en condition infectieuse.
Résultats : Nous avons montré que les protéines TDP-43 et FUS
mutées activent le système immunitaire innée via TIR-1. La perte de
fonction engendrée par la mutation de tir-1, ou des kinases en aval,
supprime le déficit moteur et la dégénéréscence dans nos modèles de
SLA. Enfin, l’inhibition pharmacologique de la voie TIR-1 protège
contre la protéotoxicité.
Discussion/Conclusion : Les résultats suggèrent que le système
immunitaire réagit à la présence des protéines mutantes comme des
DAMPs (Damage-Associated Molecular Pattern) et conduit à une
neurodégénérescence. Les protéines mutantes associées à la SLA
activent la voie TIR-1/SARM. Ces protéines pourraient devenir de
nouvelles cibles thérapeutiques.
Ce projet est subventionné par les IRSC.
Subventionné par ALS Canada
89
CARACTÉRISATION D'UNE NOUVELLE POPULATION TH17 AVEC
DES CONTRIBUTIONS DISTINCTES À LA PATHOGENÈSE À VIH.
Wacleche V, Ancuta P.
CRCHUM, Université de Montréal, Qc, CA.
Introduction : Nous avons démontré que les cellules Th17 à
phénotype CCR4+CXCR3-CCR6+ sont permissives à l’infection et leur
fréquence est diminuée chez les sujets chroniquement infectés (CI) par
le VIH. Nous avons récemment identifié une nouvelle population avec
un phénotype CCR4-CXCR3-CCR6+ (CCR6+DN), qui exprime le
facteur de transcriptions des Th17 RORC et dont la fréquence est
préservée chez les sujets CI. Notre objectif est de déterminer la
relation de différenciation entre les CCR6+DN et les Th17 et d’étudier
la permissivité au VIH des CCR6+DN.
Méthodes : Les Th17 et les CCR6+DN mémoires ont été triées par
FACS. La spécificité antigénique a été déterminée par un test de
prolifération. Les cellules ont été infectées par une souche R5 du VIH
et la réplication virale a été mesurée par ELISA et par PCR. L’ADN
proviral a été également quantifié dans les sous-populations de sujets
CI.
Résultats : Similairement aux Th17, les CCR6+DN produisent de l’IL17A et prolifèrent en réponse au C. albicans et non au CMV. Les
CCR6+DN se distinguent des Th17 par leur capacité à produire de
l’IFN-γ et des quantités élevés d’IL-17F. Les CCR6+DN stimulées
avec des anticorps anti-CD3/CD28 acquièrent l’expression de CCR4. À
l’instar des Th17, les cellules CCR6+DN sont permissives à l’infection
par le VIH in vitro. De plus, les CCR6+DN de sujets CI portent de
l’ADN proviral in vivo à des niveaux similaires aux Th17.
Conclusion : Les cellules CCR6+DN sont une nouvelle population
Th17 avec un profil cytokinique distinct. Également, nos résultats
permettent de mieux caractériser l’hétérogénéité des cellules T CD4+
dans un contexte d’homéostasie et d’infection à VIH. Identifier les
mécanismes permettant la préservation des cellules CCR6+DN dans
les sujets infectés par le VIH est nécessaire pour mieux comprendre la
façon dont le système immunitaire s’adapte à la présence d’une
infection chronique tout en essayant de fournir une défense appropriée
contre la venue d’autres pathogènes.
90
NOVEL ROLES OF EPHS/EFNS IN CATECHOLAMINE SECRETION
AND HYPERTENSION. Wang Y*, Wu J. CRCHUM, NOUVEAU
CRCHUM, Department of. Biomedical.
Introduction : Hypertension is the most important risk factor for the
cardiovascular diseases (CVD) and strokes. Erythropoietin-producing
hepatocyte kinases (Ephs) are the largest family of receptor tyrosine kinases,
which bind to cell surface ligands called ephrins on neighboring cells. The
relationship between Ephs/ephrins and hypertension has not been studied.
EphB6 gene knockout (KO) mice with hypogonadism (caused by castration)
will become hypertensive. This function was achieved via adrenal gland
chromaffin cells (AGCC). We found that EphB6, in concert with testosterone,
regulates catecholamine synthesis and release by AGCC, and such modulation
contributes to the hypertension observed in castrated EphB6 KO mice.
Methods : Identify EfnB1 and/or EfnB2 as key molecules mediating EphB6
reverse signalling in AGCC by solid phase Ab studies and siRNA studies.
Study the role of EphB6 deletion in catecholamine release.To identify the
source of Ca2+ involved, we will first investigate the impact of extracellular
Ca2+ removal on the ACh Ca2+ increase in AGCC. Patch clamp recordings
will be carried out to investigate different ion channels. We also did DNA
microarray to identify downstream influential factor. To investigate the
modulation of EphB6 signalling molecules by testosterone with regard to
AGCC function.
Results : VSMC and AGCC are 2 types of target cells upon which EphB6 and
testosterone exert their BP regulatory effects. Male EphB6 KO mice secrete
less ambient catecholamines based on 24-h urine catecholamine amounts.
However, this reduction is abolished after castration. We have recently
established techniques for adrenal gland organ culture and primary AGCC
single cell culture. Adrenal glands from male but not female EphB6 KO mice
had reduced adrenaline secretion on a per adrenal gland basis after
acetylcholine (Ach) stimulation, compared to their WT counterparts. We also
found that Ca++ flux per cell from AGCC of male but not female KO mice was
lower than in WT, suggesting defective catecholamine release in male KO
AGCC. Our recent patch-clamp findings demonstrated that the densitometry of
T type Ca2+ channel, L type Ca2+ channel and BK channel changed in KO
AGCC.
Discussion : This project will for the first time delineate novel mechanisms
involving EphB6/EfnB and hypogonadism for catecholamine secretion in
chromaffin cells. The results will elucidate hypertension pathogenesis in a
subpopulation of hypogonadic males. Our study has a good chance of
validating novel hypertension risk genes related to EphB6/EfnB signalling in
hypogonadic males.
91
ANTI-LG3 ANTIBODIES AGGRAVATE IRI CAUSED AKI.
Yang B*, Hamelin K, Pomerleau L, Peng J, Tremblay J, Patey N,
Hébert MJ.
AKI (acute kidney injury) caused by IRI (ischemia-reperfusion injury) in
transplant recipients is a frequent occurrence with significant risk for
poor long-term graft outcomes. Injured endothelial cells are important
mediators in IRI. LG3, a truncated C-terminal perlecan fragment is
released by apoptotic endothelial cells and renal transplant patients
with anti-LG3 antibodies develop more severe forms of rejection. We
demonstrated previously that in an animal model of vascular rejection,
the passive transfer of anti-LG3 antibodies increased vascular
rejection. Here, we plan to evaluate whether anti-LG3 antibodies can
enhance vascular injury in the non-transplanted kidney. To further
elucidate the role and molecular mechanism of anti-LG3 antibodies in
AKI, we established an animal model of IRI by unilateral renal artery
clamping plus contra-lateral nephrectomy. Intra-peritoneal injections of
anti-LG3 antibodies or mouse control IgG were performed 2 days prior
to renal artery clamping and every other day thereafter. Mice serum
and urine were collected at days 2 and 7 post-surgery, and mice were
scarified at day 2 or day 7 post-surgery for renal histological analysis.
Compared to the IgG control group, mice passively transferred with
anti-LG3 antibodies had higher level of serum BUN (p =0.0372, n=
7/group). At day 7 post-surgery, immunohistochemistry for C4d and
MAC (complement membrane attack complex) demonstrated
increased glomerular deposition of MAC in the renal cortex (p =0.029,
n= 5/group), increased C4d glomerular deposition in the renal cortex (p
=0.0075, n= 5/group)as well as at the cortico-medullary junction (p
=0.0083, n= 5/group), and increased deposition of C4d (p =0.0022, n=
5/group)and MAC(p =0.016, n= 5/group) in peri-tubular capillaries at
the cortico-medullary junction,. Together, our results revealed an
important role for anti-LG3 antibodies in complement pathway
activation and deterioration of renal function in the context of IRI
caused AKI.
Project supported by KFoC. Yang B est récipiendaire d'une bourse de
Chaire Shire (Université de Montréal)
92
MOLECULAR MECHANISM OF ANGIOTENSIN 1-7 IN PREVENTING
SYSTEMIC HYPERTENSION AND KIDNEY INJURY IN DIABETIC
MICE.
Shi Y*, Lo CS, Abdo S, Chenier I, Zhang SL, Chan JSD.
CRCHUM, Montreal, QC, CA.
Introduction : Angiotensin converting enzyme-2 (Ace2) converts
angiotensin II (Ang II) to angiotensin 1-7 (Ang 1-7). Ang 1-7 plays an
important role in counteracting Ang II action in the cardiovascular
system. We investigated the underlying molecular mechanism of Ang
1-7 in preventing systemic hypertension and ameliorating of kidney
injury in Akita mice with type 1 diabetes.
Methods : Ang 1-7 was administered daily (500 μg/kg body weight
(BW)/day, subcutaneously) to male Akita mice starting at 14 weeks of
age with or without co-administration of A779 (an antagonist of the Ang
1-7 receptor (MasR)) (10 mg/kg BW/day). The animals were
euthanized at 18 weeks of age. Wild type (WT) mice of the same age
served as controls. Blood glucose (BG), systolic blood pressure (SBP)
and albumin/creatinine ratio (ACR) were monitored weekly. Kidneys
were processed for histology. Pro-hypertensive and pro-fibrotic protein
and mRNA expression in renal proximal tubular cells (RPTCs) were
determined by respective immunohistochemistry (IHC), Western
blotting (WB) and qPCR assay.
Results : Ang 1-7 administration prevented the increase of SBP and
normalized urinary ACR without affecting BG levels in Akita mice. Ang
1-7 also prevented the increase in renal oxidative stress
(dihydroethidium
(DHE)
staining),
RPTC
expression
of
angiotensinogen (Agt, sole precursor of all angiotensins), angiotensin
converting enzyme (ACE), sodium-hydrogen exchanger-3 (NHE-3),
transforming growth factor -1 (TGF-β1) and collagen IV but significantly
up-regulated Ace2 and MasR expression. These changes were
reversed by A-779.
Conclusions : Our data suggest that intrarenal Ang 1-7 plays a
protective role by attenuating SBP and RPTC injury in diabetes,
through decreasing oxidative stress, pro-hypertensive and pro-fibrotic
gene expression (Agt, ACE, NHE-3 and TGF-β1) and up-regulating
Ace2 and MasR expression in diabetic kidney.
Supported by CIHR, KFOC, MDRC.
93
TIBIOFEMORAL CONTACT POINTS MEASURED WITH BIPLANAR
RADIOGRAPHIC IMAGES TO BE INTRODUCED IN A DYNAMIC
INVERSE MODEL OF KNEE JOINT. Zeighami A*, Dumas R, Aissaoui
R. CRCHUM, Département de génie de la production automatisée,
École de technologie supérieure, QC, CA.
Introduction : Knowledge of in vivo dynamic joint surface interaction is useful
in the Osteoarthritis study to identify changes in joint space and contact
patterns over time. Solution of dynamic inverse simulations predicting joint
loads are also dependant to contact location in medial and lateral
compartments of knee joint that contribute to balance joint torques. For a
patient specific model of knee contact force, locating the load carrying zone is
important to estimate the forces correctly. Knowing the relative position of joint
surfaces with respect to each other, it is also possible to assume the minimum
distance in each position as the thickness of load carrying cartilage layer on the
relevant part of the bone. Afterwards, this measure can be used in
computational models of cartilage.
Methodology : In our study, reconstruction is done using biplanar EOS images
in standing position and it is then rigidly translated to match the captured
images in other flexion angles. The proximity of the bones is therefore possible
to be mapped during the movements. Validity evaluation of estimating contact
points from our reconstruction and registration technique is possible by
comparing it with an existing 3D model of the tibia and femur. Five digitally
reconstructed biplane radiographs will be generated during the movement to
mimic the EOS images. In each position, the proximity parameters will be
calculated using the current technique and compared with the control
measures from moving the original 3D model.
Results : Distance mapping of bone to bone interface is plotted over the
medial and lateral tibial plateaus and femoral condyles. Patterns represent the
load carrying regions of the joint as a function of flexion angle in a squat
movement.
Conclusion : Generally, the interaction between the bones has been
previously quantified using different techniques such as Casting and Pressure
sensitive film; or 3D kinematics or pseudo-kinematics analysis techniques
which are based on reconstructing the geometry of the bone and then
matching that to recorded data during movement. This technique provides a
fast, noninvasive clinically feasible pseudo-kinematic tracking method to
compute the distance map and define the contact regions using stand-alone
biplanar low-dose X-ray images; however the selection of the method to obtain
any parameter should be done carefully with awareness of its accuracy.
Project funded by NSERC.
94
MONOACYLGLYCEROL ACTIVATION OF PPARa MEDIATES
WHITE ADIPOSE BROWNING IN Ab-HYDROLASE DOMAIN6-ko
MICE .
ZHAO S, MUGABO Y, IGLESIAS J, E ATTANÉ C, THOMAS G,
POURSHARIFI P, NGUYEN TA ZHANG D, PEYOT ML, JOLY E,
BROWN M, MADIRAJU M, PRENTKI M.
MDRC-CRCHUM, Departement de Biochimie et Nutrition, Université
Lipolysis parts of GL/FFA cycling can generate metabolite(s) to activate
PPARa, but the specific metabolite is still unknown. Here, we show that
monoacylgycerol accumulation by deletion of monoacylglycerol lipase
alpha/beta-domain hydrolase-6 (ABHD6) in mouse white adipocytes
increases PPARa activity, which leads to browning of white adipocytes
in ABHD6 KO mice. Thus, ABHD6 KO mice mice show increased O2
consumption, heat production and maintain normal body temperature
for longer period during cold exposure. And ABHD6 KO mice are
protected from HFD-induced obesity.
Ex vivo and in vitro experiments indicate that increased MAG level in
white adipocytes by either exogenous MAG, ABHD6 inhibitor, or
ABHD6 deletion, is associated with elevated expression of UCP1 and
other beige/ brown adipocyte marker genes, including PPARa and
PGC1-alpha. Differentiation of preadipocytes from ABHD6-KO fat pads
to adipocytes showed increased UCP1 expression compared to WT
mice that is curtailed by PPARa antagonist. Further, we found that
MAG species transactivate PPARa in luciferase-reporter gene studies,
suggesting that MAG activates PPARalpha to promote browning of
white adipocytes.
Collectively, the results provide evidence that ABHD6-accesible MAG
can activate PPARa to regulate energy and glucose homeostasis, and
ABHD6 is a promising target for metabolic syndrome, diabetes and
obesity..
95
MATERNAL DIABETES MODULATES KIDNEY FORMATION IN
PROGENY: THE FUNCTIONAL INTERACTION BETWEEN
CATALASE AND HEDGEHOG INTERACTING PROTEIN (HHIP).
Zhao XP*1, Chang SY1, Liao MC1, Chenier I1, Ingelfinger JR2, Chan
JSD1 and Zhang SL1.
1
CRCHUM, Montreal, QC, CA, 2Harvard Medical School, Pediatric
Nephrology Unit, Massachusetts General Hospital, Boston, MA, USA.
Background : Previously, we reported that impaired nephrogenesis
induced by maternal diabetes is mediated, at least in part, via
augmented Hedgehog Interacting Protein (Hhip) gene expression.
Overexpression of catalase (CAT) in renal proximal tubular cells
(RPTCs) could prevent maternal diabetes-impaired kidney formation.
The present study aims to investigate the functional interaction
between Hhip and CAT gene expression in maternal diabetes
modulated kidney formation in progeny and examine the potential
underlying mechanisms in vivo and in vitro.
Methods : Young male offspring (newborn to 3 weeks of age) of nondiabetic and diabetic dams of Hoxb7-green fluorescence protein
(GFP)-transgenic (Tg) and Hoxb7/Catalase (CAT)-Tg mice were
studied. Renal morphology, immunohistochemistry, reactive oxygen
species (ROS) generation and gene expression were assessed by
standard methods. MK4 and UB tip cells represent the MM and UB
epithelium were used as in vitro studies.
Results : As compared to the offspring from non-diabetic Hoxb7-GFPTg dams, renal dysmorphogenesis, nascent nephron apoptosis,
increased ROS and heightened Hhip and TGFβ1 gene expression
were observed within the kidneys of offspring of Hoxb7-GFP-Tg dams
with severe maternal diabetes. These changes were ameliorated in
male offspring of diabetic Hoxb7/Cat-GFP-Tg dams. In studies in vitro,
high glucose stimulated Hhip gene expression, and subsequently
targeted TGFβ1 signaling. CAT promoted Pax2, Shh and p27Kip1
expression to counter the stimulatory effects of high glucose on Hhip
gene expression.
Conclusions : Our data suggest that the counterbalance of CAT and
Hhip gene expression plays a key role in the impaired nephrogenesis
that is induced by maternal diabetes, both in vivo and in vitro.
96
DISCOVERY OF A NATURAL COMPOUND TO STIMULATE STEM
CELL ACTIVITY AND RESILIANCE TO HYPOXIC MICROENVIRONMENT.
Aceros H*, Der Sarkissian S, Borie M, Vu MQ, Bessette P-O, Stevens
LM, Mansour S, Roy DC, Noiseux N.
Introduction : Clinical benefits of stem cell therapy for ischemic heart
disease are limited due to attenuated therapeutic potential and death of
implanted cells. We have shown that short burst Celastrol activates
cytoprotective pathways and increases survival to hypoxic and
oxidative (H2O2) conditions in rat mesenchymal stem cells (MSC). Our
objective is to investigate the efficacy of Celastrol in conditioning
human MSC and evaluate the potential for clinic use.
Methods : Human MSC (hMSC) were treated with Celastrol (60 min,
10-10M to 1 µM) or vehicle. hMSC were placed in a hypoxia up to 48
hrs. Cell viability was assessed with LIVE/DEAD kit. Expression of
genes was quantified by Western Blot and rt-PCR. Cell proliferation
was assessed by Hoechst stain, differentiation potential was evaluated
by incubating cells for 3 weeks with osteogenic and adipogenic media,
and phenotype was evaluated by FACS.
Results : Celastrol induced activation of PI3K/Akt (5.0-fold) and p44/42
MAPK (ERK1/2) (5.9-fold) within 5 minutes. Celastrol treatment
followed by washout (3-12 hrs) upregulated cytoprotective HSP70 and
HSP32 mRNA and protein (p<0,05). Celastrol improved (2.7-fold)
hMSC viability during hypoxia compared to vehicle (p<0.05), and
Celastrol dose-dependently increased cell proliferation (2-7 days).
Celasrtol (0.1 to 10 µM) did not hinder hMSC differentiation to
osteogenic and adipogenic phenotypes, and cell surface markers were
not modified with treatment and successive cell passages.
Discussion/Conclusion : Short burst Celastrol treatment confers
increased therapeutic potential to hMSC by activating cell growth and
survival pathways and phenotypes. Exposure to Celastrol preserves
MSC differentiation potential and phenotype. These results suggest
that Celastrol conditioning could be a safe and efficient for enhancing
stem cell therapy for clinical applications.
Support: ThéCell FRQS, HMR, Pfizer CIHR, Département de Chirurgie
Université de Montréal..
97
ETUDE DU ROLE DE CD73 ET DES RECEPTEURS
ADENOSINERGIQUES
DANS
LA
LYMPHANGIOGENESE
INFLAMMATOIRE
Allard B*, Chrobak P & Stagg John - CRCHUM, Axe Cancer, Université
de Montréal.
Introduction : La formation de nouveaux vaisseaux lymphatiques, ou
lymphangiogenèse, est un processus physiologique normal impliqué
dans la réparation tissulaire et la résolution des épisodes
inflammatoires. Dans certains cancers, la lymphangiogenèse est
exploitée par
la tumeur pour favoriser sa croissance et sa
dissémination métastatique. Nous avons récemment démontré
l’implication de CD73 et de l’adénosine dans l’angiogenèse tumorale.
Nous souhaitons maintenant étudier le rôle potentiel de CD73 et des
récepteurs adénosinergiques lors de la lymphangiogenèse.
Méthodes : Pour induire la lymphangiogenèse in vivo, nous avons
utilisé deux modèles de péritonite, induite chez la souris par injection
de LPS ou d’adjuvant incomplet de Freund (IFA). Dans ces modèles, la
formation de nouveaux vaisseaux lymphatiques se réalise au niveau
du diaphragme et peut être visualisée par microscopie ou bien
quantifiée par cytométrie flux en utilisant des marqueurs spécifiques.
L’utilisation de souris déficientes pour CD73 ou pour le récepteur A2A
ainsi que l’utilisation d’inhibiteurs spécifiques, nous a permis d’évaluer
le rôle du système adénosinergique dans la lymphangiogenèse
inflammatoire.
Résultats : Nos données suggèrent un rôle important du récepteur
A2A dans le processus de lymphangiogènese inflammatoire. Les
souris déficientes pour A2A présentent une réduction du nombre de
vaisseaux lymphatiques par rapport aux contrôles après stimulation
avec du LPS. Par ailleurs, dans un modèle d’induction de
lymphangiome par injection d’IFA, nous avons observé une nette
diminution de la formation des lymphangiomes dans les souris
déficientes pour CD73 et A2A.
Conclusion : Ces résultats préliminaires indiquent que CD73 et les
récepteurs à l’adénosine sont impliqués dans la lymphangiogenèse
inflammatoire. L’importance du système adénosinergique dans la
lymphangiogenèse tumorale reste à démontrer.
Allard B est récipiendaire d'une bourse de formation postdoctorale du
FRQS.
98
ROLE DE L’ADIPOSE TRIGLYCERIDE LIPASE ET DE LA
LIPOLYSE DANS LA REGULATION DE LA REPONSE
INSULINIQUE AU GLUCOSE.
Attané C*, Peyot ML, Wang S, Mitchell G.A, Lussier R, Zhao S,
Pineda M, Madiraju S.R. M, Joly E et Prentki M.
CRCHUM et Hôpital Sainte Justine, Centre de recherche du Diabète
Introduction : Plusieurs études suggèrent que la lipolyse, via la
génération de signaux lipidiques, est importante pour la sécrétion
d’insuline en réponse au glucose dans les cellules bêta-pancréatiques.
Afin de mieux comprendre le rôle de la lipolyse dans ce processus, un
modèle de souris spécifiquement déficiente en adipose triglycéride
lipase (ATGL, enzyme catalysant la première étape de la lipolyse) dans
les cellules bêta a été généré.
Méthodes : Pour cela, des souris portant le gène ATGL-Lox ont été
croisées avec des souris exprimant l’enzyme Cre recombinase
spécifiquement dans les cellules bêta (souris transgéniques MIPCreER). A l’âge de 8 semaines, les souris KO ainsi que leur contrôle
ont été traités par le tamoxifène afin d’activer la Cre recombinase et
d’induire la délétion d’ATGL spécifiquement dans les cellules bêta (BATGL-KO).
Résultats : Les îlots de souris mâles KO présentent une forte
diminution de l’expression protéique d’ATGL ainsi qu’une diminution de
son activité de l’enzyme. Les souris KO ont une insulinémie réduite
sans modification de la glycémie, montrent une tendance à être
intolérantes au glucose et cet effet est associé à une diminution de
l’insulinémie après l’administration par voie orale de glucose. Ce défaut
de sécrétion est aussi observé ex vivo sur des îlots isolés en réponse
au glucose. En revanche, les sécrétions en réponse aux acides gras et
au KCl ne sont pas altérées. Enfin, la consommation d’oxygène basale
et induite par le glucose ainsi que l’utilisation et l’oxydation du glucose
ne sont pas modifiées.
Conclusion : Nos résultats démontrent que la lipolyse et l'ATGL jouent
un rôle important dans la régulation de la réponse insulinique au
glucose. Cet effet n’est pas dû à une altération mitochondriale mais
pourrait s’expliquer par des modifications de contenu en certains
signaux lipidiques, en particulier le 1-monoacylglycerol dont notre
équipe a suggéré récemment qu'il agit comme facteur de couplage
métabolique.
Financé par l’Association Canadienne du Diabète. .
99
HIV-1 TRANSMISSION FROM T CELLS TO MACROPHAGES.
*Baxter AE1, 2, Russell RA1, Kauffmann DE2, Sattentau QJ1.
1
Sir William Dunn School of Pathology, University of Oxford, UK, 2CRCHUM, Université de Montréal, QC, CA.
Introduction : Within the paradigm of HIV-1 disease macrophages
play a crucial role as long-lived viral reservoirs; however the route of
macrophage infection is unclear as cell-free infection is inefficient. We
hypothesised that macrophages might be infected via direct contact
with HIV-1+ T cells.
Methods : Monocytes and CD4+ T cells were isolated from human
PBMCs. CD4+ T cells were infected with HIV-1 and cocultured with
autologous monocyte-derived macrophages (MDM). MDM-T cell
interactions during coculture and subsequent MDM infection were
investigated using live cell microscopy, ImageStream, HIV-1 luciferase
assays and p24 ELISA.
Results : We found that MDM selectively engulfed HIV-1+ T cells,
leading to a robust, productive MDM infection. Cell-to-cell infection was
more efficient than cell-free infection for both chronic and
transmitted/founder HIV-1. MDM infected through this route were able
to transmit infectious virus to T cells. Uptake of HIV-1+ cells occurred
independently of viral tropism; however, productive infection following T
cell engulfment was restricted by viral tropism. This, as well as
experiments utilising viral entry inhibitors, suggested a receptor- and
co-receptor-dependent step in uptake-dependent infection. MDM
preferentially engulfed dying HIV-1+ T cells over healthy HIV-1+ T
cells, indicating that the mechanism for recognition and uptake of HIV1+ cells may be based primarily on cell death.
Discussion : We present a novel route of viral transmission whereby
macrophages are infected via engulfment of HIV-1+ T cells. Future
work will focus on the implications for cell-intrinsic antiviral immunity.
AEB, RAR and QJS were supported by The Wellcome Trust and MRC,
UK; DEK by a Research Scholar Career Award of the FRQS and the
NIH.
100
VALIDATION DE CIBLES THERAPEUTIQUES DU CANCER DE
L'OVAIRE.
Communal L*1, Medrano M2, Sircoulomb F2, Labouba I1, Chouinard G1,
Provencher D1,3, Robert Rottapel R2, Mes-Masson AM1.
1
CRCHUM, Institut du Cancer de Montréal, Montreal, QC, CA, 2Institut
d’Ontario de Recherche contre le Cancer, Toronto, ON, CA,
3
Département de Médecine, Université de Montréal, Montreal, QC, CA.
Le projet de validation de cibles thérapeutiques du Cancer Epithélial de
l’Ovaire (CEO) est issu du Programme de Thérapies Sélectives (STP)
développé à l’Institut d’Ontario de Recherche contre le Cancer. Le STP
a permis d’identifier des cibles thérapeutiques ou biomarqueurs
potentiels à partir d’études intégrant un criblage génomique et
protéomique de lignées CEO couplé à une analyse bioinformatique de
la banque de données TCGA. L’objectif du projet est d'analyser la
pertinence thérapeutique de ces candidats dans le sous-type séreux
de haut grade (HGS), le plus fréquent et létal des CEO.
L’expression des candidats est observée par Western Blot dans une
grande variété de lignées CEO, ainsi que par immunofluorescence (IF)
sur des constructions de micro-étalages tissulaires (TMA) de tumeurs
de l’ovaire. Un TMA de cent cas de HGS permet de corréler
l'expression des candidats avec les données cliniques des patientes.
La quantification des marquages IF est réalisée à l’aide du logiciel
VisioMorph afin d’automatiser l’analyse et d'affiner les résultats. Les
candidats les plus exprimés dans les tissus HGS comparativement aux
tissus normaux (trompes de Fallope) ainsi que les plus significatifs au
regard de leur implication dans la progression tumorale et la survie des
patientes, sont retenus pour une étude approfondie de leur potentiel.
Parmi les premiers candidats analysés, l’expression des protéines
CD151 et CD58 a été corrélée avec les paramètres cliniques des
patientes et ces candidats vont donc être analysés plus finement. La
candidature de la protéine CD151 vient notamment d’être acceptée
pour une étude à grande échelle dans la cohorte de validation de
biomarqueurs du projet pancanadien CŒUR (Unification des
Ressources Expérimentales du Cancer de l’Ovaire).
Comme l'indique nos premiers résultats, le projet STP constitue une
stratégie robuste et pertinente d'identification de nouvelles cibles
thérapeutiques et/ou biomarqueurs prometteurs du cancer de l’ovaire.
Projet subventionné par l'Institut de Recherche Terry Fox. Communal L
est récipiendaire d'une bourse de formation post-doctorale du FRQS..
101
102
THE INTERPLAY OF IRON, MICROBIOTA AND HOST AT THE
MUCOSAL INTERFACE.
Constante M*, Fragoso G, Santos MM. CRCHUM.
Introduction : Inflammation alters the physiology of the host to
promote cancer, and patients with inflammatory bowel disease (IBD)
have a higher risk of developing colon cancer. In mouse models that
recapitulate aspects of IBD-associated cancer, carcinogenesis is
avoided when the intestinal microbiota is reduced by antibiotics. Iron is
an important nutrient at the interface between the microbiota and the
host, which is used as a cofactor in many metabolic pathways
fundamental to both.
Methods : To interfere with the intestinal microbiota we fed mice with
diets containing iron sulphate or heme as an iron source. To evaluate
the effects of the diets on the development of colitis we used the
dextran sodium sulphate (DSS) mouse model in conjunction with the
above diets. The gut microbiota composition was determined by nextgeneration sequencing and quantitative real-time PCR. Finally, to
determine the levels of IL-17, which has been associated with the
degree of colitis, we used the Luminex technology.
Results : We have found that dietary heme changes microbiota
composition in mice and results in a worse colitis than in control mice.
In addition we have found that the colitis of the heme-fed mice displays
lower IL-17 levels than the control mice, a cytokine that when ablated
in mice results in a worse degree of colitis when the mice are subjected
to DSS.
Conclusion : Our results suggest that the presence of heme from diet
or blood losses may modulate the microbiota and down regulate IL-17,
further fuelling any underlying inflammation. This modulation of the
colitis by heme may then have an impact in the development of colon
cancer. With this work we hope to develop approaches to mitigate the
effects of heme and modulate the microbiota in the GI tract, for
instance, by capturing heme or activating IL-17.
STABILISATION DU TRIMÈRE DE L’ENVELOPPE DU VIH-1.
Debbeche O*, Finzi A.
CRCHUM, Université de Montréal
Introduction : Ayant causé la mort de plus de 36 millions de
personnes jusqu’à ce jour, le virus de l’immunodéficience humaine
(VIH) demeure un problème majeur de santé publique; le
développement d’un vaccin anti VIH demeure une grande priorité
mondiale. L’enveloppe du VIH est un trimère formé de deux sousunités gp120-gp41 liés de façon non-covalente. Dans la forme native
d’Env, la gp41 est sous une forme métastable. Cette métastabilité
cause un obstacle pour la conception d’Env trimérique stable qui
pourrait être utilisée en tant qu’immunogène. Dans le but de créer une
forme trimérique plus stable, nous avons introduit des mutations dans
différentes régions de la gp41.
Matériel et méthode : Par des techniques de mutagénèse, nous
avons introduit des cystéines à des endroits clés d’Env pour créer des
ponts disulfures. Nous avons incorporé ces Env à la surface de
particules virales pour identifier les mutations qui ne compromettent
pas la fonction/conformation d’Env tout en la stabilisant. Nous avons
réalisé des tests d’infectivité en utilisant un agent réducteur pour tester
l’efficacité des ponts disulfures formés.
Résultats : Nous avons identifié un site stratégique permettant de
mieux stabiliser la structure trimérique tout en gardant une
conformation compatible avec la fusion virale suite à l’ajout d’un agent
réducteur et en conférant une stabilité accrue à l'enveloppe trimérique.
Conclusion : Nous avons réussi à stabiliser la gp41 au sein du trimère
d'Env dans une conformation compatible avec la fusion virale et ce,
sans affecter la conformation globale de la protéine. La stabilisation du
trimère d'Env permettra d'avancer le design d'immunogènes
trimériques solubles nécessaires au développement d'un vaccin contre
le VIH/SIDA.
This project is funded by CCRSI.
Financé par les IRSC.
103
ROLE OF MICRO RNA LET-7F IN CIGARETTE SMOKEINDUCED IMPAIRMENT OF NEOVASCULARIZATION.
Dhahri W, Dussault S, Haddad P, Turgeon J, Tremblay S,
Desjarlais M, Mathieu R, Rivard A. CRCHUM, Department of
Medecine, Université de Montréal, QC, CA.
Background : Ex posure to cigarette smoke (CS) is associated
with impaired neovascularization in response to ischemia. Here
we investigated the potential role of micro RNAs (miRs) for the
modulation of neovascularization in the context of cigarette
smoking.
Methods and Results : Using Affimetrix GeneChip miRNA array
and qRT-PCR analyses, we found that the pro-angiogenic miR
let-7f was downregulated in HUVECs exposed to CM extracts and
in the ischemie muscles of mice exposed to CS. Hindlimb
ischemia was surgically induced by femoral artery removal in
mice ex posed or not to CS. Mice were then treated with a local
injection of a let-7f mimic, or with a control scrambled mimic. We
found that let-7f supplementation can rescue blood flow
recuperation and capillary density in the ischemie muscles of mice
exposed to CS.Clinically, this is associated with a significant
improvement of mobility in treated animais. Endothelial progenitor
cells (EPCs) have been shown to be important for postnatal
neovascularization. We show that CM exposure is associated with
a reduction in the number and the functional activities of EPCs.
lmportantly, treatment with let-7f mimic can rescue EPC number
and function in mice exposed to CM. TGF-13-RI and HIF1AN are
predicted to be targeted by let-7f. These 2 targets are increased in
mice exposed to CM, whereas the expression of the angiogenic
factors HIF-1a and VEGF are reduced.lnterestingly, let-7f
supplementation can reduce the expression of TGF-13-RI and
HIF1AN, and restores the expression of HIF-1 and VEGF in
ischemie muscles.
Conclusion : Our results suggest that a reduction in the
expression of let-7f could be involved in the cigarette smokeinduced inhibition of angiogenesis through modulation of TGF-13RI and HIF1AN. Overexpression of let-7f using a miR mimie could
constitute a novel therapeutic strategy to improve ischemiainduced neovascularization in pathological conditions.
Study supported by CIHR.
104
LA PERTE DE FONCTION D’ABHD6 DANS L’HYPOTHALAMUS
VENTROMEDIAN ALTERE LA DEPENSE ENERGETIQUE ET
INDUIT L’OBESITE CHEZ LA SOURIS.
Fisette A*1, Madiraju M, Prentki M1,2, Alquier T3, Fulton S1.
CRCHUM et CRDM. 1Département de Nutrition, 2Biochimie, 3
Médecine, Université de Montréal, Montréal, QC, CA.
ABHD6 est une sérine hydrolase exprimée de manière périphérique et
centrale qui est impliquée dans la dégradation de plusieurs lipides,
dont l’endocannabinoïde 2-AG. Le rôle spécifique d’ABHD6 dans le
cerveau demeure toutefois méconnu. Cette étude vise à élucider la
fonction d’ABHD6 dans les neurones de l’hypothalamus ventromédian
(VMH), un noyau régulateur de la nutrition et de la dépense
énergétique.
L’approche Cre-LoxP a été utilisée afin d’exciser le gène ABHD6. Des
souris ABHD6 floxées ont reçu une infusion de virus adéno-associés
dans le VMH afin d’y induire l’expression de la recombinase Cre + GFP
(KOVMH) ou uniquement de la GFP (WTVMH). Les animaux ont
ensuite suivi une diète faible ou riche en gras saturés de 12 semaines.
Des paramètres liés au métabolisme énergétique et à la composition
corporelle ont été mesurés.
Les souris KOVMH sous diète riche en gras gagnent significativement
plus de poids (+17%) que les souris WTVMH malgré une prise
alimentaire semblable. Ce gain de poids est attribuable essentiellement
à un gain de masse adipeuse. La dépense énergétique des souris
KOVMH est plus faible que celle des souris contrôles (-15%). Cette
réduction de dépense énergétique est la conséquence d’une activité
ambulatoire fortement diminuée et d’une thermogenèse altérée.
L’invalidation d’ABHD6 dans le VMH altère le métabolisme énergétique
des souris et aggrave le développement d’obésité indépendamment de
la prise alimentaire. Le mécanisme par lequel ces effets sont obtenus
demeure à résoudre et implique vraisemblablement des lipides
bioactifs dont l’endocannabinoïde 2-AG.
Projet subventionné par le CRDM. Fisette A est récipiendaire d'une
bourse de formation postdoctorale du CDA.
105
KvLQT1 FUNCTION IN LUNG PHYSIOLOGY.
Girault A1, Chebli J1, Privé A1, Maillé E1, Peloquin F1, Robichaud A2,
Brochiero E1.
1
Department of Medicine, Université de Montréal, CRCHUM, Montréal,
QC, CA, 2SCIREQ Inc., Montreal, QC, CA.
Introduction : Acute lung injury and its more severe form, acute
respiratory distress syndrome (ARDS), are characterized by extensive
alveolar injury and lung edema. It has been established that the
resolution of ARDS parameters is highly dependent on alveolar
regeneration and edema resorption. Because we previously
demonstrated that KvLQT1 potassium channels are involved in
alveolar repair processes and in the control of ion and liquid transports
in vitro, we now decided to investigate their role in lung function and in
the resolution of ARDS parameters in vivo, using a KvLQT1 knockout
(KO) mice model.
Methods and Results : We first noted an absence of morphological
difference in airway structures (trachea, bronchus and alveolus)
between control (wild type, WT) and KvLQT1 KO mice. We then
evaluated the impact of KvLQT1 extinction on the mechanical
properties of the respiratory system using the flexiVent system
(SCIREQ Inc.). Our results showed a significant increase of tissue
damping and dynamic resistance of the respiratory system in KvLQT1
KO mice compared to WT. The role of KvLQT1 was then evaluated in a
model of lung edema induced by thiourea, disrupting the integrity of
endothelial/alveolar barrier. We observed a significant increase in the
wet/dry ratio (W/D, index of lung edema) in both WT and KO mice.
Interestingly, the thiourea-induced W/D increase was partially
prevented by a treatment with R-L3, a KvLQT1 activator, in WT mice.
However, this beneficial effect of R-L3 was lost in KO mice.
Conclusion : Our results show that the activation of KvLQT1 K+
channels could play a role in the resolution of ARDS parameters,
especially pulmonary edema resorption.
Funded by CIHR, NSERC, FRQS.
106
ELASTOGRAPHIE PAR FORCE DE LORENTZ.
Grasland-Mongrain P1, Miller-Jolicoeur E1, Souchon R2, Catheline S2,
Cloutier G1.
1
LBUM, CRCHUM, Université de Montréal, QC, CA, 2INSERM u1032,
Université de Lyon, F-69003, Lyon, France.
L'un des premiers examens pratiqué par un médecin qui suspecte une
pathologie chez un patient est de palper manuellement l'organe concerné. Ce
geste permet d'avoir une première estimation de l'élasticité de l'organe (ou
autrement dit sa rigidité), et la présence éventuelle de zones plus dures. Mais
depuis moins de 25 ans, on peut être beaucoup plus précis grâce à une
technique d'imagerie médicale appelée élastographie, qui produit des images
de l'élasticité des organes. Bien que récente, les bons résultats obtenus par
cette méthode encouragent son utilisation par les médecins. Par exemple, en
2004 a été introduit le Fibroscan, un appareil mesurant l'élasticité du foie pour
détecter une éventuelle fibrose.
En élastographie, on produit un déplacement dans un organe, que l'on observe
simultanément par échographie ou par Imagerie par Résonance Magnétique
(IRM). L'élasticité de l'organe peut alors être calculée en mesurant la vitesse
de ce déplacement : en effet, lorsque celui-ci se propage sous la forme d'une
onde de cisaillement, sa vitesse est proportionnelle à l'élasticité de l'organe.
Deux méthodes sont actuellement utilisées pour créer ce déplacement: avec
un vibreur placé sur le patient ou avec des ondes acoustiques focalisées sur
l'organe à observer.
Cependant, ces deux méthodes sont difficilement applicables au cerveau,
protégé par la boite crânienne. Nous cherchons donc dans ce projet à
combiner un courant électrique et un champ magnétique pour créer le
déplacement d'élastographie à distance, notamment derrière la boite
crânienne.
Dans nos expériences, nous avons utilisé un échantillon de gélatine ou de foie
de porc, entouré de deux aimants produisant un champ magnétique de 450
mT, et de deux électrodes délivrant une impulsion électrique de 50 Hz de 500
mA. L’échantillon est simultanément observé par un échographe. Sur les
images obtenues, nous pouvons observer le déplacement d'élastographie
recherché.
Nous avons ensuite remplacé les électrodes par des bobines pour induire le
courant électrique à distance. Les premiers résultats montrent les
déplacements d'élastographie recherchés.
Grâce à ces résultats, nous avons montré qu'il est possible de faire des images
d'élasticité du cerveau. Cela serait particulièrement utile pour donner le
caractère bénin ou malin de tumeurs cancéreuses, préparer des interventions
chirurgicales ou encore de diagnostiquer précocement des maladies
neurologiques comme Alzheimer ou l'hydrocéphalie. .
107
LIFETIME OCCUPATIONAL PHYSICAL ACTIVITY AND LUNG
CANCER RISK.
Ho V*, Parent ME, Pintos J, Abrahamowicz M, Gauvin L, Siemiatycki J,
Koushik A.
CRCHUM, Axe Risques à la santé.
Introduction : Lack of physical activity (PA) is a hypothesised risk
factor for many cancers, including lung cancer. The evidence that
exists concerns mainly recreational PA; however, one of the main
sources of PA for most adults occurs in the workplace rather than at
leisure. Our objective was to assess PA at work during a person`s
lifetime and to assess risk of lung cancer in relation to lifetime
occupational PA. Further, we examine lung cancer risk in relation to
occupational PA in different age windows of a person`s life.
Methods : Detailed lifetime job histories were obtained via interviews
with participants in a population-based case-control study conducted in
Montreal (1,136 lung cancer cases and 1,457 controls). Each person `s
occupational PA was derived based on expert assessment of the
energy expenditure associated with major tasks descriptions collected
for all jobs. Unconditional logistic regression was used to estimate odds
ratios (OR) with 95% confidence intervals (CI) for lung cancer
associated with lifetime and occupational PA levels in various age
windows, separately for men and women.
Results : The OR for lung cancer risk was 1.38 (95% CI: 0.88-2.16) in
men and 1.01 (95% CI: 0.58-1.76) in women when comparing the
highest vs. lowest quartiles of lifetime occupational PA. In men,
occupational PA was not associated with lung cancer in any age
window. In women, a suggestive increase in risk of lung cancer was
observed in the highest quartile of occupational PA for the age window
of 18-24 years (OR=1.72, 95% CI: 1.00-2.94).
Conclusion : Results fail to support a protective role of occupational
PA. Though a suggestive positive relationship was observed among
women this finding is novel and needs to be confirmed.
MÉCANISMES DU DÉFAUT INSULINOSÉCRÉTOIRE ASSOCIÉ À
L’INSUFFISANCE RÉNALE CHRONIQUE (IRC).
Koppe L*1, Nyam E1, Moullé V1, Poitout V1.
1
CRCHUM et département de médecine, Université de Montréal.
Objectif : Les troubles de l'homéostasie glucidique sont fréquents
dans l’IRC, mais les mécanismes de perturbation de la sécrétion
d'insuline restent inconnus. Les objectifs étaient : 1-d’établir si la
sécrétion d'insuline est altérée dans un modèle de souris IRC par
néphrectomie des 5/6; 2-de déterminer si la culture d’îlots isolés en
présence de concentrations pathologiques d'urée (20 mM, 24 h) altère
la sécrétion d'insuline ; et 3- d’évaluer le rôle du stress oxydant et des
O-GlcNac dans ces deux modèles.
Méthode: La sécrétion d'insuline a été évaluée in vivo par clamps
hyperglycémiques et ex vivo en incubations statiques en réponse au
glucose et au KCl. L’effet d’un antioxydant (N-acétyl-cystéine, NAC)
sur la sécrétion d’insuline a été évalué après traitement des souris IRC
(NAC, 200mg/j) ou dans les îlots exposés à l’urée (NAC, 0.5 mM). Les
niveaux d’O-GlcNac des protéines totales ont été évalués par Western
Blot.
Résultats: La sécrétion d’insuline pendant le clamp hyperglycémique
était diminuée chez les souris IRC (-46%, n=7, p<0.05). La sécrétion
d’insuline des îlots de souris IRC était diminuée en réponse à 16,7 mM
de glucose (-41%, n=5-7, p<0.05) et au KCl (-55%, n=5, p<0.05). Une
réduction similaire de la sécrétion d'insuline fut constatée dans les îlots
exposés à 20 mM d'urée (-46% n=4, p<0.05). Une augmentation des
O-GlcNac dans les îlots de souris IRC ou traités à l’urée a été
observée. La NAC a diminué les O-GlcNac et restauré la sécrétion
d’insuline dans les deux modèles.
Conclusion : L’IRC est associée à un défaut de sécrétion d'insuline
situé probablement au niveau de l'exocytose. Ce défaut est récapitulé
par une exposition des îlots à l’urée, et est lié à une augmentation des
O-GlcNac et du stress oxydant.
Project funding: Canadian Cancer Society. Ho, V: CIHR Postdoctoral
Fellowship
Projet subventionné :HCL, NIH, FRSQ, CRCHUM.
109
OVEREXPRESSION OF HETEROGENEOUS NUCLEAR RIBONUCLEOPROTEIN
F
INHIBITS
RENAL
ANGIOTENSINOGEN
EXPRESSION, ATTENUATES SYSTOLIC BLOOD PRESSURE AND
TUBULAR INJURY IN TYPE 2 DIABETIC DB/DB TRANSGENIC
MICE.
Lo CS*, Shi Y, Ghosh A, Chenier I, Zhang SL and Chan JSD.
CRCHUM, Montreal, QC, CA.
Background : Intrarenal renin-angiotensin system (RAS) plays an
important role in the development of hypertension and nephropathy in
diabetes. We investigated whether overexpression of heterogeneous
nuclear ribonucleoprotein F (hnRNP F) would inhibit renal
angiotensinogen (Agt) expression and attenuate systolic blood
pressure and renal proximal tubular (RPT) apoptosis in type 2 diabetic
db/db mice.
Methods : db/db transgenic (Tg) mice specifically overexpressing
hnRNP F in their renal proximal tubular cells (RPTCs) were studied.
Physiological parameters were monitored from 10 to 20 weeks of age.
Pro-apoptotic and pro-fibrotic genes and protein expression in renal
proximal tubular (RPT) were evaluated by real time-qPCR and Western
blotting. Urinary Agt, angiotensin II (Ang II) and angiotensin 1-7 (Ang17) levels were quantified by ELISA. Rat immortalized RPTCs were also
studied in vitro.
Results : db/db mice developed obesity, hyperglycemia, hypertension,
albuminuria and kidney hypertrophy. In contrast, overexpression of
hnRNP F attenuated these abnormalities without affecting plasma
glucose levels in db/db hnRNP-F Tg mice. RPT pro-apoptotic genes
(Bax and caspase-3), pro-hypertensive genes (Agt and ACE) and profibrotic genes (TGF-β1) expression, and urinary Agt and Ang II levels
were significantly increased in db/db mice, but normalized in db/db
hnRNP F-Tg mice. Moreover, RPT Ace2 expression and urinary Ang 17 levels were significantly decreased in db/db mice and normalized in
db/db hnRNP F-Tg mice. In vitro, overexpression of hnRNP F
attenuated Agt and up-regulated Ace2 gene expression in rat RPTCs.
Conclusion : Overexpression of hnRNP F in RPTCs attenuated
hypertension, tubular apoptosis and interstitial fibrosis in type 2 diabetic
mice. hnRNP F could be a novel therapy target for the prevention of
hypertension and nephropathy development in diabetes.
This project is funded by CIHR, KFOC and MDRC.
110
CHROMATIN
STRESS
TRIGGER
TIP60/ATM-MEDIATED
CELLULAR SENESCENCE AND RAPID INFLAMMATORY
SECRETION WITHOUT DNA DAMAGE.
Malaquin N*1,2, Carrier-Leclerc A1,2, Coppé JP3, Dessureault M1,2,
Martinez A1,2, Cardin G1,2, Campisi J3,4 and Rodier F1,2.
1
CRCHUM, Université de Montréal, 2Institut du cancer de
Montréal, 3Lawrence Berkeley National Laboratory, Berkeley, USA.
4
Buck institute for age research, Novato, USA.
Introduction : Senescence is a stable proliferative arrest limiting the
growth of cells at risk for neoplastic transformation. Senescent cells
produce a microenvironmentally active senescence-associated
secretory phenotype (SASP) composed by many cytokines and growth
factors that can promote tissue dysfunction and age-related diseases
including cancer. Senescence generally occurs after important
genotoxic stresses (i.e ionizing radiation and chemotherapeutic drugs),
which generate persistent DNA double-strand breaks (DSBs)
sustaining the molecular activation of a DNA damage response (DDR)
signaling cascade. Recent evidences suggest that genome alterations
leading to chromatin stresses are also able to induce a senescentlike phenotype. Whether and how chromatin remodeling contributes to
regulate the microenvironment via a SASP remains unknown.
Methods : We combined lentivirus-mediated gene modulation with
DNA damage or chromatin stresses triggered by the pharmacological
inhibition of histone deacetylases causing acute chromatin relaxation
and evaluated DDR activity and SASP development. Results: We first
confirmed by analyzing classical senescence hallmarks (activation of
cell cycle checkpoints, SA-β-Galactosidase…) that histone deacetylase
inhibitor (HDACi) treatment induces senescence without DSBs-type
DNA lesions. Using cytokine array and ELISA (IL-6), we show that
HDACi triggers a complete SASP independently from direct DNA
damage. Interestingly cytokine secretion occurs rapidly within hours
after HDACi treatment compared to several days when induced using
DNA damage. Depletion of ATM by shRNA infection completely
abrogates the SASP suggesting that HDACi stimulate a DDR-mediated
secretory phenotype. Finally, depletion of complexes involved in
detection and repair of DSBs, such as MRN (MRE11/RAD50/NBS1) or
involved in chromatin stress sensing like Tip60, is also sufficient to
prevent cytokine secretion in HDACi treated cells. Conclusion : We
find that chromatin stresses sensed by DDR-related complexes
including MRN/ATM and TIP60 trigger senescence and a SASP.
111
L'AGONISME BIAISÉ DU RECEPTEUR DES ACIDES GRAS FFAR1
Mancini A*+, Bertrand G@, Vivot K+, Carpentier E#, Ghislain J+, Bouvier
M#, Poitout V+#.
+
CRCHUM, Département de médecine et #Département et de
Biochimie, Université de Montréal, @Institut de Génomique
Fonctionnelle, Universités de Montpellier1,2.
Le récepteur couplé aux protéines G FFAR1 est activé par les acides
gras à chaînes moyenne et longue, et est préférentiellement exprimé
dans les cellules β-pancréatiques. FFAR1 est une cible
pharmacologique d’intérêt pour augmenter la sécrétion d'insuline dans
le diabète de type 2 (DT2). Cependant, les connaissances sur la
biologie et la pharmacologie de FFAR1 restent limitées.
Objectif : Établir i) si FFAR1 engage une signalisation indépendante
des protéines G via les protéines d'échafaudage β-arrestine (bArr) 1 et
2, et ii) si les voies de signalisation dépendantes des protéines G ou
des bArr peuvent être régulés distinctement par différents ligands
("agonisme biaisé").
Méthodes : Les profiles de signalisation d’un agoniste endogène
(palmitate; PA) et synthétique (TAK875) de FFAR1 ont étés analysés
avec différents biocapteurs BRET. La sécrétion d'insuline a été évaluée
avec des îlots isolés de souris sauvages ou bArr2-/- en réponse aux
deux agonistes.
Résultats : Nous avons détecté une interaction directe entre FFAR1 et
les bArr et mis en évidence l’existence d’un agonisme biaisé pour
FFAR1. Nos résultats démontrent que le PA active principalement la
voie dépendante de la protéine G (Gq/11), alors que TAK875 engage
de manière préférentielle la voie bArr. Ce biais signalétique est
confirmé au niveau fonctionnel avec une diminution significative de
l’effet insulinotropique de TAK875, mais pas celui de PA, dans des îlots
bArr2-/-.
Conclusions : Ces données exposent un niveau de complexité
inconnue auparavant pour la transduction du signal via FFAR1 et
peuvent guider le développement d'agonistes plus efficaces pour le
traitement du DT2.
Organismes subventionnaires: CDA, IRSC.
112
A DENDRITIC CELL INDUCED MODEL OF EXPERIMENTAL
SYSTEMIC SCLEROSIS.
Mehta H*1, Nguyen V1, Perez G2, Goulet PO1, Koenig M2, Senécal JL2,
Sarfati M1.
1I
mmunoregulation Laboratory and 2Laboratory for Research in
Autoimmunity, CRCHUM, Montréal, QC, CA.
Objective : Dendritic cells (DCs) have been implicated in the
pathogenesis of autoimmune disorders and DNA topoisomerase I
(TopoI) is a candidate autoantigen for systemic sclerosis (SSc).
However, the role of DCs in SSc has not been explored. The aim of
this study is to develop a murine model of SSc that encompasses the
cardinal pathophysiological features of human SSc, by immunization
with TopoI peptide loaded DCs.
Methods : TOPOIA and TOPOIB were selected from different regions
of TopoI. Mice were repeatedly immunized with peptide loaded DCs
and later received a final boost with the corresponding peptide in CFA.
Experimental SSc was assessed by measurement of pulmonary, skin
and kidney fibrosis, vascular and pulmonary inflammation and, antiTopoI autoantibody production.
Results : Simultaneous immunization with both TOPOIA and TOPOIB
loaded DCs induced fibrosis and anti-TopoI autoantibody production.
Mice immunized with TOPOIA+DCs developed pronounced pulmonary
and skin fibrosis whereas TOPOIB+DCs mainly induced anti-TopoI
autoantibody production. Strikingly, fibrosis and anti-TopoI response
persisted for at least 18 weeks after initial immunization. At this late
time point, parenchymal and subpleural inflammation was observed in
lungs of TOPOIA+DCs or TOPOIB+DCs immunized mice while,
fibrosis was diffuse in skin and progressed to kidneys. TOPOIA+DC
immunization elicited robust pulmonary inflammation and elevated
CXCL4, a biomarker of early diffuse human SSc, which preceded the
development of fibrosis.
Conclusion : This novel model of experimental SSc closely mimics the
systemic fibrosis, vasculopathy, inflammation and autoantibody
responses characteristic of diffuse human SSc and may, therefore,
serve as a valuable tool to test new therapeutic approaches.
Funding This work was supported by research grants from
Sclérodermie Québec, Scleroderma Society of Ontario and
Scleroderma Canada.
113
114
IMPACT OF PD1 BLOCKING ON THE MOLECULAR SIGNATURE
OF HIV-SPECIFIC CD4 T CELLS .
A Morou*, Brassard N, Langois S, Peneau C, Routy JP, Kaufmann DE.
CRCHUM, University of Montreal, QC, CA.
Introduction : Robust HIV-specific CD4 T responses are pivotal in
controlling HIV infection. This work aims at identifying critical gene
signatures and master transcriptional factors that discriminate
functional from exhausted HIV-specific CD4 T cells and assessing
whether manipulation of PD1 immunoregulatory pathway could restore
HIV-specific CD4 T cell function.
Methods : gag-specific CD4 T cells and CD4 memory subsets from
blood of subjects with treated and untreated HIV infection, including
elite controllers, are isolated using live cell sorting. Transcriptional
expression of the sorted cells and the impact of PDL1 blocking
antibody are evaluated using qRT-PCR on a Biomark high throughput
nanofluidic platform.
Results : Transcriptional analysis of exhausted CD4 T cells
demonstrates a molecular profile distinct from effector and memory
CD4 T cells. We reveal important roles for transcription factors
including Helios, Zeb2, and a diverse set of coinhibitory and
costimulatory molecules during CD4 T cell exhaustion. PD1 blockade
altered the signature of CD4 T cell exhaustion by upregulating
transcription of molecules with effector functions.
Discussion-Conclusion : This study yields important results regarding
the regulation of HIV-specific CD4 T exhaustion and the downstream
events of PD1 signaling in exhausted T cells, pinpointing critical events
that regulate effective and inefficient HIV-specific CD4 T cell
responses. Restoration of HIV-specific CD4 T cell responses by
targeting the PD1 pathway may be considered to improve efficacy of a
prophylactic or therapeutic HIV vaccine, improving help to both the
cellular and humoral arms of the immune system.
UN TRAITEMENT AVEC DE L'OCYTOCINE PRÉVIENT LE
DÉVELOPPEMENT DE LA CARDIOMYOPATHIE DIABÉTIQUE
DANS UN MODÈLE DE SOURIS DB/DB.
PlanteE*, Menaouar A, Yip D, Jankowski M, Gutkowska J.
CA.
Introduction : Le diabète et l'obésité sont des facteurs de risque de
développer des maladies cardiovasculaires. Ces désordres
métaboliques s'accompagnent d'une déficience au niveau du
système ocytocine (OT) cardiaque. L'OT est impliquée dans la
régulation du métabolisme énergétique ainsi que dans l'activation de
divers mécanismes cardioprotecteurs. Nous avons évalué l'efficacité
d'un traitement avec de I'OT à prévenir les anomalies métaboliques
structurales et fonctionnelles du cœur associées au diabète à
l'obésité.
Méthodes: Des souris db/db (obèses et diabétiques) ont été traitées
avec de I'OT (125 ng/kg/h) ou un véhicule salin pendant 12
semaines. Les effets de I'OT sur l'obésité et le diabète, ainsi que sur
la structure et la fonction cardiaque ont été analysés. Résultats: Le
traitement OTa réduit l'accumulation de tissu adipeux (-19% ; p
<0,001), a diminué la glycémie à jeun (-23% ; p<0,001), et a amélioré
la tolérance au glucose et sensibilité à l'insuline. Au niveau du cœur,
I'OT a prévenu l'hypertrophie et l'apoptose des cardiomyocytes ainsi
que la fibrose cardiaque, prévenant ainsi le développement de
dysfonction cardiaque. En outre, I'OT a normalisé l'expression des
récepteurs de I'OT et des peptides natriurétiques, a réduit le stress
oxydatif et l'inflammation cardiaque, et a normalisé l'activité de
I'AMPK.
Discussion/conclusion : Ces résultats indiquent qu'un traitement
avec de I'OT améliore partiellement le métabolisme du glucose et
des graisses, tout en ayant un effet direct sur le cœur pour le
protéger du remodelage structural et de la dysfonct ion, pour ainsi
prévenir le développement de la cardiomyopathie diabétique chez la
souris db/db .
The study is funded by the NIH (RO1 HL-092565). DEK is supported
by a Research Scholar Career Award of the FRQS.
Projet subventionné
recherche).
par les IRSC (bourse et subvention
de
115
116
IDENTIFICATION OF NEW ADCC-MEDIATING ANTIBODIES
TARGETING THE HIV-1 ENVELOPE.
Richard J*1, Coutu M1, Veillette M1, Batraville L-A1, Alsahafi N1,
Chapleau JP1, Cheng-Mayer C2, Wu X2, Finzi A1.
1
CRCHUM, 2ADARC, NY.
Introduction : Increased evidence of Fc-mediated effector functions
against HIV-1 has led to renewed interest into the role that antibodydependent cellular cytotoxicity (ADCC) could play in controlling HIV-1
infection.
Interestingly, the interaction of HIV-1 envelope (Env)
glycoproteins with the CD4 receptor was recently reported to be
required for efficient exposure of ADCC-mediating Env epitopes.
Moreover, potent CD4-induced ADCC-mediating monoclonal
antibodies (mAbs) targeting the HIV-1 Env glycoprotein gp120 were
isolated from vaccinees of the RV144 trial, which only showed modest
HIV-1 protection.
Methods/Results : Here, we developed an alternative flow-cytometrybased assay that allows specific measurement of ADCC-mediated
elimination of HIV-1 gp120-coated target cells. This assay relies on
staining target and effector cells with different dyes, which allows
precise gating and permits the calculation of the number of surviving
target cells by normalization to flow-cytometry particles. This method
was successfully applied to screen ADCC activity in plasma of
individuals from the Canadian Slow Progressor cohort and also from
SHIV-infected macaques. Furthermore, we were able to isolate new
ADCC-mediating mAbs both from human and macaque samples. This
was achieved by sorting individual B cells using a newly-engineered
Env probe, specifically sampling the CD4-bound conformation and
presenting higher affinity for ADCC-mediating mAbs.
Discussion/Conclusions : We developed a novel approach to screen
ADCC activity and isolate new ADCC-mediating mAbs.
The
identification as well as molecular characterizations of such mAbs is
critical for the design of Env-based immunogens aimed at developing
efficient HIV-1 vaccines able to generate strong ADCC-responses.
PSEUDOMONAS AERUGINOSA PROTEASES UNDER LASR
CONTROL IMPAIR AIRWAY EPITHELIAL REPAIR.
Ruffin M*1, Bilodeau C1, Maillé E1, Lafayette S2, Trinh NTN1, Beaudoin
T2, Desrosiers MY1, Rousseau S2, Nguyen D2, Brochiero E1.
1
CRCHUM, Département de Médecine, Université de Montréal,
Montréal, QC, CA, 2Mc Gill, Meakins Christie Laboratories.
Pseudomonas aeruginosa (PA) and virulence factors secreted by this
pathogen in CF airways are not only responsible for airway epithelial
damage, but also affect the ability of this tissue to repair. Our study
focused on the mechanisms whereby the factors secreted by PA are
impacting epithelial repair.
For that purpose, we used primary airway epithelial cells (AEC)
isolated from non-CF and CF human explants. To mimics conditions
created by airway PA infection, cells were exposed to PA diffusible
material (PsaDM) prepared from different PA strains.
Our results show that PsaDM from the CF clinical isolate (PACF508) or
the PAO1 strain significantly decreased the repair rates of non-CF and
CF airway epithelial cell monolayers. Further analysis revealed that
both cell proliferation and migration rates were reduced. Moreover,
directional migration ability was impaired in the presence of PACF508
PsaDM. We then showed that heat-inactivation of PsaDM fully
abolished their inhibitory effect on non-CF airway repair. We then
established that inactivation of the quorum-sensing (QS) regulator lasR
gene in PAO1 strain reversed its negative impact on non-CF and CF
repair rates. A similar result was observed after the concomitant
inactivation of lasA and lasB genes (encoding for LasA protease and
LasB elastase under LasR QS control).
Altogether our data demonstrate that the heat-sensitive PA
exoproducts under lasR control, LasA and LasB, impaired the epithelial
repair. These results may contribute to explain the obviously ineffective
airway epithelial repair in CF patients.
Projet subventionné ar le CIHR.
This study was supported by RHN-FRQS, CFC, IRSC, NSERC, VLM.
117
118
HOW GLYCINE SIGNALING REGULATES EARLY EMBRYO
NEUROGENESIS IN ZEBRAFISH?
Samarut E*, Bekri A, Drapeau P.
CRCHUM, Département de neurosciences, Université de Montréal,
QC, CA.
Introduction : How is the initial set of neurons correctly established
during the development of the vertebrate nervous system? Many
factors are regulating the production of the right number of neurons, at
the right time and at the right place in the embryo. Interestingly, our
group previously showed that glycine is involved in the differentiation of
interneuron populations within the spinal chord of the zebrafish
embryo. However, the subjacent molecular mechanisms are not yet
understood.
Methods : Using zebrafish embryo as a handy, fast-growing and
transparent vertebrate model, we aim at generating mutant lines in
which glycine signalling is impaired by knocking-out glycine receptor
using the latest genome-editing technics applied to zebrafish embryo.
Then, using these mutants, we will broadly identify genes which
expression is affected specifically in neural stem cells using nextgeneration sequencing of their transcriptome.
Results : Using the CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short
Palindromic Repeats) /CAS9 system, we successfully generated
mutant transgenic lines in which the gene coding for the GLRA4A
embryonic glycine receptor subunit is knocked-out. Furthermore, from
zebrafish embryos in which glycine signalling is impaired, we isolated
neural stem cells (NSCs) and had access to their entire transcriptome
through next-generation sequencing. As a result, we were able to
establish a list of genes that are regulated by glycine in vivo specifically
in NSCs.
Conclusion and Perspectives :
Our preliminary data will allow understanding, at the molecular and
genomic levels, how glycine is regulating neurogenesis in the zebrafish
embryo. Lastly, we will focus on these candidate genes and investigate
their role as pro- or anti-neuronal in glycine-regulated neurogenesis
during zebrafish embryo development through functional genomic
assay.
RAPID DRUG DISCOVERY IN GENETIC MODELS OF AUTISM
SPECTRUM DISORDERS.
Schmeisser K, Ghassemi YF, Parker JA.
CRCHUM, Department of Neuroscience, Université de Montréal, QC,
CA.
Introduction : Autism spectrum disorders (ASD) encompass a range
of neurodevelopmental disorders ultimately resulting in abnormal social
behavior, difficulties in communication, stereotyped and repetitive
behavior, and obsession with routines. The prevalence of ASD is
constantly increasing and there are no pharmacological therapies
available that successfully treat core ASD deficits.
Methods : We use Caenorhabditis elegans to model neurological
diseases. The nematode is 1mm long, easy to maintain, and especially
well-suited for neuroscience research thanks to its comprehensively
detailed neuronal lineage and interconnectivity of synapses that
resembles very well those of the vertebrate nervous system. Also, it is
highly amenable to genetic manipulation. Based on the SFARI gene
scoring system we focused on 27 genes linked to ASD that have
orthologs in C. elegans and viable loss-of-function (LOF) mutants. We
screened these mutants for motor-deficiency phenotypes that can be
exploited for drug discovery purposes. At the moment, we are testing
~3800 FDA approved compounds for their ability to suppress motility
defects caused by ASD mutations.
Results : From the 27 genes tested in form of screening LOF mutants,
14 showed a motor-deficient phenotype. While the drug screening is
still running, we already identified various promising compounds.
Conclusion : Very few drugs are approved to treat ASD symptoms,
but without modifying core mechanisms of the disorder. Establishing
C.elegans models for ASD and screening of a well-characterized
library of FDA approved compounds might directly gain insights into the
mechanisms underlying neuronal dysfunction. Furthermore, positively
tested substances will be promising candidates for clinical applications
to treat ASD.
Projet subventionné par les IRSC. SAMARUT E. est récipiendaire
d'une bourse de recherche postdoctorale du GRSNC et du CRCHUM
The study is funded by the SFARI. .
119
CHROMOSOMAL INSTABILITY MAY BE DUE TO SPINDLE
ASSEMBLY CHECKPOINT MISREGULATION AND SEGREGATION DEFECTS IN HIGH GRADE SERCUS EPITHELIAL
OVARIAN CANCER.
Tchakarska G*1, Culot E1, Huntsman D2, Shah S2, Tonin P3,4,
Provencher D1.5, Mes-Masson AM1,5.
1
CRCHUM, Institut du cancer de Montréal, 2Molecular Oncology,
BC Cancer Agency, Vancouver, 3Department of Human Genetics,
McGill University, Montreal, 4The Research lnstitute of the McGill
University Health Centre, Montréal, 5Département de Médecine,
Introduction : High grade serous epithelialovarian cancer (HGS
EOC) îs the most frequent EOC hîstopatholog cal subtype,
characterîzed
by
chromosomalinstability (CIN),
complex
karyotypes.including aneuploidy,chromosome de tionsllnversions
and translocations. Furthermore, karyotypes may evotve durîng
cancer progression suggesting alink between CIN and tumor
progression. One major source of CINis the deregulation of the
sp ndle assembly checkpoint (SAC).
Methods : Next generation sequenc ng, metaphase spreads,
FACS, Western blot.mmunofluorescence, timelapse microscopy
and cell microporation assays were performed.
Results:We identified mutations and differentiai expression of
severa!SAC--related genes.Metaphase spreads karyotyping
revealed aneuploidy in ali cell lines.Treatment with nocodazole
uncovered structural and functionaldisorders of the SAC.
Expression of BUB1wt.a master gene of the SAC regulation
comp ex.mutated in 3133 cell lnes, reversed the accumu ation of
polypk>id cens after SAC activationin these cens.
Discussion/Conclusions : Our results carty demonstrate a
deregulated function of the SACin HGS EOC celllines and
identified new mutated and/or misregulated genesin HGS
EOC.Dissection of key regulators of the SAC will provide a better
understanding of the relationship between genomic instability,
SAC and HGS EOC progression.
This researchis funded by a FROS postdoctoralgrant.
120
RGS16 CONTRÔLE LA SÉCRÉTION D’INSULINE EN LIMITANT LE
RETROCONTROLE NEGATIF EXCERCÉ PAR LA SOMATOSTATINE
1
1
1
1
1
1,2
K.Vivot , B. Zarrouki , V. Moullé , A. Mancini , J. Ghislain , V. Poitout .
1
Centre de Recherche du Diabète de Montréal, CRCHUM, 2 Département de
Médecine, Université de Montréal, QC, CA.
Le diabète de type 2 est du à une insuffisance de sécrétion d’insuline par les
cellules β pancréatiques. La sécrétion d’insuline est sous la dépendance du
glucose, mais elle est également modulée par des facteurs agissant sur les
récepteurs couplés aux protéines G (RCPG). Les RCPG sont eux-mêmes
modulés par les régulateurs de la signalisation des protéines G (RGS)
responsables de l'inhibition du signal. La fonction des RGS dans la cellule β
est essentiellement inconnue. Nous avons identifié RGS16 comme l’un des
gènes le plus fortement régulés par le glucose dans des îlots pancréatiques de
rats soumis à un excès de nutriment. Nous émettons l’hypothèse selon laquelle
RGS16 régule la sécrétion d’insuline dans les cellules β-pancréatiques.
Des îlots isolés de souris ont été infectés par des adénovirus codant pour un
shRNA dirigé contre RGS16 ou pour un cDNA afin de surexprimer RGS16.
Après 60h d’infection, la sécrétion d’insuline et la production d’AMPc ont été
mesurées en incubations statiques en réponse au glucose et différents
sécrétagogues.
Nos données montrent que la sécrétion d’insuline est significativement
augmentée dans les îlots surexprimant RGS16 par rapport aux îlots témoins en
réponse au GLP-1 (15 ± 2 % vs. 22 ± 2 %, n=5, p < 0.001) et au carbachol (15
± 2 % vs. 22 ± 2 %, n=5, p < 0.01). Dans ces mêmes îlots, la production
d’AMPc est également augmentée en réponse au glucose (6.4 ± 4 pmol/ml vs.
26.4 ± 4 %, n=4-6, p < 0.05). A l’inverse, la sécrétion d’insuline est diminuée
dans les îlots infectés avec un shRNA dirigé contre RGS16 par rapport aux
îlots témoins en réponse au GLP-1 (12 ± 1 % vs. 9 ± 1 %, n=12, p < 0.01) et au
carbachol (15 ± 1 % vs. 11 ± 1 %, n=12, p < 0.01). Toutefois après l’inhibition
de RGS16 avec le shRNA, la sécrétion d’insuline est restaurée après
l’inactivation des protéines Gi/o (inhibiteur tonique de la sécrétion d’insuline)
avec de la toxine pertussique. Les mêmes effets ont été observés avec
l’utilisation de cyclosomatostatine, un antagoniste spécifique des récepteurs à
la somatostatine.
Nos résultats suggèrent qu’RGS16 contrôle la sécrétion d’insuline via les
récepteurs à la somatostatine couplés à des protéines Gi/o. La caractérisation
des voies de signalisation impliquées et le phénotypage des animaux dont le
gène de RGS16 a été invalidé permettront de tester l’intérêt thérapeutique de
cibler RGS16 dans le diabète de type 2.
Financement : CIHR / FRSQ
121
122
DÉVELOPPEMENT D’UN ESSAI CELLULAIRE À HAUT DÉBIT
POUR ÉTUDIER LA CONFORMATION DE L’ENVELOPPE DU VIH-1
SOUS SA FORME TRIMÉRIQUE.
Chapleau JP*, Richard J, Finzi A.
Département de microbiologie, infectiologie et immunologie, Université
de Montréal et Centre de Recherche du CHUM, QC, CA.
Introduction : La glycoprotéine d’enveloppe (Env) du virus
d’immunodéficience humaine (VIH) forme le complexe protéique viral
responsable de la fusion du virus avec la cellule hôte. L’entrée virale
nécessite qu’Env subisse des modifications conformationelles
nécessaires au processus de fusion. Afin de mieux comprendre les
mécanismes de fusion du VIH-1, nous avons développé un essai
ELISA sur base cellulaire à haut débit permettant d’exprimer Env sous
sa forme trimérique dans un format de plaque 384 puits.
Méthode : Chaque puits contient des cellules adhérentes exprimant
Env qui est détectée via l’ajout de ligands reconnaissant différentes
conformations de celle-ci.
Ainsi, chaque puits teste un état
conformationel d’Env à l’aide d’un seul ligand. Ces ligands sont
détectés avec un deuxième anticorps spécifique couplé à l’enzyme
HRP. Cette dernière émet un signal lumineux quantifié à l’aide d’un
luminomètre. Le signal spécifique obtenu par rapport au bruit de fond
(obtenu avec des puits contrôles) est raffinée en modifiant les
paramètres de l’essai.
Résultats : En modifiant la conformation d’Env avec du CD4 soluble, il
a été possible de détecter des épitopes conformationnels avec un
signal spécifique au moins 3 fois supérieur au bruit de fond.
Conclusion : Le format de plaque 384 puits permet de profiter d’une
uniformité expérimentale pour plusieurs variables, ce qui facilite l’étude
des changements conformationels d’Env. Ainsi, l’essai pourrait servir
au criblage de banques de molécules pour leur capacité à bloquer ces
changements essentiels à la fusion du VIH-1.
ÉTUDE DE L’IMPACT DE LA CO-EXPRESSION DU RÉCEPTEUR
CD4 SUR LA FUSION CELLULAIRE MÉDIÉE PAR LES
GLYCOPROTÉINES DE L'ENVELOPPE VIRALE DU VIRUS DE
L’IMMUNODÉFICIENCE HUMAINE DE TYPE 1 (CHRONIQUES ET
FONDATEURS).
Zoubchenok D*, Veillette M et Finzi A.
CRCHUM, Département de microbiologie, infectiologie et immunologie,
Université de Montréal, QC, CA
Introduction : La fusion virale médiée par les glycoprotéines de
l’enveloppe (Env) du VIH-1 est impliquée dans l’entrée et la
propagation du virus par transmission cellule-cellule via la formation de
synapses virologiques. Les changements conformationnels d’Env
jouent un rôle important dans ce mécanisme. L’interaction d’Env avec
son récepteur CD4 présent sur la cellule cible induit des changements
conformationnels qui permettent de promouvoir la fusion virale. En
revanche, lors de la formation et relâche de particules virales, le VIH-1
engage beaucoup d’efforts pour diminuer la présence de CD4 à la
surface et ceci pourrait avoir un effet indirect sur la conformation d’Env
et sur sa capacité à effectuer la fusion.
Méthodes : Dans cette étude, un ensemble de 20 Envs de virus
fondateurs et 14 Envs de virus chroniques ont été testés pour leur
capacité à faire de la fusion cellulaire suite à la co-expression de CD4.
Pour ce faire, une technique de fusion entre cellules a été réalisée
avec des cellules exprimant les différents Envs ainsi qu'une
concentration croissante de CD4.
Résultats : L’interaction Env-CD4 au sein de la même cellule ne
semble pas affecter les Envs issus de virus fondateurs en ce qui a trait
à la fusion cellulaire. Cependant, les Envs de virus chroniques
présentent une baisse significative de la fusion, proportionnelle à la
quantité de CD4 exprimé à la surface cellulaire.
Conclusion : Cette disparité suggérerait la possibilité que les Envs de
virus TF aient une certaine résistance à la présence de CD4 au sein de
la même cellule, ce qui leur permettrait de médier la fusion cellulecellule de façon plus efficace que les Env de virus chronique.
Ce projet est financé par les IRSC et le CRCHUM. Chapleau JP est
récipiendaire d’une bourse COPSÉ.
Projet subventionné par IRSC et FRQS.

congrès - CRCHUM - Centre hospitalier de l`Université de Montréal

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