Forensische Genetik - Lindner
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Forensische Genetik - Lindner
Forensische Genetik Dr.rer.nat. Iris Lindner Diplom-Biologin Universitätsmedizin Rostock Institut für Rechtsmedizin der Universität Rostock Direktor: Univ.-Prof. Dr. med. Andreas Büttner Rostock, 08. Januar 2016 Literaturempfehlung 2 à Wolfgang Keil: BASICS Rechtsmedizin Urban & Fischer 2009 ISBN: 978-3-437-41391-9 (ca. 19,99 €) ergänzend Vorlesungsskripte ab 2016 zum Download auf der Homepage des Institutes für Rechtsmedizin (Kein Anspruch auf Vollständigkeit!) Universitätsmedizin Rostock Weitere Literatur 3 Für Ärzte in Weiterbildung, Fachärzte mit wenig Leichenschaupraxis, Polizisten und Juristen Universitätsmedizin Rostock Wichtiger Hinweis Es ist nicht gestattet, während der Vorlesung zu fotografieren oder zu filmen! Universitätsmedizin Rostock Forensische Genetik 5 Wissenschaftliche Grundlagen - Methodik der DNA-Analyse Schwerpunkte - Spurenuntersuchung - Identifikation unbekannter Leichen - Chimärismusdiagnostik - Abstammungsbegutachtung Gutachtenerstellung für StA & Gerichte Universitätsmedizin Rostock Das humane Genom 6 • Größe: 3,3 Mia bp (ca. 25000 Gene) • ca. 98 % der DNA sind nicht codierend • nur genetisch informationslose Abschnitte werden forensisch untersucht • kein Rückschluss auf Intelligenz, Körpergröße, Haarfarbe u.a. Individualmerkmale Universitätsmedizin Rostock DNA-Polymorphismen 7 Repetitive DNA Länge der Repeats • Satelliten-DNA > 1000 bp • Mini-Satelliten (VNTR) > 10-100 bp (variabel number of tandem repeats) • Mikro-Satelliten (STRs) > 2-9 bp (short tandem repeats) Binäre Polymorphismen • SNPs 1 bp (single nucleotide polymorphisms) . Universitätsmedizin Rostock Mikrosatelliten-DNA (STRs; short tandem repeats) 8 • Wiederholungssequenzen im nicht-codierenden Bereich ca. 0,5 % des Genoms • Unterscheidung in Anzahl der Wiederholungseinheiten • je STR-System 2 äquivalente Positionen (väterlicher/mütterlicher Erbteil) Prinzip: Längenpolymorphismus Merkmal ATCT ATCT ATCT ATCT ATCT homologe 5 repeats 5 / 7 ATCT ATCT ATCT ATCT Chromosomen ATCT ATCT ATCT 7 repeats Universitätsmedizin Rostock Short tandem repeats (STR) 9 Prinzip: Längenpolymorphismus Person A ATCT Allel 5 / 7 ATCT ATCT ATCT ATCT ATCT ATCT 5 repeats ATCT ATCT ATCT ATCT ATCT 7 repeats Person B ATCT Allel 4 / 5 ATCT ATCT ATCT 4 repeats ATCT ATCT ATCT ATCT ATCT 5 repeats Universitätsmedizin Rostock Anwendung: Spurenanalytik - Datenbankmuster 10 SE33 D2S1338 FGA D8S1179 D2S441 D3S1358 D1S1656 zzgl. Amelogenin = EU-Standard seit 2011 alt: 8/ 11 DNA-Systeme D16S539 VWA D10S1248 16 DNA-Systeme D18S51 TH01 (= dt. DNA-Analysedatei) D12S391 D19S433 Amelog D21S11 Amelog > 30 verschiedene DNA-Marker einsetzbar D22S1045 Universitätsmedizin Rostock Laboranalyse I : PCR (polymerase chain reaction) 11 gezielte Vervielfältigung von DNA-Bereichen; hier STR-Loci (Mullis et al.1986) 1. Trennung des Doppelstranges 2. Anlagerung der Primer an Zielsequenz 3. Synthese des Komplementärstranges Universitätsmedizin Rostock Laboranalyse II: Multiplex-PCR 12 • Simultane Amplifikation von bis zu 16 STR-Loci mittels PCR (z. B. PowerPlex-16-HS; NGMSelect-Kit) • Verwendung von Fluoreszenz-markierten Primern (bis 6 Farben) zur Unterscheidung der PCR-Fragmente fw primer ATCT ATCT ATCT ATCT ATCT rev primer Fluoreszenzmarkierung (6-FAM, VIC, NED, SID, LIZ, TAZ) Universitätsmedizin Rostock Laboranalyse III: Kapillarelektrophorese 13 • Auftrennung der PCR- Fragmente • Laserbasierte Detektion der Fluoreszenz-markierten Fragmente • Bestimmung der Länge durch Abgleich mit Standard/ Allelischer Leiter Universitätsmedizin Rostock Laboranalyse IV: DNA-Typisierung 14 Allelzuordnung mittels Allelischer Leiter System D21S11: 29 / 31.2 29 31.2 29 31.2 Universitätsmedizin Rostock Messergebnis = DNA-Profil 15 Kombination 16 STR-Systeme (DAD) = einzigartig Ausnahme: Zwillinge weiblich 13-14 7-9.3 17-19 30 13-14 20-24.2 15 21-22 Universitätsmedizin Rostock Biostatistik – Theorie I 16 Bsp. VWA-System: 10 Merkmale 55 Kombinationen !! Universitätsmedizin Rostock Biostatistik – Theorie II 17 Kombination von 2 STR-Systemen (je 10 Merkmale) x 55 x 55 3025 Kombinationen !! Kombination von mind. 8 STR-Systemen (je 10 Merkmale) x 55 x 55 x 55 … … x 55 83 Billionen Kombinationen !! Kombination von mind. 16 STR-Systemen (je 10 Merkmale) x 55 x 55 x 55 … … x 55 7 Quadrilliarden Kombinationen !! Universitätsmedizin Rostock Biostatistik 18 • Bewertung – Basis für Beweiswert vor Gericht • Häufigkeitsverteilung von Allelen je STR-System in einer bestimmten Population Häufigkeit [%] Bsp. System D3S1358 35 30 25 20 15 10 5 0 13 14 15 16 17 18 19 Allel Universitätsmedizin Rostock Beweiswert eines DNA-Musters 19 Berechnung der Häufigkeit eines DNA-Merkmalmusters in einer Population • Basis: Allelfrequenzdaten der einzelnen STR-Loci • System Allelkombination Allelfrequenz/ Häufigkeit Häufigkeit pro System 2 homozygot: p heterozygot: 2*p*q FGA 20 26 0,14 0,027 0,76 % SE33 17 29.2 0,0675 0,0604 0,82 % VWA 16 18 0,204 0,215 8,77 % Häufigkeit für 3 STR-Systeme 0,000546 % = 1/ 183.150 -21 Häufigkeit für 16 STR-Systeme (System 4-16 je 5%) 6,64 x 10 % Eine Person von: 150 Trillionen Universitätsmedizin Rostock Anwendungen der STR-Analytik 20 Spurenuntersuchungen Universitätsmedizin Rostock Forensische Spurenanalytik - Untersuchungsstrategie 21 Spuren finden & sichern Ø Suchtests für Eiweiß, Blut, Sperma Spurenart bestimmen Ø Nachweis für Blut, Speichel, Sperma Spuren zuordnen Ø Feststellung individueller Merkmale Ø Zuordnung zu Person Universitätsmedizin Rostock Geeignetes Material für DNA-Analyse 22 prinzipiell alle kernhaltigen Körperzellen • Körperflüssigkeiten, -sekrete Blut, Speichel (Urin, Kot, Schweiß, Nasensekret) • Sexualsekrete Ejakulat / Vaginalsekret • Organe bzw. Gewebe Muskel, Knochen, Zähne, Fingernägel Haare (mit Wurzel) Universitätsmedizin Rostock Ärztliche Spurensicherung 23 Gynäkologe/ Rechtsmediziner (körperliche Untersuchung) Spurenmaterial (Bsp. Sexualdelikt) Ø Spuren mit Spurenträger sichern (z. B. Bekleidung) Ø Bekleidung trocknen (Papiertüte !!, niemals Plastiktüte!) Spurensicherung Ø Asservierungskit!! Kripo einbeziehen Ø mehrere Abstriche je Abnahmeort (Oral-, Vaginal-, Analabstriche) Ø Ausstriche auf Objektträger (Mikroskopie) Ø so früh wie möglich (Spermien max. 3 Tage post coitum nachweisbar) Ø ggf. Schamhaare auskämmen/ Abklebungen Oberschenkelinnenbereich Ø ggf. Tupfer rücktrocknen (sonst Schimmelbefall!!, Kontaminationen vermeiden) / immer sorgfältig beschriften Ø Fingernägel des Opfers sichern Universitätsmedizin Rostock Geeignete Asservate 24 • Bekleidung des Opfers / Beschuldigten Ø z.B. Unterwäsche Sexualdelikt • Tatwerkzeuge • Abriebe vom Tatort • Trinkgefäße • Flaschen, Dosen • Zigarettenreste Universitätsmedizin Rostock Vergleichsmaterial 25 Unerlässlich für Zuordnung einer Spur zu realer Person BlutAnhaftung vom Opfer? Vergleichsproben: • Mundschleimhautabstrich des Opfers • Mundschleimhautabstrich des Tatverdächtigen • je nach Fragestellung: 2-5 ml Blut (Toxikologie, BAK, Drogen) • Haare: 20-50 Haare bündeln (nur mit Wurzel) Universitätsmedizin Rostock Spuren – Charakterisierung 26 • Blut-Vortest Ø • z.B. OPTI-Test (humanspezifisch) Vortest auf Ejakulat Ø z. B. PSA-Test Ø Mikroskopie (HE-Färbung) – einziger Nachweis von Spermien • Speichelvortest Ø z.B. Amylase • Haare (Mikromorphologie) Universitätsmedizin Rostock Fallbeispiel I – vers. Totschlag 27 Tatort: Wohnung des G1; Tatverdächtigter wurde ermittelt Asservat: Ziersäbel mit Blutanhaftungen– Tatwerkzeug???!!! Universitätsmedizin Rostock DNA-Typisierung 28 Abrieb Klinge: vollständiges Profil! Abrieb Griff: vollständiges Profil! Universitätsmedizin Rostock Vergleich der DNA-Muster 29 SE 33 D21S11 VWA TH01 FGA D3S1358 D8S1179 D18S51 Amel. G1 17-27.2 32-33.2 16-17 6-7 19-20 16-18 12-13 16-22 X-Y TV 1 13-31.2 30-30.2 16 6-7 22-24 15-17 11-14 15-16 X-Y Klinge 17-27.2 32-33.2 16-17 6-7 19-20 16-18 12-13 16-22 X-Y Griff 13-31.2 30-30.2 16 6-7 22-24 15-17 11-14 15-16 X-Y Eindeutige Zuordnung der Spuren zu beiden Personen Biostatistische Berechnungen zur Erhebung des Beweiswertes Universitätsmedizin Rostock Fallbeispiel II - Sexualdelikt 30 Asservat: Vaginalabstrich; TV unbekannt Mischspur: Ableitung Täterprofil problematisch D8S1179 D21S11 8/13?; 13/14 TH01 D18S51 27/28 29/30.2 D3S1358 9.3/? 7/9 14/17; 13/16 Opfer Täter SE33 14/? 14/17 9.3 VWA FGA Universitätsmedizin Rostock Zusätzliche DNA-Marker 31 Universitätsmedizin Rostock STR-Systeme auf Y-Chromosom 32 • Besonderheiten: Ø > 23 etablierte STR-Systeme haploider Marker Ø rein paternale Vererbung Ø • Anwendung: Spurenanalytik: bei Mischspuren (Sexualdelikten) Ø zum Ausschluss von TV Ø Beweiswert geringer als autosomale STRs !! Männer einer paternalen Linie nicht unterscheidbar Ø Abstammungsbegutachtung: ØDefizienzfällen mit männlichen Kindern Universitätsmedizin Rostock Fallbeispiel III – Mord 33 Auffindesituation: April 2014; TV meldet sich bei Polizei und gibt an, er habe seine Ex-Freundin in einem Waldstück bei Lichtenhagen vergraben; Auffindung einer in mehreren Lagen „Verpackung“ gehüllten Leiche im Erdgrab Universitätsmedizin Rostock Fallbeispiel III – Mord 34 Todesursache: Erstickung/Drosselung oder Brustkorbkompression DNA-analytische Untersuchung von >120 Spuren (Klebebänder, Fesselungsmaterial, Bekleidung, Werkzeuge, Abstriche etc.) Universitätsmedizin Rostock Fallbeispiel III – Mord 35 Entscheidende Spuren: Körperabstriche der Geschädigten Aussage TV: kein Geschlechtsverkehr mit Geschädigter Vaginalabstrich tief PSA-Vortest: positiv!!! Samenflüssigkeit! Kann an dem Vaginalabstrich der Geschädigten männliches DNA-Material festgestellt werden, das mit dem des TV übereinstimmt ? Universitätsmedizin Rostock Fallbeispiel III – Mord 36 Real-time-PCR: DNAGesamt = 81,05 ng/µl; DNA Y = 0,03 ng/µl; Faktor 1:2700 Vaginalabstrich II: ausschließlich Merkmale der Geschädigten Universitätsmedizin Rostock Y-chromosomales Profil = Haplotyp 37 Vaginalabstrich II: vollständiger Haplotyp des Beschuldigten!! Spur 7A Spur 7A Spur 7A Spur 7A Vollständiges männliches Y-STR-Profil nach 2-monatiger Liegezeit der Leiche!! Spur 7A Spur 7A Spur 7A Spur 7A Universitätsmedizin Rostock Mitochondriale DNA (mt-DNA) 38 Besonderheiten: zirkuläre DNA (degradationsunempfindlich) • • mehrere 100 Kopien pro Zelle • maternale Vererbung • Sequenzierung zweier hochvariabler Regionen des D-Loops (HV1/HV2) • ungeeignet für Abstammungsgutachten & Mischspurenanalytik • Beweiswert geringer Bei schwierigen Spuren besonders geeignet (telogene Haare, sehr alte Knochen) Universitätsmedizin Rostock Grenzen der STR-Analyse 39 • Nachweisgrenze (ca. 500 pg DNA für Vollprofil; mind. 100 pg DNA, dann Teilprofile) Bsp. problematisch Kontaktspuren (Diebstahl) • Qualität der DNA (Degradation, Inhibitoren) Bsp. DNA aus Knochen, Haare, Abstrich Schuh, Teppich • Mischspuren (Bsp. Sexualdelikte) Ableitung von DNA-Profilen für Recherche nur begrenzt möglich • Haare (mit Wurzel, erfolgreiche Typisierung mgl.) Haarschaft (nur mt-DNA, Sequenzierung) Universitätsmedizin Rostock DNA-Analysedatei (DAD) 40 • Spurengutachten: 8 STR-Systeme (Einstellung in die DAD seit 1998 beim BKA) 16 STR-Systeme nach EU-Standard (seit Herbst 2011) • DAD beim BKA Wiesbaden (§3 DNA-Identitätsfeststellungsgesetz) Nur Einstellung von DNA-Profilen von: Ø Tatverdächtigen Ø verurteilten Straftätern Ø unbekannten Proben („Spuren“) Ø bei Straftaten von erheblicher Bedeutung (> 1 Jahr Haftstrafe), insbes. Vergehen gegen sexuelle Selbstbestimmung, gefährliche Körperverletzung, Diebstahl in besonders schwerem Fall oder Erpressung Ø nach Gerichtsbeschluss Universitätsmedizin Rostock DNA-Analysedatei (DAD) 41 DAD beim BKA Wiesbaden ermöglicht: • Tataufklärungen (Zuordnung von Personen zu Spuren) • das Erkennen von Tatzusammenhängen (Spur-Spur-Treffer) • das Erkennen von Wiederholungstätern (Person-Person-Treffer) Universitätsmedizin Rostock DNA-Analyse-Datei (DAD) 42 Stand: 31.12.2012 Datensätze: Treffer: Gesamt Personen Spuren 998.661 775.648 223.013 (ca. 78%) (ca. 22%) Gesamt Person-Spur Spur-Spur 145.932 ca. 79% ca. 21% Universitätsmedizin Rostock Juristische Grundlagen – DNA-Analyse 43 Universitätsmedizin Rostock Strafprozeßordnung (StPO) 44 1990: BGH bestätigt Zulässigkeit der Analyse von genetisch informationslosen Abschnitten der DNA zu Beweiszwecken im Strafverfahren 1997: Strafverfahrensänderungsgesetz – Ergänzungen (§81 a Abs. 3,§81 e-f) 1998: DNA-Identitätsfeststellungsgesetz (§81 g) Ø Abnahme von MSH von TV zum Zwecke der Erstellung eines DNA-Profils Ø Speicherung in DAD zulässig 2005: Gesetz zur Novellierung der forensischen DNA-Analyse Ø Entnahme von Körperzellen zur Identitätsfeststellung von TV zulässig im Verdachtsmoment Ø erzwungene Entnahme von MSH bei Gefahr im Verzug durch StA/ Gericht Universitätsmedizin Rostock § 81 a-g Strafprozeßordnung (StPO) 45 § 81 a [Körperliche Untersuchung von Beschuldigten] § 81 b [Erkennungsdienstliche Maßnahmen] § 81 c [Körperl. Unters. von Beschuldigten u.a. Personen, Verweigerung] § 81 d [Untersuchung weiblicher Personen] § 81 e [Molekulargenetische Untersuchungen]* § 81 f [Anordnung und Durchführung molekulargenet. Untersuchungen] § 81 g [Zusatzbestimmung zur DNA-Identitätsfeststellung]** * Ergänzungen (§ 81a Abs. 3, § 81 e-f) im Strafverfahrensänderungsgesetz DNA-Analyse vom 21.03.1997 ** durch DNA-Identitätsfeststellungsgesetz vom 7.09.1998 angefügt Universitätsmedizin Rostock Strafverfahrensänderungsgesetz- DNA-Analyse zu §81 StPO 46 Zweckbestimmung: Verwendung der Vergleichsproben vom TV nur im zugrunde liegenden oder anderem „anhängigem“ Verfahren Vernichtung: Vernichtung aller entnommenen Vergleichsproben, wenn diese für Verfahren nicht mehr erforderlich sind (§81a, Abs.3); keine Asservierung erlaubt Festlegung des Untersuchungszieles: molekulargenetische Untersuchungen zur Feststellung der Abstammung oder Zuordnung zu einer Spur zum TV oder G sind zulässig, darüber hinausgehende Untersuchungen (z.B. Offenlegung von Anlagen einer Erbkrankheit) sind unzulässig (§81e) Universitätsmedizin Rostock Strafverfahrensänderungsgesetz- DNA-Analyse zu §81 StPO 47 Organisatorische und sachliche Trennung: der ermittlungsführenden Dienststelle von Einrichtung, die die DNA-Analyse durchführt Anonymisierung: Weitergabe der Proben an Sachverständigen ohne Nennung des Namens, der Anschrift und des Geburtsdatums des Betroffenen; Schutz vor Manipulation Überwachung durch Datenschutzbeauftragten: auch wenn der Sachverständigende die Ergebnisse nicht in Dateien verarbeitet (§81f, Abs. 2) Kein Einsatz der DNA-Analyse bei Ordnungswidrigkeiten (Art. 2 mit Bezug auf §46 Abs. 4) Universitätsmedizin Rostock Anwendungen der STR-Analytik 48 Identitätsfeststellung Universitätsmedizin Rostock Identifizierung unbekannter Leichen 49 • starker Verwesungszustand bzw. Identifizierung über Zahnstatus nicht möglich Bevorzugtes Probenmaterial: Knochen Klärung der Identität - über Abstammungsbegutachtung unter Einbeziehung naher BlutsVerwandter (Eltern, Kinder) - über persönliche Gegenstände des Toten (Haarbürste, Zahnbürste, Rasierapparat, Kleidung) Universitätsmedizin Rostock DNA-Profil aus Knochenmaterial 50 Aufarbeitung schwierig; Entkalkung zeitaufwendig Ergebnis abhängig vom Alter / Lagerungszustand der Knochen Vollprofile selten Universitätsmedizin Rostock Verwandtschaftliche Analyse 51 System Knochen Sohn der Unbekannten (MSH) W-Wert % SE33 21-28.2 28.2-30.2 74,85 D21S11 30-31.2 29-31.2 72,67 VWA 15-17 17 65,00 TH01 6-9.3 6 68,08 FGA 21-24 21-24 77,56 D3S1358 16-17 17 69,58 D8S1179 10-13 11-13 43,78 D18S51 14-15 14-16 59,88 D16S539 9-13 9-14 70,03 D2S1338 19-23 19-24 66,22 D19S433 15-17 14-15 57,80 Amelogenin X X-Y - Mögliche Mutterschaft der Verstorbenen: 99,945 % !! Universitätsmedizin Rostock Anwendungen der STR-Analytik 52 Chimärismusdiagnostik Universitätsmedizin Rostock Chimärismusdiagnostik 53 • langjährige Kooperation: Klinik für Hämatologie/ Onkologie/ Palliativmedizin (ZIM) • Chimärismusmonitoring nach Stammzelltransplantation mit Hilfe der STR-Analyse • Chimärismus: – Spender- und Empfängerzellen kommen gleichzeitig im Patienten vor – Berechnung des Empfängeranteils / Empfänger- und Spendermerkmale müssen bekannt sein • Anzeige von persistierenden/ wiedererscheinenden Empfängerzellen weit vor klinischem Befund Universitätsmedizin Rostock Anwendungen der STR-Analytik 54 Abstammungsbegutachtung Universitätsmedizin Rostock Historie – Erbbiologisches Gutachten 55 Der Kläger ist blond und blauäugig Der Beklagte hat schwarze Haare und braune Augen Vaterschaft des Beklagten zweifelhaft!! Universitätsmedizin Rostock Historie - Blutgruppengutachten 56 Proteine als Untersuchungsmaterial 1900: Blutgruppen A, B, AB und O entdeckt durch Karl Landsteiner später weitere Blutgruppen, ab ca. 1970 das HLA System Universitätsmedizin Rostock Historie – DNA-Gutachten 57 1985: Satelliten DNA entdeckt durch Sir Alec Jeffreys (RFLP, multi-locus / single-locus-Sonden) 1986: Entwicklung der PCR durch Kary Mullis (Nobelpreis Chemie 1993) STR-Systeme weltweit Standard Universitätsmedizin Rostock Abstammungsgutachten 58 Auftraggeber: Gerichte, Privatpersonen Triofall: Kind, Mutter, Putativvater Untersuchung von mind. 15 STRSystemen auf mehr als 10 Chromosomen Rechtliche Aspekte: Einwilligung von allen beteiligten Personen nötig Universitätsmedizin Rostock Grundlagen der Vererbung 59 Mensch: Diploider Chromosomensatz Vererbung: Je 1 ChromosomenSatz von Mutter & Vater Universitätsmedizin Rostock Prinzip der Abstammungsbegutachtung 60 Beispiel: der Marker D3S1358 System D3S1358 Mutter 14/18 Kind 14/19 Putativvater 19/19 Einschluß: Das Kind muß das Allel 19 von seinem Erzeuger geerbt haben. Universitätsmedizin Rostock Prinzip der Abstammungsbegutachtung 61 Beispiel: der Marker D3S1358 System D3S1358 Mutter 14/18 Kind 14/17 Putativvater 16/18 Ausschluß: Das Kind muß das Allel 17 von seinem Erzeuger geerbt haben. Der Putativvater kann Allel 17 nicht vererbt haben. Universitätsmedizin Rostock Warum Mutter (mit)testen ? 62 Beispiel: der Marker D5S818 Mutter ? Kind 9-10 Putativvater 9-13 Ergebnis Einschluss Mutter 9-11 Kind 9-10 Putativvater 9-13 Ergebnis Ausschluss Der Putativvater besitzt nicht das Merkmal 10. Merke: Ohne Untersuchung der Kindesmutter können Ausschlüsse übersehen werden! Universitätsmedizin Rostock Befundtabelle 63 PCR-System Kind Kindesmutter Unerlässliche väterliche Allele D3S1358 13-15 15-18 13 7-8 8-9.3 7 D21S11 30.2-30.2 30.2-31 D18S51 16-21 15-21 Penta E 5-5 5-5 D5S818 9-10 10-11 D13S317 11-14 11-11 D7S820 10-11 8-10 D16S539 10-12 9-10 CSF1PO 11-12 12-12 Penta D 9-12 12-12 VWA 14-17 17-17 D8S1179 13-14 13-15 TPOX 8-11 8-8 FGA 23-25 20-25 TH01 Putativvater Universitätsmedizin Rostock Befundtabelle 64 PCR-System Kind Kindesmutter Unerlässliche väterliche Allele D3S1358 13-15 15-18 13 7-8 8-9.3 7 D21S11 30.2-30.2 30.2-31 30.2 D18S51 16-21 15-21 16 Penta E 5-5 5-5 5 D5S818 9-10 10-11 9 D13S317 11-14 11-11 14 D7S820 10-11 8-10 11 D16S539 10-12 9-10 12 CSF1PO 11-12 12-12 11 Penta D 9-12 12-12 9 VWA 14-17 17-17 14 D8S1179 13-14 13-15 14 TPOX 8-11 8-8 11 FGA 23-25 20-25 23 TH01 Putativvater Universitätsmedizin Rostock Befundtabelle 65 PCR-System Kind Kindesmutter Unerlässliche väterliche Allele Putativvater D3S1358 13-15 15-18 13 13-15 7-8 8-9.3 7 6-7 D21S11 30.2-30.2 30.2-31 30.2 30-30.2 D18S51 16-21 15-21 16 16-19 Penta E 5-5 5-5 5 5-21 D5S818 9-10 10-11 9 9-13 D13S317 11-14 11-11 14 12-14 D7S820 10-11 8-10 11 8-11 D16S539 10-12 9-10 12 12-13 CSF1PO 11-12 12-12 11 11-12 Penta D 9-12 12-12 9 9-12 VWA 14-17 17-17 14 14-15 D8S1179 13-14 13-15 14 14-14 TPOX 8-11 8-8 11 8-11 FGA 23-25 20-25 23 21-23 TH01 Universitätsmedizin Rostock Bewertung der Befunde 66 • mind. 15 STR-Systeme werden untersucht • bei 4 Ausschluss-Konstellationen auf mind. 3 verschiedenen Chromosomen = „sicherer Ausschluss“ • bei < 4 Ausschlüssen – biostatistische Berechnung unter Würdigung von Mutationen • bei Zuordnung aller "paternalen" Merkmale des Kindes unter Beachtung der Vererbungsregeln = sicherer „Nicht-Ausschluss“ Berechnung der Vaterschaftswahrscheinlichkeit nach ESSEN-MÖLLER Universitätsmedizin Rostock Berechnung der Wahrscheinlichkeit 67 Berechnung unter Einbeziehung von Allelhäufigkeiten der gefundenen Merkmalkombination in einer relevanten Population angelsächsischer Sprachraum: Deutschland: Likelihood-Quotient (LQ) = Paternity Index (PI) LQ nach ESSEN-MÖLLER LQ= X Y Vaterschaftswahrscheinlichkeit W in % W= 1/(1+Y/X) W-Wert > 99,90 % bzw. PI-Wert > 1000 “Vaterschaft praktisch erwiesen” Universitätsmedizin Rostock Identitätssicherung 68 • Identitätsfeststellung aller beteiligten Personen (Anerkennung vor Gericht) • Vorlage der Dokumente (Kopie Personalausweis, Geburtsurkunde) • Fingerabdruck (bei Kleinkind ggf. Ferse) • Foto der Beteiligten • Exakte Zuordnung der Speichelproben zu Beteiligten • Sichere Kennzeichnung und Beschriftung der Röhrchen • Unterschrift der Beteiligten / des Arztes (Identitätsformular) • Formular zur Aufklärung & Einwilligung in DNA-Analyse (GenDG) ► Gutachter hat für sachgerechte Probenentnahme Sorge zu tragen ! Universitätsmedizin Rostock Defizienzfälle ohne Vater 69 Bei verstorbenem Putativvater können Exhumierungen meist vermieden werden....... Universitätsmedizin Rostock Wenn der Putativvater verstorben ist … 70 • ohne lebende Verwandte kann ggf. von einem Krankenhaus/Pathologie ein Gewebepräparat erhalten werden Vorteile: • unabhängig dokumentierte Identität der Probe • oft sehr lange Aufbewahrungszeiten Universitätsmedizin Rostock Wenn der Putativvater verstorben ist … 71 Andere Materialien: problematisch! da keine Identitätssicherung, somit nicht richtlinienkonform! Anerkennung obliegt Richter! Universitätsmedizin Rostock Wenn der Putativvater verstorben ist … 72 Mit lebenden Verwandten können die Erbmerkmale des Vaters rekonstruiert werden. KM Kind Untersuchung der Großeltern Universitätsmedizin Rostock Wenn der Putativvater verstorben ist … 73 KM Kind Untersuchung von Ehefrau und Halbgeschwistern Universitätsmedizin Rostock Wenn der Putativvater verstorben ist … 74 KM Kind Untersuchung von Geschwistern des Putativvaters Universitätsmedizin Rostock Brüder als mögliche Väter 75 • Brüder sind genetisch sehr ähnlich • wenn zwei Brüder als Erzeuger eines Kindes in Frage kommen, muß dies bei der Untersuchung bekannt sein. • Optimal: Proben von beiden Brüdern liegen vor • gleiches gilt für Fälle mit Vater und Sohn als Putativvater Universitätsmedizin Rostock Zwillinge als mögliche Väter 76 • Zweieiige Zwillinge sind genetisch wie Brüder, also unterscheidbar • Eineiige Zwillinge sind genetisch identisch • und somit bei einem DNAVaterschaftstest nicht zu unterscheiden Universitätsmedizin Rostock Heteropaternale Zwillinge 77 • in seltenen Fällen können Zwillinge 2 Väter haben • es sind einige Fälle mit einem weißen und einem schwarzen Zwilling bekannt • nur bei zweieiigen Zwillingen mgl. • daher immer beide Zwillingskinder testen Universitätsmedizin Rostock Juristische Grundlagen – Abstammungsbegutachtung 78 Universitätsmedizin Rostock Bürgerliches Gesetzbuch (BGB) 79 Mutterschaft (§1591 BGB) Mutter eines Kindes ist die Frau, die es geboren hat Vaterschaft (§ 1592 BGB) Vater eines Kindes ist der Mann, 1. der zum Zeitpunkt der Geburt mit der Mutter des Kindes verheiratet ist, 2. der die Vaterschaft anerkannt hat oder 3. dessen Vaterschaft nach § 1600d BGB oder § 640 h Abs. 2 der ZPO gerichtlich festgestellt ist. 4. Vaterschaft besteht nach § 1593 auch 300 Tage nach Auflösung der Ehe durch Tod. Universitätsmedizin Rostock Bürgerliches Gesetzbuch (BGB) 80 Gerichtsverfahren zur Klärung der Vaterschaft gibt es in drei Konstellationen 1. § 1600 d Gerichtliche Feststellung der Vaterschaft (Kindesmutter, Klage auf Zahlung des Unterhaltes; Jugendamt als Beistand des Kindes) (1) Besteht keine Vaterschaft nach §1592 Nr. 1 & 2, §1593, so ist die Vaterschaft gerichtlich festzustellen. (2) als Vater wird vermutet, wer der Mutter während der Empfängniszeit beigewohnt hat. (3) als Empfängniszeit gilt die Zeit von dem 300. bis zu dem 181. Tage vor Geburt des Kindes. In der Regel gibt Familiengericht Gutachten in Auftrag. Universitätsmedizin Rostock Bürgerliches Gesetzbuch (BGB) 81 2. §1600 d Gerichtliche Anfechtung der Vaterschaft • falsche Zuordnung eines Kindes kann korrigiert werden (Anfechtung durch Vater, Mutter, Kind); JA als Beistand • innerhalb von 2 Jahren (Klage des Vaters bei Familiengericht) - Fristbeginn seit Kenntnis von Umständen, die gegen Vaterschaft sprechen - Kind kann nach Eintritt der Volljährigkeit selber anfechten Bei Gericht muss vom Vater ein schlüssiger Grund vorgelegt werden, warum er glaubt, nicht der biologische Vater des Kindes zu sein (Bsp. kein sexueller Kontakt zum Zeugungszeitpunkt (Zeugen !!) oder privates gerichtsverwertbares Gutachten) Familiengericht gibt Gutachten in Auftrag. Universitätsmedizin Rostock Bürgerliches Gesetzbuch (BGB) 82 2. §1600 d Gerichtliche Anfechtung der Vaterschaft • Gerichtsverwertbares Gutachten nötig (Anerkennung obliegt Richter) • rechtliche Konsequenzen (Unterhalt, Sorgerecht, Erbansprüche etc.) • kompetenter Rechtsbeistand empfohlen • Kosten ca. 2000,- Euro (Gerichtsgebühren, Vaterschaftstest, Rechtsanwalt etc.) Universitätsmedizin Rostock Bürgerliches Gesetzbuch (BGB) 83 seit 01. April 2008 3. §1598 a Klärung der Abstammung • Legale Feststellung der biologischen Vaterschaft durch Klage bei Familiengericht • Einwilligung aller Angehörigen per Gerichtsbeschluss erwirkt • ohne Fristen; keine rechtlichen Konsequenzen nach Ergebnis der Untersuchung • Verfahren ausgesetzt, wenn Kindeswohl gefährdet • Kosten trägt Antragsteller Der zweifelnde rechtliche Vater gibt ein privates gerichtsverwertbares Gutachten in Auftrag. Universitätsmedizin Rostock Rechtswege 84 Familiengericht entscheidet auf Klage der Mutter/ des Kindes oder des Mannes über Feststellung, Anfechtung oder Klärung der Vaterschaft (§§ 1598a, 1600ff, BGB) - Gericht beschließt Gutachtenerstattung (§§§ 144, 403, 404 ZPO) - Unterstützung von Kindesmutter/ Kind gehört zu Amtspflichten des Jugendamtes (ggf. Prozesskostenhilfe) Wird ein DNA-Test verweigert, kann die Einwilligung vor einem Familiengericht durchgesetzt werden (§ 372a ZPO) - Ausnahme: Test kann verschoben werden, wenn Kindeswohl gefährdet ist. Universitätsmedizin Rostock Gültige Richtlinien - Vaterschaftstest 85 24. April 2009: Gendiagnostikgesetz ab 01. Februar 2010 heimliche Vaterschaftstests gesetzlich verboten Strafen: Antragsteller bis 5000,- Euro (ohne Einverständnis des Sorgeberechtigten) Anbieter: bis 300.000,- Euro Einwilligungserklärung (Privatpersonen): Aufklärung/ Vernichtung der DNA-Proben bestimmt Privatperson Richtlinien: - Gendiagnostikgesetz (gültig 01.02.2010) - GEKO-Richtlinie (gültig ab 11.07.2011; Inhalte der Aufklärung) - GEKO-Richtlinie (gültig ab 26.07.2012; PCR-Systeme Qualifikation des Gutachters) Universitätsmedizin Rostock Beweiswert eines privaten Gutachtens 86 ab 1. Februar 2011: Anbieter von Vaterschaftstests – Akkreditierungspflicht !! • Gutachten sollte sich an den gültigen Richtlinien für Erstattung von Abstammungsgutachten orientieren (mind. 15 STR-Systeme) • Identitätssicherung der beteiligten Personen entscheidend!! • Einwilligungserklärung gemäß GenDG • Qualität des Labors? - Gutachter (Qualifikation, KFQA?) - Umfang der Untersuchung (Doppelbestimmung?, PCR-Kits??) - Teilnahme an externen Ringversuchen?? - Akkreditierung durch DAKKS ?? Universitätsmedizin Rostock Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit! 87 Kontakt Institut für Rechtsmedizin Arbeitsbereich Forensische Genetik Dr.rer.nat. Iris Lindner tel. 0381-494 / 9911 Universitätsmedizin Rostock Zusatzfolien Universitätsmedizin Rostock Suchtests für Blut, Ejakulat Blut (Luminoltest) Ejakulat (UV-Licht) Chemolumineszenz von Luminol mit Hämoglobin (Luminol + H2O2 + Katalysator (Fe2+) Universitätsmedizin Rostock