Artisan™ Orcein Stain Kit Code AR313

Artisan™
Orcein Stain Kit
Code AR313
Avsedd användning
För in vitro-diagnostik.
Orcein färgningssats är avsedd för laboratorieanvändning för att med ljusmikroskopi identifiera de virala inklusionskropparna från hepatit B
ytantigen (HBsAG) och kopparassocierat protein i vävnadsprover.1-2 Rutinmässigt bearbetade prover (paraffininbäddade) kan användas. Det
föredragna fixativet är neutralbuffrat formalin. Den kliniska tolkningen av all färgning eller frånvaro av färgning, måste kompletteras genom
morfologiska studier och lämpliga kontroller, och måste utvärderas av en kvalificerad patolog inom ramen för patientens anamnes och andra
diagnostiska tester. Alla reagenser i Orcein färgningssats har optimerats för användning med Dakos Artisan Link Staining System och kräver
ingen blandning eller spädning.
Sammanfattning och förklaring
Viruspartiklar i värdceller kallas virala inklusionskroppar. Ett hepatit B-virus ligger på ytan av viruspartikeln. HBsAG kan detekteras genom att
använda Orcein färgningsmetod. Antigenen syns som fina granulat antingen diffust utspridda på hela cytoplasman eller i koncentrerat i
cytoplasman omkring sinusoidområdet. Kopparassocierat protein kan, när det finns i stora mängder som Wilsons sjukdom och vissa former
av cirros, detekteras genom att använda Orcein färgningsmetod.1-2
Procedurprincip
Orcein färgning är en modifiering av Shikatas Orcein-metod för HBsAG- och kopparassocierat protein. Elastinfibrer färgas också som en
intern kontroll.
Orcein färgningssats är optimerad för användning på Artisan Link Staining System med eller utan Artisan Clearing Solution. Tvättningssteg
följer alla färgningssteg. Ta bort objektglasen från instrumentet efter färgning. Doppa 3–4 gånger i 70 % alkohol. Doppa 3–4 gånger i 95 %
alkohol. Doppa 3–4 gånger i 100 % alkohol. Upprepa genom att doppa 3–4 gånger i 100 % alkohol. Rengör med xylen eller xylenersättning och
montera med lämpligt monteringsmedel. Resultaten tolkas med hjälp av ett vanligt ljusmikroskop.
Kontroller: Levervävnad innehållande positiv HBsAG. Fosterlever kan användas för koppar eller lever med Wilsons sjukdom. Ett multiblock innehållande positiv lever för HBsAG och koppar med normal lever rekommenderas.
Medföljande reagenser
Orcein färgningssats består av 4 bruksfärdiga dispenserförpackningar innehållande:
Kaliumpermanganat 1 %
1 % Kaliumpermanganat i avjoniserat vatten
Svavelsyra 3 %
3 % Svavelsyra i avjoniserat vatten
Oxalsyra 5 %
5 % Oxalsyra i avjoniserat vatten
Orcein 1 %
1 % Orcein i 70 % syra-alkohol
Reagensförpackningen måste blandas före flödning.
Dako tillhandahåller dessa reagenser vid optimal formulering för användning enligt de anvisningar som tillhandahålls för färgning på
preparerade vävnadssnitt. Varje avvikelse från rekommenderade testprocedurer kan ogiltiggöra angivna förväntade resultat.
Material som behövs men inte medföljer
1. Objektglas för mikroskop
2. Artisan Link Staining System
3. Tvättlösning (kod AR102)
4. Artisan rengöringslösning (kod AR309), valfritt
Försiktighetsåtgärder
1. För yrkesmässigt bruk.
(122836-001)
P02039SE_003_AR313/2012.10 sid. 1/3
2.
3.
4.
Minska mikrobiell kontamination av reagenser, annars kan en ökning av icke-specifik färgning inträffa.
Reagensförpackningarna kan innehålla restlösning efter det föreskrivna antalet tester fullbordats.
Andra inkuberingstider eller temperaturer än de som specificeras kan ge felaktiga resultat. Användaren måste validera alla ändringar
som gjorts av den fabriksutgivna proceduren.
5. Förvara reagensförpackningarna i upprätt läge när de inte används på instrumentet.
6. Skydda reagensförpackningarna från direkt solljus samt värmegenererande källor.
7. Som huvudregel får personer under 18 år inte arbeta med denna produkt. Användarna måste vara ordentligt utbildade i lämplig
arbetsprocedur, produktens farliga egenskaper samt nödvändiga säkerhetsinstruktioner. (enligt EU-direktivet 94/33/EC). Se databladet
för materialsäkerhet för ytterligare information.
8. Använd lämplig personlig skyddsutrustning för att undvika kontakt med ögonen och huden.
9. Oanvänd lösning måste kasseras i enlighet med lokala och statliga föreskrifter.
10. Datablad för materialsäkerhet för yrkesanvändare kan erhållas på begäran.
11. För flaskor som levereras i påsar för riskmaterial ska man kontrollera att det inte finns någon utspilld vätska eller trasiga
reagenspack. Om något är utspillt eller trasigt ska man inte öppna påsen utan skicka tillbaka satslådan och rapportera skadan till
kundtjänst för att få en sats i ersättning.
Risker och säkerhet
Kaliumpermanganat 1 %: 1 % Kaliumpermanganat/risksymbol: Inga
R52/53
Skadligt för vattenlevande organismer, kan orsaka skadliga långtidseffekter i vattenmiljön.
S60
Detta material och/eller dess behållare skall kasseras som farligt avfall.
S61
Undvik utsläpp i miljön. Läs särskilda instruktioner/datablad för materialsäkerhet.
Oxalsyra 5 %: 5 % Oxalsyra/risksymbol: Skadlig
R21/22
Farligt vid hudkontakt och förtäring.
S36/37
Använd lämpliga skyddskläder och skyddshandskar.
S60
Detta material och/eller dess behållare skall kasseras som farligt avfall.
Orcein 1 %: 70 % etanol (denaturerad), 1 % Orcein/risksymbol: Mycket brandfarlig, skadlig
R11
Mycket brandfarligt.
R20/21/22
Farligt vid inandning, hudkontakt och förtäring.
R68/20/21/22
Farligt: möjlig risk för bestående hälsoskador vid inandning, hudkontakt och förtäring.
S16
Förvaras åtskilt från antändningskällor – rökning förbjuden.
S35
Detta material och dess förpackning skall oskadliggöras på säkert sätt.
S36/37
Använd lämpliga skyddskläder och skyddshandskar.
Förvaring
Varje komponent skall förvaras vid den temperatur som anges på etiketten. Får ej användas efter utgångsdatum. Användaren måste
validera alla förvaringsförhållanden som avviker från de som specificerats. Det finns inga tydliga tecken som indikerar instabilitet hos denna
produkt. Lämplig vävnad måste därför köras som kontroller för sådan verifiering. Kontakta Dako teknisk service om du observerar oväntad
färgning som inte kan förklaras med variationer i laboratorieprocedurerna eller olämplig förvaring.
Instrumentprocedur/färgningsprocedur
Preliminära kommentarer
Se användarhandboken för Artisan Link för ytterligare information.
Flöda reagensförpackningarna
Innan färgningen påbörjas skall reagensförpackningarna flödas och kontrolleras med avseende på läckor. Kontrollera och flöda alla
reagensförpackningar när en ny sats används och före dagens första färgningskörning.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Arbeta över en pappersduk och avlägsna det röda eller svarta transportlocket, om sådant finns, från reagensförpackningens
dispenserenhet genom att försiktigt dra locket nedåt.
Vid leveransen av en reagensförpackning flödar du den genom att hålla reagensförpackningen så att dispenserenheten pekar nedåt
och försiktigt knacka på reagensförpackningens sida 2–3 gånger så att eventuella luftbubblor som kan sitta fast i dispenserenheten
frigörs.
Tryck in och släpp ut kolven fullständigt 3–4 gånger i snabb följd tills ett stabilt flöde uppnås. Var noga med att eventuell vätska som
sprutar ut absorberas av en pappersduk, absorberande gasväv eller något liknande material.
Undvik att göra av med onödigt stora mängder reagens vid flödningen. Överdriven flödning leder till förlust av reagenser, vilket kan göra
att reagensförpackningen tar slut innan det beräknade antalet tester har utförts.
Före varje användning kan reagensförpackningarna flödas 1–2 gånger för att kontrollera att genomströmningen är stabil.
Håll reagensförpackningen i ena handen och för in monteringsguiden på förpackningens baksida i springorna på reagenskarusellen tills
förpackningen sitter fast ordentligt.
(122836-001)
P02039SE_003_AR313/2012.10 sid. 2/3
Procedur
Se avsnittet Procedurrapporter i Dako Link-programmet för rekommenderad detaljerad procedur.
Efter färgningen tar du bort objektglasen från instrumentet och gör följande:
•
Doppa objektglasen 3–4 gånger i 70 % alkohol.
•
Doppa objektglasen 3–4 gånger i 95 % alkohol.
•
Doppa objektglasen 3–4 gånger i 100 % alkohol. Upprepa genom att doppa objektglasen 3–4 gånger i 100 % alkohol.
•
Rengör objektglasen i xylen eller xylenersättning och montera dem.
Tolkning av färgningen
HBsAG/Elastinfibrer: ................... Mörkt rödbrun
Kopparassocierat protein:............ Mörkt rödlila
Bakgrund:.................................... Blekrosa - rosa
Felsökning
Se avsnittet Underhåll och felsökning i användarhandboken för Artisan Link eller kontakta vår tekniska servicegrupp.
Referenser
1. Sheehan D, Hrapchak B Theory and Practice of Histotechnology, 2nd ed., pp 247-248
2. John D. Bancroft and Marilyn Gamble Theory and Practice of Histological Techniques 5th edition, pg. 349-350
Utgåva 01/13
(122836-001)
P02039SE_003_AR313/2012.10 sid. 3/3