Immunoassay zur Bestimmung von Acetaminophen

Acetaminophen
Immunoassay zur Bestimmung von
Acetaminophen-Überdosierung
Indikation
Paracetamol (Acetaminophen) ist ein weit verbreitetes Medikament, das aufgrund seiner analgetischen und antipyretischen
Eigenschaften in vielen frei verkäuflichen und rezeptpflichtigen Präparaten Verwendung findet. Bei überdosierter Einnahme
kann Paracetamol schwere Leber- und Nierenschädigungen oder sogar den Tod verursachen.1,3 Nach akuter ParacetamolÜberdosis zeigt der Patient im Frühstadium häufig nur wenige oder gar keine Symptome. Der einzige verlässliche Frühindikator für eine Diagnose ist die quantitative Messung der Paracetamol-Konzentration im Serum oder Plasma. Der klinische
Nachweis einer Leber-und Nierenschädigung kann in der Regel frühestens 24 Stunden nach Einnahme erbracht werden,
d. h. deutlich nach dem Zeitpunkt, an dem das prophylaktische Gegenmittel Acetylcystein wirksam verabreicht werden kann.1
Eine Leberschädigung wird mit Acetylcystein, insbesondere bei Verabreichung innerhalb von 8 bis 10 Stunden nach
Überdosierung hochwirksam verhindert und das Überleben von Patienten mit Leberversagen bei Therapieeinleitung 12 bis
16 Stunden nach Überdosierung verbessert.1
Testprinzip: Homogener enzymatischer Immunoassay
Kein Medikament in der Probe
Anti-Drug-Antikörper
Medikament in der Probe
G6PDH
Anti-Drug-Antikörper
G6P
G6PDH
Medikamentenprobe
G6P
NADH absorbiert
bei 340 nm
Reaktionsrichtung:
Steigend
+
NAD+ +
Das Enzym ist nur aktiv, wenn
es nicht an einen Antikörper
gebunden ist.
+
+
NAD+ +
Die Antikörper-Bindung verursacht
eine sterische Hemmung und Inaktivierung der Enzyme – keine Bildung
von NADH und keine Veränderung
der Absorption.
NAD+ +
+
+
NADH
Das freie Medikament konkurriert mit dem Medikament-Enzym-Konjugat
um den Antikörper.
Der Antikörper bindet das freie Medikament; das aktive Enzym führt zur
Bildung von NADH und Veränderung der Absorption.
•In dem Test konkurrieren das Medikament in der Probe und das mit Enzym Glucose-6-Phosphatdehydrogenase (G6PDH)
markierte Medikament um die Antikörperbindungsstellen.
•Die Enzymaktivität nimmt mit der Bindung an den Antikörper ab, sodass die Medikamentenkonzentration in der Probe
als Enzymaktivität gemessen werden kann.
•Das aktive Enzym wandelt oxidiertes NAD+ zu NADH um. Die sich dabei ergebende Extinktionsänderung wird
spektrofotometrisch gemessen.
* alle cobas c-Systeme ausser cobas c 111 Analyzer und cobas c Modul 701/702
Eigenschaften des Acetaminophen-Tests
Systemkompatibilität
cobas c 311 System
cobas c 501 | 502 | 701 | 702 Module
COBAS INTEGRA® 400 plus System
Reaktionszeit
10 Min.
Testprinzip
Homogener enzymatischer Immunoassay
Kalibrierungsintervall
Jede Reagenzcharge und wenn Qualitätskontrollverfahren
dies erfordern
Rückverfolgbarkeit
Gegen USP-Referenzstandards geprüft
Probenmaterial
Serum, Plasma (K2- oder K3-EDTA oder Lithium-Heparin-Plasma)
Probenvolumen
2 μL
Haltbarkeit im Gerät
12 Wochen
Messbereich
5 – 200 μg / mL (33,1 – 1324 μmol / L)
> 1000, wenn eine automatische Wiederholung programmiert ist
LoQ
5 μg/mL
Acetaminophen-Referenzwerte
Normale therapeutische Acetaminophen-Dosen bei gesunden
Erwachsenen ergeben Serum-Konzentrationen von 10 – 30 μg/mL
(66 – 199 μmol/L)
Wiederholpräzision (Präzision innerhalb eines Laufs)
Kontrolle 1
Kontrolle 2
Kontrolle 3
Durchschnitt μg / mL
15,3 34,9
106
μmol / L VK %
101
2,5
2312,5
700 2,2
Zwischenpräzision
(Gesamtpräzision / Präzision zwischen den Läufen /
Präzision von Tag zu Tag)
Kontrolle 1
Kontrolle 2
Kontrolle 3
Durchschnitt μg / mL μmol / L 15,3 34,9
106
101
3,2
2312,8
700 3,0
ONLINE TDM Kernpunkte:
•Vollständige Rückverfolgbarkeit zu LC-MS/MS
Referenzmethoden
•Vergleichbare Test-Performance auf COBAS INTEGRA®
und cobas c
•Gebrauchsfertige Reagenzien
Bestellinformation
ACET2 Kernpunkte:
•Keine Interferenz mit Bilirubin und Antidot NAC
•Vergleichbar mit LC-MS/MS-Referenzmethode2
•Optimierter Messbereich (Wiederhollauf, LoQ)
Literatur
1 Dale, D.C. (2007). ACP Medicine, 3rd edition. BC Decker Inc., 161 – 162.
2 Bylda, C. (2014). Simultaneous quantification of acetaminophen and structurally
related compounds in human serum and plasma, Drug Test Anal.; 6 (5), 451 – 60.
3 Dart, et.al. (2006). Acetaminophen Poisoning: an Evidence-Based Consensus Guideline
for Out-of-Hospital Management, Clinical Toxicology, 44, 1–18.
COBAS, COBAS C, COBAS INTEGRA und LIFE NEEDS ANSWERS
sind Marken von Roche.
©2015 Roche
Roche Diagnostics (Schweiz) AG
CH-6343 Rotkreuz
Schweiz
www.roche-diagnostics.ch
VK %
ONLINE TDM Acetaminophen
Gen.2
150 Tests
06 769 942 190
ACET2 Kalibrator ACETC
1 x 2 mL
07 007 515 190
Code 670
TDM Control Set
Level I
Level II
Level III
2 x 5 mL
2 x 5 mL
2 x 5 mL
04 521 536 190
Code 310
Code 311
Code 312