SYMBOLER - CellSearch
Transcription
SYMBOLER - CellSearch
7900005(100rør) 9528-20(20rør) 10. SYMBOLER 11. Medicinsk udstyr til in vitro diagnostik Katalognummer Batchkode/lotnummer Anvendes inden ÅÅÅÅ-MM-DD Temperaturgrænse Producent Se brugervejledningen NB! Se medfølgende papirer Repræsentant i det Europæiske Fællesska STERILE R Steril, stråling Må ikke genanvendes TILSIGTET BRUG CellSave-præserveringsrør(PreservativeTube)erberegnettilindsamlingogpræservering af cirkulerende epitelceller (tumorceller) i fuldblod, som skal bruges til optælling og fænotypebestemmelse. INDIKATIONER CellSave-præserveringsrørkanbrugestilmonitoreringafcirkulerendeepitelceller(tumorceller), somkanhjælpevedbehandlingenafkræftpatienter. PRODUKTBESKRIVELSE CellSave-rørerevakueredeblodopsamlingsrør,somindeholderEDTA-antikoagulantiumoget cellepræserveringsmiddel.Vakuummeterdesignettilattrækkeca.10mlblod.Indersidenaf røretersterilt.CellSave-rørerberegnettilbrugsammenmedVeridix-instrumenter. FUNKTIONSMÅDE CellSave-rørerevakueredeblodopsamlingsrør,somerdesignettilbrugsammenmedstandard flebotomiudstyr til veneblodprøvetagning. Røret indeholder 300 ul af en opløsning, som indeholder Na2-EDTAogetcellepræserveringsmiddel.EDTAabsorbererkalciumioner,som forhindrerblodetiatkoagulere.Præserveringsmidletbevarermorfologienogepitelcellernes overfladeantigenekspression.Hvertrørerevakueretforatudtage10,0mlvenøstfuldblod, nårstandardflebotomiprocedurernefølges. BEGRÆNSNINGER • Mængdenafudtagetblodvariereraltefterhøjde,omgivendetemperatur,barometertryk, røretsalder,venetrykogfyldningsteknik. • Prøverneskalbehandlesindenfor96timerefterudtagning. • VedanalyseafsjældnecellervedhjælpafCELLTRACKS ANALYZERII™tjekkesprøvens integritetsombeskrevetiBrugervejledningenforCELLTRACKSANALYZERII™. FORSIGTIGHEDSREGLER 1. Opbevaring af rør ved eller under 0oCkanmedførebrudpårøret. 2. Fjernikkegummiproppenvedatrullemedtommelfingeren.Fjernproppermedet vridogettræk. 3. Brugikkerøret,hvisdetindeholderfremmedmateriale. 4. Overholdgenerelleforsigtighedsregler.Brughandsker,kittel,beskyttelsesbrillerog andetpersonligtbeskyttelsesudstyrsamttekniskekontrolforanstaltningerforatundgå blodstænk,blodlækageogpotentieleksponeringforblodbårnepatogener. 5. Altglaskangåistykker.Undersøgaltglasforeventuelskadeundertransportinden brugogtagpassendeforholdsreglerunderhåndteringen. 6. Håndterallebiologiskeprøverogskarpegenstandetilblodprøvetagning(lancetter, kanyle,luer-adaptereogblodprøvesæt)ihenholdtilpolitikkerneogprocedurerne på din institution. Søg læge i tilfælde af eksponering for biologiske prøver (f.eks. ved punkturskade), da de kan overføre viral hepatitis, HIV (AIDS) eller andre infektionssygdomme. Brug en eventuel integreret beholder til brugte kanyle, hvis blodprøvetagningssættet leveres med en sådan.Veridex anbefaler ikke, at beskyttelseshættensættespåbrugtekanyleigen.Derkandogværeandrepolitikker ogprocedurerpådininstitution,ogdisseskalaltidfølges. 7. Bortskaf alle skarpe genstande til blodprøvetagning i beholdere til miljøfarlige produkter,somergodkendttilbortskaffelseafdisse. 8. Det anbefales ikke at overføre en udtaget prøve ved hjælp af sprøjte og kanyle. Yderligerehåndteringafskarpegenstandesomf.eks.hulekanylerøgerrisikoenfor nålestiksskade. 9. OverførselafprøverfraensprøjtetiletCellSave-rørvedhjælpafenikke-skarpanordning skaludføresmedforsigtighedafdeherunderanførteårsager.Hvissprøjtestemplet 12. trykkesnedunderoverførslen,kandetskabeetpositivttryk,hvorvedproppenog prøven trykkes ud, og der opstår stænkning og potentiel blodeksponering. Hvis mananvenderensprøjtetiloverførselafblod,kanderskeover-ellerunderfyldning af rørene, hvilket medfører et forkert forhold mellem blod og additiv og muligvis forkerteanalyseresultater.CellSave-rørerdesignettiludtagelseafenspecifikmængde. Fyldningenerfærdig,nårderikkelængeretrækkesvakuum.Noglerørkandogfyldes delvistpågrundafstempelmodstand,nårderpåfyldesfraensprøjte. Hvisderudtagesblodviaenintravenøsslange,skaldetsikres,atslangenerskylletfor intravenøsopløsning,indenfyldningenafCellSave-rørpåbegyndes. Underfyldningelleroverfyldningafrørkanmedføreetforkertforholdmellemblodog additivsamtforkerteanalyseresultater. Bemærk!Prøverskaltransporteresogopbevaresved15-30ºC.Nedkølingafprøver indenbehandlingkanpåvirkeprøvensintegritetnegativt. Forhindring af tilbageløb DaCellSave-præserveringsrørindeholderadditiver,erdetvigtigtatundgåeventueltbackflow fra røret, da det kan medføre uønskede reaktioner. For at undgå backflow skal følgende forholdsregler overholdes: 1. Patientensarmskalpegenedad. 2. Holdrøretmedproppenøverst. Løsnstaseslangen,såsnartblodetbegynderatløbe. 3. 4. Sørgfor,atopløsningenindeirøretikkekommerikontaktmedproppenellerenden afkanyleundervenepunktur. OPBEVARING • Opbevarrøreneved4-30ºC.Måikkebruges,hvisadditivetikkeerklartogfarveløst.Må ikkebenyttesefterudløbsdatoen. • Opbevar eller transportér prøverne ved 15-30ºC. Under ekstreme temperaturforhold kan det være nødvendigt med passende isolering under forsendelse. PROCEDURE Leverede materialer CellSave-præserveringsrør.Indeholder:300ulopløsningindeholdende4,6%Na2-EDTAog 36%cellepræserveringsmiddel,0,36%polyethylenglykol,0,46%inaktivestoffer. Nødvendige materialer, som ikke medfølger Blodprøvetagningskanyleogadaptere,spritservietter,staseslange 1. ForetagvenepunkturihenholdtilCLSI-procedureH3-A6,Procedure for indsamling af diagnostiske blodprøver ved hjælp af venepunktur.BrugCellSave-røreneførst,hvisder skaludtagesblodiflereforskelligetyperafrør. 2. Fyldrøret,indtilblodstrømmenstopper. 3. Fjernrøretfraadapterenogvenddetforsigtigt8gangeforatblandeindeholdet.Når røretvendesopogned,undgårmankoagulation.Utilstrækkeligellerforsinketblanding kanmedføreunøjagtigetestresultater. 4. Prøvenskalbehandlesindenfor96timerefterudtagning.Opbevarprøverneved 15-30ºC. PERFORMANCE Genfinding Genfindingblevvurderetvedattilsætteetlavtantaltumorceller(0,50,100og200celler/ 7,5 ml) og et højt antal tumorceller (0, 100, 1.000 og 10.000 celler/7,5 ml) til prøverne. Der blev udtaget blod fra 5 normale donorer i CellSave-rør, som blev tilsat SKBR-3-celler (enbrystcancercellelinje).Prøverneblevbehandletogfarvetmedetnukleinsyrefarvestof, anti-CD45-APCoganti-CK-PEvedhjælpafCELLPREP™Semi-AutomatedSampleProcessing System(halvautomatiskprøvebehandlingssystem)oganalyseretvedhjælpafFACSCalibur flowcytometermedperlerforatmuliggøreberegningafabsoluttecelletal.Foreksperimentet meddenlavetilsætningvarregressionsligningeny=0,8x+4,7,ogkorrelationskoefficientenvar R2=0,98.Foreksperimentetmeddenhøjetilsætningvarregressionsligningeny=0,9x+6,2,og korrelationskoefficientenvarR2=0,99. Tabel 1. GenfindingsdatafortilsætningaflavtoghøjtantalSKBR-3-tumorceller Donor A B C D E Middelprocent genfinding 0 2 2 5 1 4 3 Lav tilsætning 50 100 31 89 44 97 51 92 46 81 52 82 45 88 89,3% 88,2% 200 164 141 175 153 181 163 81,4% 0 2 4 1 2 2 2 Høj tilsætning 100 1.000 10.000 84 876 8.259 74 775 8.185 75 880 9.342 118 846 8.030 106 959 9.014 91 867 8.566 91,3% 86,7% 85,7% Forstyrrende stoffer Blodfra5normaledonorerblevindsamletiEDTA-ogCellSave-rørogtilsatca.800SKBR-3celler.CellSave-rørblevtilsatpotentieltforstyrrendestoffer(hæmolyse5+,lipæmi1,94-2,04% emulgeretfedt,icterus7,0mg/dl)foratbestemmeeffektenpågenfindingogoptællingaf tumorceller.To prøver blev behandlet ved hjælp af CELLPREP™ Semi-Automated Sample ProcessingSystemoganalyseretvedhjælpafFACSCaliburflowcytometret.Fuldblodsprøver medhæmolyse,lipæmiogicterus,someropsamletiCellSave-rør,forstyrrerikkegenfindingen ogoptællingaftumorceller. Tabel 2. Genfinding af tilsatte tumorceller for 7,5 ml fuldblod EDTA-kontrol Donor A1 A2 B1 B2 C1 C2 D1 D2 E1 E2 Middelstandardafvigelse # genfundne celler # tilsatte celler 452 828 445 828 802 749 711 749 580 771 451 771 571 771 642 771 610 771 541 771 CellSave-kontrol %genfinding # genfundne celler # tilsatte celler 55% 388 696 54% 486 696 107% 689 696 95% 690 696 75% 289 716 58% 272 716 74% 552 716 83% 636 716 79% 526 716 70% 535 716 %genfinding 56% 70% 99% 99% 40% 38% 77% 89% 73% 75% 581 75% 506 72% 117 17% 150 22% CellSave, hæmolytisk blod CellSave, lipidt blod CellSave, ikterisk blod # # # # # # % % % genfundne tilsatte genfinding genfundne tilsatte genfinding genfundne tilsatte genfinding celler celler celler celler celler celler A1 482 696 69% 664 696 95% 638 696 92% A2 502 696 72% 691 728 95% 612 728 84% B1 514 696 74% 748 696 107% 678 696 97% B2 571 696 82% 712 696 102% 679 696 98% C1 499 716 70% 568 716 79% 561 716 78% C2 470 716 66% 599 716 84% 514 716 72% D1 582 716 81% 628 716 88% 651 716 91% D2 551 716 77% 549 716 77% 589 716 82% E1 571 716 80% 620 716 87% 554 716 77% E2 499 716 70% 620 716 87% 584 716 82% 524 74% 640 90% 606 85% Middelstan41 6% 63 10% 55 9% dardafvigelse Prøvekvalitet Kvaliteten af prøven er vigtig for at opnå tilstrækkelig detektion af sjældne epitelceller. Leukocytintegritet i blodprøver, som er immunomagnetisk beriget for epitelceller med CELLPREP™-systemet, er et udmærket mål for denne kvalitet. Figur 2 viser billeder af kernefarvning(DAPI)afblodprøveropsamletiEDTA-ogCellSave -rør,somblevbehandlet efter24timervedhjælpafCELLPREP™-systemet.Billederneblevtagetmedet10xobjektiv påetfluorescensmikroskop.Mensdererenstormængdekernematerialetilstedeiprøven, someropsamletiEDTA-røret,erderkunrundegenstande(leukocytter)tilstedeiprøven, someropsamletiCellSave-røret. Figur 2.KernefarvningafleukocytteriEDTA-ogCellSave-rør. EDTA CellSave-rør Donor Præservering af antigener med henblik på fænotypebestemmelse Evnentilatskelnemellemdeforskelligecellepopulationerpåvirkesklartafprøvensalder påanalysetidspunktet,medmindreprøvenerpræserveret.Leukocytbevarelsesigernoget omprøvekvalitetenvedudførelseafanalyseafcirkulerendetumorceller.Figur1viseret typisk eksempel på CD45-antigendensiteten af de forskellige cellepopulationer i blod udtagetietstandard-EDTA-rørogCellSave-rør.Blodetblevanalyseretindenfor2timerefter udtagning, og analysen blev gentaget ca. 48 timer efter udtagning. Graden af separation mellem lymfocytter og granulocytter er vist ved længden af de vandrette bjælker på X-aksen i hvert diagram. Separationen mellem begge cellepopulationer nedbrydes over tid med EDTA-røret. Separationen opretholdes med CellSave-røret. Pilene i figuren, som pegerpålymfocyt-,monocyt-oggranulocytpopulationerne,viserforskydningenafdisse cellepopulationer som følge af aldring af blodprøverne. Dette gør det sværere at skelne mellem disse cellepopulationer. VeridexLLC 1001USHwy202North Raritan,NJ08869USA Phone:1-877-VERIDEX(USA) 0080008374339(EU) AUTOPREP™, CELLSEARCH™, CELLTRACKS™, CELLTRACKS ANALYZER II™ og MAGNEST™ er varemærkertilhørendeVeridex,LLC. Denne teknologi, herunder produkter og/eller tilhørende komponenter af disse, samt procedureroginstrumentsystemer,dererbeskrevetheri,erbeskyttetafamerikanskepatenter og tilsvarende internationale patenter og verserende patentansøgninger, som ejes af Veridex, LCC,ogomfatterenellerflereaffølgende:USPatentNumbers5,466,574;5,512,332;5,597,531; 5,698,271; 5,985,153; 5,993,665; 6,120,856; 6,136,182; 6,365,362; 6,551,843; 6,620,627; 6,623,982;6,645,731;6,660,159;6,790,366;6,861,259;6,890,426;7,011,794,7,282,350and 7,332,288.VissekomponenterergivetilicenstilVeridex,LCC,fraStreckLaboratories,Inc.,La Vista,NE,USpatentnr.5,849,517og5,459,073. Figur 1. SeparationafcelleklyngerunderaldringafblodopsamletiEDTA-ogCellSave-rør. EDTA @ 48 timer Retvinklet lysspredning Retvinklet lysspredning EDTA @ 2 timer CD45-PerCP forskydning CellSave Tube @ 48 timer 1001 US HWY 202 North Raritan, New Jersey 08869 USA 1-877-VERIDEX Retvinklet lysspredning CD45-PerCP forskydning CD45-PerCP CellSave Tube @ 2 timer Retvinklet lysspredning forskydning CD45-PerCP Ortho-Clinical Diagnostics Johnson & Johnson 50-100 Holmers Farm Way High Wycombe Buckinghamshire HP12 4DP United Kingdom 00 8000 8374339 (EU) Udgivet juni 2010 631500041_DA LBL50263